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基于网络药理学和分子对接探讨美洲大蠊CII-3治疗结直肠癌的作用机制

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现代药物与临床 2025年第2期 319-329页

作者：彭鹏白丽大理大学基础医学院大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室

目的基于网络药理学和分子对接探讨美洲大蠊CII-3治疗结直肠癌的作用机制。方法通过查阅文献归纳总结筛选美洲大蠊CII-3的有效活性成分；利用PubChem数据库、SwissADME、SwissTargetPrediction平台进行作用靶点的预测；通过DisGeNet、... 详细信息

目的基于网络药理学和分子对接探讨美洲大蠊CII-3治疗结直肠癌的作用机制。方法通过查阅文献归纳总结筛选美洲大蠊CII-3的有效活性成分；利用PubChem数据库、SwissADME、SwissTargetPrediction平台进行作用靶点的预测；通过DisGeNet、GeneCards、TTD、OMIM数据库检索、归纳、筛选结直肠癌相关靶点；通过Venny 2.1.0对美洲大蠊CII-3活性成分作用靶点与结直肠癌相关靶点取交集，共同靶点即为CII-3抗结直肠癌的潜在作用靶点。将潜在靶点导入STRING数据库，构建蛋白互作（PPI）网络。通过PPI网络和Cytoscape 3.10.1软件及centiscape 2.2插件，筛选出美洲大蠊CII-3治疗结直肠癌的关键活性成分及核心靶点，构建“药物–成分–靶点基因”和“疾病–通路–靶点–成分–药物”网络。利用DAVID数据库对CII-3和结直肠癌潜在的作用靶点进行基因本体论（GO）功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。利用AutoDockTools 1.5.7软件对关键活性成分与核心靶点进行分子对接验证。结果筛选汇总了24种美洲大蠊CII-3的有效成分，通过网络药理学验证环(脯氨酸-亮氨酸)、环(亮氨酸-丙氨酸)等为主要活性成分，通过Venny 2.1.0平台取交集，得到150个潜在的作用靶点。甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、蛋白激酶B1(Akt1)和表皮生长因子受体（EGFR）等为主要的核心靶点。KEGG通路富集分析显示主要涉及癌症通路、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）-Akt信号通路等；分子对接显示，美洲大蠊CII-3的主要活性成分与预测的核心靶点对接结果均小于0 kJ/mol，结果显示较好的结合活性。结论美洲大蠊CII-3可能通过多成分、多靶点、多通路协同作用治疗结直肠癌，为揭示CII-3治疗结直肠癌的分子机制提供了理论基础。

关键词：美洲大蠊CII-3 结直肠癌网络药理学分子对接甘油醛-3-磷酸脱氢酶蛋白激酶B1 表皮生长因子受体

意大利蜜蜂lncRNA15837的调控作用和表达模式分析

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昆虫学报 2025年 2-11页

作者：宋宇轩李坤泽臧贺刘小玉吴陶徐细建刘锋骆群邱剑丰陈大福郭睿福建农林大学蜂学与生物医药学院天然生物毒素国家地方联合工程实验室福建省蜂疗研究所江西省养蜂研究所

[目的]本研究旨在通过解析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica lncRNA15837的调控方式和作用,并检测lncRNA15837在工蜂不同发育阶段和不同组织及幼虫应答蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染中的表达模式,为深入探究lncRNA15837的调控功能... 详细信息

[目的]本研究旨在通过解析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica lncRNA15837的调控方式和作用,并检测lncRNA15837在工蜂不同发育阶段和不同组织及幼虫应答蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染中的表达模式,为深入探究lncRNA15837的调控功能与机制提供参考和依据。[方法]基于已获得的意大利蜜蜂7和10日龄工蜂成虫中肠高质量转录组数据,利用Miranda,RNAhybrid和TargetScan软件预测lncRNA15837靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA,再通过Cytoscape v3.7.2软件构建并可视化竞争性内源RNA (competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络。使用Blast工具将靶mRNA比对至GO和KEGG数据库以获得相应的功能和通路注释。通过RT-PCR验证lncRNA15837在刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺)中的表达。利用RT-qPCR检测lncRNA15837在工蜂的不同发育阶段(3日龄幼虫、7和8日龄预蛹、12日龄蛹及1,2,6,12,15和18日龄工蜂成虫)、刚出房工蜂成虫不同组织(触角、咽下腺、脑、表皮、中肠、脂肪体和毒腺)和3日龄幼虫感染蜜蜂球囊菌后4,5和6日龄幼虫肠道中的表达量。[结果]LncRNA15837可靶向ame-miR-21-x和ame-miR-0046-3p等29个miRNA,进而靶向1 559条mRNA,形成1个复杂的ceRNA网络;上述靶mRNA可注释到139个GO条目,其中114条靶mRNA涉及139个分子功能相关条目,115条靶mRNA涉及257个生物学进程相关条目,67条靶mRNA涉及40个细胞组分相关条目;可注释到224条KEGG通路,其中28条靶mRNA注释到内吞、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路,以及157条靶mRNA注释到JAK-STAT,Toll和Imd,NF-kappa B和Toll样受体信号通路等体液免疫通路;lncRNA15837在工蜂卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫中差异表达,在7日龄幼虫中的表达量最低,而在3日龄幼虫中的表达量最高;lncRNA15837在刚出房工蜂成虫的触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮中均有表达但表达水平存在差异,在脂肪体中的表达量最低,而在毒腺中的表达量最高;相较于未接种对照组,lncRNA15837的表达量在蜜蜂球囊菌接种组4日龄幼虫肠道中表达量上调,在5和6日龄幼虫肠道中显著上调。[结论]意大利蜜蜂lncRNA15837通过ceRNA网络潜在调控胞吞作用、吞噬细胞和溶酶体等细胞免疫通路和JAKSTAT、Toll和Imd、NF-kappa B和Toll样受体信号通路等体液免疫通路;lncRNA15837在工蜂的3日龄幼虫和工蜂成虫毒腺中特异性高表达;工蜂幼虫肠道中lncRNA15837的表达被蜜蜂球囊菌侵染所激活,提示lncRNA15837是幼虫应答蜜蜂球囊菌侵染的潜在调控因子。

关键词：意大利蜜蜂竞争性内源RNA 长链非编码RNA 时空表达谱蜜蜂球囊菌

美洲大蠊糖蛋白对2种益生菌生长及其代谢产物的影响

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食品工业科技 2024年第14期45卷 139-146页

作者：李开伶王宝宇李维俊张敬宇肖培云杨永寿云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 大理大学药学院云南大理671000

目的:本实验旨在探究美洲大蠊糖蛋白(PAG)对植物乳杆菌和青春双歧杆菌生长及其代谢产物的影响。方法:在含不同浓度PAG的培养基(MRS培养基中PAG浓度分别为0.5、1.0、2.0、4.0 mg/mL;TPY培养基PAG浓度分别为1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL)中... 详细信息

目的:本实验旨在探究美洲大蠊糖蛋白(PAG)对植物乳杆菌和青春双歧杆菌生长及其代谢产物的影响。方法:在含不同浓度PAG的培养基(MRS培养基中PAG浓度分别为0.5、1.0、2.0、4.0 mg/mL;TPY培养基PAG浓度分别为1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL)中培养有益菌,并以菊粉为阳性对照,测定菌液的OD600值、pH以及代谢产物乳酸、短链脂肪酸(SCFAs,即乙酸、丙酸和丁酸)的含量。结果:PAG添加量达1.0 mg/mL时,促植物乳杆菌生长达到最佳,而青春双歧杆菌生长达到最佳时PAG浓度为2.0 mg/mL。添加PAG;1.0 mg/mL)的植物乳杆菌菌液的OD600值、乳酸和SCFAs产量较同浓度菊粉升高,而pH显著(P<0.05)降低。添加PAG(2.0 mg/mL)的青春双歧杆菌菌液的OD600值、丙酸和丁酸产量较同浓度菊粉升高,乳酸产量12 h优于菊粉,乙酸产量24 h优于菊粉,而pH降低,提示PAG促青春双歧杆菌产乳酸和SCFAs的效果与菊粉不相同。结论:PAG能够促进植物乳杆菌和青春双歧杆菌的增殖和有机酸量的生成,效果优于菊粉。

关键词：美洲大蠊糖蛋白植物乳杆菌青春双歧杆菌代谢产物

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西方蜜蜂肽聚糖识别蛋白相关基因的剪接体鉴定及分析

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昆虫学报 2025年 2-12页

作者：冯佩林朱乐冉臧贺刘小玉康婧邱剑丰刘锋徐细建骆群陈大福郭睿徐国钧福建农林大学蜂学与生物医药学院天然生物毒素国家地方联合工程实验室福建农林大学蜂疗研究所江西省养蜂研究所

[目的]本研究旨在系统鉴定和分析西方蜜蜂Apis mellifera肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan recognition protein,PGRP）相关基因及其剪接体,探析PGRP基因剪接体编码蛋白的理化性质和分子特征,并测定西方蜜蜂PGRP基因剪接体在工蜂成虫应答... 详细信息

[目的]本研究旨在系统鉴定和分析西方蜜蜂Apis mellifera肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan recognition protein,PGRP）相关基因及其剪接体,探析PGRP基因剪接体编码蛋白的理化性质和分子特征,并测定西方蜜蜂PGRP基因剪接体在工蜂成虫应答东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染中的表达模式,以期为西方蜜蜂PGRP基因剪接体的功能研究提供参考和依据。[方法]基于已获得的西方蜜蜂8和11日龄工蜂成虫中肠纳米孔测序数据,利用Blast工具将前期鉴定到的所有全长转录本分别比对到Nr和KEGG数据库,筛选出西方蜜蜂PGRP基因及其剪接体,并随机选择PGRP基因的5条剪接体通过RT-PCR进行验证。使用Gffcompare软件将鉴定到的PGRP基因序列比对至西方蜜蜂参考基因组以优化基因结构。采用Astalavista软件鉴定PGRP基因的可变剪接（alternative splicing,AS）事件类型,再通过RT-PCR和Sanger测序验证。利用相关软件预测和分析PGRP基因剪接体编码蛋白的理化性质和分子特征。采用RT-qPCR检测东方蜜蜂微孢子虫接种后西方蜜蜂工蜂成虫中肠中PGRP基因剪接体的相对表达量。[结果]共鉴定到西方蜜蜂的4个PGRP相关基因（PGRP-3,PGRP-S2,PGRP-LC和PGRP-LB）及19条剪接体。通过RT-PCR与Sanger测序证实了PGRP基因5条剪接体（rna14029,ONT.6350.8,ONT.6350.10,rna24089,ONT.6350.7）的表达和序列真实性。PGRP-3（gene10434）的5'和3'端分别延长了8和1 055 bp,PGRP-S2（gene10435）的5'和3'端分别延长了27和234 bp。通过RT-PCR证实了PGRP-S2的AS事件真实性。剪接体ONT.6350.2编码蛋白的分子式为C966H1502N2720275S7,分子量约为21 527.63 D,理论等电点为8.94,平均亲水性为-0.119,含有信号肽和PGRP结构域,不含跨膜结构域;剪接体ONT.6350.6编码蛋白分子式为C841H1301N243O244S5,分子量约为18 860.46 D,理论等电点9.14,平均亲水性为-0.324,不含跨膜结构域和信号肽。西方蜜蜂与东方蜜蜂***的PGRP-S2在进化树上聚为一支。相较于未接种东方蜜蜂微孢子虫的对照组西方蜜蜂工蜂成虫中肠,接种东方蜜蜂微孢子虫的西方蜜蜂工蜂成虫中肠中剪接体ONT.6350.2的表达量在接种后2 d时显著上调,在3 d时极显著上调;剪接体ONT.6350.6的表达量在接种3和4 d时均极显著上调;剪接体ONT.6350.2和ONT.6350.6在接种1-4 d时总体上均表现为上升表达趋势。[结论]本研究优化了西方蜜蜂参考基因组上已注释的PGRP-3和PGRP-S2基因结构;揭示剪接体ONT.6350.2编码蛋白可能是分泌蛋白,而ONT.6350.6编码蛋白可能是胞内蛋白;西方蜜蜂与东方蜜蜂的PGRP-S2同源性最高;剪接体ONT.6350.2和ONT.6350.6在西方蜜蜂工蜂成虫应答东方蜜蜂微孢子虫侵染中被激活表达。

关键词：西方蜜蜂东方蜜蜂微孢子虫肽聚糖识别蛋白纳米孔测序剪接体

美洲大蠊多肽逆转人肝癌HepG2/ADM细胞多药耐药性的作用及机制研究

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中草药 2021年第1期52卷 152-159页

作者：李彩琳吕鸿张鸿翰王彦权彭芳大理大学药学院云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000

目的探讨美洲大蠊多肽(PAE_(2))逆转人肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM的作用及机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测HepG2/ADM细胞对不同化疗药物的耐药性以及PAE_(2)联合化疗药物(5-氟尿嘧啶、阿霉素、环磷酰胺、长春新碱、奥沙利铂)对HepG2/ADM... 详细信息

目的探讨美洲大蠊多肽(PAE_(2))逆转人肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM的作用及机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测HepG2/ADM细胞对不同化疗药物的耐药性以及PAE_(2)联合化疗药物(5-氟尿嘧啶、阿霉素、环磷酰胺、长春新碱、奥沙利铂)对HepG2/ADM细胞增殖的影响;激光共聚焦观察PAE_(2)对HepG2/ADM细胞中药物累积的影响;Western blotting法检测PAE_(2)对HepG2/ADM细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X,Bax)、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase 9,Caspase-9)、DNA修复酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达的影响;qRT-PCR法检测PAE_(2)对多药耐药蛋白1(multiple drug resistance 1,MDR1)、乳腺癌耐药相关蛋白(breast cancer resistant protein,BCRP)和酶介导的多药耐药途径中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ,TopⅡ)的m RNA表达。结果PAE_(2)抑制Hep G2/ADM细胞增殖,呈时间和剂量相关性。PAE_(2)可逆转Hep G2/ADM对不同化疗药物的耐药性;PAE_(2)可上调Hep G2/ADM细胞中阿霉素水平,呈剂量相关性。PAE_(2)可显著上调耐药细胞中Bax、cleaved Caspase-9 p37蛋白表达水平(P<0.05、0.01),显著下调Bcl-2蛋白表达水平(P<0.01),对cleaved PARP蛋白表达无显著影响。PAE_(2)均显著下调Hep G2/ADM细胞中MDR1、BCRP、PKC、TopⅡm RNA水平(P<0.01)。结论PAE_(2)可以通过减少药物外排、促进细胞凋亡、下调耐药蛋白表达等途径逆转Hep G2/ADM细胞的多药耐药性。

关键词：美洲大蠊多肽 PAE2 肝癌多药耐药 HepG2/ADM细胞

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石仙桃属植物菲类化学成分研究进展

中国新药杂志 2018年第4期27卷 422-428页

作者：胡军郭洁晏和贵伏雪梅陆安梅秦泽敏杨明惠大理大学药学与化学学院云南省昆虫生物医药研发重点实验室

石仙桃属植物化学成分主要有菲、联苄、二苯乙烯、三萜、木脂素、甾体和酚酸等类化合物,其中以菲类化合物为主要成分。菲类化合物具有良好的药理活性,如抗炎、抗氧化活性等作用,具有广阔的开发前景。目前,从石仙桃属植物中已鉴定出菲类... 详细信息

石仙桃属植物化学成分主要有菲、联苄、二苯乙烯、三萜、木脂素、甾体和酚酸等类化合物,其中以菲类化合物为主要成分。菲类化合物具有良好的药理活性,如抗炎、抗氧化活性等作用,具有广阔的开发前景。目前,从石仙桃属植物中已鉴定出菲类化合物64个,结构类型包括简单的菲类、9,10-二氢菲类、9,10-二氢菲二聚体、菲类其他衍生物。本文系统地综述了国内外对石仙桃属植物菲类化学成分研究进展,为石仙桃属植物进一步研究与开发利用提供参考。

关键词：石仙桃属菲类化学成分

美洲大蠊提取物对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用

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中国现代应用药学 2024年

作者：吴广俊高冉张维炜郭美仙刘晓波肖培云何正春大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室

目的观察美洲大蠊醇沉水提取物(CⅡ-3)、乙醇提取物(PA-B)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的骨髓抑制小鼠的保护作用。方法 CTX 40 mg·kg-1小鼠腹腔注射建立骨髓抑制模型，126只SPF级昆明种小鼠随机分为Con组，Mol组，人参皂苷... 详细信息

目的观察美洲大蠊醇沉水提取物(CⅡ-3)、乙醇提取物(PA-B)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的骨髓抑制小鼠的保护作用。方法 CTX 40 mg·kg-1小鼠腹腔注射建立骨髓抑制模型，126只SPF级昆明种小鼠随机分为Con组，Mol组，人参皂苷Rg1组，CⅡ-3剂量组(L-CⅡ-3、M-CⅡ-3、H-CⅡ-3),PA-B剂量组(L-PA-B、M-PA-B、HPA-B)，给药治疗14 d。于第7天、14天尾静脉采血，测定外周血细胞。计算脾脏和胸腺指数；骨髓有核细胞(bone marrow nucleated cells,BMNC)计数；ELLSA检测促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)、白介素-3(interleukin-3,IL-3)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的表达；股骨HE染色；流式细胞术检测骨髓细胞周期和骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)含量。结果第14天血细胞数值显著低于第7天，经CⅡ-3和PA-B治疗后，白细胞数目显著增加(P<0.01)，脾脏指数和胸腺指数升高，BMNC数目增多(P<0.01),EPO、IL-3、IL-6、SOD表达增加，MDA表达降低(P<0.01)，骨髓细胞S期和G2/M期比例升高，PI指数增加，HSCs含量增加(P<0.01)。结论美洲大蠊提取物促进HSCs激活、分化和迁移，调控细胞进入S期和G2/M期，延缓骨髓细胞衰老，修复CTX造成的骨髓损伤。

关键词：美洲大蠊骨髓抑制细胞周期细胞衰老

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动物源活性蛋白多肽的分离纯化方法研究进展

天然产物研究与开发 2019年第5期31卷 916-921页

作者：付文鹏杨永寿肖培云大理大学药学与化学学院云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

动物类中药的有效成分以蛋白多肽为主,因此活性蛋白多肽具有重要的医疗保健价值。文章分析了沉淀法、色谱法、膜分离法以及电泳法的基本原理和主要适用范围,综述了这些方法在动物源活性蛋白多肽的分离纯化中的应用,为动物源蛋白多肽的... 详细信息

动物类中药的有效成分以蛋白多肽为主,因此活性蛋白多肽具有重要的医疗保健价值。文章分析了沉淀法、色谱法、膜分离法以及电泳法的基本原理和主要适用范围,综述了这些方法在动物源活性蛋白多肽的分离纯化中的应用,为动物源蛋白多肽的分离纯化与进一步研究提供参考,以期开发出高效、经济和环保的蛋白多肽分离纯化新技术。

关键词：蛋白质多肽分离纯化研究进展

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基于成分-活性整体相似性的重楼替代资源筛选

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中草药 2018年第18期49卷 4366-4373页

作者：张海珠赵飞亚陶爱恩董洪李若诗黎氏文梅夏从龙大理大学药学与化学学院云南大理671000 云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000

目的考察不同种重楼成分-活性的整体相似性,建立重楼替代资源筛选的新方法。方法采用HPLC法及镇痛、止血药理学模型比较了重楼属7种药用植物中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的量及其镇痛、止血的药效,采用离差标准化法对数据进行标准化,以《... 详细信息

目的考察不同种重楼成分-活性的整体相似性,建立重楼替代资源筛选的新方法。方法采用HPLC法及镇痛、止血药理学模型比较了重楼属7种药用植物中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的量及其镇痛、止血的药效,采用离差标准化法对数据进行标准化,以《中国药典》2015年版一部规定的重楼皂苷含量及阿司匹林、云南白药组"镇痛、止血"药效数据作为标准对照,建立了成分指数和活性指数,采用SPSS 20.0软件对成分指数和活性指数进行主成分分析和聚类分析。结果重楼属7种药用植物主要皂苷类成分的总质量分数为0.125%~1.649%,其中长柱重楼最高(1.649%),大理重楼最低(0.125%);云南重楼镇痛活性最强、小鼠出血停止时间(BT)最短、小鼠凝血时间(CT)最短;长柱重楼组小鼠活化部分凝血活酶时间(APTT)最短,黑籽重楼组最长;南重楼组小鼠凝血酶原时间(PT)最短;大理重楼组小鼠BT最长,多叶重楼组小鼠CT和PT均最长;云南重楼、南重楼、黑籽重楼聚为一类,多叶重楼、长柱重楼、大理重楼、毛重楼聚为一类,说明南重楼、黑籽重楼与云南重楼的成分-活性整体之间相似度较高,可考虑作为替代资源使用。结论通过成分-活性等指标的整体相似性,评价不同种重楼之间的品质关系,为濒危植物重楼替代资源的寻找提供了思路和方法。

关键词：重楼替代资源整体相似性化学计量学镇痛活性凝血时间

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