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猪源ISG15蛋白通过促进炎症因子释放和巨噬细胞死亡加剧胸膜肺炎放线杆菌感染

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微生物学通报 2025年第2期52卷 713-724页

作者：甘林文宇田岩岩张开心李丰阳雷连成李娜吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室

【背景】猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)感染引起的一种呼吸道疾病，该病死亡率可达80%–100%。干扰素刺激基因15(interferon-stimulated genes 15, ISG15)蛋白可抑制病毒的复制，但其在... 详细信息

【背景】猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)感染引起的一种呼吸道疾病，该病死亡率可达80%–100%。干扰素刺激基因15(interferon-stimulated genes 15, ISG15)蛋白可抑制病毒的复制，但其在APP方面的研究尚不清楚。【目的】构建猪源ISG15原核表达载体，纯化ISG15蛋白并研究其对APP感染的影响。【方法】构建pET-28a-ISG15原核表达载体，纯化获得ISG15蛋白。采用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测ISG15蛋白处理后肺泡巨噬细胞死亡情况和炎症因子表达水平。建立APP感染小鼠模型，鼻内给药ISG15后，检测小鼠体重、临床症状及存活情况，分析ISG15对APP致病性的影响。【结果】获得了ISG15蛋白。相较于单独攻菌组，ISG15添加组的肺泡巨噬细胞死亡率、炎症因子IL-6和IFN-γ表达水平均显著升高(P<0.05)。在小鼠试验中，相较于单独攻菌组，中剂量和高剂量ISG15组小鼠的临床症状及死亡率显著上升，肺组织IL-6、IFN-γ和IL-1β表达水平显著增加。【结论】ISG15通过促进肺泡巨噬细胞死亡和炎症因子的释放加剧APP的感染，为APP防治技术的研发提供了理论基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 ISG15 炎症因子巨噬细胞

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卡介苗诱导训练免疫研究进展及其应用

微生物学通报 2025年第2期52卷 522-532页

作者：徐瑞阳刘栋辉钱佳彤徐正中郑成坤陈祥焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室

训练免疫属于先天免疫反应，其特征是先天免疫细胞表观遗传重编程、代谢重编程。通过某些刺激(如疫苗、微生物或其产物)可激发先天免疫细胞，如单核细胞、中性粒细胞和骨髓干细胞的训练免疫，若重新刺激，可增强先天免疫细胞对微生物病... 详细信息

训练免疫属于先天免疫反应，其特征是先天免疫细胞表观遗传重编程、代谢重编程。通过某些刺激(如疫苗、微生物或其产物)可激发先天免疫细胞，如单核细胞、中性粒细胞和骨髓干细胞的训练免疫，若重新刺激，可增强先天免疫细胞对微生物病原体的免疫反应。牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)、β-葡聚糖[白色念珠菌(Candida albicans)主要细胞壁成分]等通过激活先天免疫细胞核转录因子-κB (nucleus factor-κB,NF-κB)通路或者树突状细胞相关C型凝集素-1/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/低氧诱导因子-1α(dendritic cell-associated C-type lectin 1/protein kinase B/mammalian target of rapamycin/hypoxia-inducible factor 1-alpha,Dectin-1/Akt/mTOR/HIF-1α)信号通路调控细胞代谢重编程和表观遗传重编程，从而诱导训练免疫。先天免疫细胞中训练免疫的发现为新疫苗的研发、免疫缺陷状态的治疗策略及调节自身炎症性疾病提供新的方向。因此，了解BCG诱导训练免疫的细胞学机制，可对未知疾病的预防有重大意义。

关键词：训练免疫先天免疫细胞卡介苗

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四株耻垢分枝杆菌噬菌体的分离与鉴定

微生物学通报 2025年第2期52卷 833-847页

作者：徐博郭慧敏徐正中郑成坤陈祥焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室

【背景】分枝杆菌属(Mycobacterium)是一类细长略弯曲、可呈分枝状生长的杆菌，部分严重威胁人类和动物健康；噬菌体因其高效特异及易于制备的特性，成为抗生素替代疗法的研究热点。【目的】分离鉴定耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmat... 详细信息

【背景】分枝杆菌属(Mycobacterium)是一类细长略弯曲、可呈分枝状生长的杆菌，部分严重威胁人类和动物健康；噬菌体因其高效特异及易于制备的特性，成为抗生素替代疗法的研究热点。【目的】分离鉴定耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)噬菌体并对其进行生物学特性分析，评价其在不同环境下的适应能力及体外抑菌能力。【方法】以耻垢分枝杆菌mc2155为宿主菌，从奶牛场污水、粪便、土壤、垫料中分离纯化烈性噬菌体，并对其进行生物学特性研究。【结果】分离纯化鉴定并获得4株耻垢分枝杆菌噬菌体，分别命名为MP2201、MP2202、MP2203、MP2204，其效价分别为1×10～8、5×10～8、3×10～8、1×10～8 PFU/mL；透射电子显微镜结果显示，4株噬菌体均属于长尾噬菌体；MP2204最佳感染复数为1，其余3种噬菌体最佳感染复数均为0.1；噬菌体MP2201暴发量最高，可达500 PFU/cell;4株噬菌体在40-60℃时均可稳定存活，当pH 3.0-11.0时，效价变化不显著；制备噬菌体鸡尾酒能够显著抑制宿主菌生长；噬菌体全基因组测序结果表明：MP2201、MP2202、MP2203和MP2204的基因组全长分别为69 720、68 282、47 622和70 950 bp,G+C含量分别为59.14%、66.58%、63.22%和59.02%，并且不含耐药基因。【结论】分离鉴定4株耻垢分枝杆菌噬菌体，为开发针对分枝杆菌感染的新型生物防治手段提供了生物材料和理论依据。

关键词：分枝杆菌属噬菌体分离鉴定噬菌体鸡尾酒

泛素特异性蛋白酶47调控狂犬病病毒感染的功能研究

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中国兽医学报 2025年第2期 266-273页

作者：张艳楠武梦阳王重阳董浩淼果鑫郭艺迪张茂林吉林大学动物医学学院人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室/人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室

为探究泛素特异性蛋白酶47(ubiquitin-specific protease 47,USP47)对狂犬病病毒(rabies virus, RABV)感染小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a, N2a)的影响，本研究通过RT-qPCR、免疫印记和病毒滴度测定等技术，检测在N2a细胞中，RABV直接... 详细信息

为探究泛素特异性蛋白酶47(ubiquitin-specific protease 47,USP47)对狂犬病病毒(rabies virus, RABV)感染小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a, N2a)的影响，本研究通过RT-qPCR、免疫印记和病毒滴度测定等技术，检测在N2a细胞中，RABV直接感染对USP47表达水平的影响，然后检测过表达USP47及敲低USP47后RABV核蛋白和磷蛋白基因水平、蛋白水平和上清液病毒滴度的变化。结果显示，RABV感染会引起N2a细胞中USP47转录水平上调。过表达USP47后，RABV N和RABV P基因和蛋白表达水平均上升，上清中病毒滴度也随之升高，同时白细胞介素6(IL-6)基因水平降低；敲低USP47后，RABV N和RABV P基因和蛋白表达水平降低，上清中病毒滴度也相应降低，IL-6基因水平升高。结果表明，USP47可促进RABV感染，抑制IL-6的表达。这一发现为深入研究USP47调控RABV感染的分子机制打下了基础。

关键词：狂犬病病毒泛素特异性蛋白酶47 白细胞介素6

微/纳材料对食源性致病菌的抗菌作用研究进展

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中国畜牧兽医 2025年第2期52卷 922-933页

作者：李清萌谢言之沈建忠马晓溦中国农业大学动物医学院北京100193 国家兽医公共卫生安全重点实验室北京市动物源性食品安全检测技术重点实验室北京100193

食源性致病菌(foodborne pathogens)是引起动物和人类食源性疾病最重要的致病因素。常见的食源性致病菌有沙门菌、致泻性大肠杆菌、弯曲杆菌、副溶血性弧菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌等。食源性致病菌具有强大的侵袭和定植能力,可污染多... 详细信息

食源性致病菌(foodborne pathogens)是引起动物和人类食源性疾病最重要的致病因素。常见的食源性致病菌有沙门菌、致泻性大肠杆菌、弯曲杆菌、副溶血性弧菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌等。食源性致病菌具有强大的侵袭和定植能力,可污染多种蔬果及动物源性食品,并可沿“农场-餐桌链”传播。由于抗生素的滥用,食源性致病菌耐药性现象日益严重。传统的抗菌药物逐渐难以应对日益严重的细菌耐药性问题,导致食源细菌性疾病面临治疗药物选择受限、生物利用度差、毒性难以控制等诸多挑战。随着纳米技术的发展,多种微纳材料(micro/nano materials)逐步应用于生物医学领域,展示出优异的治疗性能。微纳材料主要指平均粒径在微米或纳米级的一系列复合材料。抗食源性致病菌感染研究中的微纳材料主要是指将微米材料与纳米材料结合而成的药物递送系统,兼具微米和纳米尺度材料的优势,具有生物相容性良好、靶向性药物递送、可控与长效释放及多重抗菌作用等多种优势。笔者综述了微纳材料的基本概念、常见种类、独特优势及微纳材料在各种抗食源性致病菌感染中的研究进展,探讨了微纳材料在应对多种食源性细菌感染、缓解抗生素耐药性问题中的应用潜力以及目前存在的应用瓶颈,以期为微纳材料在食源细菌性疾病治疗中的研究和应用提供参考。

关键词：食源性致病菌纳米材料微米材料微纳材料

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2株H5N6亚型禽流感病毒的遗传进化分析

中国家禽 2025年第1期47卷 97-111页

作者：陈晓娜杨文卓尹信周江涛张家豪亓文宝华南农业大学动物疫病防控全国重点实验室广东广州510642 国家禽流感专业实验室(广州) 广东广州510642 人兽共患病防控国家与区域联合工程实验室广东广州510642 农业农村部人畜共患病重点实验室广东广州510642

为了解禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传进化特点,试验对2022—2023年从我国湖南和福建活禽交易市场分离的2株鸭源H5N6亚型AIV进行全基因组测序、关键氨基酸位点分析和遗传进化树构建,这2株AIV分别为A/duck/Hunan/QG3/2022(... 详细信息

为了解禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传进化特点,试验对2022—2023年从我国湖南和福建活禽交易市场分离的2株鸭源H5N6亚型AIV进行全基因组测序、关键氨基酸位点分析和遗传进化树构建,这2株AIV分别为A/duck/Hunan/QG3/2022(H5N6)(简称HN/QG3)和A/duck/Fujian/QG4/2023(H5N6)(简称FJ/QG4)。结果显示:HN/QG3株属于2.***.4.4b分支,其基因组来源于H5N6和H5N8毒株,与鸭、野鸟、环境和人类来源的H5亚型AIV的同源性较高,而FJ/QG4株属于2.***.4.4h分支,HA基因与分离株A/Rattus norvegicus/China/FS21/2021(H5N6)的相似性为97%,而其他基因片段与2021年广东地区分离的人源H5N6亚型AIV的同源性较高;2株H5N6亚型AIV的HA蛋白裂解位点含有多个连续的碱性氨基酸,符合高致病性AIV的分子特征,HA蛋白第226和228位分别为Q和G,说明H5N6亚型AIV具有优先结合禽源α2,3-唾液酸受体的特征,并且NA蛋白第58~68位缺失11个氨基酸,对小鼠的致病性可能增强。研究表明,2株鸭源H5N6亚型AIV分别属于2.***.4.4b分支和2.***.4.4h分支,其对人源α2,6-唾液酸受体的识别能力增强,毒力和传播能力可能增强。

关键词：禽流感病毒 H5N6亚型遗传进化基因突变

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非洲猪瘟诊断靶标的研究进展

微生物学通报 2025年第2期52卷 510-521页

作者：潘婷婷康喜龙黄霞孟闯潘志明焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室扬州大学江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染而引起的一种急性传染病。目前，国内外尚未生产出有效的商业化疫苗，致使ASF的防控难度一直较大，定期的流行病学监测和高效的早期诊断技术... 详细信息

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染而引起的一种急性传染病。目前，国内外尚未生产出有效的商业化疫苗，致使ASF的防控难度一直较大，定期的流行病学监测和高效的早期诊断技术对ASF防控和净化非常重要。针对ASFV检测靶标的挖掘和研究，可以有效地为ASF诊断技术研发提供参考，为疾病防控贡献力量。本文对当前ASF所使用的诊断靶标进行了综述，以期为ASF的防控工作以及研发高效可行的诊断技术提供参考。

关键词：非洲猪瘟非洲猪瘟病毒诊断靶标检测方法

自噬与蛋白酶体途径在布鲁菌感染巨噬细胞过程中的相互作用

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中国兽医学报 2025年第03期 507-513页

作者：董炳梅梁萌萌许文雅王君宋立立任洪林沧州师范学院生命科学学院吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室/人兽共患病研究教育部重点实验室

为了探明巨噬细胞(macrophage, Mφ)感染布鲁菌(Brucella)后泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome system, UPS)和自噬-溶酶体途径(autophagy-lysosome pathway, ALP)在对抗Brucella过程中的相互作用关系，一方面将猪种布鲁菌(Brucella suis,***)分别体外感染Mφ和腹腔接种BALB/c小鼠，并对细胞上清液和腹腔液中LC3Ⅱ、P62与20S蛋白酶体水平进行了测定，结果显示***感染过程中UPS首先被激活，随后ALP途径发挥作用；另一方面，应用3-MA、乳胞素分别制备ALP抑制态Mφ与UPS抑制态Mφ并接种***,随后对细胞上清中LC3Ⅱ、P62与20S蛋白酶体水平进行测定，结果显示当MφUPS功能被抑制时，ALP作用被显著提高；而ALP功能被抑制时，UPS活性未有显著变化。最后，将不同状态Mφ接种***后，对***的胞内增殖能力进行测定，结果显示当UPS与ALP功能被同时抑制时，***的胞内增殖能力显著降低，且UPS对***胞内增殖的促进作用强于ALP。结果表明，Brucella感染Mφ过程中UPS与ALP存在相互作用关系，在理论上可为Brucella与宿主细胞相互作用机制的研究提供新思路。

关键词：自体吞噬泛素蛋白酶体途径布鲁菌巨噬细胞

BALB/c小鼠肠道主要原虫感染情况的分子流行病学调查

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中国兽医学报 2025年第03期 514-518页

作者：郑瑜张西臣荣尧李建华宫鹏涛王晓岑岳涛涛李新张旭张楠吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室/人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室

分别对国内4家BALB/c小鼠供应商提供的540只BALB/c小鼠进行肠道原虫检测。其中，供应商A 140只，供应商B 130只，供应商C 135只，供应商D 135只。分别采集每只小鼠的新鲜粪便样本以提取基因组，并根据人五毛滴虫(Pentatrichomonas homin... 详细信息

分别对国内4家BALB/c小鼠供应商提供的540只BALB/c小鼠进行肠道原虫检测。其中，供应商A 140只，供应商B 130只，供应商C 135只，供应商D 135只。分别采集每只小鼠的新鲜粪便样本以提取基因组，并根据人五毛滴虫(Pentatrichomonas hominis,***)、泰泽隐孢子虫18S rRNA基因序列引物进行巢氏PCR扩增，利用鼠三毛滴虫(Tritrichomonas muris,***)16S-like rRNA基因序列引物进行PCR扩增并测序，以检测BALB/c小鼠肠道原虫的感染状况。结果显示，供应商A提供的140份小鼠粪便样本中，总肠道原虫感染率为7.1%(10/140),其中，***虫阳性率为7.1%(10/140)、泰泽隐孢子虫(Cryptosporidium tyzzeri,***)阳性率为2.1%(3/140)、***阳性率为7.1%(10/140),2种肠道原虫共感染率为7.1%(10只：***+***)、3种肠道原虫共感染率为2.1%(3只：***+***+***)。供应商C提供的135份小鼠粪便样本中，总肠道原虫感染率为7.4%,其中，***阳性率为7.4%(10/135),未检出***和***感染。供应商B提供的130份小鼠粪便样本和供应商D提供的135份小鼠粪便样本中均未检出肠道原虫感染。遗传进化分析结果显示，本研究扩增的*** 16S-like rRNA基因序列与GenBank发表的***的16S-like rRNA基因具有98.52%的同源性(GenBank No:AY886846.1),并且在遗传进化树中聚类为一独立分支；*** 18S rRNA基因序列与GenBank发表的*** 18S rRNA基因具有98.27%的同源性(GenBank ***156964.1),聚为一独立分支；*** 18S rRNA基因序列与GenBank发表的*** 18S rRNA基因同源性为99.87%(GenBank ***000486.1)。综上，本研究对不同实验动物供应商提供的BALB/c小鼠进行肠道寄生虫检测，发现存在不同程度的肠道原虫感染情况，并发现有***、***和***等3种以上寄生虫共感染的现象，从而为今后预防和制定有效的防控策略提供科学依据。

关键词：鼠三毛滴虫人五毛滴虫泰泽隐孢子虫 BALB/c小鼠