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环境内分泌干扰物对青春前期雄性大鼠性腺发育的不良影响及益肾填精方的治疗作用

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中国中西医结合杂志 2013年第12期33卷 1690-1695页

作者：李祥婷蔡德培复旦大学附属儿科医院中西医结合科上海200032

目的复制SD雄性大鼠由环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors,EEDs)引致的性腺发育不良(gonadal dysgenesis,GD)模型,验证益肾填精方对EEDs抗雄激素活性的拮抗作用。方法 3周龄雄性SD大鼠70只随机分为7组:对照组(喂饲玉... 详细信息

目的复制SD雄性大鼠由环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors,EEDs)引致的性腺发育不良(gonadal dysgenesis,GD)模型,验证益肾填精方对EEDs抗雄激素活性的拮抗作用。方法 3周龄雄性SD大鼠70只随机分为7组:对照组(喂饲玉米油)、模型A组[邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexylphthalate,DEHP)500 mg/kg]、中药A组(DEHP 500 mg/kg+益肾填精方40 mL/kg)、模型B组[氯氰菊酯(Cypermethrin,CYP)80 mg/kg]、中药B组(CYP 80 mg/kg+益肾填精方40 mL/kg)、模型C组(DEHP 500 mg/kg+CYP 80 mL/kg)及中药C组(DEHP 500 mg/kg+CYP 80 mg/kg+益肾填精方40 mL/kg),每组10只。每天灌胃1次,共30天。于末次染毒24 h后处死动物,测定大鼠体重、睾丸湿重,并计算睾丸系数;测定血清睾酮(testosterone,T)水平;制备睾丸病理组织切片,光镜观察其组织学改变,电镜观察生殖细胞超微结构的变化。结果与对照组比较,各模型组及各中药组大鼠体重增加量差异无统计学意义(P>0.05),各模型组睾丸下降时间及包皮分离时间均明显延迟(P<0.01);模型A组及模型C组睾丸重量减轻,血清T降低;模型A组睾丸系数降低(P<0.01)。与相应模型组比较,各中药组睾丸下降时间及包皮分离时间均提前(P<0.01);中药A组睾丸重量、睾丸系数及T水平均增加(P<0.01),中药B组T水平明显升高(P<0.05)。结论应用DEHP剂CYP成功地复制了GD大鼠模型,证实EEDs具有显著的抗雄激素活性,并验证了益肾填精方对其抗雄激素活性具有显著的拮抗作用。

关键词：环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯氯氰菊酯性腺发育不良益肾填精方

淫羊藿苷拮抗脂多糖炎症模型的体内和体外研究

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中国中西医结合杂志 2009年第4期29卷 330-334页

作者：吴金峰董竞成徐长青张心菊曾丽绚复旦大学附属华山医院中西医结合肺、炎症、肿瘤研究室上海200040 复旦大学附属华山医院中心实验室

目的从前炎症细胞因子、炎性介质、黏附分子等环节,评价淫羊藿苷的抗炎作用。方法以脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7建立体外炎症模型,以LPS刺激C57BL/6J小鼠建立体内炎症模型,采用淫羊藿苷干预,并以地塞米松为阳性对照。采用CC... 详细信息

目的从前炎症细胞因子、炎性介质、黏附分子等环节,评价淫羊藿苷的抗炎作用。方法以脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7建立体外炎症模型,以LPS刺激C57BL/6J小鼠建立体内炎症模型,采用淫羊藿苷干预,并以地塞米松为阳性对照。采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;采用酶联免疫法检测细胞培养上清和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;采用Griess Reagent法检测细胞培养上清一氧化氮(NO)含量;采用流式细胞术检测小鼠中性粒细胞表面黏附分子CD11b表达;采用病理切片HE染色观察肺部炎症细胞浸润。结果体外研究表明:淫羊藿苷(1、10、100μg/mL)均未显示出细胞毒性作用(P<0.01);淫羊藿苷(10、100μg/mL)可显著抑制RAW264.7TNF-α、IL-6产生(P<0.01);淫羊藿苷100μg/mL可显著抑制NO释放(P<0.01)。体内研究表明:淫羊藿苷(20mg/kg)可显著降低小鼠血清TNF-α、IL-6的水平(P<0.01),减少小鼠中性粒细胞表面黏附分子CD11b的表达(P<0.01),减轻小鼠肺部炎症细胞浸润。结论淫羊藿苷是一种安全有效的天然抗炎药物,对前炎症细胞因子(如TNF-α、IL-6)、炎症介质(如NO)和黏附分子(如CD11b)等的多环节干预是其部分疗效机理。

关键词：淫羊藿苷脂多糖炎症体内体外 CD11b

邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯及氯氰菊酯致大鼠性腺发育障碍的研究

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中华劳动卫生职业病杂志 2014年第3期32卷 195-201页

作者：高连连李祥婷蔡德培复旦大学附属儿科医院中西医结合科上海201102

【摘要】目的探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di_***，DEHP）和氯氰菊酯（cypermethrin，CYP）单独及联合染毒引致青春前期雄性大鼠性腺发育不良的作用机制。方法SPF级3周龄雄性sD大鼠40只，随机分为对照组（玉米油）、DEHP单独染... 详细信息

【摘要】目的探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di_***，DEHP）和氯氰菊酯（cypermethrin，CYP）单独及联合染毒引致青春前期雄性大鼠性腺发育不良的作用机制。方法SPF级3周龄雄性sD大鼠40只，随机分为对照组（玉米油）、DEHP单独染毒组（500mg／kg）、CYP单独染毒组（80mg／kg）及联合染毒组（DEH500mg／kg＋CYP80ms／ks），各组10只，每天灌胃1次，连续30d。于末次染毒24h后处死动物，测定大鼠体重及睾丸湿重，并计算睾丸系数；放射免疫法测定血清睾酮水平；电子显微镜观察睾丸生殖细胞超微结构变化；实时荧光定量PCR法测定卵泡刺激素受体（FSHR）、雄激素结合蛋白（ABP）、抑制素B（INHB）、波形蛋白（VIM）的基因表达水平；蛋白免疫印迹法（Westernblot）测定FSHR、ABP、INHB及VIM的蛋白表达水平，利用2x2析因方差分析，对比各组间的差异，通过交互图判断DEHP与CYP的交互作用。结果与对照组比较，DEHP、CYP单独及联合染毒组睾丸重量分别下降39．3％．59．2％，睾丸系数分别下降19．7％--58．6％，血清睾酮水平均分别显著下降49．1％～62．7％，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。各染毒组睾丸生殖细胞超微结构均可见不同程度的病变。与对照组比较，DEHP单独染毒组FSHR、ABP、INHB、VIMmRNA表达水平分别下调1．72，2．64，2．83及1．79倍，蛋白表达分别下调65．2％，53．7％，70．1％及51．9％，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；CYP单独染毒组ABP、INHB的mRNA表达水平分别下调1．72及2．06倍，蛋白表达分别下调38．3％及49．7％，差异有统计学意义（P〈0．05）；联合染毒组FSHR、ABP、INHB及VIM的mRNA表达水平分别下调1.62、2．00、2．35及1．54倍，FSHR，INHB及VIM蛋白表达分别下调52．1％，53．9％及58．8％，差异均有统计学意义（P〈0．05）。经2x2析因方差分析，DEHP、CYP联合染毒对ABP、INH的交互作用有统计学意义（P〈0．05），交互作用呈拮抗效应。结论DEHP、CYP单独及联合染毒均可致青春前期大鼠性腺发育不良，二者均可不同程度的干扰睾丸支持细胞功能相关的基因与蛋白的表达，联合染毒呈一定拮抗作用，两者相比，以DEHP的生殖毒性更强。

关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯氯氰菊酯睾丸支持细胞

补肾、益气中药对哮喘模型大鼠神经内分泌免疫网络若干指标的影响

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中国中西医结合杂志 2007年第8期27卷 715-719页

作者：赵福东董竞成谢瑾玉费震宇崔焱宫兆华巫善美复旦大学附属华山医院中西医结合肺炎症和肿瘤研究室复旦大学上海医学院中西医结合系上海200040

目的观察补肾(淫羊藿)和益气(黄芪)中药对哮喘反复发作模型大鼠神经内分泌免疫(neuro-endocrino-i mmune,NEI)网络相关指标变化的影响。方法将健康清洁级雄性挪威(Brown Norway,BN)大鼠120只,分为11组,采用Realti me-PCR法检测下丘脑促... 详细信息

目的观察补肾(淫羊藿)和益气(黄芪)中药对哮喘反复发作模型大鼠神经内分泌免疫(neuro-endocrino-i mmune,NEI)网络相关指标变化的影响。方法将健康清洁级雄性挪威(Brown Norway,BN)大鼠120只,分为11组,采用Realti me-PCR法检测下丘脑促肾上腺激素释放激素(CRH) mRNA的表达;放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清白细胞介素-4(IL-4),IL-6,干扰素-γ(IFN-γ)和皮质酮(CORT)的含量;采用HE染色法观察肺组织病理变化。结果与正常对照组比较,哮喘反复发作3周模型大鼠下丘脑CRH mRNA表达和血浆ACTH无明显变化,血清CORT水平升高显著,IFN-γ无明显变化,前炎症因子IL-6、IL-4有上升趋势;与哮喘对照组比较,复方中、高剂量组和淫羊藿低、中剂量组下丘脑CRH mRNA的表达明显升高,淫羊藿中剂量组大鼠血清IFN-γ的浓度升高。黄芪低剂量组大鼠血清CORT的浓度升高,黄芪高剂量组血清IL-4和IL-6的浓度降低。结论哮喘反复发作3周大鼠存在NEI网络若干指标的紊乱;补肾和益气中药可以增强下丘脑-垂体-肾上腺皮质(hypotha-lamic-pituitary-adrenal,HPA)轴的功能,还可以改变Th1和Th2型细胞因子的平衡,这些可能是其治疗哮喘反复发作的机制之一。

关键词：支气管哮喘炎症神经内分泌免疫网络淫羊藿黄芪

支气管哮喘“寒痰”与“热痰”证型微观辨证指标及其炎症特点

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中国中西医结合杂志 2010年第8期30卷 828-832页

作者：曹玉雪董竞成杜懿杰张红英徐长青段晓虹复旦大学附属华山医院中西医结合肺、炎症和肿瘤研究室复旦大学上海医学院中西医结合系上海200032

目的探讨支气管哮喘"寒痰"、"热痰"证型的微观辨证指标及其炎症特点。方法将支气管哮喘慢性持续期按中医辨证分为寒痰证组(27例)、热痰证组(32例)和非寒痰热痰证组(31例),并以健康人作为正常组(33名)。通过诱导痰技术使之咳出痰液,痰涂... 详细信息

目的探讨支气管哮喘"寒痰"、"热痰"证型的微观辨证指标及其炎症特点。方法将支气管哮喘慢性持续期按中医辨证分为寒痰证组(27例)、热痰证组(32例)和非寒痰热痰证组(31例),并以健康人作为正常组(33名)。通过诱导痰技术使之咳出痰液,痰涂片计数嗜酸性粒细胞(Eosinophil,EOS)百分比、中性粒细胞(Neutrophils,NEU)百分比;血常规测EOS和NEU百分比;ELISA方法检测痰上清液和血清中白介素(IL)-8、IL-4、IL-5、干扰素(IFN)-γ、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、白三烯(LT)B4、C-反应蛋白(CRP)水平。结果寒痰证组血和痰EOS均明显高于正常组、非寒痰热痰证组和热痰证组(均P0.05)。寒痰证组血清IL-4水平高于非寒痰热痰证组(P<0.05),IFN-γ/IL-4值明显低于非寒痰热痰证组(P<0.01)。结论中医哮病之宿根——"痰"可能与现代医学的"炎症"相关。哮喘寒痰证型的炎症特点部分表现为EOS升高,可能有Th2优势的趋势,与嗜酸性粒细胞哮喘表现有类似之处。热痰证表现为气道局部NEU升高。EOS、ECP可能是哮喘寒痰证微观辨证的重要指标之一,NEU可能是热痰证微观辨证的重要指标之一。

关键词：支气管哮喘炎症嗜酸性粒细胞寒痰证热痰证

补肾益气中药仙灵脾和黄芪对哮喘大鼠TNF-α和NF-κB的影响

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中国中西医结合杂志 2006年第8期26卷 723-727页

作者：谢瑾玉董竞成宫兆华赵福东崔焱复旦大学附属华山医院中西医结合肺炎症和肿瘤研究室复旦大学上海医学院中西医结合系上海200040

目的观察补肾益气中药仙灵脾和黄芪对哮喘大鼠前炎症因子之一的肿瘤坏死因子α(TNFα)和核转录因子κB(NFκB)的影响。方法将大鼠分为5组:生理盐水对照组、哮喘组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。ELISA法检测和比较各组大... 详细信息

目的观察补肾益气中药仙灵脾和黄芪对哮喘大鼠前炎症因子之一的肿瘤坏死因子α(TNFα)和核转录因子κB(NFκB)的影响。方法将大鼠分为5组:生理盐水对照组、哮喘组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。ELISA法检测和比较各组大鼠血清中TNFα的浓度,免疫组化法检测和比较各组大鼠肺组织NFκB的活性。结果仙灵脾和黄芪可有效减少哮喘大鼠TNFα的生成,抑制NFκB的活性,中药低、中、高剂量组间比较,差异无显著性。结论在哮喘发作期和缓解期给予仙灵脾和黄芪,可有效减少前炎症因子TNFα的生成,抑制NFκB的活性,抑制炎症的发展。

关键词：补肾益气中药仙灵脾和黄芪哮喘肿瘤坏死因子α 核转录因子κB

饮食和养阴药对雄激素致不孕大鼠排卵及能量状态、血脂的影响

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复旦学报（医学版） 2005年第5期32卷 607-610页

作者：李娟吴志勇魏美娟复旦大学附属妇产科医院中西医结合科

目的探讨饮食和养阴药对雄激素致不孕大鼠(ASR)排卵及能量状态、血脂的影响及其相互关系。方法给出生9日龄SD雌性大鼠丙酸睾酮1.25mg皮下注射,建立ASR模型,将其随机分为①模型组;②中药组(80日龄起灌服滋肾阴药“天癸方”);③节食组(80... 详细信息

目的探讨饮食和养阴药对雄激素致不孕大鼠(ASR)排卵及能量状态、血脂的影响及其相互关系。方法给出生9日龄SD雌性大鼠丙酸睾酮1.25mg皮下注射,建立ASR模型,将其随机分为①模型组;②中药组(80日龄起灌服滋肾阴药“天癸方”);③节食组(80日龄开始饲料减为自由进食时的70%);④中药+节食组;⑤设立对照组。每组14只。各组于110日龄称重,断头处死,测定各组血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、血糖的变化;同时对能量状态指标(每日摄食量、腹膜后脂肪垫、体重)进行评估;卵巢苏木精伊红染色作形态学观察。结果雄激素致不孕大鼠呈高代谢、能量失衡肥胖状态,其低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖较对照组增加(P0.05),镜下见卵巢卵泡囊性扩张;分别予滋肾阴中药、节食、滋肾阴+节食治疗后,能量失衡肥胖状态改善,低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖恢复正常,卵巢排卵功能不同程度地恢复,以中药+节食组治疗效果最佳(排卵率达71.43%),而中药组、节食组排卵率分别为42.86%,28.57%。结论雄激素致不孕大鼠有肥胖、脂质代谢紊乱及不排卵特点。养阴药+节食能改善能量代谢紊乱,促进排卵,且两者有协同作用。

关键词：饮食养阴中药雄激素致不孕大鼠血脂排卵

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下丘脑为命门初探

辽宁中医杂志 2010年第7期37卷 1246-1247页

作者：张红英刘宝君董竞成曹玉雪复旦大学附属华山医院中西医结合科上海200040

中医之命门为人体的生命之门,为了发挥命门学说对临床的指导作用,通过对古代命门学说中命门的位置、生理功能的探讨,对照下丘脑的位置、生理功能,提出了下丘脑可能是中医藏象学中的命门,是人体元气所在,生命的原动力。

关键词：命门下丘脑内分泌系统

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中医药与免疫

中国免疫学杂志 2004年第1期20卷 8-10页

作者：沈自尹复旦大学附属华山医院中西医结合研究所

1 中西医学体系大不相同现在中国有两种截然不同的医学体系同时并存.中医学根源于历史悠久、文化深厚的华夏文明,春秋战国是我国古代文化最为辉煌的时期,以其具有朴素唯物辩证法的哲学思想和观点向医学渗透,使医学从古代唯心论的神学中... 详细信息

1 中西医学体系大不相同现在中国有两种截然不同的医学体系同时并存.中医学根源于历史悠久、文化深厚的华夏文明,春秋战国是我国古代文化最为辉煌的时期,以其具有朴素唯物辩证法的哲学思想和观点向医学渗透,使医学从古代唯心论的神学中解脱出来.诸子百家进行学术争鸣,使当时盛行的阴阳五行学说对中医理论的形成起了主导的推动作用.

关键词：中医药免疫细胞因子调节网络肿瘤坏死因子免疫抑制剂