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基于CT影像儿童枢椎正常发育与变异的解剖特征

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中国组织工程研究 2025年第21期29卷 4545-4551页

作者：吕绍茂蓝佐珍吴文雪池金澄段少银福建医科大学临床医学部福建省福州市350004 厦门大学附属中山医院影像科福建省厦门市361004 厦门市儿童医院(复旦大学附属儿童医院厦门医院)放射科福建省厦门市361006

背景:枢椎发育演变过程复杂,研究报道较少。CT成像可以显示枢椎的正常发育过程、解剖结构、发育变异与畸形,明确枢椎骨化中心出现与骺板闭合时间及其演变过程和规律具有重要的临床价值。目的:基于CT影像展示儿童枢椎正常发育与变异的解... 详细信息

背景:枢椎发育演变过程复杂,研究报道较少。CT成像可以显示枢椎的正常发育过程、解剖结构、发育变异与畸形,明确枢椎骨化中心出现与骺板闭合时间及其演变过程和规律具有重要的临床价值。目的:基于CT影像展示儿童枢椎正常发育与变异的解剖结构。方法:回顾性分析2016年6月至2019年11月行颈部扫描的732例0-15岁儿童CT图像。观察指标包括枢椎齿状突、双侧椎弓、椎体骨化中心,齿突尖部二次骨化中心,椎弓、齿突基底部及后正中骺板,以及枢椎发育变异或畸形。分析与比较各项指标在不同年龄下的变化情况,并利用SPSS 17.0统计学软件包进行数据分类处理及统计学分析。结果与结论:(1)732例研究对象包括枢椎正常发育718例(98.1%),畸形或发育异常14例(1.9%);(2)枢椎5个骨化中心,其中双侧椎弓及齿突、椎体骨化中心在出生时已出现;齿突尖部二次骨化中心出现的中位年龄是5.7岁,年龄四分位差(IQR)是4.1-7岁,最早出现的为8个月22 d,最迟未出现的为12岁10个月;(3)齿突尖骺板融合的中位年龄是6岁,IQR是5-8岁,未融合最大年龄是8岁9个月,融合的最小年龄是4岁3个月;(4)双侧椎弓骺板闭合的中位年龄约3.8岁,IQR约2.9-4.6岁,闭合的最小年龄是2岁3个月,未闭合的最大年龄是6岁;(5)齿突基底部骺板闭合的中位数5.2岁,IQR为3.5-6.8岁,闭合最小年龄是2岁6个月,最晚未闭合年龄是9岁6个月;(6)后正中骺板闭合年龄中位数为1.5岁,IQR为1.0-2.1岁,最晚未闭合2例分别为2岁5个月、14岁,最早闭合为6个月20 d;(7)枢椎畸形或发育异常,包括出现副骨化中心及副骺板7例、枢椎游离骨化小骨3例、后正中骺板不闭合2例、无齿突尖部二次骨化中心2例及枢椎齿突骨化中心未出现1例;(8)提示多层螺旋CT扫描、结合多平面重组技术可以完整显示枢椎的解剖结构,评估其正常发育变异及畸形。

关键词：枢椎骨化中心骺板发育与变异 CT影像

腺病毒介导的ezrin抑制对肝癌细胞生物学行为的影响

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中华肝脏病杂志 2009年第1期17卷 61-63页

作者：王志军张岩刘康达柯爱武复旦大学附属中山医院实验研究中心上海200032

膜细胞骨架连接蛋白ezrin是一种与细胞骨架重排，细胞变形运动有关的分子，近年来被报道与肿瘤转移有关。我们以前期研究陋到筛选出的有效小干扰RNA序列为基础，构建以ezrin为靶点的腺病毒小发夹RNA（shRNA）载体，使ezrin在细胞内获得... 详细信息

膜细胞骨架连接蛋白ezrin是一种与细胞骨架重排，细胞变形运动有关的分子，近年来被报道与肿瘤转移有关。我们以前期研究陋到筛选出的有效小干扰RNA序列为基础，构建以ezrin为靶点的腺病毒小发夹RNA（shRNA）载体，使ezrin在细胞内获得稳定持续的下调，从而为深入研究膜-骨架连接蛋白ezrin在肿瘤细胞运动转移方面的作用及其相关的分子信号转导奠定了基础。

关键词：癌肝细胞小发夹RNA ezrin 腺病毒载体

膜-细胞骨架联接分子ezrin对肝癌细胞系生长和侵袭能力的影响

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中华肝脏病杂志 2006年第7期14卷 489-494页

作者：张岩胡美玉陈碧华王志军吴伟忠周康刘康达复旦大学附属中山医院实验研究中心上海200032 复旦大学肝癌研究所

目的探讨膜-细胞骨架联接蛋白ezrin在肝细胞肝癌生长和转移过程中的作用。方法分别应用免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测ezrin和骨架蛋白在不同转移潜能肝癌细胞系中的表达。选取高转移潜能SF7721(SMMC-7721经... 详细信息

目的探讨膜-细胞骨架联接蛋白ezrin在肝细胞肝癌生长和转移过程中的作用。方法分别应用免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测ezrin和骨架蛋白在不同转移潜能肝癌细胞系中的表达。选取高转移潜能SF7721(SMMC-7721经转基因后稳定表达肝细胞生长因子．从而获得高转移潜能的细胞系)和 MHCC97-H细胞系为研究对象,通过RNA干扰技术下调SF7721和MHCC97-H细胞系中ezrin蛋白的表达,观察其运动和侵袭能力的变化:通过四甲基偶氮唑盐检测细胞增殖能力变化;电子显微镜观察细胞伪足,Transwell检测细胞的运动侵袭能力。结果免疫荧光显示ezrin和骨架蛋白表达于细胞质,且双色荧光证实两者存在共表达;高转移潜能细胞系SF7721,MHCC-I、MHCC97-H ezrin和骨架蛋白的表达明显高于低转移潜能细胞系SMMC-7721、 Hep3B、HepG2细胞(x2=13．277,P=0．010; x2=21．815,P<0．01)。β-肌动蛋白在高低转移潜能细胞系的表达差异无统计学意义。通过RNA干扰技术抑制ezrin蛋白表达后,SF7721和MHHC97-H的细胞的增殖和侵袭能力均显著下降。结论 ezrin和骨架蛋白的过表达与肝癌的转移潜能相关,通过下调ezrin的表达可明显抑制肝癌细胞系SMMC-7721和MHCC97-H细胞的增殖和运动侵袭能力。

关键词：癌,肝细胞细胞支架蛋白质类

更年期大鼠血清雌二醇水平与脾细胞凋亡的增龄性改变

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复旦学报（医学版） 2004年第2期31卷 155-157页

作者：哈灵侠张绍芬谢倩刘暘复旦大学附属妇产科医院妇科上海200011 中山医院实验研究中心上海200032

目的　了解更年期大鼠雌激素水平与脾细胞凋亡的增龄性变化。方法　应用放射免疫法测定血清雌二醇 (E2 )水平 ;AnnexinV FITC/PI双染色流式细胞仪测定脾细胞凋亡率 ;逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测脾细胞凋亡基因Bcl 2、Bax的表达。... 详细信息

目的　了解更年期大鼠雌激素水平与脾细胞凋亡的增龄性变化。方法　应用放射免疫法测定血清雌二醇 (E2 )水平 ;AnnexinV FITC/PI双染色流式细胞仪测定脾细胞凋亡率 ;逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测脾细胞凋亡基因Bcl 2、Bax的表达。结果　更年组大鼠血E2 水平低于青年组 (14 .89pg/mLvs 34.0 9pg/mL ,P <0 .0 1) ;脾细胞凋亡率高于青年组 (7.7%vs 10 .3% ,P <0 .0 5 ) ,促凋亡基因Bax的转录水平也高于青年组。结论　衰老过程中脾淋巴细胞凋亡增加 ,受到相关基因的调控。

关键词：更年期大鼠血清雌二醇脾细胞增龄性改变细胞凋亡

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体外诱导大鼠骨髓基质细胞向心肌细胞的分化

复旦学报（医学版） 2002年第5期29卷 329-332页

作者：唐耀亮赵强葛均波储以微王春生胡美玉杨英珍刘康达复旦大学附属中山医院心外科上海200032 复旦大学附属中山医院心内科上海200032 复旦大学附属中山医院医学院免疫学教研室上海200032 复旦大学附属中山医院实验研究中心上海200032

目的　通过体外诱导研究骨髓基质细胞 (MSC)向心肌样细胞的分化和心肌细胞特异性标志的表达。方法　抽取雄性SD大鼠骨髓 ,进行体外培养和连续传代 ,获得较纯的MSC。采用第 8代的MSC ,以去甲基化药物 5 氮杂胞苷进行体外诱导 ,相差显... 详细信息

目的　通过体外诱导研究骨髓基质细胞 (MSC)向心肌样细胞的分化和心肌细胞特异性标志的表达。方法　抽取雄性SD大鼠骨髓 ,进行体外培养和连续传代 ,获得较纯的MSC。采用第 8代的MSC ,以去甲基化药物 5 氮杂胞苷进行体外诱导 ,相差显微镜下观察其形态变化 ,通过流式细胞仪 (FACS)分析细胞形态比例 ,以免疫组化方法鉴定心肌特征性蛋白Desmin和肌钙蛋白T(cTnT)表达 ,并通过RT PCR鉴定心肌特异因子基因的表达。结果　诱导前MSC多呈扁平多突起形态 ,诱导后形态发生变化 ,10d细胞呈长梭形 ,2 0d后细胞之间形成连接 ,排列方向渐趋一致 ,1月时出现肌管样结构。FACS检测发现诱导后MSC形态构成发生变化 ,以形态较小细胞为主。免疫组化检测Desmin阳性比例近 35 % ,有cTnT免疫荧光阳性细胞出现 ,约占 10 %。RT PCR显示诱导后MSC后有GATA 4、ANP和a MHC基因表达。结论　成体中的MSC在一定诱导条件下可以表现心肌样特征。

关键词：骨髓基质细胞心肌化细胞心肌成形术组织工程

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间充质干细胞移植减轻大鼠盐酸吸入性肺损伤

中华急诊医学杂志 2013年第6期22卷 585-590页

作者：吴晓丹贾庆安钱梦佳隆玄李善群宋元林王向东白春学复旦大学附属中山医院呼吸科上海200032 复旦大学附属中山医院实验研究中心上海200032 复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032

目的研究骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对大鼠盐酸吸人性肺损伤的作用与机制。方法本实验于复旦大学附属中山医院实验研究中心进行。改良贴壁法分离培养SpragueDawley（sD）大鼠BMSCs。24只SD大鼠随机（随机数字法）分为3组（n=8）：... 详细信息

目的研究骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对大鼠盐酸吸人性肺损伤的作用与机制。方法本实验于复旦大学附属中山医院实验研究中心进行。改良贴壁法分离培养SpragueDawley（sD）大鼠BMSCs。24只SD大鼠随机（随机数字法）分为3组（n=8）：对照组，损伤组和移植组。损伤组和移植组气道内滴注盐酸（1．2ml／kg，pH=1．5），对照组则滴人等量磷酸缓冲盐溶液（PBS），用动脉血气、肺组织湿干比和病理改变评价模型是否成功建立。移植组于颈外静脉注射5×10^6个BMSCs，其他2组注入0．5ml的PBS。移植6h后行动脉血气分析，酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）的肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-6（IL-6）和白介素-10（IL-10）质量浓度，观察肺组织病理改变和测定肺组织湿干比。体外实验中，BMSCs与损伤肺细胞或正常肺细胞于Transwell体系共培养36h，观察损伤肺影响BMSCs迁移情况；另取BMSCs与损伤肺细胞混合培养或于Transwell中培养，正常肺细胞或损伤肺细胞单独培养作对照，6h后检测上清液中TNF-α、IL-6和IL-10质量浓度。用方差分析比较多组间的差异，独立样本t检验比较两组间差异。结果BMSCs移植改善了肺损伤大鼠的低氧血症（P〈0．01）和肺组织损伤，降低了肺组织湿干比（P〈0．01），降低了血清和BALF的TNF-α水平（P〈0．05；P〈0．01），升高了血清和BALF的IL-10质量浓度（P〈0．01），对IL-6水平无明显影响（P〉0．05）。体外实验中，BMSCs向损伤肺迁移明显多于向正常肺迁移（P〈0．01），BMSCs与肺细胞接触或不接触的共培养均降低了上清液TNF-α质量浓度（P〈0．01），升高了IL-10质量浓度（P〈0．01），对IL-6质量浓度无影响（P〉0．05）。结论BMSCs移植可以减轻大鼠盐酸吸人性肺损伤，可能机制为干细胞通过旁分泌途径下调炎症反应。

关键词：间充质干细胞吸入性肺损伤大鼠盐酸骨髓肿瘤坏死因子-α 白介素-6 白介素-10

硬皮病伴发肺间质病变小鼠模型的建立及发病机制研究

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复旦学报（医学版） 2015年第4期42卷 491-497页

作者：张立李正曾海英王强复旦大学附属中山医院皮肤科上海200032 复旦大学附属中山医院实验研究中心上海200032 复旦大学附属中山医院病理科上海200032

目的建立硬皮病伴发肺间质病变(systemic scleroderma associated with interstitial lung disease,SscILD)的小鼠动物模型,并初步探讨其发病机制。方法造模组以0.4 mg/mL浓度博来霉素(bleomycin,BLM)背部中央区域局部皮下注射0.1 mL/天,连续28天;对照组以PBS缓冲液(pH=7.4)相同方法处理;连续观察2组小鼠大体形态变化,以HE和Masson染色明确模型的可靠性,通过检测羟脯氨酸了解纤维化程度,并通过免疫组化检测TGF-β1、α-SMA、collagen-1、MMP-9、CD8+T细胞、CD68+巨噬细胞、IL-23的表述。结果造模组小鼠皮肤显著硬化,镜下真皮层显著增厚,胶原纤维束增多,排列紧密,胶原含量升高,符合硬皮病表现;并且肺组织出现明显炎症和纤维化,胶原含量显著升高,免疫组化检测发现TGF-β1、collagen-1、MMP-9、α-SMA、CD8+T细胞、CD68+巨噬细胞、IL-23的表达均显著性增高(P均<0.05)。结论 C3H/He小鼠连续28天皮下注射0.4 mg/mL的BLM能诱导Ssc-ILD动物模型,出现符合Ssc标准的皮肤改变,肺部出现明显的炎症和纤维化,与TGF-β1升高密切相关,并伴随α-SMA、collagen-1、MMP-9、CD8+T细胞、CD68+巨噬细胞、IL-23增多。

关键词：硬皮病肺间质病变 C3H/He 炎症纤维化小鼠

海藻酸盐基复合水凝胶培养乳腺癌类器官中钙离子的关键作用

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中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4702-4709页

作者：林志光饶琪梁珊珊王若雨于炜婷大连大学附属中山医院肿瘤中心辽宁省大连市116001 大连大学中山临床学院辽宁省大连市116001 大连市海洋多糖生物材料转化医学重点实验室辽宁省大连市116001

背景:基质胶是当前培养肿瘤类器官的主要材料,但单纯基质胶不足以在体外模拟肿瘤生长的力学环境;在基质胶基础上引入海藻酸盐材料可提升水凝胶刚度,但水凝胶力学性能在长期培养中难以维持稳定。目的:在乳腺癌类器官培养体系中引入少量... 详细信息

背景:基质胶是当前培养肿瘤类器官的主要材料,但单纯基质胶不足以在体外模拟肿瘤生长的力学环境;在基质胶基础上引入海藻酸盐材料可提升水凝胶刚度,但水凝胶力学性能在长期培养中难以维持稳定。目的:在乳腺癌类器官培养体系中引入少量钙离子,观察其对基质胶-海藻酸钠水凝胶长期力学性能的维持作用。方法:(1)在恒定质量浓度(5 mg/m L)的基质胶中引入不同质量浓度(0,2.5,5 mg/m L)的海藻酸钠,分别制备低、中、高刚度水凝胶,使用流变仪定期测量水凝胶的力学性能。(2)将人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231重悬于不同刚度的水凝胶预凝胶中,成胶后加入含(或不含)钙离子的乳腺癌类器官因子培养基,进行乳腺癌类器官培养,在设定的时间点,使用流变仪定期测量引入钙离子对水凝胶力学性能的影响,光学显微镜下观察乳腺癌类器官形态变化,统计第13天乳腺癌类器官成球率。乳腺癌类器官培养7 d后,加入不同浓度(0.1,1,10,100 nmol/L)的化疗药物多西他赛干预6 d,检测细胞活力,计算多西他赛的半抑制浓度IC_(50)。结果与结论:(1)海藻酸钠的加入有效提高了水凝胶的力学强度。(2)随着乳腺癌类器官培养时间的延长,水凝胶的力学强度均降低,培养第13天,中、高刚度水凝胶在含钙离子培养环境中的力学性能均显著高于在不含钙离子培养环境中的力学性能(P0.05)。在长期培养中(13 d),中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官随水凝胶力学性能的下降由圆形转化为梭形,而引入钙离子后两组乳腺癌类器官形态不随培养时间延长而改变。在培养环境中引入钙离子对低刚度水凝胶组乳腺癌类器官成球率无影响,但可提升中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官成球率。(3)在不含钙离子的培养环境中,随着多西他赛浓度的升高,乳腺癌类器官的细胞活力均降低,3组水凝胶组间的IC_(50)无明显差异(P>0.05);在含钙离子的培养环境中,随着多西他赛浓度的升高,乳腺癌类器官的细胞活力均降低,中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官的细胞活力强于低刚度水凝胶组,IC_(50)高于低刚度水凝胶组(P<0.05)。(4)结果表明,在乳腺癌类器官培养体系中引入钙离子可维持基质胶-海藻酸钠水凝胶的力学性能。

关键词：肿瘤类器官乳腺癌类器官海藻酸钠基质胶复合水凝胶基质刚度药物反应

流式细胞磁珠微阵列法检测血清中细胞因子水平在稳定期和急性加重期哮喘中的意义

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复旦学报（医学版） 2016年第1期43卷 22-29页

作者：杜春玲徐侃闵智慧苏孝琼董年白丰玺陈智鸿复旦大学附属中山医院呼吸科上海200032 复旦大学附属中山医院青浦分院呼吸科上海201700 复旦大学附属中山医院老年科上海200032 复旦大学附属中山医院实验研究中心上海200032

目的探讨流式细胞磁珠微阵列法（cytometric beads array,CBA）检测血清中细胞因子水平在稳定期和急性加重期哮喘中的意义。方法纳入慢性持续期哮喘40例,急性发作期哮喘22例,健康人18例。抽取外周血2 mL,采用CAB法检测外周血清中细胞因... 详细信息

目的探讨流式细胞磁珠微阵列法（cytometric beads array,CBA）检测血清中细胞因子水平在稳定期和急性加重期哮喘中的意义。方法纳入慢性持续期哮喘40例,急性发作期哮喘22例,健康人18例。抽取外周血2 mL,采用CAB法检测外周血清中细胞因子水平,并分析各细胞因子特征及与临床数据的相关性。全自动血细胞及生化仪检测血常规,C反应蛋白和降钙素原。结果定制含7种细胞因子微球（分别为IL-5,IL-6,IL-10,IL-13,IL-17,TNF-α,IFN-γ）的CBA试剂盒。与健康人相比,7种细胞因子在慢性持续期哮喘无明显改变。急性发作期哮喘细胞因子升高分为5种亚群,分别为IL-6升高型（22.8%）、IL-6/TNF-α双高型（13.6%）、IL-5升高型（31.8%）、IL-17升高型（占13.6%）及细胞因子正常型（占18.2%）。其中,IL-6、TNF-α明显升高,较健康人分别升高了6.28-12倍和17.3倍。IL-6升高型、IL-6/TNF-α升高型与白细胞及C反应蛋白呈正相关（R2=0.63,R2=0.67;P〈0.05）。结论 CBA法可快速检测哮喘血清标本的多种细胞因子水平,细胞因子在慢性持续期无明显升高,但IL-6、TNF-α、WBC和CRP的综合指标有助于判断由细菌感染诱发的急性加重,并快速指导抗生素的使用。

关键词：细胞因子哮喘流式细胞磁珠微阵列法