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地黄环烯醚萜苷类通过调控TGF-β1/Smads信号通路保护糖尿病小鼠肾脏作用

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中国实验方剂学杂志 2025年第2期 56-66页

作者：张宏伟刘明王慧森葛文静张雪侠周倩李华妮唐素勤李更生河南大学药学院河南省中西医结合医院/河南省中医药研究院中药所河南中医药大学中医药科学院

目的：观察地黄环烯醚萜苷类（RIG）成分对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠肾脏的保护作用，并探讨其机制。方法：雄性C57BL/6J小鼠72只，随机抽取12只为正常组，其余60只进行高脂饲料喂养6周联合60 mg·kg-1链脲佐菌素连续注射4 d进行... 详细信息

目的：观察地黄环烯醚萜苷类（RIG）成分对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠肾脏的保护作用，并探讨其机制。方法：雄性C57BL/6J小鼠72只，随机抽取12只为正常组，其余60只进行高脂饲料喂养6周联合60 mg·kg-1链脲佐菌素连续注射4 d进行2型糖尿病造模，造模成功后随机分为模型组、二甲双胍组(250 mg·kg-1)、梓醇组(100 mg·kg-1)、地黄环烯醚萜苷类低剂量组(RIG-L,200 mg·kg-1)和地黄环烯醚萜苷类高剂量组(RIG-H,400 mg·kg-1)，每组11只。各给药组小鼠灌胃对应药物，正常组和模型组给予等体积去离子水灌胃，1次/d。干预8周后，进行口服糖耐量（OGTT）实验，并计算OGTT曲线下面积（AUC），处死小鼠并剥离双肾组织。测定小鼠体质量、双肾质量、空腹血糖（FBG）；生化试剂盒检测血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）含量；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清胰岛素（FINS）含量，计算胰岛素敏感指数（ISI）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）；苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色观察肾脏组织病理变化；免疫组化法（IHC）检测肾脏组织白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、胶原蛋白-3（ColⅢ）的表达情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织TGF-β1、细胞信号转导分子3（Smad3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、ColⅢ蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组小鼠体质量、ISI显著降低（P比较，各给药组小鼠体质量变化差异无统计学意义；各给药组小鼠肾脏绝对质明显降低（P<0.05,P<0.01）;RIG-H组小鼠给药第4～8周及二甲双胍、梓醇和RIG-L组小鼠给药第6～8周，FBG显著降低（P<0.01）;RIG-L、RIG-H和二甲双胍组小鼠AUC明显降低（P<0.05,P<0.01）；各给药组小鼠血清TC、SCr、BUN水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,RIG-L、RIG-H和二甲双胍组小鼠TG明显降低（P<0.05,P<0.01）；梓醇组、RIG-L和二甲双胍组小鼠FINS显著降低（P<0.01）；各给药组小鼠HOMA-IR显著降低（P<0.01）；各给药组小鼠ISI显著升高（P<0.01）；镜下各给药组小鼠肾脏组织病变均得到不同程度改善；各给药组小鼠肾脏组织IL-1、TGF-β1蛋白，RIG-H和二甲双胍组小鼠肾脏组织IL-6、TNF-α、ColⅢ蛋白及RIG-L小鼠肾脏组织IL-6、TNF-α蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01），梓醇组小鼠肾脏组织IL-6、TNF-α、ColⅢ蛋白及RIG-L小鼠肾脏组织ColⅢ蛋白含量呈下降趋势，差异无统计学意义；RIG-H和二甲双胍组小鼠肾脏组织TGF-β1、Smad3、ColⅢ蛋白表达显著降低（P<0.01），各给药组小鼠肾脏MMP-9蛋白表达量显著升高（P<0.01）。结论：地黄环烯醚萜苷类可以改善糖尿病小鼠肾组织结构和功能，其机制可能与TGF-β1/Smads信号通路有关。

关键词：地黄环烯醚萜苷类 2型糖尿病转化生长因子-β1(TGF-β1)/细胞信号转导分子3(Smad3) 胶原蛋白-3(ColⅢ) 基质金属蛋白酶-9(MMP-9)

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血塞通软胶囊对东莨菪碱致阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力及突触可塑性的影响研究

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海南医学院学报 2025年

作者：胡小童胡卓瑶曹秀敏安欣黄雄峰陈乔江西中医药大学中西医结合一级学科平台萍乡卫生职业学院南昌大学抚州医学院

目的：探究血塞通软胶囊（Xuesaitong soft capsule，XST）对东莨菪碱所致阿尔茨海默病模型小鼠学习认知功能的影响及对突触可塑性的调节作用。方法：90只雄性昆明小鼠随机分为空白组（Control），模型组（Model），盐酸多奈哌齐组（don... 详细信息

目的：探究血塞通软胶囊（Xuesaitong soft capsule，XST）对东莨菪碱所致阿尔茨海默病模型小鼠学习认知功能的影响及对突触可塑性的调节作用。方法：90只雄性昆明小鼠随机分为空白组（Control），模型组（Model），盐酸多奈哌齐组（donepezil hydrochloride，DPH）及血塞通低、中、高剂量组（XST-L、XST-M、XST-H）。通过腹腔注射东莨菪碱制备阿尔茨海默病模型，使用Morris水迷宫检测小鼠空间认知记忆功能改变；苏木精-伊红染色（Hemoxylin-eosin staining，HE）观测小鼠海马CA1区和皮质区细胞形态改变；透射电镜观察海马超微结构变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定脑组织中环磷酸腺苷（Cyclic- adenosine monophosphate，cAMP）含量变化，免疫组化染色检测突触素（synaptophysin，SYN）、生长相关蛋白-43（growth-associatedprotein-43，GAP-43）、突触后致密物-95（post-synaptic density protein-95，PSD-95）蛋白水平表达；蛋白免疫印迹法（Western Blot，WB）检测PSD-95、GAP-43、SYN、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cyclic-AMP response binding protein，CREB）、蛋白激酶A（Protein kinase A，PKA）在海马和皮质区的表达。结果：Morris水迷宫结果显示，与Control组比较，Model组小鼠平均逃避潜伏时间明显延长，穿越平台次数出现减少（P比较，各用药组上述病理变化得到不同程度改善。透射电镜观察结果显示，Model组突触结构不完整，突触间隙模糊，突触小泡以及突触前致密物质减少，药物干预后突触结构相对完整，突触间隙清晰，突触小泡密度增加，线粒体丰富，突触前致密物增多，突触后膜增厚。ELISA结果显示，与Control组比较，Model组cAMP蛋白表达极显著减少（P＜0.01）；与Model组比较，海马区DPH组和XST-H组cAMP含量明显增加（P＜0.05或P＜0.01），皮质区DPH组、XST-M组和XST-H组cAMP含量显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。免疫组化结果分析，与Control组比较，Model组SYN、GAP-43、PSD-95蛋白表达均呈显著下降趋势（P比较，Model组PSD-95、GAP-43、CREB、PKA和SYN蛋白表达明显减少（P＜0.05或P＜0.01）；与Model组比较，药物干预后PSD-95、GAP-43、CREB、PKA和SYN表达水平不同程度增加（P＜0.05或P＜0.01）。结论：血塞通软胶囊能够改善AD小鼠学习记忆能力，其作用机制可能与激活cAMP/PKA/CREB信号通路、修复突触可塑性相关。

关键词：血塞通软胶囊阿尔茨海默病突触可塑性学习记忆能力

淋巴细胞基因表达谱揭示淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的分子机制

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中国中西医结合杂志 2004年第1期24卷 59-62页

作者：陈瑜沈自尹陈伟华复旦大学中西医结合研究所

目的 :探讨淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的基因调控模式。方法 :(1)采用流式细胞技术定量分析老年组、年轻组及淫羊藿总黄酮组大鼠脾淋巴细胞凋亡百分率。 (2 )采用基因芯片技术分析各组淋巴细胞基因表达谱。结果 :(1)细胞凋亡百分率 ... 详细信息

目的 :探讨淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的基因调控模式。方法 :(1)采用流式细胞技术定量分析老年组、年轻组及淫羊藿总黄酮组大鼠脾淋巴细胞凋亡百分率。 (2 )采用基因芯片技术分析各组淋巴细胞基因表达谱。结果 :(1)细胞凋亡百分率 :老年组与年轻组比较 ,淫羊藿总黄酮与老年组比较 ,差异均有显著性 (P 比较 ,老年组上调的基因有 116个 ,下调的基因有 2 15个。与老年组比较 ,淫羊藿总黄酮上调的基因有 4 47个 ,下调的基因有 4 5 6个。涉及细胞凋亡、细胞增殖调控等方面。结论 :(1)以促凋亡基因表达上调、抗凋亡基因表达下调为主要特征的表达模式是衰老免疫稳态失衡的重要基因背景。 (2 )淫羊藿总黄酮的作用规律在于逆转功能对立的促凋亡基因与抗凋亡基因、促增殖基因与抗增殖基因在衰老淋巴细胞中表达的异常 ,重塑基因表达的良性平衡 ,重建衰老免疫稳态。

关键词：淋巴细胞基因表达谱淫羊藿总黄酮衰老免疫稳态分子机制

白藜芦醇二聚体Quadrangularin A和Pallidol合成方法学研究

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有机化学 2020年第6期40卷 1571-1577页

作者：韩吉来唐美麟孙逊复旦大学药学院天然药物系上海201203 复旦大学中西医结合研究所上海200040 复旦大学生物医学研究院上海200433

研究了白藜芦醇二聚体quadrangularin A (3)和pallidol (4)的全合成新方法学,设计了以廉价易得的3,5-二甲氧基苯乙腈(5)和3,5-二甲氧基苯甲醛(6)为原料,经9步反应得到天然产物quadrangularin A (3),总收率为2.6%;经11步反应得到天然产物... 详细信息

研究了白藜芦醇二聚体quadrangularin A (3)和pallidol (4)的全合成新方法学,设计了以廉价易得的3,5-二甲氧基苯乙腈(5)和3,5-二甲氧基苯甲醛(6)为原料,经9步反应得到天然产物quadrangularin A (3),总收率为2.6%;经11步反应得到天然产物pallidol(4),总收率为1.3%.其中,利用Knoevenagel反应在室温无需无水无氧条件下,简单高效地引入A、B两个对称或非对称芳环,拓展了二苯乙烯基多样性骨架结构中间体7,产率达98%以上,改善了文献报道中非对称结构拓展受限,产率低,操作复杂等问题.此外,通过巧妙构建4-烯醛骨架结构的关键中间体9,可高效地构筑C、D芳环,为拓展A、B、C和D芳环多样性结构的白藜芦醇类二聚体提供了新思路.所合成的中间体及天然产物结构均经~1H NMR, ^(13)C NMR, HRMS表征确证.

关键词：白藜芦醇二聚体傅克反应格氏试剂加成全合成

上皮间质转化在特发性肺纤维化及其信号通路中的研究进展

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复旦学报（医学版） 2022年第4期49卷 614-619,627页

作者：邓玲玲欧阳博书魏颖董竞成复旦大学附属华山医院中西医结合科上海200040 复旦大学中西医结合研究院上海200040

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性致死性疾病,其发病机制尚未完全阐明。上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是分化的肺泡上皮细胞失去上皮特征同时获得间充质细胞形态以及迁移性的生物... 详细信息

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性致死性疾病,其发病机制尚未完全阐明。上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是分化的肺泡上皮细胞失去上皮特征同时获得间充质细胞形态以及迁移性的生物学过程。阻断TGF-β-Smad、Wnt/β-catenin、Hippo等介导的信号转导,有利于抑制EMT,进而有助于抑制IPF进展。本文总结了EMT相关信号转导通路在IPF中的研究进展,为临床使用靶向EMT的药物诊疗肺纤维化患者提供一定的参考和依据。

关键词：特发性肺纤维化(IPF) 上皮间质转化(EMT) 信号转导 TGF-β-Smad

单细胞转录组测序在哮喘研究中应用的研究进展

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复旦学报（医学版） 2021年第3期48卷 404-409页

作者：魏颖(综述) 吾尼且木·吐拉克滕方舟汤蔚峰董竞成(审校) 复旦大学附属华山医院中西医结合科上海200040 复旦大学中西医结合研究院上海200040

哮喘是一种异质性疾病,传统转录组测序方法获得的是同一基因在所有细胞中的平均表达水平,不能完全揭示异质性哮喘的发病机制及药物疗效。单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,sc RNA-seq)是在单细胞水平对全转录组进行扩增与... 详细信息

哮喘是一种异质性疾病,传统转录组测序方法获得的是同一基因在所有细胞中的平均表达水平,不能完全揭示异质性哮喘的发病机制及药物疗效。单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,sc RNA-seq)是在单细胞水平对全转录组进行扩增与测序的一项新技术,能够获得每个细胞的m RNA表达信息,发现不同的细胞亚群及相关信息,揭示细胞间基因表达的异质性及鉴定稀有细胞类型,为深入研究和理解哮喘发病机制提供了新的技术手段。本文对sc RNA-seq技术在哮喘研究中的应用做一概述,以期为深入研究哮喘这一异质性疾病的发病机制提供新的视角和研究思路。

关键词：单细胞转录组测序(scRNA-seq) 哮喘异质性

不同中医证型晚期肺腺癌患者血清、诱导痰中炎症因子与 HPA 轴功能的相关性研究

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中国中西医结合杂志 2012年第7期32卷 896-901页

作者：杜懿杰曹玉雪段晓虹厉蓓金华良吴金峰刘宝君张红英董竞成复旦大学附属华山医院中西医结合肺、炎症和肿瘤研究室复旦大学中西医结合研究所

目的研究不同中医证型肺腺癌患者血清、诱导痰中炎症因子与下丘脑-垂体-肾上腺( hypotha-lamic-pituitary-adrenal,HPA) 轴功能变化的相关性。方法根据中医辨证分型不同将 71 例肺腺癌患者分为肾阳虚组( 28 例) 、肺气虚组( 23 例) 、... 详细信息

目的研究不同中医证型肺腺癌患者血清、诱导痰中炎症因子与下丘脑-垂体-肾上腺( hypotha-lamic-pituitary-adrenal,HPA) 轴功能变化的相关性。方法根据中医辨证分型不同将 71 例肺腺癌患者分为肾阳虚组( 28 例) 、肺气虚组( 23 例) 、阴虚火旺组( 20 例) 。另选取 41名健康体检者作为健康组。采用 Bio-Plex 悬液芯片检测血清及诱导痰中肿瘤坏死因子( TNF) -α、转化生长因子( TGF) -β、白介素( IL) -6 和干扰素( INF) -γ水平,用放免法检测 24 h 尿游离皮质醇、尿 17-羟皮质类固醇( 尿 17-羟) 、尿 17-酮类固醇( 尿 17-酮) 及血清和唾液皮质醇。结果肾阳虚组血清 IL-6 明显高于其他3 组( P 比较,肾阳虚组、阴虚火旺组血清 TNF-α明显升高,INF-γ明显降低( P <0. 05) ,肾阳虚组诱导痰 TNF-α、TGF-β明显升高( P <0. 05) ,阴虚火旺组诱导痰 IFN-γ明显降低( P <0. 05) 。肾阳虚组上午8: 00及次日上午 8: 00 血、唾液皮质醇明显降低( P < 0. 05) 。3 组患者血清 TNF-α、血清 IL-6 均与血皮质醇呈较为明显的负相关( r = -0. 26,P =0. 03; r = -0. 25,P =0. 03) ,诱导痰 IL-6 还与唾液皮质醇呈较为明显的负相关( r = -0. 29,P =0. 02) 。血清 IFN-γ与尿 17-羟呈较为明显的正相关( r =0. 21,P =0. 03) 。结论肾阳虚型肺腺癌患者炎症因子上调,HPA 轴功能下降或紊乱最为明显,肺腺癌患者 IL-6、TNF-α和 IFN-γ与HPA 轴功能关系密切。肺腺癌中医证候存在由气虚、阴虚向肾阳虚衰的转化。血清及诱导痰中 IL-6、TNF-α和 IFN-γ及 HPA 轴功能是肺腺癌微观辨证的重要指标。

关键词：肺腺癌炎症因子下丘脑-垂体-肾上腺轴中医证型相关性

小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化相关基因PPARγ、C/EBPα mRNA和蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2008年第11期28卷 1005-1009页

作者：刘毅娄少颖何燕铭陈伟华应健王文健复旦大学中西医结合研究所复旦大学附属华山医院中西医结合科上海200040

目的探讨小檗碱对脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法以XTT法检测3T3-Ll前脂肪细胞的增殖;油红O染色并通过比色定量分析检测3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积;采用Real-time PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)技术... 详细信息

目的探讨小檗碱对脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法以XTT法检测3T3-Ll前脂肪细胞的增殖;油红O染色并通过比色定量分析检测3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积;采用Real-time PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)技术检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体γ(peroxisome proliferator activated receptor,PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer bindingprotein,C/EBPα)mRNA以及蛋白的表达。结果浓度低于10μmol/L小檗碱干预24h,对脂肪细胞增殖的影响不明显(与空白对照组比较,P>0.05),20、40、80μmol/L小檗碱在作用24h后即表现出明显的抑制效应;不同浓度的小檗碱作用48、72h后对脂肪细胞的增殖亦表现出抑制效应,且有一定的量效关系,即小檗碱浓度越高抑制作用越明显,与空白对照组比较差异有统计学意义(P比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论小檗碱能够抑制前脂肪细胞的增殖和分化,减少脂肪细胞分化过程中脂质的堆积,机制可能与其抑制脂肪细胞分化相关基因PPARγ、C/EBPαmRNA和蛋白表达有关,实验为小檗碱防治肥胖等代谢相关性疾病提供了依据。

关键词：小檗碱脂肪细胞过氧化物体增殖剂活化受体γ CAAT/增强子结合蛋白α mRNA表达蛋白表达

补肾与健脾复方调节皮质酮鼠T细胞凋亡的对比研究

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中国中西医结合杂志 2002年第6期22卷 444-446页

作者：陈瑜沈自尹陈伟华应健复旦大学华山医院中西医结合研究所

目的 :补肾复方与健脾复方调节皮质酮鼠T细胞凋亡的对比研究。方法 :采用透射电镜、TUNEL标记的流式细胞仪分析技术对激活诱导的T淋巴细胞凋亡进行定性及定量分析。结果 :模型组T细胞凋亡 (% )为 4 5 87± 7 2 2 ,正常对照组 34 2 5± ... 详细信息

目的 :补肾复方与健脾复方调节皮质酮鼠T细胞凋亡的对比研究。方法 :采用透射电镜、TUNEL标记的流式细胞仪分析技术对激活诱导的T淋巴细胞凋亡进行定性及定量分析。结果 :模型组T细胞凋亡 (% )为 4 5 87± 7 2 2 ,正常对照组 34 2 5± 6 4 7,两组比较差异有显著性 (P 比较 ,差异有显著性 (P 比较差异有显著性 (P 比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :皮质酮鼠激活诱导的T细胞凋亡敏感性显著增高 ,两个补肾复方均可显著降低皮质酮鼠激活诱导的T细胞凋亡 ,而四君子汤对皮质酮鼠激活诱导的T细胞凋亡无显著的下调作用。

关键词：健脾复方 T细胞凋亡对比研究皮质酮补肾复方细胞凋亡