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表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS基因生物学功能研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 946-953页

作者：王家学朱涛娄强吴旸韩聪瞿涤复旦大学上海医学院生物医学研究院病原生物学研究所教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室200032

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重... 详细信息

目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重组质粒在43℃条件下振摇培养,筛选表皮葡萄球菌1457菌株的arlS缺失突变株(SE1457-△arlS);采用微量板半定量方法检测arlS删除突变对细菌生物被膜形成的影响,通过检测A595值观察其生长曲线,检测过夜培养上清液对菌细胞裂解的活性,并用0.1%TritonX-100诱导细菌自溶的方法检测SE1457-△arlS突变株的自溶情况。结果成功构建pBT2-△arlS质粒,利用同源重组基因删除的方法表皮葡萄球菌1457 arlS基因被删除。△arlS突变株与野生株的生长曲线基本相似,提示arlS基因删除对细菌的增殖无明显影响,但SE1457-△arlS突变株形成生物被膜的能力明显低于野生株,降低90.96%;在0.1%Triton X-100诱导下SE1457-△arlS基因删除突变株的裂解率为97.83%,野生株为55.38%;而△arlS突变株过夜培养上清液对靶细菌裂解的活性则低于野生株,其裂解率为20.50%,野生株为56.12%。结论表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统arlS基因可调控细菌生物被膜形成、菌细胞自溶以及胞外细菌裂解酶的活性。

关键词：表皮葡萄球菌双组分信号转导系统 arLS基因

分枝杆菌细胞壁脂质PDIM致病机制研究进展

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科技导报 2012年第7期30卷 63-67页

作者：黄新华王德成复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)是导致人和动物结核病的病原体。MTB细胞壁成分复杂,功能多样,不但帮助分枝杆菌抵御外界不良的生活环境,同时在细菌逃逸宿主免疫攻击和致病过程中也发挥重要作用。脂质占细胞壁干重的60%以... 详细信息

结核分枝杆菌(MycobacteriumTuberculosis,MTB)是导致人和动物结核病的病原体。MTB细胞壁成分复杂,功能多样,不但帮助分枝杆菌抵御外界不良的生活环境,同时在细菌逃逸宿主免疫攻击和致病过程中也发挥重要作用。脂质占细胞壁干重的60%以上,其高含量与细菌毒力密切相关。MTB不含内毒素,也不产生外毒素和侵袭性酶类,其致病性主要与占细胞壁干重60%以上的脂质成分密切相关。PDIM(phthioceroldimycocerosate)作为细胞壁组分中独特而重要的结构,在维持细菌正常结构上发挥重要作用。由于PDIM在细胞壁分布的广泛性,研究发现PDIM在病原体-宿主的相互作用过程中也扮演重要角色,尤其是在细菌的早期侵染及进入巨噬细胞环节中发挥积极作用。对PDIM重要致病和毒力损伤机制研究,不仅加深对病原体-宿主互作网络中的理解,还有望为结核病的治疗带来新的希望与突破。

关键词：分枝杆菌 PDIM 脂质致病机制

乙型肝炎病毒cccDNA体外实验模型研究进展

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科学通报 2019年第30期64卷 3061-3069页

作者：朱园飞苏瑜邓强复旦大学基础医学院病原生物学系医学分子病毒学重点实验室

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是一种小的DNA包膜病毒,属于嗜肝DNA病毒科.在细胞核内,HBV部分双链的DNA基因组修复为共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),后者作为HBV复制的原始模板起始病毒转录.cccDNA具... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是一种小的DNA包膜病毒,属于嗜肝DNA病毒科.在细胞核内,HBV部分双链的DNA基因组修复为共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),后者作为HBV复制的原始模板起始病毒转录.cccDNA具有显著的稳定性,是HBV持续感染的分子基础,也是抗病毒药物设计的关键靶点.HBV cccDNA研究常受限于细胞内较低的拷贝数,以及缺乏灵敏、可靠的检测方法,因此,建立合适的cccDNA实验模型具有重要意义.本文对近年来HBV cccDNA体外实验模型方面的主要研究进展进行综述,以期为深入研究HBV病毒学和抗病毒药物研发提供帮助.

关键词：乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA 病毒复制持续性感染实验模型

新型冠状病毒(SARS)的主要特性及其防治

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上海医学 2003年第5期26卷 297-298页

作者：闻玉梅复旦大学医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

2002年11月左右在我国广州省境内发现了一些病因不明，有严重呼吸系统症状的疾病。香港、越南等地也先后发现该疾病，并向世界多国传播。2003年该疾病由意大利医师沃比钠在越南发现后建议命名为SARS(se-vere acute respiratory syndrom... 详细信息

2002年11月左右在我国广州省境内发现了一些病因不明，有严重呼吸系统症状的疾病。香港、越南等地也先后发现该疾病，并向世界多国传播。2003年该疾病由意大利医师沃比钠在越南发现后建议命名为SARS(se-vere acute respiratory syndrome),并向世界卫生组织发出“警报”，而沃比钠医师却因感染SARS不治而亡。经过全世界十个国家(包括我国)的科学家们集体研究，至2003年4月16日世界卫生组织已公布SARS的病原体为一种新型冠状病毒。该病毒作为病原符合KocK氏三定律，即自多数患者中分离出该病毒；该病毒可在体外传代培养；该病毒接种猴后，猴现现典型SARS症状，并可自感染动物中分离出同样的病毒。虽然自2003年2～3月以来，已陆续分离出新型冠状病毒，并作全基因组测序，但最终由荷兰实验室进行的猴体实验结果确定这一病毒为SARS的病原体。在确定冠状病毒为SARS的病原体后，科学家们也不排除个别患者合并其他微生物的共同感染。因共同感染的微生物一般均未能显示在感染者的相应抗体效价升高4倍以上，因此不能作为该病的主要病原体。

关键词：新型冠状病毒主要特性防治 SARS 病原体非典型肺炎

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疯牛病及其病原体——朊病毒

上海医学 2002年第3期25卷 135-137页

作者：闻玉梅复旦大学医学院教育部卫生部医学分子病毒学重点实验室200032

通常被称为疯牛病的学名为牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalopathy,BSE).属慢性进行性致死性神经系统疾病.目前对其病因尚有争论,但大多数学者倾向认为其病因为一种有传染性的蛋白颗粒.这一致病因子与已知的所有其他病原体(如... 详细信息

通常被称为疯牛病的学名为牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalopathy,BSE).属慢性进行性致死性神经系统疾病.目前对其病因尚有争论,但大多数学者倾向认为其病因为一种有传染性的蛋白颗粒.这一致病因子与已知的所有其他病原体(如细菌、病毒、真菌或寄生虫)不同,主要特点为迄今未能从病原因子中发现核酸.因此国外统一称为Prion,而国内译名甚多(包括非寻常病毒、慢病毒、传染性大脑淀粉样变因子等).鉴于研究者原以为本病原体为一种特殊的病毒,但又不是真正的病毒,故本文暂译作朊病毒.此外,仍有部分学者认为该病的病因为代谢异常导致淀粉样斑块沉积在神经系统而致死.

关键词：疯牛病朊病毒致病性预防特性

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎小鼠感染模型的建立与评估

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中国抗生素杂志 2011年第8期36卷 617-620页

作者：王星周文江沈艳刘芳杨华高谦王德成教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室复旦大学上海医学院上海200032 上海市公共卫生临床中心复旦大学附属公共卫生临床中心上海201508

目的本研究采用临床分离鉴定的ST239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)感染BALB/c小鼠,建立小鼠肺炎模型,对小鼠的临床症状、肺载菌量与组织病理学变化进行时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠的治疗效果。方法取35只小鼠随机分成MRS... 详细信息

目的本研究采用临床分离鉴定的ST239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)感染BALB/c小鼠,建立小鼠肺炎模型,对小鼠的临床症状、肺载菌量与组织病理学变化进行时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠的治疗效果。方法取35只小鼠随机分成MRSA感染组、药物组和对照组,通过滴鼻方式分别滴入50μL细菌(前两组)与PBS(对照组);感染一天后对药物组用同样的方式滴入万古霉素,CT检测肺部的变化,并对肺载菌量和组织病理学变化进行观察。结果与对照组比较,CT和细菌计数等结果表明MRSA感染组和药物组的肺组织有明显的炎症反应,载菌量较高;与感染组相比,药物组小鼠肺部的载菌量明显降低,气管和肺部的组织病理学症状明显减轻。结论本实验结果表明小鼠MRSA肺炎模型成功建立,并可用于药物疗效的比较评估。该模型的建立,将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机理、治疗方法等,提供可靠的小动物模型。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎小鼠模型

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轮状病毒疫苗有效性及其影响因素研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2019年第6期39卷 472-484页

作者：王金霞汪萱怡复旦大学生物医学研究院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

轮状病毒是引起儿童急性胃肠炎最常见的病原体,疫苗是控制轮状病毒腹泻的最有效措施。目前国际上应用比较广泛的两种疫苗是Rotarix和RotaTeq,另有几种疫苗仅在个别国家上市。本文就已上市轮状病毒疫苗的有效性及其影响因素进行了综述,... 详细信息

轮状病毒是引起儿童急性胃肠炎最常见的病原体,疫苗是控制轮状病毒腹泻的最有效措施。目前国际上应用比较广泛的两种疫苗是Rotarix和RotaTeq,另有几种疫苗仅在个别国家上市。本文就已上市轮状病毒疫苗的有效性及其影响因素进行了综述,并详细介绍了正在研发的新型疫苗。

关键词：轮状病毒疫苗效果

CpG ODN对活动性肺结核患者外周血Th1/Th2型免疫应答的调节作用

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复旦学报（医学版） 2005年第6期32卷 648-652页

作者：任涛金美玲蔡映云胡芸文袁正宏复旦大学附属中山医院呼吸病研究所复旦大学上海医学院医学分子病毒学教育部重点实验室上海200032

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍... 详细信息

目的观察CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)对活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法20例活动性肺结核患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、结核菌素纯化蛋白衍化物(PPD)组(10ng/mL)、CpG ODN组(2nmoL/mL)和CpG ODN+PPD组。用real ti me-PCR法检测PBMCIFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达。结果①活动性肺结核患者PBMC空白对照组IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达低于健康人(P0.05);②经PPD刺激,IFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达较空白对照组增高(P0.05),IL-10mRNA的表达高于健康人(P0.05),与健康人也无差别(P>0.05);④经CpGODN+PPD刺激,IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达较空白对照组增高(P0.05),IL-10mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人也无差别(P>0.05);⑤经CpG ODN+PPD刺激,肺结核患者IL-12mRNA的表达高于PPD组(P<0.05),IL-10mRNA的表达低于PPD组(P<0.01)。结论CpG ODN可促进活动性肺结核患者PBMC产生IFN-γ和IL-12,增强Th1型免疫反应。CpG ODN与PPD联合应用可进一步促进PPD对IL-12表达的诱导,并抑制PPD对IL-10表达的增强作用。

关键词：肺结核 CpG寡脱氧核苷酸 γ干扰素白细胞介素10 白细胞介素12

双组分信号转导系统saeRS对表皮葡萄球菌生存能力的影响

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四川大学学报（医学版） 2015年第1期46卷 27-30页

作者：娄强王耀辉瞿涤马远方河南大学医学院河南省医学与分子免疫学实验室抗体药物河南省工程实验室开封475004 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室上海200032

目的研究不同浓度的葡萄糖对表皮葡萄球菌野生株、saeRS基因删除突变株及回复株生存能力的影响及机制。方法在BM培养基中添加不同浓度(7.0mmol/L、14mmol/L、28mmol/L、56mmol/L)的葡萄糖,分析3种表皮葡萄球菌的生存能力、生物膜形成能... 详细信息

目的研究不同浓度的葡萄糖对表皮葡萄球菌野生株、saeRS基因删除突变株及回复株生存能力的影响及机制。方法在BM培养基中添加不同浓度(7.0mmol/L、14mmol/L、28mmol/L、56mmol/L)的葡萄糖,分析3种表皮葡萄球菌的生存能力、生物膜形成能力、培养基的酸度及抵抗抗生素生存的能力。结果与表皮葡萄球菌野生株相比,葡萄糖能明显促进saeRS删除突变株的生存能力和生物膜形成能力,但能够明显降低其对抗生素(比如青霉素、苯唑西林、庆大霉素、环丙沙星和丁胺卡那霉素)的抵抗能力;saeRS删除突变株和回复株在14mmol/L浓度时生存能力最强,在28mmol/L浓度时生物膜形成能力最强,而葡萄糖浓度对于野生株的生存能力及生物膜形成能力无显著影响。在添加14mmol/L葡萄糖时,saeRS删除突变株培养基(pH=8.07)的酸度比野生株(pH=7.0)明显降低。结论 SaeRS可能通过介导葡萄糖的利用影响了表皮葡萄球菌的生存能力;双组分信号转导系统saeRS影响抗生素如青霉素、苯唑西林、庆大霉素、环丙沙星和丁胺卡那霉素对表皮葡萄球菌的杀菌作用。

关键词：葡萄糖代谢双组分信号转导系统saeRS 生物膜形成表皮葡萄球菌