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TRAIL在免疫细胞凋亡中的作用及其意义

现代免疫学 2005年第5期25卷 434-437页

作者：邓富刚(综述) 王缨(审阅) 熊思东(审阅) 复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海200032

免疫细胞的凋亡异常与自身耐受的打破以及自身免疫性疾病的发生密切相关。TRAIL是TNF家族的成员,以往研究主要集中在肿瘤的发生、发展和治疗等方面。近年来,TRAIL在免疫系统中的作用开始受到关注。本文主要就TRAIL在免疫细胞凋亡中的作... 详细信息

免疫细胞的凋亡异常与自身耐受的打破以及自身免疫性疾病的发生密切相关。TRAIL是TNF家族的成员,以往研究主要集中在肿瘤的发生、发展和治疗等方面。近年来,TRAIL在免疫系统中的作用开始受到关注。本文主要就TRAIL在免疫细胞凋亡中的作用及其与自身免疫性疾病发生和发展的关系作一综述。

关键词： TRAIL 免疫细胞凋亡免疫耐受

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巨细胞病毒感染对动脉粥样硬化的影响

免疫学杂志 2003年第6期19卷 451-453页

作者：许从峰陈瑞珍徐薇沈燕葛均波陈灏珠郑秀娟熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032 复旦大学附属中山医院心血管病研究所上海200032

目的　研究巨细胞病毒 (CMV)感染和动脉粥样硬化的关系 ,并探讨其可能机制。方法　通过一个大样本从血清流行病学 (ELISA检测患者血清中抗CMV的IgG抗体 )和分子生物学 (PCR检测动脉粥样硬化病变中CMV特异性基因 )方面探讨巨细胞病毒感... 详细信息

目的　研究巨细胞病毒 (CMV)感染和动脉粥样硬化的关系 ,并探讨其可能机制。方法　通过一个大样本从血清流行病学 (ELISA检测患者血清中抗CMV的IgG抗体 )和分子生物学 (PCR检测动脉粥样硬化病变中CMV特异性基因 )方面探讨巨细胞病毒感染和动脉粥样硬化的关系 ,并检测CMV感染对内皮细胞趋化因子表达的影响。结果　动脉粥样硬化组血清中CMV的阳性率显著高于非动脉粥样硬化组 (分别为 82 .2 %和 6 1.0 % ,P =0 .0 2 ) ;而且动脉粥样硬化斑块中HCMV基因出现率显著高于正常血管组织 (13 15和 2 7,P =0 .0 1) ;CMV感染还可上调内皮细胞ECV 30 4表达MCP 1。结论　CMV感染参与动脉粥样硬化的形成和发生。

关键词：巨细胞病毒感染动脉粥样硬化趋化因子内皮细胞

原钙黏附蛋白18b基因抑制对斑马鱼神经系统发育的影响

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生物化学与生物物理进展 2010年第8期37卷 897-903页

作者：贡月波蒋缪胡晶莹王跃祥宋后燕复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系分子医学教育部重点实验室上海200032

原钙黏附蛋白18b(Protocadherin18b,Pcdh18b)属于钙黏附蛋白家族成员.为了研究pcdh18b基因抑制对斑马鱼神经系统发育的影响,针对pcdh18b的翻译起始位点设计一个吗啡啉修饰的反义寡核苷酸抑制其表达,在斑马鱼受精卵一到二细胞期注射并且... 详细信息

原钙黏附蛋白18b(Protocadherin18b,Pcdh18b)属于钙黏附蛋白家族成员.为了研究pcdh18b基因抑制对斑马鱼神经系统发育的影响,针对pcdh18b的翻译起始位点设计一个吗啡啉修饰的反义寡核苷酸抑制其表达,在斑马鱼受精卵一到二细胞期注射并且验证其有效性.注射后用原位杂交和吖啶橙染色检测神经系统的表型和标志基因的表达.pcdh18b下调使神经前体细胞的标志基因neurog1、神经元标志基因elavl3和神经胶质细胞标志基因gfap的表达均出现下调,中后脑边界的标志基因pax2a和wnt1表达减弱并出现神经管分叉现象,同时与后脑分节相关的基因krox20表达减少.吖啶橙染色显示pcdh18b下调后斑马鱼中脑、后脑及中后脑边界细胞凋亡增多.这些结果表明pcdh18b抑制导致了斑马鱼神经系统发育的异常。

关键词：原钙黏附蛋白18b 斑马鱼神经系统发育整体原位杂交

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生物化学与生物物理进展 2012年第10期39卷 987-994页

作者：陈婧文郭亮复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系分子医学教育部重点实验室上海200032

C3H10T1/2多潜能干细胞成脂过程分为定向和分化两个阶段,骨形成蛋白4(BMP4)可以诱导其定向成前脂肪细胞.已有的研究表明,脂肪组织特异性敲除低密度脂蛋白受体相关蛋白1(Lrp1)的小鼠体重减轻,脂肪组织含量减少,揭示此基因对成脂具有重要... 详细信息

C3H10T1/2多潜能干细胞成脂过程分为定向和分化两个阶段,骨形成蛋白4(BMP4)可以诱导其定向成前脂肪细胞.已有的研究表明,脂肪组织特异性敲除低密度脂蛋白受体相关蛋白1(Lrp1)的小鼠体重减轻,脂肪组织含量减少,揭示此基因对成脂具有重要作用.然而,目前尚不清楚Lrp1是否在成脂定向过程中发挥作用.采用小干扰RNA技术(RNAi),在体外水平研究低密度脂蛋白Lrp1对C3H10T1/2多潜能干细胞成脂定向的作用.分别在C3H10T1/2成脂的定向期和脂滴成熟期敲低Lrp1,通过显微镜下观察、油红O染色、Western blotting等实验证实,定向期而非脂滴成熟期敲低Lrp1显著抑制C3H10T1/2多潜能干细胞成脂.BMP4通过激活下游Smad1/5/8信号通路发挥作用,而敲低Lrp1显著抑制BMP4诱导的Smad1/5/8磷酸化.这些结果说明:敲低Lrp1通过下调Smad信号通路,抑制BMP4诱导的C3H10T1/2多潜能干细胞成脂定向.

关键词：低密度脂蛋白受体相关蛋白1(Lrp1) C3H10T1/2多潜能干细胞成脂定向

丝素蛋白修饰改性的聚羟基脂肪酸酯支架上人体平滑肌细胞的生长

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化学学报 2007年第24期65卷 2935-2940页

作者：张翼周平潘銮凤谢尚喆孙敏李文婷教育部聚合物分子工程重点实验室复旦大学高分子科学系上海200433 复旦大学上海医学院分子生物学实验室上海200032

聚三羟基丁酸脂和聚三羟基己酸脂的共聚物(PHBHHx)是一种具有良好强度和韧性的生物可降解高分子材料,可作为组织工程心脏瓣膜支架的选择材料之一.但其生物相容性尚不甚理想.为此,本工作利用丝素蛋白修饰改性高分子多孔支架,以提高支架... 详细信息

聚三羟基丁酸脂和聚三羟基己酸脂的共聚物(PHBHHx)是一种具有良好强度和韧性的生物可降解高分子材料,可作为组织工程心脏瓣膜支架的选择材料之一.但其生物相容性尚不甚理想.为此,本工作利用丝素蛋白修饰改性高分子多孔支架,以提高支架的生物相容性.并将人体平滑肌细胞接种在该复合支架上进行体外培养,以证实改性效果.其中,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)方法测试细胞生长,评估复合支架的细胞相容性.并用扫描电子显微镜观察细胞在支架上的生长形态.结果显示,丝素蛋白修饰改性后的复合支架更有利于细胞的粘附与生长,平滑肌细胞在支架上表现出良好的生长形态.这表明,丝素能够改善多孔支架的生物相容性,使PHBHHx/丝素蛋白复合物能更适宜作为组织工程心脏瓣膜的支架材料.结果对于进一步研究细胞外间质在复合支架上的生长以及体外培养的组织重建有重要的参考意义.

关键词：组织工程心脏瓣膜多孔支架丝素蛋白聚羟基脂肪酸脂人体平滑肌细胞

聚羟基脂肪酸酯的亲水性改性及其与人脐静脉内皮细胞相容性的研究

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高分子学报 2010年第12期20卷 1430-1436页

作者：孙敏杨华啸周平潘銮凤刘水教育部聚合物分子工程重点实验室复旦大学高分子科学系上海200433 复旦大学上海医学院分子生物学实验室上海200032

用丝素蛋白(SF)对微生物合成的高分子聚合物聚(3-羟基丁酸酯-co-3-羟基己酸酯)(PHBHHx)进行亲水改性,以提高材料的生物相容性.水接触角测定和表面自由能分析表明,丝素蛋白在支架表面吸附,使PHBHHx材料表面的水接触角从90°降至51°,表... 详细信息

用丝素蛋白(SF)对微生物合成的高分子聚合物聚(3-羟基丁酸酯-co-3-羟基己酸酯)(PHBHHx)进行亲水改性,以提高材料的生物相容性.水接触角测定和表面自由能分析表明,丝素蛋白在支架表面吸附,使PHBHHx材料表面的水接触角从90°降至51°,表面自由能从37.9 mJ/m2增至57.4 mJ/m2,因而增加了材料的亲水性.进一步对亲水性改性前后PHBHHx多孔支架与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的相容性进行了比较.MTT法细胞活力分析表明,细胞在支架上培养3,5,7天后,其在SF改性PHBHHx多孔支架上的活力显著高于在未改性的PHBHHx支架上的活力;扫描电镜观察细胞生长形貌表明,细胞在改性后多孔支架上黏附及生长5天后,形成了连续细胞单层,其生长状态优于在未改性的PHBHHx支架上的生长状态;胶原含量测定表明细胞在改性后支架上比在未改性支架上有更好的胶原分泌能力,即改性后支架更利于诱导HUVECs分泌细胞外基质(ECM)从而构建类似体内的生长环境.

关键词：丝素蛋白(SF) 聚(3-羟基丁酸脂-co-3-羟基已酸酯)(PHBHHx) 人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 生物相容性

天然生物材料壳聚糖支架上人胚肺成纤维细胞的生长

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化学学报 2004年第10期62卷 992-997页

作者：陈光周平潘銮凤梅娜吴春根陈新邵正中复旦大学高分子科学系教育部聚合物分子工程重点实验室上海200433 复旦大学上海医学院分子生物学实验室上海200032

采用不同粒度的硅胶粒子作为致孔剂 ,按硅胶和壳聚糖重量比 9∶1,制备了三组不同孔径的壳聚糖多孔支架 .以无孔壳聚糖支架为参照 ,对多孔支架的有效孔径、吸水性进行了比较 .结果表明 :孔径大小由硅胶尺寸控制 ,吸水性随孔径增大而增大 ... 详细信息

采用不同粒度的硅胶粒子作为致孔剂 ,按硅胶和壳聚糖重量比 9∶1,制备了三组不同孔径的壳聚糖多孔支架 .以无孔壳聚糖支架为参照 ,对多孔支架的有效孔径、吸水性进行了比较 .结果表明 :孔径大小由硅胶尺寸控制 ,吸水性随孔径增大而增大 .为研究支架孔径大小对其生物相容性的影响 ,在系列支架上进行了人胚肺成纤维细胞的培养 .细胞种植 1d后 ,多孔支架上的细胞粘附较多 ,而无孔支架上的细胞伸展情况较好 ;细胞培养 5d后 ,所有支架上细胞伸展情况良好 ,孔径越大的支架上细胞增殖越多 .

关键词：天然生物材料壳聚糖人胚肺成纤维细胞组织工程支架材料生物相容性

应用功能化氧化硅泡沫负载甲基化结合结构域建立一种富集甲基化DNA的方法

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中华医学遗传学杂志 2012年第3期29卷 284-288页

作者：陈雅婷韩路赵东元屠波马端复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院分子医学教育部化学系上海200032

目的用功能化氧化硅泡沫负载甲基化CpG结合域（methyl—CpGbindingdomain，MBD）建立一种用于大样本初筛时富集甲基化DNA的方法。方法将具有超大介孔尺寸的氧化硅泡沫（mesocellularsilicafoam，MCF）功能化并负载融合蛋白GST-MBD以结... 详细信息

目的用功能化氧化硅泡沫负载甲基化CpG结合域（methyl—CpGbindingdomain，MBD）建立一种用于大样本初筛时富集甲基化DNA的方法。方法将具有超大介孔尺寸的氧化硅泡沫（mesocellularsilicafoam，MCF）功能化并负载融合蛋白GST-MBD以结合甲基化DNA。结果MCF功能化后仍保持较大的笼状孔结构，孔径约为55Dm，窗口约30nm，空隙容积高达1．0m^3／g，MBD蛋白负载量达53wt％。具有较高的结合甲基化DNA的活性和稳定性。在缓冲液盐浓度为500～550mmol／L时，MCF-MBD能较为专一地区分并富集混合溶液中的甲基化DNA。结论该方法为高通量和自动化检测DNA甲基化提供了一个较好的选择和分子生物学依据，为临床应用和DNA甲基化相关疾病的研究奠定了基础。

关键词：甲基化结合结构域甲基化DNA 功能化氧化硅泡沫富集

p38丝裂原素激活的蛋白激酶在调节低氧诱导人内皮细胞分泌血管内皮生长因子过程中的作用(英文)

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生理学报 2005年第1期57卷 13-20页

作者：范蓓王艳霞姚泰朱依纯复旦大学上海医学院生理与病理生理教研室教育部分子医学重点实验室上海200032

血管内皮细胞中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的合成增加在促进血管新生的过程中起着非常重要的作用。然而低氧诱导VEGF分泌的细胞内信号转导机制还不是很清楚。人脐静脉内皮细胞系(ECV304)在低氧或常氧的状... 详细信息

血管内皮细胞中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的合成增加在促进血管新生的过程中起着非常重要的作用。然而低氧诱导VEGF分泌的细胞内信号转导机制还不是很清楚。人脐静脉内皮细胞系(ECV304)在低氧或常氧的状态下培养12-24h后分别用实时定量PCR和Westernblot的方法来检测VEGFmRNA的表达及ERK1/2和p38激酶的磷酸化水平。分泌到培养液中的VEGF蛋白用酶联免疫吸附(ELISA)的方法来检测。业已报道,ERK的抑制剂PD98059能够抑制低氧诱导的VEGF基因的表达,根据这个报道,我们发现在低氧情况下,ECV304细胞的ERK1/2磷酸化水平增高以及VEGF的合成增加等这些变化也能被PD98059所抑制。本次实验的新发现是p38激酶的激活在低氧诱导VEGF合成增加中的作用。p38激酶的抑制剂SB202190能抑制低氧诱导的VEGF合成增加。这些数据首次直接证实了p38激酶在低氧诱导人内皮细胞分泌VEGF增加过程中的作用。

关键词：低氧血管内皮生长因子血管内皮细胞 p38丝裂原素激活的蛋白激酶信号转导