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糖皮质激素与炎症因子对应急时相反应蛋白SIP24/24p3的协同调控作用及其意义(英文)

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生理学报 2003年第5期55卷 525-529页

作者：刘全胜 Marit Nilsen-Hamilton 熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032 Biochemistry Biophysics and Molecular Biology Iowa State University Ames IA 5001 I USA

小鼠应急时相反应蛋白SIP24/24p3有抗炎症和特异性诱导白细胞凋亡的功能,其在体内的表达是高度特异性的。为研究 SIP24/24p3的调控因子及机制,我们在小鼠 Balb/cT3和 BNL细胞培养中通过灵敏的^(35)S代谢标记方法检测SIP24/24p3蛋白的表... 详细信息

小鼠应急时相反应蛋白SIP24/24p3有抗炎症和特异性诱导白细胞凋亡的功能,其在体内的表达是高度特异性的。为研究 SIP24/24p3的调控因子及机制,我们在小鼠 Balb/cT3和 BNL细胞培养中通过灵敏的^(35)S代谢标记方法检测SIP24/24p3蛋白的表达水平,定量观测分析了糖皮质激素化合物dexamethasone对SIP24/24p3的诱导作用及其与炎症因子白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的协同调控作用。结果显示:(1)在Balb/c 3T3和BNL细胞中,dexamethasone对SIP24/24p3都有明显诱导作用,这种诱导作用在BNL细胞中尤其显著;(2)在Balb/c3T3和BNL细胞中dexamethasone与IL-6协同诱导SIP24/24p3;(3)在Balb/c 3T3细胞中dexamethasone与TNF-α对SIP24/24p3有协同诱导效应,而在 BNL细胞中 dexamethasone与 TNF-α对 SIP24/24p3的诱导表现为相加效应;(4)在 Balb/c 3T3和BNL细胞中 dexamethasone与IL-6/TNF-α对SIP24/24p3的诱导分别表现出协同和相加效应。多种因子对SIP24/24p3的协同诱导调控有助于阐明其在体内的高度特异表达及机制,SIP24/24p3在不同细胞中的不同表达格局也对体内应急时相反应蛋白在肝脏外和肝脏内的表达方式及诱导机制有提示作用。SIP24/24p3能同时被炎症因子和抗炎症因子诱导的事实显示了其在炎症全过程中的重?

关键词：应急时相反应蛋白SIP24/24p3 ^35S代谢标记糖皮质激素白介素6 肿瘤坏死因子α

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CCL20对HBV基因疫苗的免疫增强作用

现代免疫学 2006年第6期26卷 441-447页

作者：邵先安徐薇李宝华蒋正刚王缨储以微熊思东复旦大学免疫生物学研究所上海医学院免疫学系上海200032

CCL20为CC家族的趋化因子,对未成熟DC和T细胞具有较强的正向趋化作用。HBsAg是乙肝病毒中具有保护作用的结构抗原。以HBsAg为目的抗原进行基因免疫可诱导HBV特异性免疫应答。为进一步增强基因疫苗的免疫效果,研究中,应用基因重组技术,构... 详细信息

CCL20为CC家族的趋化因子,对未成熟DC和T细胞具有较强的正向趋化作用。HBsAg是乙肝病毒中具有保护作用的结构抗原。以HBsAg为目的抗原进行基因免疫可诱导HBV特异性免疫应答。为进一步增强基因疫苗的免疫效果,研究中,应用基因重组技术,构建CCL20和HBsAg的真核表达载体,将重组体用肌肉注射方式免疫C57BL/6小鼠,通过ELISA方法检测C57BL/6小鼠的抗-HBs抗体水平、淋巴细胞增殖试验检测抗原特异性Th活性、FACS检测CTL效应。结果显示,用CCL20/HBsAg真核表达质粒共注射免疫后,100%小鼠能在第4、6周检测到抗-HBs抗体,CCL20可显著增强HBsAg基因疫苗诱导的体液免疫应答;Th活性和CTL效应检测也显示,CCL20增强了HBsAg诱导的特异性细胞免疫反应。这将为新型乙肝疫苗的分子设计和研制提供新的理论与实践依据。

关键词： CCL20 HBsAg DNA疫苗免疫应答

SARS-CoV N蛋白的原核表达及其免疫原性研究

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现代免疫学 2005年第3期25卷 196-199页

作者：高海峰熊凌云汪晓华储以微王缨熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

为了研究SARS-CoV病毒N蛋白基因的原核表达及其免疫原性,为进一步的研究奠定基础,我们以PCR方法在全病毒基因组文库中获得全长N基因,分别克隆到pcDNA3和pET32a载体中获得重组质粒pcDNA3-N和pET32a-N。以亲和层析方法分离纯化pET32a-N转... 详细信息

为了研究SARS-CoV病毒N蛋白基因的原核表达及其免疫原性,为进一步的研究奠定基础,我们以PCR方法在全病毒基因组文库中获得全长N基因,分别克隆到pcDNA3和pET32a载体中获得重组质粒pcDNA3-N和pET32a-N。以亲和层析方法分离纯化pET32a-N转化的BL21细菌裂解液中的重组N融合蛋白,并以ELISA方法检测pcDNA3-N质粒基因免疫小鼠诱导后血清中的特异性抗体。结果pET32a-N转化BL21细菌后可检测到重组SARS-CoVN融合蛋白表达并分离纯化,pcDNA3-N基因免疫能够诱导产生N特异的体液免疫应答。研究的结果表明,SARS-CoVN蛋白可以在原核细胞中有效表达并有良好免疫原性,可以为进一步的功能研究和血清学诊断提供条件。

关键词： SARS-CoV N蛋白基因免疫

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免疫突触的形成及其介导的分子识别

生命的化学 2005年第1期25卷 24-26页

作者：张进平熊思东复旦大学上海医学院免疫学系教育部分子医学重点实验室上海基因免疫与疫苗研究中心上海200032

T细胞和APC细胞相互作用形成免疫突触涉及到连续发生的一系列的分子识别事件,最初APC细胞在趋化因子的作用下向T细胞移动,相遇后在抗原非依赖性的弱的黏附力作用下发生最初的黏附,同时伴随着TCR在APC表面俘获特异性抗原;抗原识别之后,... 详细信息

T细胞和APC细胞相互作用形成免疫突触涉及到连续发生的一系列的分子识别事件,最初APC细胞在趋化因子的作用下向T细胞移动,相遇后在抗原非依赖性的弱的黏附力作用下发生最初的黏附,同时伴随着TCR在APC表面俘获特异性抗原;抗原识别之后,由多种机制使T细胞和APC紧密接触并维持一段时间,随后分开,最终引起T细胞的增殖和分化。对免疫突触形成过程中的分子识别机制目前尚无定论,拓扑模式和数学模式的解释,脂筏和细胞骨架蛋白的重排以及接头蛋白的连接为免疫突触形成中分子的识别提供了一定的依据。

关键词：免疫突触分子识别 T细胞抗原递呈细胞

佐剂LTN增强新型CVB3黏膜疫苗病毒性心肌炎保护效果的机制探讨

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第6期30卷 541-545页

作者：岳艳徐薇熊思东复旦大学免疫生物学研究所复旦大学上海医学院免疫学系上海200032

目的对黏膜佐剂淋巴细胞趋化因子（LTN）的机制进行初步探讨.方法共凝聚法制备chitosan-pLTN和chitosan-pVP1复合物,混合后隔周滴鼻免疫小鼠,共4次,每次每种质粒50μg.末次免疫后2周以3LD50 CVB3腹腔感染小鼠诱导病毒性心肌炎,7 d后... 详细信息

目的对黏膜佐剂淋巴细胞趋化因子（LTN）的机制进行初步探讨.方法共凝聚法制备chitosan-pLTN和chitosan-pVP1复合物,混合后隔周滴鼻免疫小鼠,共4次,每次每种质粒50μg.末次免疫后2周以3LD50 CVB3腹腔感染小鼠诱导病毒性心肌炎,7 d后行心肌病理学观察.同时检测脾脏、肠系膜淋巴结（MLN）和颈部淋巴结（CLN）部位T细胞免疫应答、DC比例及CD86的表达.结果 LTN共免疫明显改善了CVB3性病毒性心肌炎炎症损伤;显著促进了脾脏、CLN和MLN部位特异性T细胞增殖和分泌IFN-γ的能力,显著上调了DC比例和DC表面共刺激分子CD86的表达.结论黏膜佐剂LTN通过促进局部DC的招募和成熟来增强全身和黏膜部位特异性T细胞免疫应答,进而增强CVB3病毒性心肌炎黏膜基因疫苗的免疫保护效果.

关键词：柯萨奇病毒心肌炎黏膜佐剂淋巴细胞趋化因子

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利用转基因胡萝卜表达肺结核疫苗

Acta Botanica Sinica 2001年第2期43卷 132-137页

作者：王凌健倪迪安陈永宁李忠明中国科学院上海植物生理研究所上海200032 复旦大学上海医学院基因免疫和疫苗研究中心

利用转基因植物生产研制疫苗 ,不但可以改变传统的疫苗生产方式和接种手段 ,而且会大大降低疫苗的生产成本。以胡萝卜 (DaucuscarotaL .***)无菌幼苗的子叶和下胚轴为外植体 ,通过携带有 35S启动子驱动的结核杆菌 (Mycobacteriumtubercu... 详细信息

利用转基因植物生产研制疫苗 ,不但可以改变传统的疫苗生产方式和接种手段 ,而且会大大降低疫苗的生产成本。以胡萝卜 (DaucuscarotaL .***)无菌幼苗的子叶和下胚轴为外植体 ,通过携带有 35S启动子驱动的结核杆菌 (Mycobacteriumtuberculosis (Zopf)LehmannetNeumann)分泌蛋白MPT6 4基因的根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)LBA44 0 4的介导进行转化 ,在筛选培养基上诱导形成抗性愈伤组织 ,经胚状体发生途径分化得到抗性苗 ,植株移栽后生长情况正常。经PCR和Southern等方法鉴定 ,确认结核杆菌分泌蛋白MPT6 4基因已整合到胡萝卜的染色体中。Western检测结果表明 ,在转基因胡萝卜的蛋白质中含有MPT6 4分泌蛋白 ,为进一步研究利用转基因植物研制口服疫苗和防治肺结核的新型疫苗提供了新材料。

关键词：转基因胡萝卜口服疫苗结核杆菌MPT64分泌蛋白肺结核疫苗

含HBV PreS2/S的抗体化乙肝基因疫苗可增强乙肝病毒特异性CTL应答

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中国免疫学杂志 2007年第11期23卷 963-967页

作者：蒋正刚王缨邵先安岳艳洪晓武徐林熊思东复旦大学免疫生物研究所上海医学院免疫学系上海200032

目的:构建乙肝病毒抗原PreS2/S和抗体Fc段的融合分子,观察该抗体化的乙肝疫苗诱导特异性细胞免疫应答的能力及状况。方法:用PCR的方法扩增乙肝病毒抗原PreS2/S和鼠IgG1Fc段基因,依次克隆到载体上;体外转染小鼠肌细胞,观察表面抗原转录... 详细信息

目的:构建乙肝病毒抗原PreS2/S和抗体Fc段的融合分子,观察该抗体化的乙肝疫苗诱导特异性细胞免疫应答的能力及状况。方法:用PCR的方法扩增乙肝病毒抗原PreS2/S和鼠IgG1Fc段基因,依次克隆到载体上;体外转染小鼠肌细胞,观察表面抗原转录水平和蛋白水平的表达情况;基因免疫小鼠,观察其诱导的特异性CTL免疫应答状况。结果:基因克隆融合分子经酶切和测序鉴定构建成功;体外转染实验表明融合分子可以在肌肉细胞中表达;免疫小鼠脾脏细胞用特异性抗原刺激后能产生很强的细胞免疫应答,其中特异性CTL反应明显增强。结论:基于抗体Fc段的抗体化乙肝疫苗能增强机体对HBV的特异性CTL反应,有利于打破HBV感染导致的免疫耐受。

关键词：抗体化乙肝疫苗细胞免疫应答 HBV慢性感染 CTL

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斑马鱼:一种新的免疫学研究模式生物

生命的化学 2003年第3期23卷 206-208页

作者：汪晓华熊思东复旦大学上海医学院免疫学系上海基因免疫和疫苗研究中心上海200032

斑马鱼作为遗传、发育生物学模式生物已经得到了较广泛的应用。近年来随着对该生物免疫系统的深入研究 ,人们发现其存在着较为完整的特异性免疫系统并且具备血液系统发育过程透明、对特异性免疫系统依赖性低等特点。

关键词：斑马鱼模式生物免疫学研究发育生物学

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小鼠免疫细胞中agrin的表达及其作用

小鼠免疫细胞中agrin的表达及其作用