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单链抗体阿霉素结合物对人肺腺癌细胞体外生长的抑制作用

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中华肿瘤杂志 2004年第12期26卷 718-721页

作者：岳文涛赖百塘汪蕙湛秀萍王玥北京市结核病胸部肿瘤研究所细胞室 101149

目的观察抗肺腺癌单链抗体(ScFv)2A71阿霉素(ADM)结合物对人肺腺癌细胞体外生长的抑制作用。方法从抗肺癌可溶性ScFv抗体分泌克隆2A71上清提取可溶性抗体,浓缩、亲和层析纯化,以分光光度计测定浓度。戊二醛法连接2A71、ADM制备结合物,... 详细信息

目的观察抗肺腺癌单链抗体(ScFv)2A71阿霉素(ADM)结合物对人肺腺癌细胞体外生长的抑制作用。方法从抗肺癌可溶性ScFv抗体分泌克隆2A71上清提取可溶性抗体,浓缩、亲和层析纯化,以分光光度计测定浓度。戊二醛法连接2A71、ADM制备结合物,分光光度计测定结合物中所含2A71和ADM的浓度,计算结合比例。集落形成试验观察该结合物对肺癌细胞体外生长的抑制作用。结果制备的2A71ADM结合物中,ADM和2A71的克分子比为31。连接后的2A71ADM免疫结合物仍可特异结合肺腺癌A2细胞,其对肺癌细胞的抑制作用是单纯使用ADM的4倍。结论2A71ADM免疫结合物对肺癌细胞的生长抑制作用明显强于单独使用ADM,具有潜在的临床应用价值。

关键词：单链抗体阿霉素结合物肺腺癌癌细胞体外生长抑制作用

以噻吩二羧酸肼实验结果作为鉴定牛分枝杆菌依据的可靠性研究

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中华结核和呼吸杂志 2013年第5期36卷 360-362页

作者：姜广路梁倩付育红董玲玲赵雁林黄海荣首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所国家结核病临床实验室 101149 中国疾病预防控制中心结核病控制中心国家结核病参比实验室

目的评估以噻吩二羧酸肼（TCH）实验结果作为鉴定牛分枝杆菌主要依据的可靠性。方法使用对硝基苯甲酸和TCH培养基对4069株分枝杆菌临床分离株进行鉴定，并将对MTB复合群中对5mg／L的TCH敏感菌株再次接种至含2mg／L的TCH罗氏培养基中进... 详细信息

目的评估以噻吩二羧酸肼（TCH）实验结果作为鉴定牛分枝杆菌主要依据的可靠性。方法使用对硝基苯甲酸和TCH培养基对4069株分枝杆菌临床分离株进行鉴定，并将对MTB复合群中对5mg／L的TCH敏感菌株再次接种至含2mg／L的TCH罗氏培养基中进行敏感度测试，同时采用间隔区寡核苷酸分型技术和多伉点PCR技术对TCH敏感菌株进行鉴定。结果4069株分枝杆菌临床分离株中有3929株属于MTB复合群菌株，3929株中对5mg／L的TCH实验敏感菌株为245株，245株中对2mg／LTCH仍敏感的菌株为20株，间隔区寡核苷酸分型技术和多位点PCR技术鉴定出245株分离株中仪有1株为牛分枝杆菌。结论TCH实验浓度不论是5mg／L还是2mg／L，均难以成为鉴定牛分枝杆菌的可靠依据。

关键词：分枝杆菌牛生物学鉴定法噻吩二羧酸肼

结核分枝杆菌对人急性白血病单核细胞株THP-1凋亡和死亡水平的影响

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中国医学科学院学报 2009年第4期31卷 417-422,I0001,I0002页

作者：刘毅孙照刚任卫聪田苗李妍李传友北京市结核病胸部肿瘤研究所细菌免疫室北京101149

目的通过对不同毒力的结核分枝杆菌感染细胞后的细胞凋亡和死亡程度的检测,以期发现结核分枝杆菌和细胞相互作用的新的方向和观点,以及对结核病免疫学发病机制的新认识。方法选用不同毒力的结核分枝杆菌H37Ra、H37Rv及北京基因型敏感菌... 详细信息

目的通过对不同毒力的结核分枝杆菌感染细胞后的细胞凋亡和死亡程度的检测,以期发现结核分枝杆菌和细胞相互作用的新的方向和观点,以及对结核病免疫学发病机制的新认识。方法选用不同毒力的结核分枝杆菌H37Ra、H37Rv及北京基因型敏感菌株(BJTB)分别感染人的巨噬细胞THP-1细胞株,模拟细胞体外感染的过程。以流式细胞仪检测细胞凋亡水平,免疫荧光检测细胞的凋亡蛋白的分布,末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记染色检测细胞晚期凋亡的变化,台盼兰染色检测细胞死亡水平的变化。结果H37Ra引起THP-1细胞的凋亡水平最高,H37Rv次之,BJTB引起的凋亡水平最低。BJTB引起的死亡水平最高,H37Rv次之,H37Ra最低。结论毒力不同的结核分枝杆菌刺激细胞后和细胞的相互作用不同,毒力越高引起的凋亡水平越低,毒力越低引起的凋亡水平越高;对死亡水平的影响是毒力越高的结核分枝杆菌引起的死亡水平越高,毒力越低引起的死亡水平越低。

关键词：结核分枝杆菌细胞凋亡/死亡北京基因型毒力

IS6110限制性片段长度多态性和间隔区寡核苷酸分型技术在结核分枝杆菌菌株鉴定中的应用

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中华检验医学杂志 2005年第8期28卷 796-798页

作者：郭艳玲王甦民李传友刘洋北京市结核病胸部肿瘤研究所检验科北京市结核病胸部肿瘤研究所参比室北京市结核病胸部肿瘤研究所细菌免疫室

目的评价IS6110限制性片段长度多态性(IS6110RFLP)和间隔区寡核苷酸分型技术(spoligotyping)两种方法在结核病流行病学上的应用,探讨我国各地区的结核分枝杆菌菌株特点。方法收集158株结核分枝杆菌临床分离株,分别应用IS6110RFLP和Spoli... 详细信息

目的评价IS6110限制性片段长度多态性(IS6110RFLP)和间隔区寡核苷酸分型技术(spoligotyping)两种方法在结核病流行病学上的应用,探讨我国各地区的结核分枝杆菌菌株特点。方法收集158株结核分枝杆菌临床分离株,分别应用IS6110RFLP和Spoligotyping两种方法进行鉴定。结果(1)IS6110RFLP的分辨力大于spoligotyping分型。(2)将本次试验结果与国际spoligotype数据库进行比较。结果有14个类型属于共有类型,其中类型1为流行的类型,分布广泛,即所说的北京基因型。(3)广东地区与其他地区成簇率和北京基因型所占比例差异有统计学意义(P北京基因型所占比例均显著低于其他地区。结论同时应用IS6110RFLP分型和Spoligotyping两种方法进行结核病流行病学调查研究非常有效,在中国不同地区的菌株具有不同的特点。

关键词：多态性,限制性片段长度核苷酸分支杆菌,结核限制性片段长度多态性结核分枝杆菌分型技术菌株鉴定寡核苷酸 IS6110 Spoligotyping

单链构象多态性与核酸杂交联合检测耐氧氟沙星的结核分枝杆菌

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中华结核和呼吸杂志 2005年第12期28卷 841-844页

作者：张健源王甦民李传友田苗张旭霞赵冰李卫民赵雁林邱云青马玙北京市结核病胸部肿瘤研究所细菌免疫室 101149

目的探讨聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)并Southern杂交检测耐氧氟沙星(OFLX)结核分枝杆菌的可行性,并探索结核分枝杆菌对OFLX敏感与耐药的界限。方法(1)体外筛选人工诱变的耐OFLX的耐药突变株,并检测OFLX对这些耐药株的最... 详细信息

目的探讨聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)并Southern杂交检测耐氧氟沙星(OFLX)结核分枝杆菌的可行性,并探索结核分枝杆菌对OFLX敏感与耐药的界限。方法(1)体外筛选人工诱变的耐OFLX的耐药突变株,并检测OFLX对这些耐药株的最低抑菌浓度(M IC)和最低杀菌浓度(MBC)。(2)扩增结核分枝杆菌的gyrA基因,包括H37Rv 1株、H37Ra 1株、临床分离的OFLX敏感株10株及人工诱变的耐OFLX H37Rv(17株)、H37Ra(17株)及临床分离菌株(51株)共计85株,并对此扩增产物进行SSCP分析及Southern杂交,对比观察耐OFLX结核分枝杆菌的核酸单链条带位移的变化。为了验证PCR-SSCP并Southern杂交结果的可重复性,对36株临床分离的耐OFLX菌株的耐药界限进行初步检测。结果经PCR-SSCP及Southern杂交,85株人工诱变的耐OFLX菌株,全部检测到gyrA基因突变。在OFLX 10μg/m l这一点上,明显地存在着一个结核分枝杆菌对OFLX敏感与耐药并存的交叉区。对36株临床分离的OFLX耐药菌的PCR-SSCP合并Southern杂交检测结果显示,对比标准株H37Ra,在临床分离的耐OFLX菌株间观察到了类似的因单链构象变化而引起的单链位移的结果。结论PCR-SSCP合并Southern杂交可以清晰地区分对OFLX敏感与耐药的菌株,以10μg/m l为界作为判别结核分枝杆菌对OFLX是否已经产生耐药的标准是适宜的。

关键词：分枝杆菌,结核氧氟沙星突变抗药性,微生物多态现象,单链构象核酸杂交

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浅议非结核分枝杆菌肺病的诊断

中华结核和呼吸杂志 2012年第8期35卷 564-566页

作者：马玛黄海荣首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所国家结核病临床实验室 101149

随着非结核分枝杆菌（ nontuberculous mycobacteria，NTM）细菌学和分子生物学鉴定技术的发展、人们对NTM认识的提高、获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）的流行及人口老龄化等诸多因素的影响，使得NTM病的发病率呈增长趋势，痰抗酸杆菌... 详细信息

随着非结核分枝杆菌（ nontuberculous mycobacteria，NTM）细菌学和分子生物学鉴定技术的发展、人们对NTM认识的提高、获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）的流行及人口老龄化等诸多因素的影响，使得NTM病的发病率呈增长趋势，痰抗酸杆菌阳性者中诊断为NTM肺病的病例也逐渐增多。在有些国家和地区，NTM感染率和患病率甚至超过结核病。

关键词：非结核分枝杆菌肺病诊断获得性免疫缺陷综合征 NTM病分子生物学人口老龄化痰抗酸杆菌鉴定技术

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231例脊柱结核患者耐药情况分析

中国防痨杂志 2022年第9期44卷 940-946页

作者：王潮虹孙晴廖鑫磊晏君王晨倩姜广路王芬薛毅黄海荣王桂荣首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所/国家结核病临床实验室/北京市耐药结核病研究重点实验室北京101149

目的:分析231例脊柱结核患者的耐药特点,为临床医生制定脊柱结核治疗方案提供参考。方法:回顾性分析2016年1月至2021年12月首都医科大学附属北京胸科医院收治的231例脊柱结核住院患者信息,采用分枝杆菌微孔板药物敏感性检测技术测定来自... 详细信息

目的:分析231例脊柱结核患者的耐药特点,为临床医生制定脊柱结核治疗方案提供参考。方法:回顾性分析2016年1月至2021年12月首都医科大学附属北京胸科医院收治的231例脊柱结核住院患者信息,采用分枝杆菌微孔板药物敏感性检测技术测定来自231例脊柱结核患者的结核分枝杆菌对链霉素(Sm)、异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、利福喷丁(Rft)、左氧氟沙星(Lfx)、阿米卡星(Am)、卷曲霉素(Cm)、丙硫异烟胺(Pto)、对氨基水杨酸异烟肼(Pa)、莫西沙星(Mfx)、对氨基水杨酸(PAS)、克拉霉素(Clr)、利福布汀(Rfb)、卡那霉素(Km)和氯法齐明(Cfz)的敏感性。结果:脊柱结核患者对16种药物的总耐药率为34.63%(80/231),复治患者的总耐药率(75.44%,43/57)显著高于初治患者(21.26%,37/174),差异有统计学意义(χ^(2)=55.660,P结核患者任一耐药率顺位为:Sm(24.68%,57/231)>INH(22.51%,52/231)>Rft(19.05%,44/231)>RFP(18.18%,42/231)>Pa(15.58%,36/231)>Rfb(13.85%,32/231)>Lfx(7.79%,18/231)>PAS(7.36%,17/231)>Cm(5.63%,13/231)>Km(4.76%,11/231)=Cfz(4.76%,11/231)>Pto(4.33%,10/231)=Clr(4.33%,10/231)>EMB(3.90%,9/231)>Am(3.46%,8/231)>Mfx(2.60%,6/231)。脊柱结核患者多耐药率为11.69%(27/231),复治患者的多耐药率(19.30%,11/57)显著高于初治患者(9.20%,16/174),差异有统计学意义(χ^(2)=4.246,P=0.039);耐多药率为15.58%(36/231),复治患者的耐多药率(52.63%,30/57)显著高于初治患者(3.45%,6/174),差异有统计学意义(χ^(2)=46.980,P结核存在严重的耐药问题,临床医生应根据患者药物敏感性试验结果制定有效的治疗方案。

关键词：结核,脊柱微生物敏感性试验结核,抗多种药物性数据说明,统计

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胞内分枝杆菌临床分离株耐药谱及基因型特征研究

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中华结核和呼吸杂志 2018年第7期41卷 539-543页

作者：王淑琦姜广路魏国梅霍凤敏董玲玲赵立平黄海荣王桂荣首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所国家结核病临床实验室北京市耐药结核病研究重点实验室 101149

目的分析我国胞内分枝杆菌临床分离株的耐药谱及基因型特征，为治疗胞内分枝杆菌感染性疾病提供科学依据。方法纳入2013—2015年北京胸科医院150株胞内分枝杆菌临床分离株，采用微孔板Alamar Blue法测定胞内分枝杆菌对15种药物的最低抑... 详细信息

目的分析我国胞内分枝杆菌临床分离株的耐药谱及基因型特征，为治疗胞内分枝杆菌感染性疾病提供科学依据。方法纳入2013—2015年北京胸科医院150株胞内分枝杆菌临床分离株，采用微孔板Alamar Blue法测定胞内分枝杆菌对15种药物的最低抑菌浓度（MIC），以确定其药物的敏感度；对16个可变数目串联重复序列（VNTR）位点进行PCR扩增和产物电泳分析，使用BioNumerics软件对菌株进行聚类分析，以确定其基因型特征。使用SPSS 19.0软件对结果进行统计分析，应用χ2检验分析不同组间耐药率的差别。结果药敏试验结果显示，克拉霉素（97.3%，146/150）、莫西沙星（94.0%，141/150）和阿米卡星（90.0%，135/150）对胞内分枝杆菌具有较好的抗菌活性；75.3%（113/150）、64.0%（96/150）、52.7%（79/150）和8.7%（13/150）的菌株对利福平、利奈唑胺、卷曲霉素和乙胺丁醇敏感；3种注射类抗结核药物的MIC50与MIC90值为：阿米卡星4和16 mg/L，链霉素4和16 mg/L，卷曲霉素8和16 mg/L；5种氟喹诺酮类药物的MIC50与MIC90值为：莫西沙星0.5和2 mg/L，环丙沙星1和8 mg/L，左氧氟沙星1和8 mg/L，安妥沙星2和16 mg/L，氧氟沙星2和16 mg/L。采用16位点VNTR方法对胞内分枝杆菌进行基因分型，150株胞内分枝杆菌共分为21个簇，121种基因型，总Hunter－Gaston指数为0.997。结论克拉霉素、莫西沙星和阿米卡星在体外对胞内分枝杆菌具有较好的抗菌活性；16位点VNTR方法对胞内分枝杆菌临床分离株的分辨率较高；胞内分枝杆菌的耐药谱与菌株是否成簇并无明显相关性。

关键词：胞内分枝杆菌最低抑菌浓度抗药性基因型

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结核分枝杆菌对吡嗪酰胺耐药相关研究进展

中华结核和呼吸杂志 2016年第10期39卷 814-817页

作者：谷蕴婷黄海荣首都医科大学附属北京胸科医院、北京市结核病胸部肿瘤研究所、国家结核病临床实验室 101149

吡嗪酰胺（pyrazinamide,PZA）为一种烟酰胺类似物,是结核病化疗的重要药物之一,能够杀死处于半休眠期的MTB,从而将结核病的治疗周期从9～12个月缩减至6个月.虽然PZA在结核病治疗中发挥了关键作用,但其作用靶点和抗MTB作用的分子机制尚... 详细信息

吡嗪酰胺（pyrazinamide,PZA）为一种烟酰胺类似物,是结核病化疗的重要药物之一,能够杀死处于半休眠期的MTB,从而将结核病的治疗周期从9～12个月缩减至6个月.虽然PZA在结核病治疗中发挥了关键作用,但其作用靶点和抗MTB作用的分子机制尚不十分清楚.近几年,随着耐药MTB的出现与传播,MTB的分子耐药机制得到广泛关注.MTB对PZA耐药机制的研究,不仅有助于了解耐药的发生原因,也有助于建立快速检测PZA耐药性的分子诊断方法.

关键词：分子耐药机制吡嗪酰胺结核分枝杆菌治疗周期分子机制 MTB 结核病 PZA