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南极深海沉积物宏基因组DNA中低温脂肪酶基因的克隆、表达及性质分析

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生物化学与生物物理进展 2006年第12期33卷 1207-1214页

作者：张金伟曾润颖国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室厦门361005

从南极普利兹湾深海900米深的沉积物中提取获得宏基因组DNA,并通过设计引物,从中克隆到全长为948bp的低温脂肪酶(lip3)开放阅读框完整序列,该基因编码一个由315个氨基酸残基组成、预计分子质量为34.557ku酶蛋白(Lip3);氨基酸序列上的GFG... 详细信息

从南极普利兹湾深海900米深的沉积物中提取获得宏基因组DNA,并通过设计引物,从中克隆到全长为948bp的低温脂肪酶(lip3)开放阅读框完整序列,该基因编码一个由315个氨基酸残基组成、预计分子质量为34.557ku酶蛋白(Lip3);氨基酸序列上的GFGNS(GXGXS)和G-N-S-M-G(GXSXG)在许多脂肪酶中有很高的保守性,它们是水解机制所必需的序列,也是丝氨酸水解酶中最保守的序列.构建了lip3基因重组表达载体,并在大肠杆菌中获得表达,采用镍离子亲和层析柱对表达的酶蛋白Lip3进行纯化,得到约35ku蛋白条带,酶学性质的分析表明,该酶的最适作用温度为25℃,在0℃时表现为最高活力的22%,最适pH值为8.0,对热敏感,35℃热处理60min剩余酶活为10%,以硝基苯棕榈酸酯为底物,Lip3的酶促反应常数Km值随着反应温度的升高而升高,是典型的低温酶.

关键词：南极深海沉积物宏基因组低温脂肪酶克隆与表达

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基于光纤布拉格光栅的压力式海洋波浪高度传感器

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光子学报 2025年

作者：刘兆坤杜大伟赵强陈东营惠力张文孙鹏郭风祥齐鲁工业大学(山东省科学院) 海洋仪器仪表研究所崂山实验室中国人民解放军国防科技大学气象海洋学院

波浪的实测数据对海浪模型校准、海上生产实践以及海洋灾害预防具有重要作用。本文提出了一种基于光纤布拉格光栅的压力式海洋波浪高度传感器，实现了对海洋波浪高度的实时测量。采用有限元分析对传感器结构进行优化设计，并对传感器的... 详细信息

波浪的实测数据对海浪模型校准、海上生产实践以及海洋灾害预防具有重要作用。本文提出了一种基于光纤布拉格光栅的压力式海洋波浪高度传感器，实现了对海洋波浪高度的实时测量。采用有限元分析对传感器结构进行优化设计，并对传感器的测量原理进行理论分析。通过标定实验可知该波浪高度传感器的压力灵敏度为-9.486 nm/MPa，有效测量量程为0-0.3 MPa。针对传统零线提取方法存在的零点遗漏问题，提出了基于平滑先验方法的波浪零线选取方法，实现零点动态选择，该方法在复杂海洋条件下表现出更好的适用性。外场实验结果表明，该波浪高度传感器各波高特征值的变化趋势与SBF3-2型波浪浮标的测量结果一致，两者相关系数均高于0.85，验证了光纤布拉格光栅海洋波浪高度传感器的可行性。本文提出的压力式光纤布拉格光栅海洋波浪高度传感器具有水下无源、抗电磁干扰、信号传输速度快的特点，为近岸波高测量提供了一种新颖的光学测量方法，具有良好的应用前景。

关键词：光纤布拉格光栅波高传感器压力测量海岸监测海洋波浪

卵形鲳鲹促性腺激素β亚基的克隆鉴定及其受雌二醇的调控

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中山大学学报（自然科学版）（中英文） 2025年第1期64卷 172-181页

作者：黄春艳陈华谱郭煜文王岩杨浩李广丽广东省名特优鱼类生殖调控与繁育工程技术研究中心/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室/广东省海水养殖生物育种工程实验室/广东海洋大学水产学院广东湛江524088

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆... 详细信息

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)fshβ和lhβ基因的开放阅读框(ORF,open reading frame)序列,fshβORF长度为363 bp,lhβORF长度为447 bp。通过荧光定量PCR技术(qPCR,quantitative realtime PCR)检测,发现fshβ和lhβ基因在卵形鲳鲹的下丘脑-垂体-性腺轴(HPG,hypothalamus-pituitary-gonadal axis)显著表达,在垂体中的表达水平最高,其次是下丘脑和性腺。此外,通过体外实验评估17β-雌二醇(E2,17β-estradiol)对卵形鲳鲹垂体组织中fshβ和lhβ基因表达的影响。结果显示,10μmol/L E2处理6 h后,GtHβ亚基基因的表达被极显著抑制。最后,使用雌激素受体(ER,estrogen receptor)拮抗剂体外孵育卵形鲳鲹垂体组织,发现广谱性拮抗剂Fulvestrant、ERβ拮抗剂Cyclofenil和ERα拮抗剂MPP(MPP dihydrochloride)均能够消除E2对GtHβ亚基基因表达的抑制作用。综上所述,研究结果表明E2对卵形鲳鲹GtH的分泌具有负反馈调节作用,为卵形鲳鲹生殖调控机制提供了有价值的见解。

关键词：卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus) 促性腺激素(GtH) 雌激素受体(ER) 17β-雌二醇(E2)

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秋季东海海水和大气中BTEX的分布、生态风险及环境效应

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中国环境科学 2025年

作者：李进国乔浩徐锋王健吴谨巍周立敏张洪海深海圈层与地球系统前沿科学中心/海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室中国海洋大学中国海洋大学化学化工学院

以苯、甲苯、乙苯和二甲苯（BTEX）为代表的单环芳烃类挥发性有机物是大气中重要的污染物，不仅对生态系统构成威胁，还对大气臭氧(O3)、二次有机气溶胶（SOA）及光化学烟雾的生成有重要作用.本文研究了2020年10月中国东海海域海水和大... 详细信息

以苯、甲苯、乙苯和二甲苯（BTEX）为代表的单环芳烃类挥发性有机物是大气中重要的污染物，不仅对生态系统构成威胁，还对大气臭氧(O3)、二次有机气溶胶（SOA）及光化学烟雾的生成有重要作用.本文研究了2020年10月中国东海海域海水和大气中BTEX的浓度分布特征，评估了其海-气交换通量，并分析了其生态风险及环境效应.结果表明，研究海域表层和底层海水中苯、甲苯、乙苯、间/对二甲苯和邻二甲苯的平均浓度分别为136.8±76.8、321.3±279.0、530.3±530.0、336.2±453.6和493.7±814.7pmol/L，以及122.3±84.2、217.1±162.4、423.8±399.0、236.8±215.1和344.3±288.5pmol/L整体呈现出近岸和调查海域东部高的分布特征，其中近岸高表明受陆源输入影响显著，调查海域东部高值可能与石油开采活动有关.大气中苯、甲苯、乙苯、间/对二甲苯和邻二甲苯的平均浓度分别为110.5±45.3、410.1±384.4、139.5±108.8、128.3±123.9和108.9±97.6pptv，后向轨迹显示其受陆源输入的显著影响.东海海域苯、甲苯、乙苯、间/对二甲苯和邻二甲苯的海-气通量平均值分别为25.6±13.1、73.1±78.2、179.9±194.5、146.3±185.4和216.3±358.7g/（km·d），表明调查海域是大气中BTEX的重要来源.生态风险方面，海水中，BTEX浓度远低于海洋生物的急性毒性半数效应浓度（EC50）和半数致死浓度（LC50），表明BTEX对部分海洋生物的直接危害较低;大气中，通过计算致癌风险值（R）、非致癌风险危害商（HQ）和非致癌风险指数（HI）均远低于参考值，表现出BTEX对人体健康的直接威胁较低.通过O3和SOA生成潜势的分析发现，甲苯和二甲苯是大气中BTEX的关键活性成分，对环境效应的影响最为显著.

关键词：单环苯系物分布海-气通量生态风险环境效应东海秋季

西北印度洋公海鸢乌贼的繁殖生物学及其与环境要素的关系

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上海海洋大学学报 2025年

作者：唐峰华巴尧骥肖戈石永闯赵国庆郭爱张衡崔雪森陈峰中国水产科学研究院东海水产研究所农业农村部渔业遥感重点试验室大连海洋大学航海与船舶工程学院浙江省海洋水产研究所

为了分析印度洋鸢乌贼群体结构和组成的年际变化及其主要环境影响因素，本研究在2019年12月—2020年2月以及2020年9—11月连续2个航次在西北印度洋公海海域60°E～65°E，15°N～20°N开展了生产性渔业调查。在调查中，采集了印度洋鸢... 详细信息

为了分析印度洋鸢乌贼群体结构和组成的年际变化及其主要环境影响因素，本研究在2019年12月—2020年2月以及2020年9—11月连续2个航次在西北印度洋公海海域60°E～65°E，15°N～20°N开展了生产性渔业调查。在调查中，采集了印度洋鸢乌贼样本数量1430尾，共鉴定性别748尾，鉴定雌雄总性比为1:0.97。利用SPSS统计软件等方法，分析了鸢乌贼的胴长、体质量、性别、性成熟度和摄食强度等生物学特征。得出雌、雄个体的平均胴长分别为248mm和207mm，优势胴长组为220～250mm。鸢乌贼的胴长和体质量关系呈幂函数变化；通过Logistic曲线拟合个体初次性成熟胴长，其中雌性为216.04mm，雄性为216.71mm。鸢乌贼性腺成熟度达到Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ期（性成熟）的个体占比高达66.53%，雌性成熟群体占57.37%，雄性成熟群体达到75.20%。同时分析了鸢乌贼成熟群体与海洋环境因子的关系，推测其生长发育受海表温度（Sea surface temperature， SST）、海表面温度距平值（Sea surface temperature anomaly， SSTA）、叶绿素a质量浓度(Chlorophyll-a， Chl.a)等关键海洋环境因子的影响。此外，调查显示，2019年12月—2020年2月航次鸢乌贼性成熟群体比重较2020年9—11月航次高25.93%。以上结论为后期可持续开发利用西北印度洋海域鸢乌贼资源提供参考依据。

关键词：鸢乌贼性腺成熟度性比年际变化西北印度洋公海

南极嗜冷假单胞菌7197的分离和无机焦磷酸酯酶（PPase）基因ppa的克隆

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高技术通讯 2007年第10期17卷 1067-1071页

作者：张金伟曾润颖国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室厦门361005

从南极普利兹湾深海沉积物中筛选到一株耐冷菌株7197。16S rDNA序列分析表明,该菌株属于假单胞菌属（Pseudomonas）。从该菌的全基因组DNA中克隆到编码无机焦磷酸酯酶（PPase）的ppa基因完整的开放阅读框（ORF）,其全长为531bp。该基因... 详细信息

从南极普利兹湾深海沉积物中筛选到一株耐冷菌株7197。16S rDNA序列分析表明,该菌株属于假单胞菌属（Pseudomonas）。从该菌的全基因组DNA中克隆到编码无机焦磷酸酯酶（PPase）的ppa基因完整的开放阅读框（ORF）,其全长为531bp。该基因编码一个由176AA残基组成的分子量预计为19631 Da的PPase蛋白质,其氨基酸序列与Psy-chrobacter sp.273-4的PPase有97%的相似性,与Neisseria meningitidisZ2491的PPase有79%的相似性,与Mannheimia succiniciproducens MBEL55E的PPase有75%的相似性。

关键词：南极耐冷菌假单胞菌属无机焦磷酸酯酶

黄河调水调沙期间河口及其邻近海域浮游植物影响因素研究

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中国环境科学 2025年

作者：孙绍庆张晶晶申瑞婷张孝民李凡吕振波鲁东大学滨海生态高等研究院中国中交水运规划设计院山东省海洋资源与环境研究院山东省海洋生态修复重点实验室

为了研究黄河调水调沙期间河口及其邻近海域浮游植物现存量的上、下行效应的相对重要性，本研究利用R2V软件提取2011-2020年黄河口及其邻近海域中叶绿素a(Chl a)浓度、环境因子和浮游动物丰度的历史文献数据，分析了Chl a浓度的空间分... 详细信息

为了研究黄河调水调沙期间河口及其邻近海域浮游植物现存量的上、下行效应的相对重要性，本研究利用R2V软件提取2011-2020年黄河口及其邻近海域中叶绿素a(Chl a)浓度、环境因子和浮游动物丰度的历史文献数据，分析了Chl a浓度的空间分布和年际变化特征，并构建不同调水调沙阶段Chl a与环境和生物因子的回归树模型.结果显示：2011-2020年，调水调沙前黄河口及其邻近海域Chl a浓度整体呈现自河口至离岸逐渐降低的趋势，随着调水调沙进行，Chl a高值区逐渐向河口西北部近岸转移，Chl a浓度年际变化显著的区域基本与各阶段Chl a高值区重合.回归树模型显示随着调水调沙进行Chl a主要控制作用发生了转变.调水调沙前，浮游动物摄食的下行效应是驱动Chl a浓度空间变化的主控因素.调水调沙期间，Chl a浓度主要受上行效应控制，前期，温度是主要驱动因子；后期DIP是主要驱动因子.调水调沙期间径流量引起的盐度锋面的变化可能是Chl a主要控制作用变化的重要诱因.研究结果有助于阐释浮游植物响应调水调沙的内在规律，为赤潮预防和浮游植物调控研究开拓新思路.

关键词：黄河口调水调沙上、下行效应浮游植物环境因素

利用多重PCR同时检测WSSV和MBV两种对虾病毒的研究

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高技术通讯 2005年第5期15卷 101-104页

作者：徐丽美杨丰国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室，厦门361005

研究了检测斑节对虾(Penaeus monodon)的主要致病病原--对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)及斑节对虾杆状病毒(monodon baculovirus,MBV)的技术.用多重PCR检测方法,设计了两对特异性引物,从不同虾池中收集斑节对虾,提... 详细信息

研究了检测斑节对虾(Penaeus monodon)的主要致病病原--对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)及斑节对虾杆状病毒(monodon baculovirus,MBV)的技术.用多重PCR检测方法,设计了两对特异性引物,从不同虾池中收集斑节对虾,提取DNA模板,同时检测两种对虾病毒.研究结果表明:该方法检测灵敏度高、特异性好,可检测至每毫克组织100个病毒粒子;从对虾组织中提取的DNA模板对病毒DNA的扩增无抑制,适合于对虾中两种病毒的同时检测.

关键词：同时检测对虾病毒多重PCR WSSV 对虾白斑综合征病毒 syndrome 斑节对虾杆状病毒 PCR检测方法 DNA模板 virus 特异性引物检测灵敏度病毒DNA 致病病原 spot 研究结果病毒粒子提取组织虾池

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北极表层海水中氯代十六烷降解菌的多样性

微生物学报 2012年第8期52卷 1011-1020页

作者：王建宁董纯明赖其良林龙山邵宗泽国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室厦门361005 国家海洋局第三海洋研究所海洋生物与生态实验室厦门361005

【目的】为了研究北极地区表层海水中氯代十六烷(C16H33Cl)降解菌的多样性,并获得新的卤代烃降解菌资源。【方法】以C16H33Cl为唯一碳源和能源在4℃和25℃下对表层海水样品进行富集,通过平板分离鉴定可培养菌株,并验证其降解能力;同时... 详细信息

【目的】为了研究北极地区表层海水中氯代十六烷(C16H33Cl)降解菌的多样性,并获得新的卤代烃降解菌资源。【方法】以C16H33Cl为唯一碳源和能源在4℃和25℃下对表层海水样品进行富集,通过平板分离鉴定可培养菌株,并验证其降解能力;同时利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析降解菌群结构。【结果】从12个北极表层海水样品中富集分离得到112株可培养菌株。经过降解实验验证,发现19株菌株能够降解氯代十六烷,其中食烷菌(Alcanivorax)、红球菌(Rhodococcus)表现出很好的乳化和降解现象,海杆菌(Marinobacter)也有较好的降解效果。DGGE分析显示,富集驯化的降解菌群中主要优势菌为Alcanivorax,Parvibaculum和Thioclava属的菌株。【结论】北极海水中卤代烃降解菌主要是α-proteobacteria,γ-proteobacteria,Actinobacteria和Bacteroidetes。文章首次报道了北极海水卤代烷烃降解菌多样性,研究结果对于认识北极环境中的降解菌资源与生物多样性有参考价值。

关键词：北极表层海水氯代十六烷生物降解多样性

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