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抗菌肽LL-37胞内诱导表达机制的研究进展

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微生物学报 2024年第10期 3647-3655页

作者：张孟捷李晓飞李云露焦新安黄金林扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室

先天免疫是免疫防御的第一道防线，抗菌肽LL-37作为人体先天免疫的一部分，在维持人体稳态中发挥重要作用，具备直接杀菌和免疫调节两大功能。目前，对LL-37的研究主要侧重于其功能本身，而对其在体内的诱导表达知之甚少。然而，这对深... 详细信息

先天免疫是免疫防御的第一道防线，抗菌肽LL-37作为人体先天免疫的一部分，在维持人体稳态中发挥重要作用，具备直接杀菌和免疫调节两大功能。目前，对LL-37的研究主要侧重于其功能本身，而对其在体内的诱导表达知之甚少。然而，这对深入探究人体免疫防御机制至关重要。因此，本文简要综述了LL-37的合成过程与功能、诱导分泌的因素以及诱导表达的调控通路等方面的研究进展，旨在为进一步揭示LL-37在人体内的调控通路及免疫防御功能提供新思路。

关键词：抗菌肽LL-37 体内诱导调控通路

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表面展示传染性法氏囊病病毒VP2蛋白细菌样颗粒的构建与鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2024年第2期 65-71,78页

作者：洪新雅段姝宇兰奇官王瑞楠朱凡王春凤王建忠吉林农业大学动物医学院吉林省微生态制剂工程研究中心/动物生产及产品质量安全教育部重点实验室长春130118

为构建表面展示传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)VP2蛋白的细菌样颗粒(bacterium-like particies, BLPs),试验分别克隆VP2基因和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor, PA)基因片段,通过融合PCR技术构建VP2-PA融合基因,利用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建重组杆状病毒rBV-VP2-PA,将表达产物与裸露BLPs共孵育,在PA的介导下,构建表面展示IBDV VP2蛋白的细菌样颗粒(BLPs-VP2);依次采用透射电镜观察、SDS-PAGE、Western-blot、间接免疫荧光对BLPs-VP2进行鉴定。结果表明:VP2蛋白获得成功表达并展示于BLPs表面,可与IBDV阳性血清发生特异性结合,1 U(2.5×10~9颗粒)BLPs最大可负载约107μg VP2-PA融合蛋白。说明构建的IBDV VP2蛋白BLPs可用于传染性法氏囊病(IBD)新型亚单位疫苗的研发。

关键词：传染性法氏囊病 VP2蛋白细菌样颗粒细菌表面展示系统亚单位疫苗

亮氨酸与缬氨酸交互作用对刺参生长、体壁氨基酸组成及消化能力的影响

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渔业科学进展 2024年第6期 188-198页

作者：陆国峰王际英李宝山刘经未郝甜甜孙永智黄炳山上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心农业农村部鱼类营养与环境生态研究中心水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心山东省海洋资源与环境研究院山东省海洋生态修复重点实验室烟台市海珍品质量控制与精深加工重点实验室

本实验旨在研究亮氨酸和缬氨酸的交互作用对刺参(Apostichopusjaponicus)生长、体壁氨基酸组成及消化能力的影响。采用双因素实验(two-way ANOVA)设计，在基础饲料中分别添加0、1.06%、2.34%、3.40%的包膜亮氨酸和0、1.74%、2.50%、3.48... 详细信息

本实验旨在研究亮氨酸和缬氨酸的交互作用对刺参(Apostichopusjaponicus)生长、体壁氨基酸组成及消化能力的影响。采用双因素实验(two-way ANOVA)设计，在基础饲料中分别添加0、1.06%、2.34%、3.40%的包膜亮氨酸和0、1.74%、2.50%、3.48%的包膜缬氨酸，配制成4个亮氨酸水平(实际含量为1.00%、1.50%、2.10%和2.60%)×4个缬氨酸水平(实际含量为0.65%、1.40%、1.70%和2.20%)的16组等氮等脂的实验饲料，饲喂初始体重(16.80±0.18) g的刺参60 d。结果表明，亮氨酸和缬氨酸的含量及其交互作用显著影响了刺参的增重率和特定生长率。当饲料中缬氨酸含量为1.40%时，刺参体壁粗脂肪含量随着亮氨酸含量的升高而升高，二者之间存在协同作用，且L1.0V1.4组(亮氨酸1.00%，缬氨酸1.40%)显著低于其他组。亮氨酸和缬氨酸的交互作用显著影响了刺参体壁异亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸的含量。当饲料中亮氨酸含量为2.10%时，随着缬氨酸含量的升高，肠道脂肪酶和淀粉酶的活性均先升高后降低，二者之间表现出先协同后拮抗的作用。淀粉酶活性在L2.6V1.4(亮氨酸2.60%，缬氨酸1.40%)组活性达到最大值，且显著高于其他各组。综上所述，亮氨酸和缬氨酸的含量及其交互作用显著影响了刺参的生长性能、体壁氨基酸组成及消化酶活力，以增重率为评价指标，刺参饲料中亮氨酸和缬氨酸的比值为1.90(亮氨酸含量2.60%，缬氨酸含量1.40%)。

关键词：刺参亮氨酸缬氨酸生长体壁氨基酸

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毒死蜱水生生物毒性效应研究进展

生态毒理学报 2024年

作者：张玉龙屈佩徐可东初永忠孙畅宫于琛霍明宇王宗灵张学雷庞敏自然资源部第一海洋研究所海洋生态研究中心青岛海洋科技中心海洋生态与环境科学功能实验室青岛市生态环境监控中心长岛国家海洋公园管理中心中国海洋大学海洋环境与生态教育部重点实验室

毒死蜱(chlorpyrifos， CPF)是一种广谱高效的有机磷杀虫剂，在全球范围内被用来治理农业和家庭卫生虫害，CPF的广泛应用对水环境的影响及其对水生生物和人类的潜在生态威胁不容忽视。与重金属、微塑料和持久性有机污染物相比，对水生... 详细信息

毒死蜱(chlorpyrifos， CPF)是一种广谱高效的有机磷杀虫剂，在全球范围内被用来治理农业和家庭卫生虫害，CPF的广泛应用对水环境的影响及其对水生生物和人类的潜在生态威胁不容忽视。与重金属、微塑料和持久性有机污染物相比，对水生生态系统CPF的研究和评价很少，目前的研究主要集中在CPF的急性和慢性毒性。急性毒性方面，CPF能抑制微藻生长，对无脊椎动物尤其是甲壳类动物具有致命作用。此外，CPF还会抑制鱼类和两栖动物的孵化率，诱发胚胎畸形，并导致成虫心率、代谢等生命活动异常。在慢性毒性方面，CPF在水生食物链中的转移特征尚不清楚。然而，水中痕量CPF可被水生生物积累并有可能通过食物链向高营养级传递，对高营养级生物以及人类健康产生潜在威胁。本文综述了CPF对淡水和海洋生态系统中水生生物的毒性作用及其可能的作用机制，并进一步讨论了CPF在水生生态系统中研究的瓶颈和未来前景。本综述旨在为今后在全球变化的环境下深入研究有机磷农药的毒性提供参考，并为优化水生环境中CPF污染物的防治策略提供理论支撑。

关键词：毒死蜱水生生物毒性效应有机磷杀虫剂

不同油脂来源及添加水平对肉鸡颗粒饲料质量、生长性能和肉品质的影响

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动物营养学报 2024年第3期36卷 1612-1627页

作者：李香月杨洁李军国李俊姚婷董颖超牛力斌商方方中国农业科学院饲料研究所北京100081 农业农村部动物产品质量安全饲料源性因子风险评估实验室北京100081 北京市兽药饲料监测中心北京110122

本试验旨在研究不同油脂来源及添加水平对肉鸡颗粒饲料质量、生长性能、肉品质及血清生化指标的影响。试验选取1日龄白羽肉鸡960只,随机分为6组,每组8个重复,每个重复20只鸡。采用双因素试验设计,饲粮中油脂来源分别为大豆油、膨化大豆... 详细信息

本试验旨在研究不同油脂来源及添加水平对肉鸡颗粒饲料质量、生长性能、肉品质及血清生化指标的影响。试验选取1日龄白羽肉鸡960只,随机分为6组,每组8个重复,每个重复20只鸡。采用双因素试验设计,饲粮中油脂来源分别为大豆油、膨化大豆和脂肪粉,油脂添加水平分别为3%和5%。试验期42 d,分为前期(1~21日龄)和后期(22~42日龄)2个阶段。结果表明:1)在颗粒饲料质量方面,脂肪粉组成型率、颗粒耐久性和硬度显著高于其他2组(P质量、肉品质以及甲状腺的功能活性。

关键词：脂肪粉膨化大豆颗粒饲料质量肉鸡生长性能肉品质血清生化指标

脆化养殖对罗非鱼生长、血清生化指标及肠道健康的影响

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上海海洋大学学报 2024年

作者：罗文斌赵岩郑佳赵金良上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心

为评价脆化养殖对罗非鱼生长、血清生化指标及肠道健康的影响，分别用蚕豆、脆化饲料（约含50%蚕豆）和普通饲料饲喂尼罗罗非鱼（Orechromis niloticus）[体质量为（665±34）g]，检测40d和80d罗非鱼生长，血清生化，肠道组织形态、紧... 详细信息

为评价脆化养殖对罗非鱼生长、血清生化指标及肠道健康的影响，分别用蚕豆、脆化饲料（约含50%蚕豆）和普通饲料饲喂尼罗罗非鱼（Orechromis niloticus）[体质量为（665±34）g]，检测40d和80d罗非鱼生长，血清生化，肠道组织形态、紧密连接蛋白、消化酶、抗氧化酶、炎性基因以及肠道菌群指标。结果表明：与普通饲料组相比，蚕豆组和脆化饲料组体质量、体长和增重率显著降低。蚕豆组血清溶菌酶（LYZ）显著增加，血清碱性磷酸酶（AKP）无显著差异，80d血清谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）升高，脆化饲料组血清ALT、AST和AKP无显著差异，LYZ显著升高。蚕豆组和脆化饲料组肠绒毛长度均缩短。蚕豆组紧密连接蛋白基因occludin、ZO-3和claudin-3 基因表达显著下降，claudin-12表达显著上升，脆化饲料组上述基因表达无显著差异。蚕豆组α-淀粉酶和脂肪酶活性减小，脆化饲料组仅40d脂肪酶活性减小。蚕豆组丙二醛（MDA）含量显著增加，80d总抗氧化能力（T-AOC）显著增加，脆化饲料组MDA含量无显著差异，T-AOC显著下降。蚕豆组和脆化饲料组促炎基因IFN-γ、TNF-α和抗炎基因IgM表达水平显著增加，蚕豆组抗炎基因TGF-β1和IL-10表达水平显著下降，脆化饲料组TGF-β1和IL-10显著增加。脆化饲料组肠道微生物ACE、Chao1、Simpson和Shannon指数和对照组接近且高于蚕豆组，脆化饲料组毛螺菌属、乳酪杆菌丰度下降，分支杆菌、多种梭菌丰度增加，蚕豆组厚壁菌门、梭杆菌门和鲸蜡杆菌属丰度下降，变形菌门、分支杆菌等丰度增加。与40d相比，80d时脆化饲料组中大部分指标无显著变化。（结论）用蚕豆或脆化饲料（约含50%蚕豆）养殖罗非鱼都会抑制其生长和肠道抗氧化能力，使肠绒毛变短，引起肠道炎症反应，使肠道有益菌丰度下降、潜在致病菌丰度增加，但脆化饲料对罗非鱼的不利影响弱于蚕豆，主要表现为脆化饲料对肠道消化酶活性、细胞膜通透性和抗炎系统无显著影响，蚕豆对上述指标均有显著负面影响。

关键词：罗非鱼蚕豆脆化免疫肠道菌群

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新型冠状病毒E蛋白B细胞表位的预测及鉴定

中国人兽共患病学报 2024年第9期 807-813页

作者：张鹏飞刘钧邹紫阳康喜龙宋丽焦新安孟闯潘志明扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室

目的利用生物信息学方法预测SARS-CoV-2 E蛋白B细胞表位，并利用小鼠多抗血清、人新型冠状病毒阳性血清等进行验证，以明确SARS-CoV-2 E蛋白的优势B细胞表位。方法使用SOPMA、Expasy、SWISS-MODEL及IEDB数据库和BepiPred-2.0等软件预... 详细信息

目的利用生物信息学方法预测SARS-CoV-2 E蛋白B细胞表位，并利用小鼠多抗血清、人新型冠状病毒阳性血清等进行验证，以明确SARS-CoV-2 E蛋白的优势B细胞表位。方法使用SOPMA、Expasy、SWISS-MODEL及IEDB数据库和BepiPred-2.0等软件预测SARS-CoV-2 E蛋白的结构及B细胞表位；通过大肠杆菌系统表达并纯化GST标签重组表位蛋白片段，以Western blotting和间接ELISA方法检测表位蛋白与小鼠和人SARS-CoV-2 E蛋白阳性多抗血清的反应性，以初步鉴定SARS-CoV-2 E蛋白的B细胞表位。结果表位预测结果显示，E蛋白含有线性B细胞表位Ser6-Val14和Tyr57-Pro71,构象表位涉及的氨基酸序列为Glu8-Val14、Leu39-Tyr59、Ser60-Leu65;表达并纯化含有预测表位的E蛋白片段E1(Ser6-Val14表位)、E3(Tyr57-Pro71)以及阴性对照片段E2(不含表位序列),Western blotting和间接ELISA结果均显示抗E蛋白小鼠多抗和人新型冠状病毒阳性血清只与E1、E3蛋白片段呈阳性反应而与E2蛋白片段均为阴性反应，显示E蛋白线性B细胞表位预测正确。结论本研究成功预测并初步鉴定出SARS-CoV-2 E蛋白2个线性B细胞表位，为新型冠状病毒疫苗制备和免疫应答特性分析等提供参考。

关键词：新型冠状病毒 B细胞表位线性表位预测鉴定

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基于明尼苏达沙门氏菌Re595脂多糖低毒改造的外膜囊泡佐剂活性研究

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微生物学报 2024年第9期64卷 3269-3281页

作者：张嘉雯尹文竹王海燕张金秋邓碧华卢宇周明旭马芳江苏省农业科学院动物免疫工程研究所江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心江苏泰州225300

【目的】外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是由革兰氏阴性菌和某些革兰氏阳性菌生成和分泌的球形双层膜结构,含有丰富的细菌表面抗原,因此在疫苗相关领域具有重要的研究价值。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为OMVs的主要结构... 详细信息

【目的】外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是由革兰氏阴性菌和某些革兰氏阳性菌生成和分泌的球形双层膜结构,含有丰富的细菌表面抗原,因此在疫苗相关领域具有重要的研究价值。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为OMVs的主要结构,在诱导免疫活性的同时,也成为影响OMVs安全性的主要因素。因此,通过基因工程改造细菌LPS以生产安全高效的OMVs,是促进其生产应用的有效途径之一。【方法】以O抗原和大部分核心抗原缺失的明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minnesota)Re595为研究对象,通过缺失酰基链编码基因msbB和导入新凶手弗朗西丝氏菌(Francisella novicida)磷酸酶基因lpxE,减少类脂A上的酰基链和磷酸基团,从而获得低毒LPS;提取亲本株与改造株LPS与OMVs,比较其刺激免疫细胞的炎性反应,以OMVs作为免疫增强剂制备口蹄疫灭活疫苗,评价免疫活性。【结果】Re595经LPS低毒改造成功降低该菌OMVs的内毒素活性和炎性反应,进一步评价亲本株Re595与低毒改造株的OMVs免疫活性发现,LPS低毒改造虽降低了OMVs的炎性反应,但其免疫增强活性显著提高。【结论】本研究说明LPS低毒改造后可降低细菌OMVs毒性,并提高其免疫增强活性,该结果将为OMVs作为免疫佐剂的应用提供理论依据。

关键词：外膜囊泡免疫佐剂脂多糖内毒素活性基因编辑

预制小酥肉生产加工过程中沙门菌污染状况及溯源分析

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中国食品卫生杂志 2024年第3期36卷 246-252页

作者：程慧敏赵格白莉张铭洋赵建梅张青青张喜悦徐莹黄秀梅王琳刘俊辉王君玮中国动物卫生与流行病学中心致病微生物监测室农业农村部畜禽产品质量安全风险评估实验室(青岛)山东青岛266032 中国海洋大学食品科学与工程学院山东青岛266000 农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方) 山东青岛266032 国家食品安全风险评估中心北京100021

目的对某大型食品加工厂预制小酥肉生产加工环节沙门菌的污染状况进行分析,从而提出针对性的防控措施,进而提高产品质量,保障食品安全。方法采集预制小酥肉生产加工过程肉样品103份,加工前环境样品165份,对样品中沙门菌进行定性和定量分... 详细信息

目的对某大型食品加工厂预制小酥肉生产加工环节沙门菌的污染状况进行分析,从而提出针对性的防控措施,进而提高产品质量,保障食品安全。方法采集预制小酥肉生产加工过程肉样品103份,加工前环境样品165份,对样品中沙门菌进行定性和定量分析,并对分离的沙门菌进行血清分型与多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)。结果肉样中沙门菌的分离率为47.6%(49/103),环境样品中沙门菌的分离率为1.2%(2/165)。51株沙门菌共分为9种血清型和9个ST型,其中,肠炎沙门菌ST11是预制小酥肉生产加工环节的优势型,并在环境中也有检出。22株肠炎沙门菌分为7个PFGE带型,相似度在92.9%以上。结论肉样中沙门菌总体污染率较高,控制原料肉中沙门菌的污染是提高产品质量的关键,产品经油炸后沙门菌污染量得到有效控制。同时要严格划分禽类与畜类产品加工仓储区域,防止食品与食品中微生物的交叉污染。

关键词：预制小酥肉加工过程沙门菌污染溯源分析分子分型