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大豆脂肪氧化酶同功酶抗原的快速纯化方法

大豆科学 2008年第2期27卷 306-309页

作者：马志民刘渊蒋春志杨春燕马峙英张孟臣国家大豆改良中心石家庄分中心

目前常用的蛋白纯化方法均存在操作复杂、纯化周期长、成本高等缺点,本试验试图探索出一种经济快捷的蛋白纯化方案,且纯化后的蛋白可以用于制备单克隆抗体;以普通大豆品种冀豆12以及脂肪氧化酶缺失近等基因系Suzuyutaka中的Su-1,3,Su-2,... 详细信息

目前常用的蛋白纯化方法均存在操作复杂、纯化周期长、成本高等缺点,本试验试图探索出一种经济快捷的蛋白纯化方案,且纯化后的蛋白可以用于制备单克隆抗体;以普通大豆品种冀豆12以及脂肪氧化酶缺失近等基因系Suzuyutaka中的Su-1,3,Su-2,3为材料,将大豆脂氧酶非变性PAGE分析与电洗脱技术相结合,纯化脂肪氧化酶同功酶抗原蛋白;回收到具有活性的电泳纯级脂肪氧化酶溶液,回收率达到了与离子交换柱层析相当的水平(49.64%);本试验探索的方法实现了应用经济快捷的纯化方案获得免疫所需抗原,为尽早获得脂肪氧化酶单克隆抗体并将其应用于实践打下了基础,并为其它蛋白质的快速分离纯化提供了参考。

关键词：脂肪氧化酶非变性PAGE 电洗脱纯化

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大豆转录因子NAC1耐低磷胁迫的功能研究

中国农业科学 2024年第3期57卷 442-453页

作者：熊楚雯郭智滨周强华程艳波马启彬蔡占东年海华南农业大学农学院/国家大豆改良中心广东分中心

【目的】磷含量偏低是影响酸性土壤作物产量的重要因素。大豆（Glycine max）是重要的粮食和油料作物，也为喜磷作物，缺磷则影响其产量与品质。NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)转录因子家族参与多种植物对生物胁迫和非生物胁迫响应的调控，是否... 详细信息

【目的】磷含量偏低是影响酸性土壤作物产量的重要因素。大豆（Glycine max）是重要的粮食和油料作物，也为喜磷作物，缺磷则影响其产量与品质。NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)转录因子家族参与多种植物对生物胁迫和非生物胁迫响应的调控，是否参与大豆低磷胁迫响应尚未深入研究。以耐低磷野生大豆BW69为材料，克隆获得耐低磷基因GsNAC1并对其表达特性及功能进行分析，为深入解析GsNAC1调控大豆低磷胁迫及其机制奠定基础。【方法】从野生大豆BW69克隆GsNAC1的全长序列，并通过生物信息学分析探究其编码氨基酸序列的特征。随后，利用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）对其组织表达模式进行分析，并通过激光共聚焦显微镜观察其编码蛋白的亚细胞定位。此外，通过大豆遗传转化试验，获得转基因株系并进行表型分析。最后，通过转录组联合分析来鉴定转基因植株中与低磷胁迫相关的差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）。【结果】成功克隆获得GsNAC1，编码区全长876 bp，通过构建系统发育树发现GsNAC1与AtATAF1的序列相似性为62.46%，与Williams 82参考基因组的GmNAC1序列没有差异；进一步的亚细胞定位结果显示，GsNAC1定位于细胞核；基于qRT-PCR技术，发现GsNAC1在大豆的根、茎、叶、顶端、花和豆荚均有表达，在根部的相对表达量最高，且受到低pH和低磷诱导表达显著上调。通过水培法和土培法进行表型试验，在低磷处理下，与野生型（WT）相比，转基因株系鲜重根冠比、总根长、根表面积、根体积和磷含量均显著高于WT。结合转录组测序数据进行分析，发现GsNAC1可能通过促进GmALMT6、GmALMT27、GmPAP27和GmWRKY21等基因表达增强其对低磷胁迫的耐受性。【结论】GsNAC1受低pH和低磷诱导表达上调，过量表达GsNAC1可以显著增强大豆对低磷胁迫的耐受性，在低磷胁迫反应中起促进作用。GsNAC1可能通过调控下游基因表达增强大豆对酸性低磷胁迫的耐受性。

关键词：野生大豆耐低磷 GsNAC1 根系构型 RNA-seq

涝害对不同大豆品种根际微生物群落结构特征的影响

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作物学报 2021年第9期47卷 1690-1702页

作者：禹桃兵石琪晗年海连腾祥华南农业大学农学院/国家大豆改良中心广东分中心广东广州510642

淹水影响不同大豆品种根际微生物群落组成,不同基因型大豆植株耐涝性差异较大。本研究选取耐涝(waterlogging-tolerant,W-T)基因型大豆齐黄34和涝害敏感(waterlogging-sensitive,W-S)基因型大豆冀豆17为材料,采用荧光定量PCR、Illumina ... 详细信息

淹水影响不同大豆品种根际微生物群落组成,不同基因型大豆植株耐涝性差异较大。本研究选取耐涝(waterlogging-tolerant,W-T)基因型大豆齐黄34和涝害敏感(waterlogging-sensitive,W-S)基因型大豆冀豆17为材料,采用荧光定量PCR、Illumina MiSeq高通量测序技术,分析了不同淹水时间下2个基因型根际细菌多样性、群落组成和网络特征。结果表明,耐涝基因型大豆的生物量和细菌丰度明显高于涝害敏感基因型大豆。主坐标分析(PCoA)表明,耐涝基因型与敏感基因型大豆微生物群落组成的差异随淹水时间的增加而变化(P大豆富集了Yonghaparkia属和Unclassified-WD2101属以及OTU274(Clostridium)和OTU2334(Desulfosporosinus)等物种,这些细菌的富集可能与耐涝性有关,本研究提供了大豆根际微生物抗涝潜力的证据。

关键词：大豆耐涝根际微生物 16S rRNA 网络分析

外源褪黑素对铜胁迫下大豆幼苗生长及生理特性的影响

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华南农业大学学报 2023年第5期44卷 780-786页

作者：黄荣段明明文珂蒋慧乾梁晓恩米鸢年海华南农业大学农学院/国家大豆改良中心广东分中心广东广州510642

【目的】研究在铜(Cu)胁迫下,褪黑素对大豆Glycine max(Linn.)Merr.生理特性的影响,为缓解重金属胁迫提供一定的参考。【方法】采用盆栽试验,选用Cu敏感品种‘桂早1号’和耐Cu品种‘巴西13’,在0.5 mmol·L^(−1) Cu胁迫下,施用100μmol... 详细信息

【目的】研究在铜(Cu)胁迫下,褪黑素对大豆Glycine max(Linn.)Merr.生理特性的影响,为缓解重金属胁迫提供一定的参考。【方法】采用盆栽试验,选用Cu敏感品种‘桂早1号’和耐Cu品种‘巴西13’,在0.5 mmol·L^(−1) Cu胁迫下,施用100μmol·L^(−1)褪黑素,探究褪黑素对大豆生理指标(根长、株高、鲜质量、叶绿素相对含量和Cu含量),超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性,丙二醛(MDA)、可溶性糖和可溶性蛋白含量的影响。【结果】Cu胁迫下喷施100μmol·L^(−1)褪黑素显著提高了2个大豆品种的根长、株高、鲜质量和叶绿素相对含量。Cu胁迫下施用褪黑素显著降低2个品种地上部、地下部Cu含量,‘桂早1号’降低25.01%、18.40%,‘巴西13’降低26.84%、20.28%。Cu胁迫下施用褪黑素,‘桂早1号’的地上部POD活性和‘巴西13’的地下部CAT活性显著提高,分别为56.84%和48.35%;‘桂早1号’和‘巴西13’地上部SOD活性分别显著提高19.07%和7.30%;地上部MDA含量分别显著减少8.05%和26.56%。单施褪黑素和Cu胁迫下施用褪黑素对2个品种可溶性蛋白含量无显著影响;而Cu胁迫下施用褪黑素,‘桂早1号’和‘巴西13’地上部可溶性糖含量分别显著提高149.70%和58.75%。【结论】适宜浓度的褪黑素可以通过提高植株抗氧化酶活性,抑制膜脂氧化,减少对Cu的吸收和增加渗透调节物质等方式缓解Cu胁迫对大豆生长发育的影响。

关键词：大豆铜胁迫褪黑素生理特性幼苗生长

花生种子不同发育阶段的转录因子调控网络鉴定

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中国油料作物学报 2025年

作者：孙志辉鲁清李海芬黄璐李少雄陈小平王润风余倩霞徐杨玉洪彦彬王键宽汪文毅刘浩广东省农业科学院作物研究所广东省农作物遗传改良重点实验室广东省农垦南亚热带作物科技中心广东兆华航天育种创新研究院华南农业大学农学院

为了对花生种子发育过程中的转录因子调控网络进行全面解析，本研究首先对花生果针入土后3个不同发育时期（5 d、25 d、45 d）的种子与荚果进行表型数据测定。随后利用转录组测序进行基因表达量分析，共检测到71 044个基因，其中5198个... 详细信息

为了对花生种子发育过程中的转录因子调控网络进行全面解析，本研究首先对花生果针入土后3个不同发育时期（5 d、25 d、45 d）的种子与荚果进行表型数据测定。随后利用转录组测序进行基因表达量分析，共检测到71 044个基因，其中5198个为新鉴定的转录本。本研究分别于3个不同发育时期鉴定到5159(25vs5)、7714(45vs5)、1712(45vs25)个差异表达基因。差异基因参与的生物学代谢通路富集分析表明，果针入土后25 d的花生种子涉及的代谢通路最多，而果针入土后45 d的花生种子中代谢通路减少，油脂合成占主导地位。此外，基于差异基因谱共筛选出544个转录因子，并以此构建了转录调控网络，结果表明这些转录调控网络主要涉及植物激素信号转导、昼夜节律调控、MAPK信号途径等种子发育相关的重要途径。进一步的研究表明，18个转录因子在种子内特异高表达，且与种子油脂积累相关的转录因子家族ABI、NFYB与WRI的基因表达趋势与种子发育速率呈正相关性，并用qPCR进行验证。本研究基于3个不同发育时期的转录组测序数据构建了花生种子基因表达谱与转录因子互作网络，为探究花生种子发育的分子调控机制提供了参考。

关键词：花生种子发育时期转录组测序转录因子

中国大豆育成品种中不同地理来源种质的遗传贡献

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中国农业科学 1998年第5期31卷 35-43页

作者：盖钧镒赵团结崔章林邱家驯国家大豆改良中心

在对１９２３～１９９５年育成的６５１个中国大豆品种系谱分析的基础上，计算每一育成品种祖先亲本的细胞核和细胞质遗传贡献值。在全国３４７个细胞核祖先亲本和２１４个细胞质祖先亲本中，来自东北、黄淮海、南方及国外的祖先亲本对... 详细信息

在对１９２３～１９９５年育成的６５１个中国大豆品种系谱分析的基础上，计算每一育成品种祖先亲本的细胞核和细胞质遗传贡献值。在全国３４７个细胞核祖先亲本和２１４个细胞质祖先亲本中，来自东北、黄淮海、南方及国外的祖先亲本对全国育成品种细胞核与细胞质遗传贡献分别为４８．２３％和５０．５４％，２５．５０％和２９．４９％，１３．７４％和１６．２８％，１１．９５％和２．９２％。进一步分析了东北、黄淮海、南方三大生态区大豆育成品种的核、质来源，包括国外引种所占的份额及其特点。评选出３８个对全国和三大生态区域遗传贡献最大的种质

关键词：大豆种质资源遗传贡献

联合转录组学与代谢组学揭示烟草响应高温和干旱胁迫的分子机制

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南方农业学报 2025年

作者：张丹丹智博伦丘韶鑫邵秀红邹明民李集勤马柱文黄振瑞潘晓英陈浩广东省农业科学院作物研究所/广东省农作物遗传改良重点实验室/广东省烟草育种与综合利用工程技术研究中心广东烟草韶关市有限公司

【目的】探究烟草苗期高温胁迫和干旱胁迫响应的生理变化及分子机制，为烟草耐热耐旱品种的选育提供理论依据。【方法】以烟草K326品种为试验材料，采用土培，在光照培养箱进行高温和干旱胁迫处理，测定不同处理前后植株生理指标，取高... 详细信息

【目的】探究烟草苗期高温胁迫和干旱胁迫响应的生理变化及分子机制，为烟草耐热耐旱品种的选育提供理论依据。【方法】以烟草K326品种为试验材料，采用土培，在光照培养箱进行高温和干旱胁迫处理，测定不同处理前后植株生理指标，取高温胁迫和干旱胁迫处理前后地上组织进行转录组和代谢组的测定，挖掘高温干旱胁迫响应关键代谢通路。【结果】高温和干旱处理后烟草的抗氧化酶活性显著升高，叶片相对电导率、丙二醛(MDA)含量和脯氨酸含量都显著增加。转录组数据分析发现高温胁迫处理有21298个差异表达基因（上调11251个，下调10047个）。干旱胁迫处理有7673个差异表达基因（上调4462个，下调3211个）。高温干旱胁迫差异基因共同富集的KEGG通路为MAPK信号通路、苯丙烷生物合成途径等。代谢组分析发现，干旱胁迫有152个差异代谢物，其中上调150个，下调2个。高温和干旱处理共同的差异代谢物有65个，其中氨基酸及其衍生物和碳水化合物及其衍生物种类最多。代谢物共同富集的KEGG通路为半乳糖代谢，蔗糖淀粉代谢和苯丙烷生物合成等。转录组联合代谢组分析结果发现，半乳糖代谢和类胡萝卜素生物合成途径是共同显著富集的代谢通路，其中棉子糖合成酶（RS）、9-顺式环氧胡萝卜素双加氧酶（NCED）等酶的编码基因表达量在高温和干旱胁迫后都显著上升，使得棉子糖和ABA含量显著升高。【结论】棉子糖和ABA通过调节细胞渗透平衡和气孔关闭，减少水分散失响应高温干旱胁迫，该研究为耐热抗旱分子机制解析和关键基因挖掘提供理论依据。

关键词：烟草高温胁迫干旱胁迫转录组代谢组半乳糖代谢类胡萝卜素生物合成

大豆雄性不育突变体NJ89-1核雄性不育基因的等位性测验

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作物学报 2003年第3期29卷 372-378页

作者：杨守萍盖钧镒邱家驯国家大豆改良中心

以大豆雄性不育突变体 NJ89- 1杂合体为母本或父本 ,与杂合体 T2 6 6 H、T2 5 9H、T2 73H、T2 74 H、T2 77H、T2 95 H和纯合体 T2 5 9、T2 73、T2 77杂交 ,测验 NJ89- 1雄性不育基因与已报道的大豆核雄性不育基因 ms1～ ms6的等位关系 ... 详细信息

以大豆雄性不育突变体 NJ89- 1杂合体为母本或父本 ,与杂合体 T2 6 6 H、T2 5 9H、T2 73H、T2 74 H、T2 77H、T2 95 H和纯合体 T2 5 9、T2 73、T2 77杂交 ,测验 NJ89- 1雄性不育基因与已报道的大豆核雄性不育基因 ms1～ ms6的等位关系 ,结果杂交一代 (F1 )表现一致可育 ,杂交二代 (F1∶ 2 )出现育性分离 ,其分离比例符合基因不等位时的情形 ,从而证实NJ89- 1雄性不育基因与 ms1～ ms6均不等位 ;细胞形态学研究发现在败育时期、减数分裂、四分体、花粉粒等诸多方面 ,NJ89- 1与 ms1～ ms9突变体均表现不同 ,存在明显差异。因此 NJ89- 1很可能是一个新雄性不育突变体 ,其雄性不育基因符号命名为 ms0 。

关键词：大豆雄性不育突变体核雄性不育基因等位性测验

巴西大豆资源及其在华南地区衍生品种的磷效率评价

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中国油料作物学报 2013年第2期35卷 162-170页

作者：钟彩霞钟开珍赵云云陈林年海马启彬杨存义华南农业大学农学院国家大豆改良中心广东分中心广东广州510642

南方酸性红壤中有效磷含量低是限制大豆生产的不利因素之一,选育磷高效品种是最有效的途径。采用高、低磷土壤盆栽试验,利用冠干重、根干重、冠磷含量、根磷含量、植株磷吸收量、根长、根表面积、根体积、磷利用效率和磷吸收效率等10个... 详细信息

南方酸性红壤中有效磷含量低是限制大豆生产的不利因素之一,选育磷高效品种是最有效的途径。采用高、低磷土壤盆栽试验,利用冠干重、根干重、冠磷含量、根磷含量、植株磷吸收量、根长、根表面积、根体积、磷利用效率和磷吸收效率等10个性状对5个巴西大豆和11个由其与桂早1号育成品种的磷效率进行了评价,进一步利用主成分和隶属函数对19个大豆品种的磷效率做综合分析。结果发现,除巴西13号和巴西9号外,其他巴西大豆资源磷效率性状均优于桂早1号。由巴西大豆与桂早1号衍生育成的品种华夏5号、桂夏豆2号也优于其双亲,表现正向超亲遗传;衍生育成的品种华夏1号和华夏3号介于其双亲间;其余衍生育成的品种低于双亲,表现负向超亲遗传。结果表明大部分巴西大豆资源在磷效率性状方面存在明显优势,可在改良华南地区大豆品种的磷效率方面发挥作用。

关键词：大豆巴西资源品种磷效率性状改良