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23-羟基白桦酸调控免疫细胞干预NNK联合LPS致小鼠肺部炎癌转化的作用

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：刘彭浩邦段文彬陈亚娟陈兰英江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心

目的: 观察白头翁主要成分23-羟基白桦酸（23-HBA）抑制4-甲基亚硝胺基-1-3-吡啶基-1-丁酮（NNK）联合脂多糖（LPS）致小鼠肺部炎癌转化作用及对免疫细胞的影响，并初步探索该作用机制。方法：建立LPS联合NNK诱导的小鼠炎癌转化模型，... 详细信息

目的: 观察白头翁主要成分23-羟基白桦酸（23-HBA）抑制4-甲基亚硝胺基-1-3-吡啶基-1-丁酮（NNK）联合脂多糖（LPS）致小鼠肺部炎癌转化作用及对免疫细胞的影响，并初步探索该作用机制。方法：建立LPS联合NNK诱导的小鼠炎癌转化模型，随机分为空白组、模型组、阿司匹林组(10 mg·kg-1)、23-HBA低中高剂量组(3.75、7.5、15 mg·kg-1)，持续给药26周，实验结束后取脾脏、肺脏及外周血。计算肺脏、脾脏指数；苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肺组织病理变化；免疫组化（IHC）检测肺组织中甲状腺转录因子1（TTF-1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和增殖细胞核抗原（Ki67）的表达水平；高通量蛋白芯片检测小鼠血清中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；流式细胞术（FACS）检测肺组织和脾组织中巨噬细胞、髓源性抑制细胞（MDSC）、耗竭性T淋巴细胞表达情况。运用口袋分子对接的方法预测23-HBA对Janus激酶2（JAK2）、含Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶（SHP-2）蛋白与细胞因子信号抑制物3（SOCS3）的对接能。Western blot检测23-HBA对M1活化巨噬细胞与肺腺癌细胞A549中磷酸化信号传导及转录激活蛋白3（pSTAT3）及其下游蛋白p53与SHP-2蛋白的表达水平影响。结果:与正常组比较，模型组小鼠肺脏、脾脏指数均有不同程度升高（P<0.05）；与模型组比较，23-HBA各剂量组小鼠肺脏、脾脏和胸腺指数显著降低（P<0.05）；HE染色显示23-HBA高中剂量组可改善NNK联合LPS致小鼠肺部炎性浸润灶与恶性病变灶的发生；免疫组化显示，与正常组比较，模型组小鼠肺组织TTF-1、NSE与Ki67蛋白的表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01），23-HBA各剂量组小鼠TTF-1、NSE与Ki67蛋白的表达水平显著降低（P<0.05，P<0.01）；细胞因子检测结果显示，与正常组比较，模型组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量均明显升高（P<0.01），与模型组比较，23-HBA各剂量组显著降低白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量（P<0.05，P<0.01）；流式细胞术结果显示：与正常组相比，模型组巨噬细胞的数量显著降低（P<0.01），耗竭型T细胞和MDSCs的数量明显升高（P<0.05）。与模型组相比，23-HBA中剂量组显著提升肺部巨噬细胞的数量（P<0.05），显著降低肺部表达PD-1的耗竭型T细胞（P<0.01）和MDSCs的数量（P<0.05）。23-HBA对SHP-2、SOCS3、JAK2的分子对接能强(≥7kJ·mol-1)；23-HBA可显著下调M1巨噬细胞与A549肺腺癌中pSTAT3、SHP-2与p53的蛋白水平（P<0.01）。结论: 23-HBA对LPS联合NNK造成的肺部炎症反应与恶性病变有显著抑制作用，其机制可能是通过调控免疫细胞，改善肿瘤免疫微环境及调控SHP-2蛋白及其下游通路等途径，发挥抗炎抗肿瘤作用。

关键词： 23-羟基白桦酸 NNK联合LPS 肺部组织炎癌转化免疫细胞

高效液相色谱指纹图谱结合化学计量学方法评价苗药铁筷子的质量

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中国药学杂志 2017年第21期52卷 1944-1947页

作者：钟琛聪冯育林江西中医药大学南昌330006 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006

目的建立苗药铁筷子的高效液相色谱(HPLC)特征指纹图谱,结合化学计量学方法对多个批次药材质量进行评价。方法采用Amethyst C_(18)-H色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);0.1%甲酸水(A)-流动相为乙腈(B),梯度洗脱;流速0.8 m L·min^(-1),检测... 详细信息

目的建立苗药铁筷子的高效液相色谱(HPLC)特征指纹图谱,结合化学计量学方法对多个批次药材质量进行评价。方法采用Amethyst C_(18)-H色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);0.1%甲酸水(A)-流动相为乙腈(B),梯度洗脱;流速0.8 m L·min^(-1),检测波长为254 nm,柱温28℃。通过对比保留时间和紫外吸收特征,对建立的指纹图谱的主要特征峰进行确认,采用相似度软件,结合系统聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)方法 ,对10个批次药材进行质量评价。结果建立了铁筷子HPLC指纹图谱,用对照品标定3个峰,相似度在0.978 0~0.991 9之间,10批药材亲缘关系较近。结论该方法专属性强,重现性良好,可为铁筷子的鉴别及质量评价提供依据。

关键词：铁筷子高效液相色谱指纹图谱聚类分析主成分分析质量控制

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黄连的化学成分研究

中药材 2012年第9期35卷 1438-1441页

作者：李志峰王琦冯育林罗晓健范玫玫杨世林中药固体制剂制造技术国家工程研究中心/江西中医学院江西南昌330006

目的:研究毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.的化学成分。方法:利用柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等分离技术对黄连的95%乙醇提取物进行分离,根据其所得化合物的理化性质与UV、IR、MS、NMR等光谱数据鉴定其结构。结果:从黄连... 详细信息

目的:研究毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.的化学成分。方法:利用柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等分离技术对黄连的95%乙醇提取物进行分离,根据其所得化合物的理化性质与UV、IR、MS、NMR等光谱数据鉴定其结构。结果:从黄连的95%乙醇提取物的氯仿萃取部分分离得到7个成分,分别鉴定为甲基小檗碱(1)、8,9-dihydroxy-1,5,6,10b-tetrahydro-2H-pyrrolo[2,1-α]isoquinolin-3-one(2)、(±)5,5'-二甲氧基落叶松脂醇(3)、3,4-二羟基苯乙醇(4)、methyl-5-O-feruloylquinate(5)、ethyl-5-O-feruloylquinate(6)和apocynol(7)。结论:其中化合物3为首次从该属植物中分离得到,化合物5～7为首次从该植物中分离得到。

关键词：结构鉴定柱色谱法黄连氯仿提取物

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新技术在中成药工业中的应用与展望

中成药 1998年第5期20卷 1-3页

作者：沈平孃邵忠法唐青华朱莲华朱颖国家中药制药工程技术研究中心 200127

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紫丁香叶化学成分研究

中草药 2009年第3期40卷 369-371页

作者：李全许琼明郝丽莉陆冰芬杨世林李笑然苏州大学药学院江苏苏州215123 江西中医学院江西南昌330004 国家中药固体制剂工程技术研究中心江西南昌330006

目的研究木犀科丁香属植物紫丁香Syringa oblata叶的化学成分。方法利用色谱方法反复进行分离纯化,通过波谱分析、化学方法及参照文献鉴定单体成分结构。结果从紫丁香叶中分离得到8个化合物,分别鉴定为7-methyl-1-oxo-octahydro-cyclope... 详细信息

目的研究木犀科丁香属植物紫丁香Syringa oblata叶的化学成分。方法利用色谱方法反复进行分离纯化,通过波谱分析、化学方法及参照文献鉴定单体成分结构。结果从紫丁香叶中分离得到8个化合物,分别鉴定为7-methyl-1-oxo-octahydro-cyclopenta[c]pyran-4-carboxylic acid(Ⅰ)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(莨菪亭)(Ⅱ)、5,7,4′-三羟基黄酮(芹菜素)(Ⅲ)、白桦酸(Ⅳ)、乌苏酸(Ⅴ)、19α-羟基乌苏酸(Ⅵ)、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸(Ⅶ)、胡萝卜苷(Ⅷ)。结论化合物Ⅰ为环烯醚萜氧化产物,化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ为首次从该属植物中分离得到。

关键词：紫丁香环烯醚萜莨菪亭

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长尾粗叶木根的化学成分研究(Ⅱ)

中草药 2018年第4期49卷 801-805页

作者：黄腾潘玲玲吴亚芬万娜李斐周翔李斌江西中医药大学中药资源与民族药研究中心中药固体制剂制造技术国家工程研究中心江西南昌330004

目的研究长尾粗叶木Lasianthus acuminatissimus根的化学成分。方法利用正相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相柱色谱和制备液相色谱等方法进行分离纯化,通过波谱数据并结合文献报道数据鉴定结构。结果从长尾粗叶木根中分离得到16个化合物,... 详细信息

目的研究长尾粗叶木Lasianthus acuminatissimus根的化学成分。方法利用正相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相柱色谱和制备液相色谱等方法进行分离纯化,通过波谱数据并结合文献报道数据鉴定结构。结果从长尾粗叶木根中分离得到16个化合物,分别鉴定为对甲氧基苯酚(1)、3-乙酰基白桦酸(2)、十六烷酸(3)、3,8-二羟基-2-乙氧基甲基-1-甲氧基-9,10-蒽醌(4)、1,3-二羟基-2-乙氧甲基-9,10-蒽醌(5)、1,3-二羟基-3-甲基-9,10-蒽醌(6)、3,8-二羟基-1-甲氧基-9,10-蒽醌(7)、3-羟基-1-甲氧甲基-9,10-蒽醌(8)、1,3-二羟基-2-甲氧甲基-9,10-蒽醌(9)、4-羟甲基-2-糠醛(10)、邻苯二甲酸二丁酯(11)、长尾粗叶木素A(12)、异东莨菪素(13)、虎刺醇(14)、钩藤苷元A(15)、长尾粗叶木苷A(16)。结论化合物1~11为首次从粗叶木属植物中分离得到。

关键词：粗叶木属长尾粗叶木 3-乙酰基白桦酸 3,8-二羟基-2-乙氧基甲基-1-甲氧基-9,10-蒽醌 1,3-二羟基-3-甲基-9,10-蒽醌 4-羟甲基-2-糠醛

HPLC同时测定雪胆胃肠丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱

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中成药 2009年第2期31卷 326-327页

作者：郭兆荣李笑然杨世林许琼明高红伟董更婷苏州大学药学院江苏苏州215123 江西中医学院江西南昌330004 国家中药固体制剂工程技术研究中心江西南昌330006

雪胆胃肠丸是从苗族民间传统秘方中开发出来的中药复方,含有雪胆、吴茱萸、木香、白及、黄芪等十多味中药材。经临床研究表明,雪胆胃肠丸对胃炎、萎缩性胃炎、十二指肠溃疡等疾病有独特的疗效。吴茱萸是雪胆胃肠丸中一味重要的药材,吴... 详细信息

雪胆胃肠丸是从苗族民间传统秘方中开发出来的中药复方,含有雪胆、吴茱萸、木香、白及、黄芪等十多味中药材。经临床研究表明,雪胆胃肠丸对胃炎、萎缩性胃炎、十二指肠溃疡等疾病有独特的疗效。吴茱萸是雪胆胃肠丸中一味重要的药材,吴茱萸药材中的主要活性成分是吴茱萸碱和吴茱萸次碱,具有止呕、止泻、抗实验型胃溃疡作用。目前,雪胆胃肠丸的质量标准中还没有对吴茱萸的成分进行检测控制。为了给雪胆胃肠丸生产检验中提供检测指标和进一步完善其质量标准,我们采用HPLC法测定雪胆胃肠丸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量。[第一段]

关键词：雪胆胃肠丸吴茱萸碱吴茱萸次碱 HPLC

枸杞多糖指纹图谱的建立及其抗疲劳、免疫调节谱效关系研究

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中国医院药学杂志 2024年第24期 2829-2838页

作者：赵廷廷徐帮会张永萍刘耀程纯徐剑贵州中医药大学药学院国家苗药工程技术研究中心贵州中药炮制与制剂工程技术研究中心

目的：研究枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharide,LBP）的指纹图谱与抗疲劳和免疫调节作用的关联性，明确LBP发挥抗疲劳和免疫作用的药效物质基础。方法：以不同产地的10批枸杞制备样品，建立指纹图谱；对指纹图谱中的共有峰采用... 详细信息

目的：研究枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharide,LBP）的指纹图谱与抗疲劳和免疫调节作用的关联性，明确LBP发挥抗疲劳和免疫作用的药效物质基础。方法：以不同产地的10批枸杞制备样品，建立指纹图谱；对指纹图谱中的共有峰采用聚类分析、主成分分析和偏最小二乘回归分析，采用对照品进行指认；以小鼠游泳时间、尿素（blood urea nitrogen,BUN）、乳酸（lactic acid,LA）、肝糖原、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）为指标，研究LBP的抗疲劳作用；腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型，以脾脏指数、胸腺指数、TNF-α、IFN-α、IFN-γ、IL-2、IL-6、Ig-A、Ig-G、迟发型变态反应（delayed type hypersensitivity,DTH）程度和半数溶血值（HD50）为指标研究其免疫调节活性，评价LBP的免疫调节作用，最后通过灰色关联分析研究谱效关系。结果：建立的指纹图谱确定了21个共有峰，指认了5个共有峰；指纹图谱相似度>0.741，主成分将不同产地的样品分为5类，与聚类分析结果相同；灰色关联度抗疲劳前6个色谱峰分别是2、6、7、12、15和17号，免疫调节前6个色谱峰分别是4、6、7、9、12号和17;2、5、6、7、15和21号色谱峰与抗疲劳药效呈正相关，2、4、7、8、11、12、13和21号色谱峰与免疫调节药效呈正相关。结论：LBP的抗疲劳和免疫调节作用是多种成分协同作用的结果，2、6、7和15号色谱峰可能是LBP发挥抗疲劳药效的主要活性成分，4、7和12号色谱峰可能是LBP发挥免疫调节的主要活性成分。

关键词：枸杞指纹图谱抗疲劳免疫调节谱效关系

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基于化学计量学分析的桃仁炮制前后指纹图谱研究

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中国现代应用药学 2020年第8期37卷 971-976页

作者：张晓男魏惠珍张丹杨磊肖柳君丁若雯饶毅江西中医药大学药学院南昌330004 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006

目的建立桃仁炮制前、后HPLC指纹图谱,比较桃仁炮制前后的质量差异以及桃仁与种皮的差异。方法采用高效液相色谱法测定桃仁饮片(生桃仁、燀桃仁、炒桃仁)各10批的指纹图谱,使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)"进行相... 详细信息

目的建立桃仁炮制前、后HPLC指纹图谱,比较桃仁炮制前后的质量差异以及桃仁与种皮的差异。方法采用高效液相色谱法测定桃仁饮片(生桃仁、燀桃仁、炒桃仁)各10批的指纹图谱,使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)"进行相似度评价,并采用SIMCA统计软件对结果进行偏最小二乘法判别分析。结果生桃仁、燀桃仁、炒桃仁HPLC指纹图谱均含8个共有峰、种皮HPLC指纹图谱含有6个共有峰,相对应的指纹图谱相似度均>0.90。统计结果显示桃仁饮片炮制前、后的指纹图谱可明显区分,并揭示了对此区分贡献最大的4个潜在标志性色谱峰。结论该方法准确、稳定,反映了桃仁饮片炮制前后以及桃仁与种皮的差异性,为桃仁饮片临床用药、质量控制提供一定的参考。

关键词：桃仁炮制指纹图谱高效液相色谱法偏最小二乘法判别分析