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基于近红外光谱和化学计量学的蒲黄炭快速判别和定量分析方法研究

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世界科学技术-中医药现代化 2024年

作者：唐敏李霄龙李嘉琪钟泳琪梁生旺戴胜云孙飞广东药科大学中药学院国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室中国食品药品检定研究院

目的建立蒲黄炭炮制程度判别和多成分定量的近红外（Near infrared,NIR）快速分析方法。方法制备“不及”“适中”“太过”3种炮制规格的蒲黄炭样品186批，采集不同规格蒲黄炭的NIR光谱，分别采用偏最小二乘判别分析（Partialleastsqu... 详细信息

目的建立蒲黄炭炮制程度判别和多成分定量的近红外（Near infrared,NIR）快速分析方法。方法制备“不及”“适中”“太过”3种炮制规格的蒲黄炭样品186批，采集不同规格蒲黄炭的NIR光谱，分别采用偏最小二乘判别分析（Partialleastsquaresdiscriminantanalysis,PLS-DA）、K-最近邻（k-nearest neighbor,kNN）和支持向量机（Support vector machine,SVM）建立蒲黄炭炮制程度的判别分析模型，以准确度（Accuracy,ACC）和错误率（Error rate,ER）对不同类型判别模型的判别效果进行评价。然后采用偏最小二乘（Partial least squares,PLS）建立蒲黄炭中原儿茶酸、3-羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、壬二酸、槲皮素、槲皮素-3-O-（2G-α-L-鼠李糖基）-芸香糖苷、山奈酚、山柰酚-3-O-（2G-α-L-鼠李糖基）-芸香糖苷、异鼠李素、香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷和柚皮素的定量分析模型，计算校正集和验证集相关系数(rcal、rpre)、校正集误差均方根（Root mean square error of calibration,RMSEC）、验证集误差均方根（Root mean square error of prediction,RMSEP）和性能偏差比（The ratio of prediction to deviation,RPD）对PLS模型预测性能进行评价。结果与PLS-DA和KNN模型相比，SVM模型对不同炮制程度蒲黄炭判别效果最优，校正集和验证集的ACC分别为90.08%和93.44%,ER分别为9.08%和5.21%。蒲黄炭中12种化学成分的PLS模型rcal和rpre均大于0.9,RPD均大于2.3。结论本文采用NIR光谱并结合化学计量学建立蒲黄炭炮制程度判别分析和多成分定量分析的快速检测方法，该方法快速、无损、准确，为快速判断蒲黄炭炮制程度和分析化学成分变化，保证蒲黄炭炮制工艺的稳定性和饮片质量的可控性提供科学依据和方法支撑。

关键词：蒲黄炭近红外光谱化学计量学判别分析定量分析

基于角蛋白源特征肽检测优化的角类动物药鉴别研究

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2402-2409页

作者：黄潇正武文星黄思莹包旺林冯旗园赵明段金廒刘睿南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 动物类中药与功能肽国际合作联合实验室江苏南京210023

由于角蛋白结构稳定,富含角蛋白的角类动物药提取溶解步骤复杂,严重制约了检测效率及通量,该文通过简化角类样品前处理步骤,优化主要角类动物药的特征肽检测方法,提升角类动物药专属性鉴别效率。分别对经/未经碘乙酰胺(IAA)处理的角类... 详细信息

由于角蛋白结构稳定,富含角蛋白的角类动物药提取溶解步骤复杂,严重制约了检测效率及通量,该文通过简化角类样品前处理步骤,优化主要角类动物药的特征肽检测方法,提升角类动物药专属性鉴别效率。分别对经/未经碘乙酰胺(IAA)处理的角类动物药特征肽类进行分析,优化特征肽的离子对条件,并比较经/未经IAA处理的特征肽的保留时间、响应值等数据;采用直接酶解与提取总蛋白后酶解2种前处理方法制备角类动物药样品,基于特征肽保留时间、离子响应值等比较不同方法对羚羊角、水牛角、山羊角及牦牛角样品中特征肽检测的影响。结果表明待测角类样品经直接酶解的简化工艺处理后,均可检测到未经IAA处理的特征肽信息,且与IAA处理后的特征肽相比,其保留时间后移,质谱响应稍有降低;未经IAA处理的特征肽专属性良好,不影响角类动物药的专属性鉴别。综上,可采用直接酶解的工艺处理角类样品,省略蛋白质提取、二硫苏糖醇、IAA试剂处理步骤,显著提高前处理效率,且不影响角类动物药的专属性鉴别,为角类动物药质量研究及标准提升提供了思路与策略。

关键词：角类动物药前处理优化特征肽高效液相色谱-串联质谱法质量控制

中药通过调控肝脏巨噬细胞防治非酒精性脂肪性肝病的研究进展

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药学学报 2024年第4期59卷 801-810页

作者：王可可贾王雅黄镇林李剑徐红季莉莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 中国药科大学江苏南京210009 金陵药业股份有限公司技术中心江苏南京210009

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除酒精和其他明确损肝因素所致的肝细胞内脂质过度沉积为主要特征的临床病理综合征。NAFLD发病机制复杂,当肝脏受到损伤时,肝细胞内的脂质大量沉积,刺激肝细胞发生氧... 详细信息

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除酒精和其他明确损肝因素所致的肝细胞内脂质过度沉积为主要特征的临床病理综合征。NAFLD发病机制复杂,当肝脏受到损伤时,肝细胞内的脂质大量沉积,刺激肝细胞发生氧化应激、内质网应激和代谢失调等反应,免疫细胞进一步过度分泌炎性细胞因子释放入血引起全身炎症,因此在NAFLD的进程中,炎症反应扮演了重要的角色。巨噬细胞是肝脏内含量最丰富的免疫细胞,在肝脏炎症损伤中发挥重要的作用。肝脏巨噬细胞包括肝脏固有和单核细胞来源的巨噬细胞,其活化和极化过程参与NAFLD不同发展阶段。中药复方及其活性成分已被证实可调控巨噬细胞参与NAFLD病变中的炎症、损伤和恢复过程。根据现有的研究报道,本文以阐述巨噬细胞的来源、活化、极化及其与NAFLD的关系为切入点,系统综述中医药通过调控巨噬细胞活化、募集和极化,从而防治NAFLD的药效机制,以期为从中药中发现通过调控巨噬细胞防治NAFLD的创新性药物提供新的研究思路。

关键词：非酒精性脂肪性肝病中药复方活性成分巨噬细胞

中药及天然药物来源的小核酸新药发现与前景展望

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2273-2280页

作者：华桦田韦韦刘俐曾瑾魏平谭蕊蓉王剑波赵军宁四川省中医药转化医学中心国家中医药管理局中药质量生物评价重点研究室中医药转化医学四川省重点实验室四川省道地药材系统开发工程技术研究中心四川省道地药材形成原理与品质评价工程研究中心四川成都610041 国家药品监督管理局药品监管科学全国重点实验室北京100037

小核酸药物主要包括小干扰核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)、反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)、微小RNA(microRNA,miRNA)、信使RNA(messenger RNA,mRNA)以及核酸适配体(aptamer)等,可通过与靶分子的RNA结合,抑制其翻译或调控,具有高度特异性、持久性和可治愈性,近年来颇受关注。新近发现中药动植物来源的miRNA自身稳定并可稳定存在于动物或人体的血液与组织器官,而且可通过参与调控多种靶蛋白的表达发挥药理作用。该文概述了源自中药及天然药物的小核酸药物发现及其跨界调控机制,探讨这类新兴药品带来的技术挑战与监管问题,可为中药复杂性作用机制阐释、中药及天然药物来源的小核酸新药研制及监管科学研究提供新的思路和方法。

关键词：小核酸中药天然药物新药发现监管科学

基于全基因组的栀子花香成分合成TPS基因系统分析

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植物科学学报 2024年第1期42卷 85-95页

作者：许文杰娄千陈启桢胡开治曹敏刘燕琴韩蓉蓉宋经元中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所国家中医药管理局中药资源保护重点研究室北京100193 重庆市药物种植研究所重庆408435

栀子(Gardenia jasminoides ***)花色洁白且香气怡人,不仅具有极高的观赏价值,还是重要天然香料来源。萜类是栀子花独特香气的主要组成成分,但合成该类挥发性产物的关键萜类合酶(TPS)尚未鉴定。本研究基于栀子高质量基因组,通过转录组... 详细信息

栀子(Gardenia jasminoides ***)花色洁白且香气怡人,不仅具有极高的观赏价值,还是重要天然香料来源。萜类是栀子花独特香气的主要组成成分,但合成该类挥发性产物的关键萜类合酶(TPS)尚未鉴定。本研究基于栀子高质量基因组,通过转录组数据、系统发育树和保守结构域分析等,全面挖掘栀子萜类花香成分合成相关的TPS基因。结果显示,栀子基因组共注释到44个GjTPS基因,不均匀分布于11条染色体,其中9个GjTPS参与串联复制事件。所有GjTPS被划分为5个亚家族,其中27个属于被子植物特有的TPS-a、TPS-b和TPS-g分支。结合栀子5个器官的转录组数据及实时荧光定量PCR分析,筛选出5个候选GjTPS基因,其在盛开期的花器官中特异高表达,且含有DDXXD和NSE/DTE活性基序。其中,GjTPS1、GjTPS2、GjTPS3和GjTPS27为TPS-b分支酶,推测为芳樟醇或罗勒烯等栀子主要花香成分合成酶,而TPS-a分支的GjTPS18可能是金合欢烯合酶。

关键词：栀子花香萜类合酶基因组转录组

基于微生物组学研究枸杞叶对来曲唑诱导PCOS小鼠的干预作用

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药学学报 2024年第7期59卷 2030-2040页

作者：张莘悦陆聪郑慧丽宿树兰朱悦郭盛钱大玮康宏杰段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 宁夏枸杞创新中心宁夏银川750002

本研究旨在探讨枸杞叶对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)小鼠的干预作用及其机制。采用来曲唑联合高脂饮食制备PCOS模型,造模成功后将40只小鼠随机分为PCOS组、阳性药二甲双胍组、枸杞叶低剂量组和枸杞叶... 详细信息

本研究旨在探讨枸杞叶对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)小鼠的干预作用及其机制。采用来曲唑联合高脂饮食制备PCOS模型,造模成功后将40只小鼠随机分为PCOS组、阳性药二甲双胍组、枸杞叶低剂量组和枸杞叶高剂量组,灌胃给予相应药物,持续29天。实验结束摘眼球取血并收集卵巢组织,检测各组小鼠卵巢质量、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、睾酮(T)、抗苗勒管激素(AMH)、促黄体生成素(LH)、促卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))水平。采用苏木精-伊红染色观察卵巢组织形态,并计数卵母细胞、囊性卵泡和黄体。采集小鼠盲肠内容物进行肠道菌群组成和差异菌群等分析。动物实验过程经南京中医药大学动物伦理委员会审核通过。结果显示,PCOS小鼠动情周期紊乱。与PCOS组相比,枸杞叶组能明显减轻小鼠卵巢损伤,减少囊状扩张卵泡数,使动情周期正常化。经枸杞叶干预后的FBG、FINS、T、AMH、LH、FSH、LH/FSH水平显著降低(P<0.05),而E_(2)水平显著升高(P<0.001)。此外,枸杞叶能调节PCOS小鼠肠道菌群多样性紊乱,提高拟杆菌门丰度,降低厚壁菌门、回肠杆菌属、罗姆布茨菌属、类杆菌属的丰度。综上,枸杞叶可通过改善胰岛素抵抗、调节生殖激素紊乱及肠道菌群失调而发挥对PCOS小鼠的治疗作用,为枸杞叶的合理利用及开发提供了科学依据和有益参考。

关键词：多囊卵巢综合征枸杞叶胰岛素抵抗肠道菌群干预作用

杞荷分清饮中12种成分在正常及糖尿病模型大鼠体内药动学的比较研究

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中国中药杂志 2024年第5期49卷 1378-1387页

作者：陈江燕郭盛许小雪杨雅朱悦康宏杰段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省中药资源产业化过程协同创新中心国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 宁夏枸杞创新中心宁夏银川750002

研究杞荷分清饮中12种活性成分(琥珀酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、原儿茶醛、咖啡酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、对香豆酸、荷叶碱、槲皮素、齐墩果酸、熊果酸)在正常和糖尿病模型大鼠体内的药动学差异。采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲... 详细信息

研究杞荷分清饮中12种活性成分(琥珀酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、原儿茶醛、咖啡酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、对香豆酸、荷叶碱、槲皮素、齐墩果酸、熊果酸)在正常和糖尿病模型大鼠体内的药动学差异。采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,建立超高效液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱(UHPLC-QTRAP-MS/MS)方法,同时测定正常大鼠和模型大鼠分别单次灌胃给予杞荷分清饮后血浆中12种成分的含量。结果显示,所建立的分析方法对12种所测定成分线性关系良好,专属性、准确度、精密度、稳定性等方法学均符合要求。采用DAS 3.2.8软件拟合计算药动学参数结果表明,模型组中除咖啡酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、齐墩果酸外其余9种成分半衰期时间(t1/2)相对正常组延长;隐绿原酸、对香豆酸、熊果酸、齐墩果酸药时曲线下面积(AUC0-t)模型组相对正常组增加,且平均驻留时间(MRT)延迟;正常组中槲皮素、荷叶碱出现“双峰”现象,模型组未见,提示疾病状态下药物的药动学参数出现明显差异。

关键词：杞荷分清饮枸杞叶糖尿病药代动力学

一种新型肝郁化火型抑郁症动物模型的建立及评价方法

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药学学报 2024年第6期59卷 1680-1690页

作者：苏丹李健朱根华杨明廖亮亮艾志福李惠珍刘亚丽宋永贵江西中医药大学中药药效(防治精神障碍脑疾病)评价江西省中医药管理局重点研究室/抑郁症中医证候动物模型江西省中医药管理局重点研究室江西南昌330004 江西中医药大学南昌市实验动物病理研究重点实验室江西南昌330006 江西古香今韵大健康产业有限公司江西南昌330029 南昌医学院药效与安全性评价江西省卫生健康重点实验室江西南昌330004

通过一种复合诱导方法,结合神经行为学、宏观表征以及客观病理评价指标,构建并确证小鼠肝郁化火证抑郁模型。采用睡眠剥夺结合光照和隔天给粮刺激的方法进行构建,并从表观效度、结构效度和预测效度3个层次展开评估,再经由方剂反证所建... 详细信息

通过一种复合诱导方法,结合神经行为学、宏观表征以及客观病理评价指标,构建并确证小鼠肝郁化火证抑郁模型。采用睡眠剥夺结合光照和隔天给粮刺激的方法进行构建,并从表观效度、结构效度和预测效度3个层次展开评估,再经由方剂反证所建立的肝郁化火型抑郁模型。表观效度中,与空白组相比,模型小鼠神经行为学表现为典型的抑郁样症状;一般状态观察显示模型组小鼠毛发乱而无光泽,且反应迟钝易激惹,饮水量大幅增加;小鼠睡眠时相检测中,模型小鼠睡眠觉醒期所占时间比显著上升,非快速眼动睡眠期和快速眼动睡眠期所占时间比显著下降;颈内动脉平均血流速度、血流量、舌、尿液、爪色r值等生理性指标变化有显著性差异;结构效度显示,与空白组相比,模型小鼠海马中五羟色胺、多巴胺、γ-氨基丁酸显著下降,乙酰胆碱、色氨酸、谷氨酸水平显著上升,给予丹栀逍遥散治疗后,以上神经递质皆有不同程度回调。预测效度中,治疗药物帕罗西汀可有效改善模型小鼠的抑郁样行为;肝郁化火经典方丹栀逍遥散可不同程度回调抑郁及相关证候各项指标。本研究建立了一种新型肝郁化火型抑郁动物模型,扩充了中医证候抑郁模型的种类,为今后中医药防治抑郁症的科学内涵研究、药效评价以及药物筛选提供了更多选择。动物实验获得江西中医药大学动物伦理实验委员会的批准和监督(伦理编号:20230313040)。

关键词：抑郁症动物模型肝郁化火丹栀逍遥散病症结合

枸杞属植物果实多类型化学组分分析比较及其“化学-性状”关联性分析

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3462-3472页

作者：王杰美李洁王园园余代鑫康宏杰钱大玮郭盛段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 宁夏枸杞创新中心宁夏银川750002

为全面了解及利用我国枸杞属植物资源,该研究以枸杞属不同种植物干燥成熟果实为研究对象,比较其糖类、蛋白质类、类胡萝卜素类、有机酸类及酚类化学组分组成及含量,并结合果实百粒重、果形指数及籽实比性状指标,分析其“化学-性状”相... 详细信息

为全面了解及利用我国枸杞属植物资源,该研究以枸杞属不同种植物干燥成熟果实为研究对象,比较其糖类、蛋白质类、类胡萝卜素类、有机酸类及酚类化学组分组成及含量,并结合果实百粒重、果形指数及籽实比性状指标,分析其“化学-性状”相关性。研究结果表明,不同种枸杞其化学成分主要组成类别具有差异,如截萼枸杞、黄果枸杞及红枝枸杞为单糖优势种;宁夏枸杞及黄果枸杞为总多糖优势种,且宁夏枸杞为枸杞红素绝对优势种;云南枸杞与北方枸杞干果为可溶性蛋白质优势种;截萼枸杞、新疆枸杞及宁夏枸杞为有机酸类及酚类优势种;宁夏枸杞、黄果枸杞为枸杞属中大果优势种;云南枸杞及枸杞为多籽劣势种。多糖类、类胡萝卜素类、果实百粒重、籽实比、东莨菪素、果糖、5-O-阿魏酰奎宁酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷、东莨菪苷、隐绿原酸及咖啡酸被认为是不同种干果间主要差异指标。相关性分析结果表明,果实百粒重与东莨菪苷及总多糖含量呈强正相关;籽实比与琥珀酸、水溶性蛋白质及玉米黄素含量呈强正相关性,与芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、果糖及葡萄糖含量呈强负相关,表明不同化合物在枸杞果实中分布趋势不同。该研究系统分析比较了枸杞属8个不同种果实化学组分及性状差异,可为枸杞属植物全面开发利用及品种定向选育和精细化、高值化利用提供参考依据。

关键词：枸杞属种化学成分性状资源利用