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细粒棘球绦虫膜联蛋白B5、B15和B25的原核表达和分泌特性分析

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畜牧兽医学报 2024年第6期55卷 2607-2618页

作者：陈延鑫华瑞其邵国庆朱小伟侯巍李盛琼阳爱国杨光友四川农业大学动物医学院成都611130 四川省动物疫病预防控制中心成都610000

旨在探讨细粒棘球绦虫膜联蛋白B5、B15和B25的反应原性及其在中间宿主组织中的分泌特性,为进一步研究细粒棘球绦虫膜联蛋白与中间宿主的相互作用奠定基础。作者提取细粒棘球蚴原头蚴的总RNA并反转录为cDNA,以cDNA为模板PCR扩增获得EgAN... 详细信息

旨在探讨细粒棘球绦虫膜联蛋白B5、B15和B25的反应原性及其在中间宿主组织中的分泌特性,为进一步研究细粒棘球绦虫膜联蛋白与中间宿主的相互作用奠定基础。作者提取细粒棘球蚴原头蚴的总RNA并反转录为cDNA,以cDNA为模板PCR扩增获得EgANXB5、EgANXB15和EgANXB25基因全长编码序列,使用同源重组法构建pET32a-EgANXB5、pET32a-EgANXB15和pET32a-EgANXB25质粒并进行重组蛋白的原核表达,应用蛋白免疫印迹对上述重组蛋白进行鉴定,并采用免疫荧光染色试验分析EgANXB5、EgANXB15和EgANXB25在中间宿主组织中的分泌特性。结果显示:本研究成功克隆并表达出重组EgANXB5、EgANXB15和EgANXB25,并更正了EgANXB25的CDS序列(GenBank:OR245515.1)。蛋白免疫印迹结果显示,这3种蛋白均能够被感染细粒棘球绦虫的犬阳性血清和感染细粒棘球蚴的小鼠阳性血清所识别。同时,免疫荧光染色结果显示,在细粒棘球蚴包囊附近的肝实质组织中可以检测到EgANXB5、EgANXB15和EgANXB25的阳性信号。EgANXB5、EgANXB15和EgANXB25具有良好的反应原性,同时它们具有分泌进入包囊周围肝实质组织中的潜能,可能进一步参与细粒棘球蚴与宿主的相互作用。

关键词：细粒棘球绦虫膜联蛋白原核表达反应原性分泌特性

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4种布鲁氏菌病胶体金试纸条的比较研究

中国动物传染病学报 2024年

作者：黄晓兵杨磊刘爱军倪柏锋孙思琪浙江省动物疫病预防控制中心

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条... 详细信息

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条的敏感性、特异性等评价指标。结果表明：4个厂家试纸条的Cut-off值为标准血清抗体含量2.5 IU/mL～10 IU/mL，敏感性为8%～100%，特异性为93.10%～100%，符合率为72.29%～96.39%，AUC值为0.54～0.97；配对卡方检验结果显示：除厂家A外，厂家B、C、D的结果与真实结果均有显著性差异（P＜0.05）。A厂家试纸条的检测结果与真实结果符合率为95.18%，成本-效果分析结果表明，4个厂家的C/E值分别为15.76、31.52、19.71和20.75，厂家A试纸条准确诊断1份样品的成本最低。故推荐使用A厂家的胶体金试纸条开展宰前动物布病的筛查工作。

关键词：布鲁氏菌病胶体金法初筛比较分析

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管碟法测定硫酸新霉素效价的方法优化

中国抗生素杂志 2024年第6期49卷 667-672页

作者：吴雨珊孙冰清张妤姜芹顾欣张文刚曹莹上海市动物疫病预防控制中心上海201103

目的优化硫酸新霉素含量管碟法测定方法,增大新霉素抑菌圈直径大小,提高检测结果的准确性。方法按照《中国兽药典》2020版一部附录1200抗生素微生物(检定法)的实验基本要求,设置菌液麦氏浊度(0.5、1、2、3和>4 mcf)、培养基pH(7.6、7.8... 详细信息

目的优化硫酸新霉素含量管碟法测定方法,增大新霉素抑菌圈直径大小,提高检测结果的准确性。方法按照《中国兽药典》2020版一部附录1200抗生素微生物(检定法)的实验基本要求,设置菌液麦氏浊度(0.5、1、2、3和>4 mcf)、培养基pH(7.6、7.8、8.0、8.2和8.4)、磷酸盐缓冲液中NaCl添加比例(0、3%、4%、5%、7%和9%)等变量进行含量测定,比较抑菌圈直径大小和可信限率等指标。结果在添加0.5%的菌液麦氏浊度为3 mcf的金黄色葡萄球菌液、培养基p H为8.0、缓冲液添加5%的Na Cl条件下,高剂量抑菌圈直径扩大至20 mm左右,抑菌圈边缘清晰,且符合《中国兽药典》可信限率的要求(不大于5%)。通过多产品多厂家的实样验证此条件稳定可靠。结论优化后的方法可用于硫酸新霉素常规效价含量的测定。

关键词：新霉素抗生素微生物检定法效价测定金黄色葡萄球菌

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猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析

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动物医学进展 2024年第8期45卷 28-34页

作者：张启龙李振河程敏姮栗云鹏高晓龙傅彩霞王林高敏余琦周德刚张玮李志军北京市动物疫病预防控制中心北京102629 北京市平谷区动物疫病预防控制中心北京101200

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,... 详细信息

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。

关键词：猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定 VP2基因遗传进化分析

非洲猪瘟传入四川边界丘区的定性风险评估和防控措施

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中国动物保健 2024年第1期26卷 14-15,33页

作者：尹念春梁璐琪张毅陈冬李春陆富贵四川省遂宁市动物疫病预防控制中心四川遂宁629000 四川省动物疫病预防控制中心成都610041 四川省射洪市动物疫病预防控制中心四川遂宁629200

为精准研判区域性联防联控形势下非洲猪瘟传入四川省边界丘区的可能性,参照《陆生动物卫生法典》风险评估的标准流程,通过对危害识别、确定风险问题、明确风险路径、开展释放评估、暴露评估、后果评估、风险估计,对非洲猪瘟传入四川边... 详细信息

为精准研判区域性联防联控形势下非洲猪瘟传入四川省边界丘区的可能性,参照《陆生动物卫生法典》风险评估的标准流程,通过对危害识别、确定风险问题、明确风险路径、开展释放评估、暴露评估、后果评估、风险估计,对非洲猪瘟传入四川边界丘区开展定性风险评估。经评估,非洲猪瘟病毒通过“带毒蜱虫入境”“引进猪只通过屠宰感染”“未实行全封闭饲养”“带毒蜱虫叮咬家猪”“未消毒运载车辆与猪只发生有效距离接触”等5种途径传入四川边界丘区的风险等级为“中等”。从风险管理方面,强化生猪散养户养殖管理、加大饮水入口管控、加强蜱虫源头防控、做好备案登记管理等4个方面提出针对性建议,严防非洲猪瘟病毒传入,以保障四川边界丘区养殖的产能和供给。为非洲猪瘟区域防控提供技术参考。

关键词：非洲猪瘟定性风险评估风险管理

禽白血病病毒p27抗原ELISA检测试剂盒的比较与评估

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中国家禽 2024年第5期46卷 118-124页

作者：刘颖昳胡迪刘倩倩迟盛仁刘琳王传彬顾小雪中国动物疫病预防控制中心北京102618

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27抗原ELISA检测试剂盒(国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX)进行比较。结果... 详细信息

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27抗原ELISA检测试剂盒(国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX)进行比较。结果显示:从分析特性上看,试剂盒分析特异性均较好,未观察到与其他常见禽源病毒的交叉反应;与IDEXX相比,DA、IA的分析敏感性较高,DB、IC其次,DC、IB较低,对于ALV不同亚群,各种试剂盒分析敏感性差异可达2~3个稀释度;从诊断特性上看,与IDEXX相比,DB、DC和IC的诊断敏感性和诊断特异性均高于90%;DA、IA和IB与IDEXX的诊断敏感性和诊断特异性均高于80%;各试剂盒对于不同类型样品(DF-1细胞培养物、蛋清、胎粪)的诊断敏感性和诊断特异性存在差异;从重复性上看,DA和IA的批内变异系数均在15%以内。综上所述,与IDEXX相比,当前国产p27抗原ELISA检测试剂盒DA和DB、进口p27抗原ELISA检测试剂盒IA和IC的各项性能可满足禽白血病净化各阶段对不同类型样品的检测需求。

关键词：禽白血病病毒净化 ELISA p27抗原

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非洲猪瘟病毒遗传多样性分析研究进展

中国兽医杂志 2024年第7期60卷 97-101页

作者：金贵兵杨丁金仕强邹仲航牟燕平古从伟杨倩宜宾市叙州区动物疫病预防控制中心四川宜宾644600 宜宾市动物疫病预防控制中心四川宜宾644000 西南医科大学实验动物中心四川泸州646000

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、烈性和高度接触性传染病,严重危害全球养猪业。ASFV基因分型可以从分子水平追溯疫情病毒的来源,掌握和切断潜在的传播途径,有助于ASF的预防和控制。目前,ASFV的遗传分型主要通过表... 详细信息

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、烈性和高度接触性传染病,严重危害全球养猪业。ASFV基因分型可以从分子水平追溯疫情病毒的来源,掌握和切断潜在的传播途径,有助于ASF的预防和控制。目前,ASFV的遗传分型主要通过表征编码p72衣壳蛋白的B646L基因来实现,随后再通过几个特定的遗传标志基因对B646L基因型相同的ASFV进行进一步细分,包括编码p54包膜蛋白的E183L基因、编码毒力因子的I73R/I329L基因、与致病性相关的多基因家族MGF5059R/10R基因和编码p72蛋白分子伴侣的B602L基因等。这些基因分型方式对于追溯病毒起源,快速区分密切相关的毒株具有重要意义。本文就几类主要的ASFV基因分型方法进行简单概述,以期为我国ASFV诊断技术和遗传演变研究提供参考。

关键词：非洲猪瘟病毒 B646L E183L I73R/I329L MGF5059R/10R B602L

日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响

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中国饲料 2024年第13期 76-79页

作者：陈敏艳安加俊贾培龙陕西省动物疫病预防控制中心陕西西安710016 咸阳市动物疫病预防控制中心陕西咸阳713899

为研究日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响,试验选取体重相近、70日龄的健康西门塔尔牛犊牛共18头,随机分为对照组、试验I组、试验II组。试验I组和II组分别在基础日粮基础上,额外添加1.5 g和3 ... 详细信息

为研究日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响,试验选取体重相近、70日龄的健康西门塔尔牛犊牛共18头,随机分为对照组、试验I组、试验II组。试验I组和II组分别在基础日粮基础上,额外添加1.5 g和3 g益生菌,试验60 d。结果表明:(1)试验II组犊牛平均日增重较对照组提高了18.31%(P 0.05)。(2)血液生化指标中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、胆固醇和甘油三酯各组之间差异不显著(P> 0.05);试验II组Ig G和IL-6等免疫指标较对照组分别提高了26.08%和20.17%(P 0.05)。(3)试验II组瘤胃氨态氮和丁酸含量较对照组分别提高了49.85%和45.17%,乙酸含量降低了34.24%(P 0.05)。以上结果表明,犊牛日粮中添加复合益生菌能够促进犊牛的生长性能,提高免疫功能和瘤胃发酵功能。本试验中,以添加3 g/(头·d)的复合益生菌较适宜。

关键词：犊牛复合益生菌生长性能免疫瘤胃发酵

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非洲猪瘟病毒感染调控炎症反应机制的研究进展

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中国预防兽医学报 2024年第6期46卷 653-658页

作者：许凤明杨作丰山东省单县动物疫病预防控制中心山东单县274300 辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁沈阳110164

炎症反应是一种常见的病理过程,可发生在机体各组织中,是机体识别危险信号并激活天然免疫系统的重要途径。作为一种自我保护机制,机体内产生的炎症反应能够在一定程度上清除不利于机体的刺激信号,但一旦超过机体可承受的范围,炎症反应... 详细信息

炎症反应是一种常见的病理过程,可发生在机体各组织中,是机体识别危险信号并激活天然免疫系统的重要途径。作为一种自我保护机制,机体内产生的炎症反应能够在一定程度上清除不利于机体的刺激信号,但一旦超过机体可承受的范围,炎症反应则会破坏机体的平衡,加剧炎症效应,最终引发疾病。非洲猪瘟(Africanswinefever,ASF)是一种高度传染性疾病,其致死率接近100%,自发现以来已给全球养猪业造成重大经济损失。其病原非洲猪瘟病毒(ASFV)感染后可观察到宿主淋巴结组织单核细胞严重破碎,扁桃体等免疫相关组织内单核细胞/巨噬细胞的数量增加,并检测到促炎细胞因子的过量表达,尤其是TNF-α和IL-1,这种现象的发生同时伴随着淋巴细胞的凋亡[1-2]。

关键词：重大经济损失非洲猪瘟病毒刺激信号传染性疾病养猪业淋巴结组织天然免疫系统自我保护机制