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大肠杆菌多酚氧化酶的分子克隆及异源高效表达

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中国饲料 2024年第5期 26-31页

作者：邓卉余丹邹成义范景胜李斌屈东倪青松郑钰嘉陈瑾四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室四川成都610066

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB... 详细信息

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB2多酚氧化酶基因,实现其高效表达,为SDB2多酚氧化酶在饲料工业上的规模化应用奠定基础。从大肠杆菌SDB2中克隆出多酚氧化酶基因,将其与质粒pET28a连接后转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中培养,通过PCR鉴定及质粒酶切验证方法构建重组菌株,同时对重组克隆基因进行生物信息学分析。采用“2×2”交叉试验设计,以温度和诱导剂IPTG浓度两个影响因素诱导SDB2多酚氧化酶基因在重组菌株中高效表达,经SDS-PAGE和WB双重验证后,确立最佳诱导条件,最终纯化出目标酶蛋白。结果表明:(1)成功克隆SDB2多酚氧化酶基因,构建出异源表达重组菌株。(2)克隆出的SDB2重组多酚氧化酶基因含目标核苷酸741个,总编码氨基酸263个(含标签氨基酸20个),氨基酸组成的蛋白相对分子质量为28499.0,理论等电点为6.94,据此预测出SDB2重组多酚氧化酶三维结构模型。(3)确立SDB2多酚氧化酶异源高效表达的最佳诱导条件为温度37℃,IPTG浓度1 mmol,该条件下表达出大量可溶性酶蛋白,有利于工业化生产。本试验条件下,大肠杆菌SDB2多酚氧化酶成功实现了分子克隆及异源高效表达,为我国非粮饲料资源实现高效利用提供了技术参考。

关键词：大肠杆菌多酚氧化酶克隆高效表达

日粮中不同浓度维生素E对高温高湿下蜀宣花公牛生理指标及血清生化指标的影响

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江苏农业科学 2024年第3期52卷 207-212页

作者：石溢易军甘佳方东辉贺芳阿果约达邓小东马晓琴付茂忠王巍四川省畜牧科学研究院/动物遗传育种四川省重点实验室四川成都610066

为研究日粮中添加不同浓度维生素E对夏季蜀宣花公牛生理指标和血清生化指标的影响,采用单因子设计,选用年龄、体质量[(450±21)kg]相近、健康无病的蜀宣花公牛16头,随机分成A、B、C、D组在日粮中添加不同浓度维生素E(0、200、300、400 I... 详细信息

为研究日粮中添加不同浓度维生素E对夏季蜀宣花公牛生理指标和血清生化指标的影响,采用单因子设计,选用年龄、体质量[(450±21)kg]相近、健康无病的蜀宣花公牛16头,随机分成A、B、C、D组在日粮中添加不同浓度维生素E(0、200、300、400 IU/kg)。结果表明:(1)B、C、D组30 d和60 d呼吸频率均显著低于A组(P宜添加水平为400 IU/kg。

关键词：维生素E 蜀宣花牛热应激

用于延性材料力学性能测定的圆柱平面-小冲杆试验新方法与应用

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机械工程学报 2024年第4期60卷 316-325页

作者：周甜蔡力勋韩光照西南交通大学应用力学与结构安全四川省重点实验室成都610031

针对均匀、各向同性、幂律硬化的金属材料圆片试样,以圆柱平面小冲杆对试样圆面中心法向施加压载荷,提出基于能量密度等效的、用于描述试样几何尺寸、材料本构关系参数、载荷和位移之间关系的圆柱平面-小冲杆试验(Flat small punch test... 详细信息

针对均匀、各向同性、幂律硬化的金属材料圆片试样,以圆柱平面小冲杆对试样圆面中心法向施加压载荷,提出基于能量密度等效的、用于描述试样几何尺寸、材料本构关系参数、载荷和位移之间关系的圆柱平面-小冲杆试验(Flat small punch test,F-SPT)弹塑性模型,并提出获取材料应力-应变曲线和力学性能指标的F-SPT新方法。通过有限元分析对不同弹性模量、屈服强度和硬化指数组合的48种预设材料进行新方法的数值验证,以及对10种金属材料完成F-SPT,结果表明,由新方法获得的应力-应变曲线与有限元分析预设曲线和传统单轴拉伸试验结果吻合良好,此外,由新试验方法获得的弹性模量、屈服强度和抗拉强度与单轴拉伸试验结果误差大部分低于7%。

关键词：小冲杆试验能量密度等效幂律硬化材料应力-应变关系力学性能

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“双减”政策落地的结构化困境与破解

复旦教育论坛 2024年第2期22卷 99-105页

作者：杨燕中共四川省委党校经济学教研部四川成都610072

“双减”政策正式发布已两年有余,国内开始更多地就该政策的落实落地情况开展大样本调查,但数据分析整体上还偏重于呈现表象问题。本研究尝试从经典的“结构-行动”理论出发,进一步深挖“双减”政策落地中的结构化困境。研究首先从政策... 详细信息

“双减”政策正式发布已两年有余,国内开始更多地就该政策的落实落地情况开展大样本调查,但数据分析整体上还偏重于呈现表象问题。本研究尝试从经典的“结构-行动”理论出发,进一步深挖“双减”政策落地中的结构化困境。研究首先从政策本身出发,然后基于11个大样本调查,分别从顶层设计和实践两个层面分析当前凸显出的新问题、新怪象背后的深层次问题。研究发现:地方教育部门面临着上级政府部门自身实际操作偏离政策设定初心的问题;学校管理者和教师肩负着“既要、又要、还要”的多重期望;家长面临着“表面利好,实际难以做到”的困境。研究建议:在顶层设计层面,首先要从“双减”政策的根本意图出发,用中长期的工作目标与推进机制引领地方政府、教育部门和学校的行动;在实践层面,应着重于合力纾解家长的教育焦虑。

关键词： “双减”政策社会结构 “结构-行动”理论大样本调查

深地工程多维信息感知与智能建造的发展与展望

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煤炭学报 2024年第3期49卷 1259-1290页

作者：张茹吕游张泽天任利谢晶张安林严志伟米欧四川大学水利水电学院四川成都610065 四川大学深地工程智能建造与健康运维全国重点实验室四川成都610065 四川大学深地科学与工程教育部重点实验室四川成都610065 四川大学山区河流保护与治理全国重点实验室四川成都610065

随着大数据、云计算、人工智能等数字技术的加速演进,各领域智能化、信息化、数字化已成为未来的大势所趋。深地工程作为国家重大战略科技问题,必然面临智能化升级。然而,深部岩体“三高一扰动”的复杂特征给深地工程智能化转型带来严... 详细信息

随着大数据、云计算、人工智能等数字技术的加速演进,各领域智能化、信息化、数字化已成为未来的大势所趋。深地工程作为国家重大战略科技问题,必然面临智能化升级。然而,深部岩体“三高一扰动”的复杂特征给深地工程智能化转型带来严峻的挑战。为实现深地工程与数字技术的高效融合,研究基于“感知-传送-解译-分析-决策”的智能化实践路径,系统回顾了地下工程中智能感知、实时传输、信息解译、数据分析、智能决策等领域的代表性研究进展,并针对性提出了“多感知、快响应、大数据、优方法、精模型、强平台、易推广”的深地工程智能建造发展方向。研究表明:①前沿的深地工程感知技术包括:光纤传感器、MEMS传感器、计算机视觉、自动化机器人等,待数据采集完毕后,通过兼具配置简单、容错能力强、可移动性好等优点的无线通信协议完成数据的实时响应,以实现深地工程监测数据的精准感知与实时传输;②深地工程原位监测技术获取的数据类型主要包括图像、波、点云等,对原始数据解译及分析的模型众多,采用新一代的人工智能技术,如:人工神经网络和深度学习技术,可显著提高解译与分析的效率;③智能决策系统具备高效的学习能力,能够适应复杂环境下的不确定性,通过循环自主学习,以进行决策问题的智能解答。当前,我国深地工程智能建造的政策与产业体系已基本建立,大量智能建造系统已应用于实践。基于此,从智能感知与信息解译、围岩评价及安全评估、围岩控制与动态修复、平台开发及应用推广等4个方面展望了数智化深地工程的发展方向,进而构建了基于多源信息的深地工程围岩稳定性综合评价与分析系统构想。

关键词：深地工程人工智能实时响应信息解译数据分析智能决策

黑水县彩林观赏期预报模型构建及时空变化研究

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西南林业大学学报（自然科学） 2024年第3期44卷 71-79页

作者：邹雨伽李淑静张玉芳王鑫南方丘区节水研究四川省重点实验室四川成都610066 四川省农业气象中心四川成都6100723 四川省阿坝藏族羌族自治州黑水县气象局四川阿坝623500 北京师范大学北京100089

利用黑水县2008—2020年彩林物候期观测和同步气象资料,筛选影响彩林变色日序的关键气象因子,通过多元回归等数理方法建立月尺度的彩林观赏期短期气候预测模型和未来10 d的彩林观赏期中期气象预报模型并进行检验,依托GIS平台及多年平均... 详细信息

利用黑水县2008—2020年彩林物候期观测和同步气象资料,筛选影响彩林变色日序的关键气象因子,通过多元回归等数理方法建立月尺度的彩林观赏期短期气候预测模型和未来10 d的彩林观赏期中期气象预报模型并进行检验,依托GIS平台及多年平均气象数据模拟黑水县彩林变色日序时空分布。结果表明:黑水县彩林平均于9月28日、10月16日分别进入始红、盛红状态;彩林始红日序与7月的月平均气温、月平均最高气温显著正相关,与7月累计降水量显著负相关;彩林盛红日序与7月累计降水量显著负相关,与8月平均最低气温显著正相关;彩林进入始红及盛红状态日序与前10 d各气象要素均不显著相关;彩林观赏指数与前10 d平均气温、平均最高气温、平均最低气温、平均相对湿度、累计降水量呈显著负相关,与平均气温日较差、累计日照时数呈显著正相关;彩林观赏期日序整体随海拔高度由东南向西北倾斜攀升而提前,在10月10日前全县彩林均进入始红状态。本研究通过相关气象因子建立黑水县彩林短期气候预测模型及中期气象预报模型,检验认为彩林观赏期短期气候预测模型在彩林始红及盛红状态预测中具有较高准确性和可操作性,中期气象预报模型仅适用于彩林始红状态的预测。

关键词：黑水县彩林观赏期温度时空变化预测模型

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以柠檬果胶凝胶为基质的脂肪替代物的制备及其对黄油流变性的影响

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食品与发酵工业 2024年第9期50卷 99-105页

作者：何雨婕张巧李贤雷激西华大学食品与生物工程学院四川成都610039 川渝共建特色食品重庆市重点实验室四川成都610039 食品微生物四川省重点实验室四川成都610039

针对果胶凝胶为基质的脂肪替代物易脱水聚集导致其质量不稳定的问题,该研究在微粒化处理的柠檬果胶凝胶基础上探讨不同惰性外相的添加对凝胶质构及流变特性的影响,以制备稳定的脂肪替代物并将其应用于黄油中,探究对黄油流变性的影响,为... 详细信息

针对果胶凝胶为基质的脂肪替代物易脱水聚集导致其质量不稳定的问题,该研究在微粒化处理的柠檬果胶凝胶基础上探讨不同惰性外相的添加对凝胶质构及流变特性的影响,以制备稳定的脂肪替代物并将其应用于黄油中,探究对黄油流变性的影响,为制备黄油的脂肪替代物提供依据。结果表明选择质量分数为0.4%的羧甲基纤维素钠(sodium carboxyme thyl cellulose,CMC)为惰性外相制备的复配凝胶脱水率为0%且未发生聚集现象,此时凝胶体系最为稳定,且满足脂肪替代物的粒径要求;黄油流变性结果提示最佳的脂肪替代物取代率介于20%~30%。综上,微粒化果胶凝胶中添加惰性外相是制备稳定的脂肪替代物的关键,适量CMC作为惰性外相可有效控制果胶凝胶微粒化后的聚集脱水现象;该脂肪替代物部分替代黄油后能够保持黄油的流变特性,该结果为柠檬果胶凝胶为基质的脂肪替代物的制备和应用提供了理论支持。

关键词：惰性外相复配凝胶脂肪替代物黄油流变性

基于OOD泛化性验证和深度全连接神经网络的泥石流易发性评价方法

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工程科学与技术 2024年第4期56卷 182-193页

作者：郭鹏宁邢会歌李从江吴雨鑫李海波四川大学建筑与环境学院四川成都610065 四川大学水利水电学院四川成都610065 四川大学山区河流保护与治理全国重点实验室四川成都610065

提升易发性评价精度有助于山区泥石流灾害早期的识别和监测预警。大部分机器学习模型在训练、测试集合上表现良好,但实际应用过程精度较差,不利于工程选址规划和防灾减灾,如何提高机器学习模型评价精度与泛化性具有重要意义。选取深度... 详细信息

提升易发性评价精度有助于山区泥石流灾害早期的识别和监测预警。大部分机器学习模型在训练、测试集合上表现良好,但实际应用过程精度较差,不利于工程选址规划和防灾减灾,如何提高机器学习模型评价精度与泛化性具有重要意义。选取深度全连接神经网络,与梯度提升树、随机森林模型和贝叶斯网络等机器学习方法共同进行模型精确性评价和OOD(out-of-distribution)泛化性验证,从而找出在训练、预测和应用中均具有较高精度的方法。以四川省雅安市为例,采用小流域单元进行区域网格划分,将数据集合按7∶3比例随机分为训练集和测试集,使用经验法则(3-sigma)剔除异常数据,并基于多变量(Iterative Imputer)和K-近邻法对缺失值填充进行泥石流灾害易发性评价。在泥石流易发性因子的共线性、敏感性和预测能力的分析结果基础上,选定14个易发性因子构建模型评价指标体系,进行泥石流易发性评价与对比。通过对模型的精确性评价及OOD泛化性验证发现:深度全连接神经网络模型曲线下的面积(AUC)、准确率(Acc)、召回率(Recall)的值比梯度提升树等的计算结果分别超出了0.027、0.02、0.02,而平均绝对值误差(MAE)降低了0.003;OOD泛化性验证准确度超出了0.056。研究表明,深度全连接神经网络对于泥石流易发性评价的预测效果较好,能够提高泥石流评价的精度,增加评价的适应性,可为泥石流易发性评价提供新思路。

关键词：泥石流灾害易发性评价深度学习算法 OOD泛化性验证深度全连接神经网络

基于Unity3D的立体复合高速公路标志系统优化设计

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华南理工大学学报（自然科学版） 2024年第5期52卷 20-30页

作者：高龙凯赵晓华欧居尚李洋刘祥敏刘琪琪北京工业大学城市建设学部北京100124 四川警察学院智能警务四川省重点实验室四川泸州646000 北京警察学院道路交通管理系北京102202

高速公路改扩建后增加两侧立体层可以提高通行能力,但互通立交处常常会出现间距过短、流量过大、分流过多等问题,进而导致现有的交通标志无法满足驾驶人的指路需求。针对此问题,以深圳机荷高速为例,在常规标准方案基础上,设计了4种匝道... 详细信息

高速公路改扩建后增加两侧立体层可以提高通行能力,但互通立交处常常会出现间距过短、流量过大、分流过多等问题,进而导致现有的交通标志无法满足驾驶人的指路需求。针对此问题,以深圳机荷高速为例,在常规标准方案基础上,设计了4种匝道指引标志提升方案,并使用Unity3D引擎开发出了相对应的立体复合高速公路互通场景,高速公路上的车辆第1次分流时驶出地面层,第2次分流可以驶入立体层,第3次分流接入其他互通高速。28名驾驶人使用外接交互设备在不同的场景中进行模拟驾驶,实验采集到了速度、加速度、车道位置等驾驶行为数据。通过计算不同指引标志设计方案中各影响区段内指标的逐点显著性,呈现出了各指标空间维度上的差异性,进一步分析表明,增加预告层级设置3 km预告标志能够帮助驾驶人及早感知前方匝道状况;设置车道指引标志可以提升车辆在匝道处的纵向和横向稳定性,便于驾驶人采取更好的换道策略;导航语音辅助能够提升驾驶人在立体复合高速公路匝道处的速度控制水平、出口换道意识和心理舒适程度。研究表明,Unity3D保真度高、交互性好、成本低,可以为复杂道路场景中驾驶行为的相关研究提供技术支持。同时,该研究也为高速公路改扩建工程交通指引标志设立提供了理论参考。

关键词：高速公路互通立交交通标志驾驶行为 Unity3D