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兔防御素基因NP-1的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医 2012年第9期39卷 7-11页

作者：秦晓玉彭章华董晓苗向阳罗庆苗中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 青岛农业大学山东青岛266109 四川泸县畜牧局四川泸州646100

选用大肠杆菌偏嗜性的密码子对兔防御素基因NP-1进行改造,人工合成编码NP-1成熟肽的基因片段,并将其克隆到T-easy载体上,再经双酶切后重组于原核表达载体pMAL-p2X。经IPTG诱导后,在大肠杆菌TB1中融合表达出兔防御素NP-1成熟肽。

关键词：畜牧学防御素融合蛋白表达

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标准化生产模式下两种牦牛肉质特性比较研究

黑龙江畜牧兽医 2020年第21期 149-153页

作者：吴锦波何世明李铸余忠华蹇尚林罗光荣阿坝藏族羌族自治州畜牧科学技术研究所四川红原624402 阿坝藏族羌族自治州畜牧工作站四川马尔康624099 四川省龙日种畜场四川红原624401

为了探究标准化生产体系下两种牦牛的肉质特性,试验选取了年龄和体重相近的麦洼牦牛和金川牦牛各15头,按照标准化生产技术规范饲养100 d后进行屠宰,采集背最长肌和股二头肌样品测定并分析pH值、水分、氨基酸等20种肉质特性指标。结果表... 详细信息

为了探究标准化生产体系下两种牦牛的肉质特性,试验选取了年龄和体重相近的麦洼牦牛和金川牦牛各15头,按照标准化生产技术规范饲养100 d后进行屠宰,采集背最长肌和股二头肌样品测定并分析pH值、水分、氨基酸等20种肉质特性指标。结果表明:两种牦牛鲜肉pH值呈弱酸性;麦洼牦牛和金川牦牛肌肉挥发性盐基氮的含量分别为6.08 mg/100 g和5.83 mg/100 g;麦洼牦牛和金川牦牛肌肉滴水损失率分别为2.36%和1.77%;麦洼牦牛肉熟肉率为73.20%,低于金川牦牛肉的74.18%(P>0.05);两种牦牛肉脂肪色泽、组织状态、气味和肉眼可见物等感官指标均正常;均在两种牦牛肉中检测出了17种氨基酸,麦洼牦牛肉氨基酸总量为19.78%,略高于金川牦牛肉的19.60%(P>0.05);两类牦牛肉EAA/TAA值接近40%,EAA/NEAA值均高于60%。说明氨基酸组成较优;两种牦牛肉中未检出维生素A;麦洼牦牛肉维生素B1和维生素B2含量极显著高于金川牦牛(P川牦牛(P<0.05)。

关键词：标准化生产牦牛肉肉质麦洼牦牛金川牦牛

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颗粒物对动物肠-肺轴的影响及缓解策略

动物营养学报 2023年第12期35卷 7530-7540页

作者：周莹李绍钰河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州450002

畜禽舍内的颗粒物(PM)严重损害动物和工作人员的呼吸系统,且粒径越小,危害越大。颗粒物可破坏肺部组织结构,诱导肺部炎症损伤,改变肺部菌群组成。颗粒物也会导致肠道菌群紊乱,增加肠道通透性,造成肠道菌群容易移位或肠源性代谢产物通过... 详细信息

畜禽舍内的颗粒物(PM)严重损害动物和工作人员的呼吸系统,且粒径越小,危害越大。颗粒物可破坏肺部组织结构,诱导肺部炎症损伤,改变肺部菌群组成。颗粒物也会导致肠道菌群紊乱,增加肠道通透性,造成肠道菌群容易移位或肠源性代谢产物通过肠-肺轴影响肺脏损伤的发展。降低畜禽舍内颗粒物的危害可以通过安装过滤系统、通风、空气电离等物理方法,也可以通过饲料加工和添加绿色添加剂的营养调控方法。本文主要综述颗粒物对动物肠-肺轴的影响,并从物理方法、饲料加工和营养调控方法等方面来探讨颗粒物对动物影响的缓解策略,以期寻找有效的缓解颗粒物影响动物健康的措施。

关键词：颗粒物肠道菌群肺脏损伤肠-肺轴缓解策略

猪圆环病毒3型四川株Cap蛋白的截短表达及其抗体间接ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医 2024年第7期51卷 3056-3066页

作者：欧云文潘琴汪洋代军飞任绍科张洋翟佳佳张杰开江县动物疫病预防控制中心达州636250 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室兰州730046 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室秦皇岛066004

【目的】原核截短表达猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)四川株Cap蛋白(1-197位氨基酸),并建立其抗体间接ELISA检测方法,为PCV3血清学调查提供材料。【方法】以PCV3四川分离株基因组为模板,PCR扩增获得Cap蛋白编码基因片段... 详细信息

【目的】原核截短表达猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)四川株Cap蛋白(1-197位氨基酸),并建立其抗体间接ELISA检测方法,为PCV3血清学调查提供材料。【方法】以PCV3四川分离株基因组为模板,PCR扩增获得Cap蛋白编码基因片段,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中构建重组质粒pET30a-PCV3-Cap。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析纯化,获得具有良好抗原性的重组Cap蛋白。基于纯化的重组Cap蛋白建立间接ELISA方法,确定最佳抗原包被浓度、待检血清最佳稀释比例、酶标抗体稀释比例和阴阳性临界值,对间接ELISA方法的特异性、敏感性、重复性、相关性和符合率进行分析,并对2018-2022年采自川东北地区猪场的351份临床猪血清进行检测,分析该区域PCV3流行情况。【结果】试验成功构建pET30a-PCV3-Cap重组表达载体,实现重组Cap蛋白(1-197位氨基酸)的原核截短表达,蛋白大小约为26 ku,可与PCV3阳性猪血清发生特异性反应;确定最佳抗原包被浓度为1 ng/μL,待检血清最佳稀释比例为1∶100,酶标抗体稀释比例为1∶60000,阴阳性临界值D_(450 nm)为0.684;建立的间接ELISA方法与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)和猪细小病毒1型(PPV1)阳性猪血清均不发生交叉反应,敏感度达1∶1600,批内变异系数和批间变异系数均川东北地区的351份猪血清样品阳性率为7.12%。【结论】本研究成功截短表达了PCV3四川株Cap蛋白(1-197位氨基酸),建立了特异性强、灵敏度高、重复性好和符合率高的PCV3间接ELISA方法,为PCV3的血清学调查和检测试剂盒的开发提供了材料。

关键词：猪圆环病毒3型(PCV3) Cap蛋白截短表达 ELISA

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野猪白细胞抗原DQB外显子2核苷酸多态性研究

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畜牧与兽医 2013年第5期45卷 30-32页

作者：董高华徐怀亮姚永芳黄晓峰重庆市开县畜牧兽医局重庆开县405400 四川农业大学动物科技学院四川雅安625014

采用DNA测序技术测定了15头野猪235 bp的SLA-DQB基因外显子2序列,结合GenBank中报道的另外3头野猪和18头家猪共36头个体的相应序列,重点进行野猪SLA-DQB外显子2的核苷酸多态性分析。结果:18头野猪中检出26个变异位点,其中2个为单变异位... 详细信息

采用DNA测序技术测定了15头野猪235 bp的SLA-DQB基因外显子2序列,结合GenBank中报道的另外3头野猪和18头家猪共36头个体的相应序列,重点进行野猪SLA-DQB外显子2的核苷酸多态性分析。结果:18头野猪中检出26个变异位点,其中2个为单变异位点,24个为简约信息位点。同时发现7个野猪群体所特有多态位点,占野猪突变位点总数的26.92%;野猪235 bp的SLA-DQB基因外显子2序列的非同义突变率较高,占总突变位点总数的84.62%;野猪的单倍型多样度为(0.971±0.027),核苷酸多样度为(0.034 69±0.005 89)。用Kimura双参数法计算野猪种群内个体的平均遗传距离为0.037,野猪种群和家猪种群间的平均遗传距离为0.053。这些结果表明野猪SLA-DQB外显子2具有较丰富的核苷酸多态性;在家猪品种改良中,野猪具有潜在的遗传价值。

关键词： SLA-DQB 遗传多样性野猪外显子2

同时产碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的猪源大肠埃希氏菌的鉴定及耐药性研究

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生物技术通报 2022年第9期38卷 106-115页

作者：李海利郎利敏张青娴游一朱文豪王治方张立宪王克领河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州450002

为了解携带碳青霉烯酶NDM-1及其亚型在猪场的流行情况,对来自猪场产房仔猪腹泻病例分离鉴定的87株大肠杆菌进行了碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的耐药基因扩增及测序。从87株大肠杆菌中分离鉴定出一株同时携带碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的大肠埃... 详细信息

为了解携带碳青霉烯酶NDM-1及其亚型在猪场的流行情况,对来自猪场产房仔猪腹泻病例分离鉴定的87株大肠杆菌进行了碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的耐药基因扩增及测序。从87株大肠杆菌中分离鉴定出一株同时携带碳青霉烯酶NDM-1和NDM-5的大肠埃希菌(Escherichia coli),并命名为HN2106。为深入了解HN2106全基因组及其携带的质粒和耐药基因情况,对NH2106进行了16S rRNA菌种鉴定,bla耐药基因确认,全基因组测序,应用BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析。结果显示,该菌株含有7个质粒(plasmid A、plasmid B、plasmid C、plasmid D、plasmid E、plasmid F 和plasmid G),3种类型,分别为Col、IncFII、IncQ1。同时携带NDM-1和NDM-5基因,属B族β-内酰胺酶,其中bla位于质粒pNDM-HN2106(plasmid C)上,bla位于质粒pNDM5-HN2106(plasmid B)上,分别介导bla和bla耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。全基因组耐药基因预测HN2106同时还携带21种类型的抗生素耐药基因。对HN2106菌株进行了85种抗菌药物敏感性测试,结果显示,HN2106菌株对亚胺培南、青霉素G等均耐药,对磺胺甲恶唑、头孢美唑等敏感。研究结果表明,养殖场NDM-1耐药质粒是NDM-1及其亚型耐药基因的重要载体,对养殖产业健康养殖和公共卫生安全带来较大隐患和威胁,应加强抗菌药物的合理应用和感染的防控措施,重视细菌耐药性的监测工作,以期为临床耐药菌株感染的防治提供理论参考。

关键词：碳青霉烯酶 NDM-1 NDM-5 大肠埃希氏菌细菌耐药

苜蓿黄酮对奶牛泌乳性能、血清激素和免疫指标的影响

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中国农业大学学报 2018年第12期23卷 84-90页

作者：占今舜胡利珍钟小军霍俊宏谷德平江西省农业科学院畜牧兽医研究所南昌330200

为研究苜蓿黄酮对奶牛产奶性能、血清激素和免疫指标的影响,选择4头装有瘘管的头胎荷斯坦奶牛,采用4×4拉丁方设计,每组奶牛饲喂混合日粮中分别添加0g(Ⅰ组)、20g(Ⅱ组)、60g(Ⅲ组)和100g(Ⅳ组)的苜蓿黄酮。试验分4期,每期24d。结果表明... 详细信息

为研究苜蓿黄酮对奶牛产奶性能、血清激素和免疫指标的影响,选择4头装有瘘管的头胎荷斯坦奶牛,采用4×4拉丁方设计,每组奶牛饲喂混合日粮中分别添加0g(Ⅰ组)、20g(Ⅱ组)、60g(Ⅲ组)和100g(Ⅳ组)的苜蓿黄酮。试验分4期,每期24d。结果表明:1)奶牛的干物质采食量随苜蓿黄酮含量的升高呈二次曲线变化,其中试验Ⅲ组显著高于试验Ⅰ和Ⅳ组(P四碘甲状腺原氨酸浓度随苜蓿黄酮含量的升高呈线性升高,其中试验Ⅳ组显著高于试验Ⅰ组(P<0.05);3)试验Ⅱ组的CD 4+数量和CD 4+/CD 8+均显著高于其他各组(P<0.05),而CD 8+数量则相反;4)试验Ⅱ组淋巴细胞的白介素4基因、干扰素γ基因和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因的相对表达量均显著高于其他各组(P<0.05)。因此,适量添加苜蓿黄酮能够提高奶牛的采食量,调节机体激素分泌和免疫性能,添加60g的效果较好。

关键词：奶牛黄酮苜蓿激素免疫性能泌乳性能

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鸭坦布苏病毒病的研究进展

畜牧兽医学报 2021年第6期52卷 1489-1497页

作者：张帆帆曾艳兵方绍培李海琴康昭风谭美芳谭佳杨群韦启鹏江西省农业科学院畜牧兽医研究所南昌330200

鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)引起的一种新发的病毒性传染病,以产蛋鸭产蛋量严重下降和雏鸭或育成鸭出现神经症状为主要特征。自从2010年首次暴发以来,鸭坦布苏病毒给我国养鸭业带来了巨大的经济损失。本... 详细信息

鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)引起的一种新发的病毒性传染病,以产蛋鸭产蛋量严重下降和雏鸭或育成鸭出现神经症状为主要特征。自从2010年首次暴发以来,鸭坦布苏病毒给我国养鸭业带来了巨大的经济损失。本文从病原学、流行病学、天然免疫应答以及病毒的诊断与防控等方面对DTMUV进行综述,为今后该疾病的诊断和预防提供科学依据。

关键词：鸭坦布苏病毒(DTMUV) 流行病学天然免疫应答诊断与防控

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印记基因在孤雌生殖方面的研究进展

中国畜禽种业 2024年第1期20卷 36-41页

作者：彭晟坤张子敬张格阳张志浩闵佳李欣淼王香南施巧婷祁兴山黄永震李惠侠王二耀河南省农业科学院畜牧兽医研究所/河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室河南郑州450002 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095 河南农业大学动物科技学院河南郑州450002 西北农林科技大学动物科技学院陕西西安712199 泌阳县夏南牛科技开发有限公司河南驻马店463700

孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能... 详细信息

孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能够通过孤雌生殖发育为正常个体的实例极为罕见。该文介绍了孤雌激活的方式,孤雌胚胎获取方式和印记基因在孤雌生殖中的应用,以期为未来孤雌生殖的相关应用提供思路。

关键词：孤雌生殖印记基因孤雌激活孤雌胚胎