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MALDI-TOF MS对草莓中铜绿假单胞菌和黏质沙雷氏菌的检测

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食品科学技术学报 2018年第4期36卷 105-110页

作者：魏超代晓航郭灵安刘炜四川省农业科学院分析测试中心四川成都610066

为了评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)在草莓微生物风险监测的应用价值,确定草莓的危害识别微生物及其特征,采用选择性培养方法对50份草莓样品中铜绿假单胞菌和黏质沙雷氏菌进行分离,MALDI-TOF MS对分离微生物进... 详细信息

为了评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)在草莓微生物风险监测的应用价值,确定草莓的危害识别微生物及其特征,采用选择性培养方法对50份草莓样品中铜绿假单胞菌和黏质沙雷氏菌进行分离,MALDI-TOF MS对分离微生物进行鉴定,应用SARAMIS Premium软件对这2种食物感梁性病原微生物的蛋白质图谱进行分析和加权修正。结果表明,铜绿假单胞菌在草莓中的检出率为18%,黏质沙雷氏菌检出率为20%,实验获得草莓中分离铜绿假单胞菌完全拟合特征峰12组,标识峰聚类分析结果表明,分离铜绿假单胞菌差异较大;获得草莓分离黏质沙雷氏菌完全拟合特征峰有8组,标识峰加权聚类分析结果可认定分离的2株黏质沙雷氏菌同源。MALDI-TOF MS方法可标识草莓分离微生物的蛋白质特异性特征,且对微生物的溯源及特异性分析有一定优势,表明其在农产品复杂微生物环境中具有应用潜力。

关键词： MALDI-TOF MS 草莓铜绿假单胞菌黏质沙雷氏菌标识峰

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转Bt基因棉秸秆还田利用对土壤肥力的影响

中国生态农业学报（中英文） 2020年第5期28卷 734-744页

作者：张富丽尹全毛建霏郭灵安雷绍荣刘文娟罗苹王东宋君杨晓凤四川省农业科学院分析测试中心成都610066

随着转基因的快速发展,大量转Bt棉秸秆的合理利用和处理是不可忽视的重要课题之一。为明确Bt棉秸秆还田利用的可行性和安全性,本研究以不同抗虫转Bt基因棉和常规棉花‘泗棉3号’为研究材料,在分别种植1、2年后将秸秆机械粉碎后原位还田... 详细信息

随着转基因的快速发展,大量转Bt棉秸秆的合理利用和处理是不可忽视的重要课题之一。为明确Bt棉秸秆还田利用的可行性和安全性,本研究以不同抗虫转Bt基因棉和常规棉花‘泗棉3号’为研究材料,在分别种植1、2年后将秸秆机械粉碎后原位还田,测试土壤中Bt蛋白残留量、土壤酶活性及养分含量的变化,分析Bt棉秸秆原位还田对土壤肥力特性的影响。研究结果表明,秸秆还田40 d后,Bt棉样地土壤中Bt残留蛋白检测值较低,均与非转基因棉样地无显著性差异。棉秸秆还田后,土壤脲酶、蔗糖酶、蛋白酶、多酚氧化酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶活性皆较秸秆还田前增加,但土壤纤维素酶活性较之前降低。棉秸秆还田使土壤中有机质、有效磷、碱解氮、速效钾和全氮等养分含量及pH明显增加,而Bt抗虫棉与常规棉秸秆还田后对土壤肥力的影响不存在显著差异。对土壤综合肥力指数评价结果表明,秸秆还田对土壤肥力提升与Bt棉抗虫水平无关,土壤肥力指数在两年间由Ⅲ级水平上升至Ⅱ级水平。综上,Bt棉花秸秆还田不会造成土壤综合肥力降低,相反能有效提升土壤肥力;同时还田利用措施可对转基因植株有效灭活,与转基因植物秸秆利用和无害化处理要求相契合。生产中用于Bt转基因棉花秸秆利用和处理在一定程度上是安全可行的。

关键词：转Bt基因棉秸秆还田转基因植物 Bt蛋白残留土壤肥力

两个玉米品种维管束鞘叶绿体的非光化学淬灭对干旱胁迫的响应

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中国农业科学 2020年第8期53卷 1532-1544页

作者：刘文娟常丽娟岳丽杰宋君张富丽王东吴佳蔚郭灵安雷绍荣四川省农业科学院分析测试中心四川省农业科学院作物研究所

【目的】光系统Ⅱ的非光化学叶绿素荧光淬灭是高等植物响应环境变化最快速的光保护机制,玉米具备叶肉和维管束鞘2种叶绿体结构,本研究通过比较2个玉米品种的光合耐旱能力,探究维管束鞘叶绿体的非光化学淬灭对玉米耐旱性的意义。【方法... 详细信息

【目的】光系统Ⅱ的非光化学叶绿素荧光淬灭是高等植物响应环境变化最快速的光保护机制,玉米具备叶肉和维管束鞘2种叶绿体结构,本研究通过比较2个玉米品种的光合耐旱能力,探究维管束鞘叶绿体的非光化学淬灭对玉米耐旱性的意义。【方法】以成单30和仲玉3号2个玉米品种为研究材料,设置土壤相对含水量为70%—80%田间持水量(FWC)(充足浇水,对照)、50%—60%FWC(中度干旱胁迫)和35%—45%FWC(重度干旱胁迫)3个土壤水分梯度处理。测定玉米叶片的水分状况、叶绿素含量、活性氧积累、质膜透性和气体交换等参数;应用叶绿素荧光动力学显微成像观测,比较玉米叶肉和维管束鞘叶绿体的叶绿素荧光参数Fv/Fm和NPQ;通过免疫印迹法,分析玉米叶肉和维管束鞘细胞光系统Ⅱ亚基S(PsbS)稳态水平的变化差异;采用蓝-绿胶温和电泳分离,检测玉米光系统Ⅱ蛋白复合体的水平。【结果】干旱胁迫导致叶片气孔导度和蒸腾速率下降,2个玉米品种间没有明显差异。但成单30在重度干旱下表现出更好的水分状况、更低的活性氧损伤以及更高的光合速率。玉米叶肉和维管束鞘叶绿体的NPQ水平及PsbS蛋白含量受干旱诱导明显上升,维管束鞘中的上升更显著,成单30表现尤为突出。不同于仲玉3号光系统Ⅱ蛋白复合体水平的下降,重度干旱胁迫后,成单30的捕光蛋白三聚体水平在叶肉和维管束鞘细胞中均有所升高。【结论】2个玉米品种的光合机构对干旱胁迫的气孔响应能力相当,但相较仲玉3号,成单30的维管束鞘叶绿体具备更优越的非光化学淬灭能力,这对其更强的非气孔限制的光合耐旱性具有积极意义。

关键词：玉米干旱胁迫维管束鞘细胞光系统Ⅱ 非光化学淬灭

超高效液相色谱-串联质谱法测定沼液中的林可霉素和大环内酯类抗生素

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分析科学学报 2021年第1期37卷 57-62页

作者：仲伶俐郑幸果赵珊雷欣宇黄世群秦琳郭灵安李曦四川省农业科学院分析测试中心四川成都610066

建立了一种测定沼液中林可霉素(Lincomycin)和6种大环内酯类抗生素(MacrolideAntibiotics)的分析方法。沼液样品经离心后通过C18固相萃取小柱净化,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)进行测定。实验优化了净化方法和色谱、质谱条... 详细信息

建立了一种测定沼液中林可霉素(Lincomycin)和6种大环内酯类抗生素(MacrolideAntibiotics)的分析方法。沼液样品经离心后通过C18固相萃取小柱净化,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)进行测定。实验优化了净化方法和色谱、质谱条件。结果表明,7种目标药物在0.2~200.0ng/mL范围内线性关系良好(r>0.997),方法的检测限为0.1~0.5ng/mL,定量限为0.2~1.0ng/mL。当螺旋霉素、替米考星在沼液中的添加水平为1.0、5.0和50.0ng/mL时,回收率范围为76.6%~94.1%,相对标准偏差在3.5%~12.7%之间;当林可霉素、泰乐菌素、红霉素、交沙霉素和罗红霉素在沼液中的添加水平为0.2、1.0、5.0和50.0ng/mL时,回收率范围为72.5%~100.1%,相对标准偏差在2.3%~11.1%之间。该方法简单、快速、准确,适用于沼液中林可霉素和6种大环内酯类抗生素药物的检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱沼液林可霉素大环内酯类抗生素

杜马斯燃烧法和凯氏定氮法在土壤全氮检测中的比较研究

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中国土壤与肥料 2020年第4期 258-265页

作者：秦琳黄世群仲伶俐周虹赵珊向冰雷绍荣四川省农业科学院分析测试中心四川成都610066

选用6组不同全氮含量的土壤样品(梯度为0%~0.06%、0.06%~0.1%、0.1%~0.2%、0.2%~0.3%、0.3%~0.4%和0.4%~0.5%)和4份土壤有效态成分分析标准物质为试验材料,分别采用杜马斯燃烧法和凯氏定氮法测定其全氮含量,并对两种方法测定结果的精密... 详细信息

选用6组不同全氮含量的土壤样品(梯度为0%~0.06%、0.06%~0.1%、0.1%~0.2%、0.2%~0.3%、0.3%~0.4%和0.4%~0.5%)和4份土壤有效态成分分析标准物质为试验材料,分别采用杜马斯燃烧法和凯氏定氮法测定其全氮含量,并对两种方法测定结果的精密度、准确度和相关性及检测成本进行了比较分析。对土壤有效态成分分析标准物质全氮含量的检测,两种方法测定结果都接近于真实值,比较两种方法的相对标准偏差(RSD)和相对误差(RE)值,可确定杜马斯燃烧法精密度更高,且准确度更好;对于含氮量范围为0%~0.06%的样品,两种方法的测定值之比(D/K)为0.692~0.965,杜马斯燃烧法测定结果的变异系数为0.00%~9.96%,测定结果不稳定,两种方法的测定值间存在显著的线性相关,但R2仅为0.904 9;而含氮量大于0.06%的样品,两种方法的测定值之比(D/K)为0.940~1.104,变异系数均小于5%,测定结果间存在显著的线性相关(R2=0.997 9)。在检测成本方面,完成相同数量样品检测,杜马斯燃烧法所需时间和人力都约是凯氏定氮法的1/2。因而,杜马斯燃烧法是一种环保、高效的土壤全氮检测方法,对于含氮量范围为0%~0.06%的土壤样品,凯氏定氮法的测定结果更接近于真实值,而对于含氮量大于0.06%的土壤样品,杜马斯燃烧法更加适用。

关键词：土壤全氮杜马斯燃烧法凯氏定氮法

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秸秆还田配施石灰对水稻镉吸收累积的影响

农业环境科学学报 2021年第6期40卷 1150-1158页

作者：杨定清李霞周娅罗丽卉谢永红王棚李旭毅四川省农业科学院分析测试中心成都610066 四川省农业科学院作物研究所成都610066

秸秆还田是提升土壤肥力、增加作物产量的重要措施,但存在增加稻米镉(Cd)含量的风险。为探索合理的秸秆资源利用方式,以成都平原稻麦轮作土壤为对象,设置秸秆不还田、秸秆还田及秸秆还田配施4个石灰施用水平(600、1200、1800、2400 kg·... 详细信息

秸秆还田是提升土壤肥力、增加作物产量的重要措施,但存在增加稻米镉(Cd)含量的风险。为探索合理的秸秆资源利用方式,以成都平原稻麦轮作土壤为对象,设置秸秆不还田、秸秆还田及秸秆还田配施4个石灰施用水平(600、1200、1800、2400 kg·hm^(-2))等6个处理,研究秸秆还田配施不同量石灰对水稻Cd吸收累积的影响。结果表明,与秸秆不还田相比,秸秆还田稻米Cd含量提高了18.1%,土壤溶解性有机碳(DOC)含量、有效态Cd含量分别提高了28.5%~95.7%、7.7%~18.9%,且DOC含量差异达显著水平(P0.05)。在本研究试验条件下,秸秆还田配施石灰的最佳用量为1800 kg·hm^(-2),既能兼顾水稻产量,又能保障稻谷、土壤生态安全。

关键词：秸秆还田石灰水稻 Cd 产量

超高效液相色谱-串联质谱法测定脐橙中橘红2号染料

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色谱 2012年第8期30卷 832-835页

作者：胡莉雷绍荣郭灵安四川省农业科学院分析测试中心四川成都610066

建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定脐橙中的橘红2号染料。样品用乙腈提取,NH2固相萃取小柱进行净化后,用超高效液相色谱-串联质谱仪进行测定,使用Waters Acquity UPLC BEH C18柱(50mm×2.1mm,1.7μm)进行分离,以水和乙... 详细信息

建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定脐橙中的橘红2号染料。样品用乙腈提取,NH2固相萃取小柱进行净化后,用超高效液相色谱-串联质谱仪进行测定,使用Waters Acquity UPLC BEH C18柱(50mm×2.1mm,1.7μm)进行分离,以水和乙腈作为流动相梯度洗脱,流速为0.3mL/min。质谱采用电喷雾离子源、正离子采集模式(ESI+),采集方式为多反应监测(MRM)。方法的线性范围为0.1～100μg/L(线性相关系数r2=0.996 5),检出限为0.05μg/kg,定量限为0.1μg/kg。在空白脐橙样品中添加1.0、10.0和100.0μg/kg的橘红2号染料,其回收率为84.2%～94.0%,相对标准偏差为2.86%～10.15%。利用该方法对市场上随机采集的18份脐橙样品进行了检测,结果显示,从2份样品中检出橘红2号染料。该方法灵敏度高,准确度好,适用于对脐橙中橘红2号染料的检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱橘红2号染料脐橙

非生物胁迫对转基因抗虫棉Bt蛋白表达量的影响

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西南农业学报 2020年第10期33卷 2180-2183页

作者：常丽娟刘文娟张富丽王东宋君四川省农业科学院分析测试中心四川成都610066

【目的】为研究非生物胁迫对转基因抗虫棉Bt蛋白表达量的影响。【方法】对2个转基因抗虫棉品种中棉45号(ZGK9822)和鄂抗虫棉1号(GK19)幼苗分别进行低温(4℃)、高温(37℃)、0.1、0.2、0.5 mol·L^-1NaCl、轻度干旱、中度干旱、重度干旱8... 详细信息

【目的】为研究非生物胁迫对转基因抗虫棉Bt蛋白表达量的影响。【方法】对2个转基因抗虫棉品种中棉45号(ZGK9822)和鄂抗虫棉1号(GK19)幼苗分别进行低温(4℃)、高温(37℃)、0.1、0.2、0.5 mol·L^-1NaCl、轻度干旱、中度干旱、重度干旱8种非生物胁迫处理。【结果】低温及高温胁迫导致Bt蛋白含量在两个抗虫棉品种的根、茎、叶中不同程度降低,其中低温胁迫各组织Bt蛋白含量高于高温胁迫;在不同浓度盐胁迫的根、茎、叶中,与CK相比较,Bt蛋白含量呈现先降低后升高的趋势;在不同程度干旱胁迫的根、茎、叶中,Bt蛋白含量的变化趋势同盐胁迫相一致。【结论】非生物胁迫严重影响转基因抗虫棉Bt蛋白表达量,导致Bt蛋白表达量呈动态变化,田间种植转基因抗虫棉应关注环境因素的影响。

关键词：非生物胁迫转基因抗虫棉 Bt蛋白表达量

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定蜂蜜中4种抗病毒类药物残留

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食品安全质量检测学报 2021年第10期12卷 4110-4117页

作者：郑幸果赵珊李曦雷欣宇仲伶俐四川省农业科学院分析测试中心成都610066

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时检测蜂蜜中金刚烷胺、金刚乙胺、吗啉胍和阿昔洛韦4种抗病毒药物残留的分析方法。方法样品经20%乙腈水(含0.2%甲... 详细信息

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时检测蜂蜜中金刚烷胺、金刚乙胺、吗啉胍和阿昔洛韦4种抗病毒药物残留的分析方法。方法样品经20%乙腈水(含0.2%甲酸)溶液溶解,超声提取后高速离心,取上清液过Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,净化后的样液进行上机测定;选用SHISEIDO MGⅢ-H C18色谱柱(2.0 mm×100 mm,3μm),以甲醇‒0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;通过多反应监测,在正离子模式下,采用基质匹配外标法,同时对4种化合物进行定性和定量分析。结果金刚烷胺、金刚乙胺、吗啉胍和阿昔洛韦在各自浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。方法的检出限为0.2~1.0μg/kg,定量限为0.5~2.0μg/kg;在定量限、5、10、20μg/kg 4个添加水平下的平均回收率为82.9%~93.5%,相对标准偏差为2.0%~8.4%(n=6)。结论本方法简单、灵敏度高、重现性好,适用于蜂蜜中4种抗病毒类药物的同时检测。

关键词：抗病毒药物超高效液相色谱-串联质谱法蜂蜜残留