检索结果-南通市图书馆

亨廷顿蛋白相关蛋白1基因对小鼠成纤维细胞增殖的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川大学学报（医学版） 2019年第3期50卷 298-304页

作者：曹媛媛杨桂枝龚艳菊赵佳冯颖郑翔周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的研究亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1,Hap1)基因对成纤维细胞增殖的影响。方法体外分离培养获得Hap1基因敲除(Hap1^(-/-))的原代成纤维细胞,鉴定后采用EdU增殖实验、细胞周期(流式细胞术)检测验证Hap1敲除后... 详细信息

目的研究亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein 1,Hap1)基因对成纤维细胞增殖的影响。方法体外分离培养获得Hap1基因敲除(Hap1^(-/-))的原代成纤维细胞,鉴定后采用EdU增殖实验、细胞周期(流式细胞术)检测验证Hap1敲除后成纤维细胞增殖的改变;将野生型和Hap1^(-/-)成纤维细胞送转录组测序筛选增殖相关基因,实时荧光定量PCR(qPCR)验证相关基因表达水平的改变。对小鼠进行皮肤损伤造模检测Hap1敲减(Hap1^(+/-))小鼠皮肤损伤修复情况;PCNA免疫组化染色检测损伤修复过程中成纤维细胞的增殖水平。结果成功培养原代Hap1^(-/-)成纤维细胞;与野生型成纤维细胞相比,Hap1^(-/-)成纤维细胞EdU阳性比例减少,进入S期的细胞比例减少;原代成纤维细胞转录组测序筛选出Cdc25C、E2f7、E2f8和Ccl5四个差异表达的增殖相关基因,qPCR验证发现E2f7在Hap1敲除后表达增多。小鼠皮肤损伤结果显示,Hap1^(+/-)小鼠伤口面积较相同时间点野生型小鼠伤口面积大且愈合速度减慢,成纤维细胞增殖阳性密度低于野生型小鼠。结论 Hap1可能通过抑制细胞周期负性调节因子E2f7的表达对成纤维细胞增殖起正向调节作用,其缺失将抑制成纤维细胞进入S期,从而减少细胞增殖,影响伤口修复。

关键词：亨廷顿蛋白相关蛋白1 成纤维细胞增殖损伤修复

猫部分背根切断后背根节一氧化氮合酶的表达变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川大学学报（医学版） 2004年第1期35卷 29-31页

作者：覃华丽周雪章为陈思秀四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的　了解一氧化氮合酶 (NOS)在背根损伤的背根节及邻近未受损之背根节中表达的变化。方法　采用部分去背根传入动物模型 ,通过免疫组织化学 ABC法 ,观察猫背根节中 n NOS及 e NOS同工酶阳性免疫产物的分布、阳性神经元的数量及变化。... 详细信息

目的　了解一氧化氮合酶 (NOS)在背根损伤的背根节及邻近未受损之背根节中表达的变化。方法　采用部分去背根传入动物模型 ,通过免疫组织化学 ABC法 ,观察猫背根节中 n NOS及 e NOS同工酶阳性免疫产物的分布、阳性神经元的数量及变化。结果　猫背根节中 n NOS阳性反应物主要分布于小神经元中 ;背根被切断的 L5背根节及邻近完好的 L6 备用背根节中 n NOS阳性小神经元数量较非术侧均有增加 ;e NOS在成年猫背根节神经元中未见表达。结论　在背根节神经元中表达的 n NOS及由 n NOS催化产生的 NO可能与神经损伤和修复的生理病理过程有关。

关键词：一氧化氮合酶免疫组织化学背根切断背根节

大鼠脊髓横断损伤后CNTF mRNA的表达变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川大学学报（医学版） 2009年第3期40卷 412-414页

作者：赵彩霞刘佳章为四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的观察睫状神经营养因子(CNTF)mRNA在脊髓全横断大鼠损伤后的表达变化,探讨CNTF在脊髓损伤修复中的作用。方法40只SD大鼠,随机分为假手术组和脊髓损伤组(SCI组),后者根据取材时间又分为术后1d、3d、7d和14d组。SCI组动物选择在T10节... 详细信息

目的观察睫状神经营养因子(CNTF)mRNA在脊髓全横断大鼠损伤后的表达变化,探讨CNTF在脊髓损伤修复中的作用。方法40只SD大鼠,随机分为假手术组和脊髓损伤组(SCI组),后者根据取材时间又分为术后1d、3d、7d和14d组。SCI组动物选择在T10节段全横断脊髓,假手术组除不横断脊髓外其余步骤与SCI组相同。动物处死前进行BBB评分评估后肢运动功能的变化。取手术部位头端和尾端0.5cm脊髓,采用RT-PCR技术检测CNTFmRNA在各组脊髓中的表达变化。结果行为学评分随着损伤时间的推移呈小幅度增加,但后肢无运动功能恢复;术后1d组和3d组横断点尾端脊髓中CNTFmRNA的表达与假手术组相比上调(P学意义。结论脊髓损伤早期CNTF的表达变化可能与脊髓损伤修复有关。

关键词：睫状神经营养因子脊髓损伤逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) BBB评分

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

成年大鼠嗅鞘细胞的原代培养与鉴定

四川大学学报（医学版） 2007年第4期38卷 717-719页

作者：李绍波章为丁艳彭谨朱振东周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的探索一种简便、经济实用的获得成年大鼠嗅鞘细胞的方法。方法无菌条件下取2.5月龄的SD大鼠嗅球最外二层,经分散后将细胞种植于含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基中。采用差速贴壁和阿糖胞苷抑制相结合的方法培养。定期进行形态学观察... 详细信息

目的探索一种简便、经济实用的获得成年大鼠嗅鞘细胞的方法。方法无菌条件下取2.5月龄的SD大鼠嗅球最外二层,经分散后将细胞种植于含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基中。采用差速贴壁和阿糖胞苷抑制相结合的方法培养。定期进行形态学观察并摄片。在培养第14d行胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和神经生长因子受体(NGFRp75)的免疫细胞化学染色鉴定,并计算嗅鞘细胞的纯度。结果培养的嗅鞘细胞呈双极、多突起形、扁圆形三种,其中扁圆形较少,嗅鞘细胞的纯度在90%以上。结论差速贴壁和阿糖胞苷化学抑制相结合进行成年大鼠嗅鞘细胞原代培养是一种简便经济实用的方法,可获得高纯度的嗅鞘细胞。

关键词：嗅鞘细胞细胞培养免疫细胞化学成年大鼠

慢性失神经后衰老相关β-半乳糖苷酶在成年大鼠施万细胞的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川大学学报（医学版） 2016年第3期47卷 351-355页

作者：肖霞陈泽卡丁有权李轩漾齐建国四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的探讨成年大鼠长时程轴突缺失对大鼠施万细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶(senescenceassociated beta galactosidase,SA-β-gal)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、1周失神经组、2周失神经组、4周失神经组、5周失神经组... 详细信息

目的探讨成年大鼠长时程轴突缺失对大鼠施万细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶(senescenceassociated beta galactosidase,SA-β-gal)表达的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、1周失神经组、2周失神经组、4周失神经组、5周失神经组、6周失神经组、7周失神经组和8周失神经组。各组动物进行右侧坐骨神经永久性横断手术或者相应的假手术,根据各组设定的远侧段失神经时间分别获取损伤神经的5mm近侧段和10mm远侧段以及假手术组同侧神经和手术组对侧神经的对应节段,采用SA-β-gal染色检测SA-β-gal的表达,并对8周失神经组大鼠获取的损伤神经标本用SA-β-gal和施万细胞特异性蛋白(S100β)双标染色分析远侧段神经中SA-β-gal表达的细胞定位。结果成年大鼠右侧坐骨神经永久横断后,近侧段神经的远端SA-β-gal表达在2周一过性增加,而远侧段神经中SA-β-gal表达在2周明显增加,并且在更长的失神经过程中保持这种高表达水平。而且,绝大部分SA-β-gal的表达出现在S100β免疫反应阳性的施万细胞中。结论长时程轴突缺失增加成年大鼠施万细胞中SA-β-gal表达。

关键词：慢性失神经施万细胞细胞衰老衰老相关β-半乳糖苷酶坐骨神经横断

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

针刺对备用背根节神经元NP-1表达的影响

四川大学学报（医学版） 2006年第3期37卷 381-383,403页

作者：黄倩周雪丁艳彭谨赵伟章为四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的探讨针刺对备用背根节(dorsalrootganglion,DRG)NP-1表达的影响。方法将25只成年雄猫分为5组,即假手术组、单侧备用背根手术7d组、单侧备用背根手术并针刺7d组、单侧备用背根手术14d组和单侧备用背根手术并针刺14d组。通过免疫组化... 详细信息

目的探讨针刺对备用背根节(dorsalrootganglion,DRG)NP-1表达的影响。方法将25只成年雄猫分为5组,即假手术组、单侧备用背根手术7d组、单侧备用背根手术并针刺7d组、单侧备用背根手术14d组和单侧备用背根手术并针刺14d组。通过免疫组化ABC法,观察各组备用DRG中NP-1的免疫反应神经元数目。结果在假手术组,NP-1阳性神经元主要定位于部分中小神经元及少数大神经元胞浆中;部分背根切断7d后NP-1阳性中小神经元数较假手术组明显减少(P神经元数与假手术组者差异无统计学意义(P>0.05);而术后14d,NP-1阳性中小神经元数较7d组明显增多(P神经元数与手术7d组差异无统计学意义(P>0.05);针刺7d组较手术7d组NP-1阳性中小神经元数增多(P神经元数减少(P神经元数目与手术14d组及针刺7d组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论针刺可上调NP-1在备用DRG中小神经元的表达。

关键词： NP-1表达背根切断备用背根节针刺

一种用于宽场荧光显微镜下成像的皮肤厚片免疫荧光染色方法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

解剖学报 2016年第5期47卷 703-708页

作者：任弘毅丁有权李轩漾齐建国四川大学华西基础医学与法医学院组织学胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的通过改良免疫荧光染色方案,使皮肤厚切片能在宽场荧光显微镜下荧光成像。方法选择成年雄性SD大鼠5只,经Zamboni固定液灌注固定后取后肢足底皮肤,冷冻切片,片厚40μm,行神经纤维标志物PGP9.5免疫荧光染色。首先比较染色后用梯度甘油... 详细信息

目的通过改良免疫荧光染色方案,使皮肤厚切片能在宽场荧光显微镜下荧光成像。方法选择成年雄性SD大鼠5只,经Zamboni固定液灌注固定后取后肢足底皮肤,冷冻切片,片厚40μm,行神经纤维标志物PGP9.5免疫荧光染色。首先比较染色后用梯度甘油溶液透明与不经甘油透明对皮肤厚片成像深度的影响;继之在染色后甘油透明的基础上,检测染色前二甲基亚砜(DMSO)处理不同时间(10min、15min和30min)对皮肤背景信号的影响。此外,采用体视显微镜检测梯度甘油透明对切片形态的影响。最后,用上述DMSO-甘油改良染色法进一步对神经纤维其他标志物NF 200和外周蛋白分别进行染色。结果经染色后甘油透明的切片其成像深度显著大于常规染色的切片(P基础上,先用DMSO处理能有效降低皮肤背景着色,时间以15min为佳;梯度甘油处理并不会造成皮肤厚片的形态改变;DMSO-甘油改良染色法也能有效显示皮肤NF200和外周蛋白免疫反应阳性的神经纤维。结论经本改良方法染色的皮肤厚片能在宽场荧光显微镜下良好成像。

关键词：皮肤二甲基亚砜厚组织切片组织光学透明宽场荧光显微术免疫荧光大鼠

慢性束缚应激造模及观测高血糖相关指标的方法探索

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川大学学报（医学版） 2013年第3期44卷 470-475页

作者：梁冰郑翔夏卫维丁艳章为周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室成都610041

目的从束缚强度、高脂饮食、血糖测定等方面探索慢性束缚应激模型用于观测高血糖相关指标的方法。方法实验SD大鼠施加为期4个周期、每周期10d、每天12h的慢性束缚应激,喂饲普通或高脂饲料,并设高脂+链脲佐菌素(STZ)组、单纯高脂组和正... 详细信息

目的从束缚强度、高脂饮食、血糖测定等方面探索慢性束缚应激模型用于观测高血糖相关指标的方法。方法实验SD大鼠施加为期4个周期、每周期10d、每天12h的慢性束缚应激,喂饲普通或高脂饲料,并设高脂+链脲佐菌素(STZ)组、单纯高脂组和正常大鼠为对照。每个束缚周期结束后第3d用针刺大鼠尾静脉取血,血糖仪监测各组大鼠血糖;最后一个束缚周期结束后第3d处死大鼠,ELISA检测血清胰岛素、肾上腺素和皮质酮水平;胰腺行HE染色及胰岛素、胰高血糖素免疫组织化学检测。结果采用慢性束缚应激成功制备高血糖动物模型,成模率为32.5%;慢性束缚应激成模大鼠血清胰岛素水平高于3个对照组(P学意义;胰腺HE染色及免疫组化显示慢性束缚应激大鼠胰腺体积增大,胰岛素水平下降(P学意义。结论在本实验造模条件下可成功制备慢性束缚应激高血糖大鼠模型,相关指标检测方法具有可靠性。

关键词：慢性束缚应激链脲佐菌素高血糖动物模型

肥胖伴慢性束缚应激小鼠血压升高与孤束核去甲肾上腺素能神经元损伤的关系研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川大学学报（医学版） 2022年第1期53卷 77-82页

作者：王森甲郑翔毕文杰周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室成都610041 成都医学院人体解剖与组织胚胎学教研室成都610500

目的探讨肥胖伴慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)是否致小鼠血压升高及其与孤束核中间部(iNTS)损伤的关系。方法制作CRS小鼠模型,将51只小鼠分为低脂非束缚组(LF组)、低脂束缚组(LS组)、高脂非束缚组(HF组)、高脂束缚组(HS组... 详细信息

目的探讨肥胖伴慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)是否致小鼠血压升高及其与孤束核中间部(iNTS)损伤的关系。方法制作CRS小鼠模型,将51只小鼠分为低脂非束缚组(LF组)、低脂束缚组(LS组)、高脂非束缚组(HF组)、高脂束缚组(HS组);7 d束缚+3 d自由活动为一个周期,共4个周期(40 d);每个周期中第9天时检测小鼠体质量、并测量动脉收缩压,实验第40天时处死各组小鼠后取脑组织行免疫组织化学染色及免疫印迹检测胶质纤维状酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达,取附睾脂肪垫免疫印迹检测血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor,VEGFA)蛋白表达(代表脂肪组织血管密度)。结果在第40天时,HS组小鼠动脉收缩压明显高于其他三组小鼠,高脂喂养组(HF组和HS组)体质量增长明显;各组小鼠VEGFA蛋白表达差异无统计学意义;束缚组(LS组和HS组)小鼠脑组织iNTS星形胶质细胞活化,HS组iNTS TH表达减少;HF组、LS组小鼠血压均无异常变化;HS组血压普遍升高,其中37.5%小鼠出现高血压(动脉收缩压≥140 mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)。结论肥胖伴慢性束缚应激可致小鼠动脉血压升高,且其机制与孤束核去甲肾上腺素能神经元损伤有关。

关键词：慢性束缚应激高脂饮食去甲肾上腺素能神经元孤束核