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婴儿双歧杆菌介导的CD和UPRT联合5-FC基因疗法对黑色素瘤的体外治疗实验研究

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四川大学学报（医学版） 2007年第1期38卷 27-30,63页

作者：安丽娜李华岳扬王树人郭志英彭克军四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 泸州医学院病理生理学教研室北京武警总医院肝移植研究所

目的采用婴儿双歧杆菌为载体,探讨尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因(UPRT)对胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因系统抗瘤作用的增强效应。方法构建原核表达质粒pGEX-UPRT,以电穿孔法将该质粒转化入婴儿双歧杆菌,筛选阳性重组菌并鉴定。... 详细信息

目的采用婴儿双歧杆菌为载体,探讨尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因(UPRT)对胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因系统抗瘤作用的增强效应。方法构建原核表达质粒pGEX-UPRT,以电穿孔法将该质粒转化入婴儿双歧杆菌,筛选阳性重组菌并鉴定。采用M TT法检测表达的U PRT是否可以与CD产生抗瘤协同作用,并观察细胞形态学改变。结果重组婴儿双歧杆菌可以正确表达UPRT。体外M TT检测显示CD+UPRT组细胞存活率低于对照组(P<0.01),且可使B 16-F 10鼠黑色素瘤细胞对5-FC的杀伤敏感性(IC50=0.015μm o l/mL)提高,是CD组(IC50=0.127μm o l/mL)的8.5倍。形态学观察CD+UPRT组肿瘤细胞显示出明显的损伤性改变,细胞生长受到明显抑制,而UPRT组和CD组变化明显不如前者。结论婴儿双歧杆菌联合转导UPRT基因可明显增强CD/5-FC自杀基因系统对鼠黑色素瘤细胞B 16-F 10的杀伤作用。

关键词：婴儿双歧杆菌尿嘧啶磷酸核糖转移酶胞嘧啶脱氨酶基因治疗

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连续性肾替代治疗容量评估与管理专家共识

中华肾脏病杂志 2024年第1期40卷 74-81页

作者：中华医学会肾脏病学分会专家组陈江华付平梁馨苓蒋红利张凌吴燕华宋利康焰不详浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心浙江大学肾脏病研究所浙江省肾脏病防治技术研究重点实验室杭州310003 四川大学华西医院广东省人民医院西安交通大学第一附属医院

近年来的研究表明,容量过负荷是合并急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)、急性呼吸窘迫综合征或脓毒症的重症患者肾脏功能损害加重、肾功能恢复率降低和病死率增加的独立危险因素。容量过负荷对肾功能的损害可能与肾静脉高压、肾间质... 详细信息

近年来的研究表明,容量过负荷是合并急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)、急性呼吸窘迫综合征或脓毒症的重症患者肾脏功能损害加重、肾功能恢复率降低和病死率增加的独立危险因素。容量过负荷对肾功能的损害可能与肾静脉高压、肾间质水肿有关,并最终导致肾血流量和肾小球滤过率下降。然而,通过利尿剂或连续性肾替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)进行液体清除会增加患者血容量不足、血流动力学不稳定、组织器官灌注不足等风险。因此,CRRT期间对AKI患者进行准确的容量状态评估与管理至关重要。中华医学会肾脏病学分会专家组基于循证医学证据及临床经验制定了《CRRT容量评估与管理专家共识》。专家组通过对此领域系统全面的文献检索、数据分析及专业讨论,构建了5个CRRT容量管理的专题:AKI患者容量失衡的病理生理学基础及危害、AKI患者容量管理策略、AKI患者容量状态及反应性评估、CRRT容量管理的分级与应用和CRRT容量管理目标制定与CRRT处方。该共识旨在规范临床操作,降低AKI患者容量失衡的发生率并改善其预后。

关键词：连续性肾替代疗法急性肾损伤血量血浆容量血容量不足容量评估与管理专家共识

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蔓越莓抗菌作用研究进展

中国抗生素杂志 2012年第8期37卷 575-578页

作者：杨晓龙黄宁四川大学华西基础医学与法医学院病理生理教研室成都610041

蔓越莓(Vaccinium macrocarpon Ait.)是北美三大水果之一。一直以来,蔓越莓因其预防泌尿道感染的功能而受到广泛关注。大量的研究表明蔓越莓具有抑菌、抗细菌黏附等作用。本综述主要涉及其化学成分、抑菌作用、抗黏附作用及其机制。

关键词：蔓越莓抑菌作用抗黏附作用

婴儿双歧杆菌介导的CD/5-FC自杀基因系统对黑色素瘤的抑瘤实验

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四川大学学报（医学版） 2005年第2期36卷 165-168页

作者：易成郭志英黄英王浩毅王树人四川大学华西医院肿瘤中心成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室

目的　观察婴儿双歧杆菌介导的胞嘧啶脱氨酶 / 5 -氟胞嘧啶 (CD/ 5 - FC)自杀基因系统对黑色素瘤的体内、外抑瘤效果。方法　含重组 CD基因的婴儿双歧杆菌中加入 5 - FC,厌氧条件下培养 2 4 h后取其上清液 ,加到黑色素瘤 B16 - F10细胞... 详细信息

目的　观察婴儿双歧杆菌介导的胞嘧啶脱氨酶 / 5 -氟胞嘧啶 (CD/ 5 - FC)自杀基因系统对黑色素瘤的体内、外抑瘤效果。方法　含重组 CD基因的婴儿双歧杆菌中加入 5 - FC,厌氧条件下培养 2 4 h后取其上清液 ,加到黑色素瘤 B16 - F10细胞上 ,观察其对细胞形态及细胞生长抑制率的影响 ;建立小鼠黑色素瘤动物模型 ,尾静脉注入含重组 CD基因的婴儿双歧杆菌 ,腹腔注入 5 - FC,观察携带重组 CD基因的婴儿双歧杆菌联合 5 - FC对黑色素瘤肿瘤体积及肿瘤体积倍增时间的影响。结果　 1体外实验 :实验组肿瘤细胞形态显示出显著的损伤性改变 ,细胞生长受到明显抑制 ,而对照组肿瘤细胞影响不大。 2小鼠黑色素瘤动物模型实验结果显示 ,经重组婴儿双歧杆菌联合 5 -FC治疗 2 1d,实验组肿瘤倍增时间明显长于对照组 ,其肿瘤体积明显小于对照组 ,且随着观察时间的延长 ,这种差异越显著。结论　婴儿双歧杆菌介导的 CD/ 5 - FC自杀基因系统对黑色素瘤具有明显的抑瘤效果。

关键词：婴儿双歧杆菌胞嘧啶脱氨酶 5-氟胞嘧啶基因治疗

利用同源重组构建人肺鳞状细胞癌旁组织的酵母双杂交cDNA文库

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第28期12卷 5490-5493页

作者：彭媛媛邓璐霞石艳娥赵媛陈军利王薇冯云吴琦王伯瑶黄宁四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学感染免疫教研室四川省成都市610041

背景:酵母双杂交技术是目前应用最成功的研究蛋白质相互作用的技术平台。目的:运用SMART(switching mechanism at5′end of RNA transc-ript)技术构建人肺鳞状细胞癌旁组织的酵母双杂交cDNA文库。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-... 详细信息

背景:酵母双杂交技术是目前应用最成功的研究蛋白质相互作用的技术平台。目的:运用SMART(switching mechanism at5′end of RNA transc-ript)技术构建人肺鳞状细胞癌旁组织的酵母双杂交cDNA文库。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-07/2007-01在四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学感染免疫实验室完成。材料:人肺鳞状细胞癌旁组织由四川大学华西医学中心附属第一医院胸外科提供。方法:运用SMART技术,以纯化的Poly(A)+RNA为模板,用Powerscript逆转录酶进行转录,并在mRNA的5’末端添加一段5’-oligo作为延伸后的模板,从而富集全长cDNA。纯化的双链cDNA与线性化pGADT7-Rec质粒载体共同转化酵母菌株感受态AH109,经胞内同源重组形成环状文库质粒。应用营养缺陷的方法在SD/-Leu平板上筛选并收集所有克隆从而获得酵母双杂交的人肺鳞状细胞癌旁组织cDNA文库。主要观察指标:采用琼脂糖凝胶电泳观察人肺鳞状细胞癌旁组织的cDNA文库构建结果,并进行文库容量及多态性鉴定。结果:①总RNA和mRNA纯度较好,比较完整。②双链cDNA文库大小介于0.5～3kb之间。③共获得1.2×106转化子,重组子不同插入片断大小在0.3～2kb之间,文库具有较好的多样性。结论:在酵母菌株AH109成功构建了用于酵母双杂交的人肺鳞状细胞癌旁组织cDNA文库。

关键词： SMART技术 cDNA文库同源重组酵母双杂交

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呼吸中枢发育的基因调控研究进展

生理科学进展 2007年第2期38卷 125-128页

作者：李丹郑煜四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

脑干呼吸中枢组成一个复杂的网络系统,产生和调控节律性呼吸。近年来,人们利用分子生物学技术研究发现,小鼠某些基因突变可影响呼吸中枢特定神经元的发育,并由此导致特殊的呼吸表型。最近,在人类某些中枢性呼吸疾病中,也发现了相应的基... 详细信息

脑干呼吸中枢组成一个复杂的网络系统,产生和调控节律性呼吸。近年来,人们利用分子生物学技术研究发现,小鼠某些基因突变可影响呼吸中枢特定神经元的发育,并由此导致特殊的呼吸表型。最近,在人类某些中枢性呼吸疾病中,也发现了相应的基因突变。因此,基因水平的研究为深入认识节律性呼吸活动的产生和调控机制提供了新的研究途径。本文就目前研究较多、相对较深入的一些呼吸中枢发育调节基因的研究进展作一综述。

关键词：呼吸中枢基因转录因子发育分化

酸敏感离子通道在大鼠脑干斜方体核和旁巨细胞外侧核的表达及间歇性缺氧对其表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2009年第4期40卷 662-666页

作者：曹性玲陈祁周华唐玉红徐建国郑煜四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

目的探讨酸敏感离子通道(ASICs)的3种亚型(ASIC1b、ASIC2a和ASIC3)在大鼠脑干斜方体核(Tz)和旁巨细胞外侧核(LPGi)的表达以及在间歇性缺氧情况下三者表达的变化。方法制备间歇性缺氧大鼠模型,12d后抽血进行血气分析,采用常规免疫组化法(... 详细信息

目的探讨酸敏感离子通道(ASICs)的3种亚型(ASIC1b、ASIC2a和ASIC3)在大鼠脑干斜方体核(Tz)和旁巨细胞外侧核(LPGi)的表达以及在间歇性缺氧情况下三者表达的变化。方法制备间歇性缺氧大鼠模型,12d后抽血进行血气分析,采用常规免疫组化法(SABC法),观察正常大鼠及间歇性缺氧大鼠脑干Tz和LPGi神经元ASIC1b、ASIC2a和ASIC3的表达。结果正常大鼠脑干Tz和LPGi等神经核团,均可见到呈胞浆阳性的ASIC1b、ASIC2a和ASIC3表达的神经元。间歇性缺氧组大鼠,ASIC1b阳性神经元数密度(个/mm3)在Tz中减小(P0.05),灰度值在Tz和LPGi中均无明显变化(P>0.05);ASIC2a阳性神经元数密度(个/mm3)在Tz和LPGi中改变均不明显(P>0.05),灰度值在Tz中增加(P0.05);ASIC3阳性神经元数密度(个/mm3)在Tz中改变不明显(P>0.05),在LPGi中减小(P0.05)。结论正常大鼠脑干Tz和LPGi等呼吸相关神经核团神经元均表达ASIC1b、ASIC2a和ASIC3等ASICs;间歇性缺氧大鼠不同部位不同亚型ASICs表达的变化有所不同,提示不同部位不同亚型ASICs在呼吸调节中的作用可能有所不同。

关键词：呼吸调节间歇性缺氧酸敏感离子通道大鼠

同型半胱氨酸致巨噬细胞TNFSF4基因启动子去甲基化并增加其mRNA表达

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第三军医大学学报 2008年第7期30卷 614-617页

作者：黄丹丹王树人四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041

目的探讨同型半胱氨酸对THP-1巨噬细胞TNFSF4基因甲基化及mRNA表达的影响。方法在由0.1μmol/L佛波脂(phorbot12-myristate13-acetate,PMA)诱导分化的THP-1巨噬细胞中加入不同浓度的高同型半胱氨酸(homocysteine,HCY),并孵育不同时间。... 详细信息

目的探讨同型半胱氨酸对THP-1巨噬细胞TNFSF4基因甲基化及mRNA表达的影响。方法在由0.1μmol/L佛波脂(phorbot12-myristate13-acetate,PMA)诱导分化的THP-1巨噬细胞中加入不同浓度的高同型半胱氨酸(homocysteine,HCY),并孵育不同时间。另设空白对照组。应用MS-PCR技术检测TNFSF4基因甲基化状态,应用RT-PCR检测TNFSF4基因表达水平差异。结果与对照组比较,随时间和浓度的不断增加,各药物浓度组非甲基化条带越来越浓(P<0.01),甲基化条带越来越淡(P<0.01),72h处理组全部只出现非甲基化条带,同时各药物浓度组24hTNFSF4基因mRNA表达增加,且呈剂量依赖关系(P<0.01)。结论同型半胱氨酸可致THP-1巨噬细胞TNFSF4基因启动子区去甲基化,同时其mRNA表达水平增加。

关键词：同型半胱氨酸 TNFSF4基因 DNA甲基化 MS-PCR

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大鼠面神经核内非运动神经元的放电样式

华西医科大学学报 2002年第2期33卷 189-191页

作者：严亨秀张承武郑煜四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

目的　探讨大鼠面神经核内非运动神经元的放电样式。方法　在切断面神经引起面运动神经元逆行溃变后 ,细胞外记录面神经核内非运动神经元的单位放电 ,观察其放电样式与呼吸周期的关系。结果　在 18只大鼠共记录到 142个自发放电神经元 ... 详细信息

目的　探讨大鼠面神经核内非运动神经元的放电样式。方法　在切断面神经引起面运动神经元逆行溃变后 ,细胞外记录面神经核内非运动神经元的单位放电 ,观察其放电样式与呼吸周期的关系。结果　在 18只大鼠共记录到 142个自发放电神经元 ,其中呈非呼吸相关性放电的神经元 (NRRNs) 12 7个 (89.4% ) ;呈呼吸相关性放电的神经元 (RRNs) 15个 (10 .6 % )。结论　面神经核不仅控制面部骨骼肌的运动。

关键词：面神经核非运动神经元呼吸神经元放电电生理大鼠