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基于磁共振成像技术的牙龄推断研究进展

法医学杂志 2024年第2期40卷 112-117页

作者：施蕾薛冶邱丽蓉鲁婷范飞周宇驰邓振华四川大学华西基础医学与法医学院四川成都610041

牙龄推断是法医学年龄推断的重要内容和实现路径之一,影像技术是牙龄推断的重要技术手段。近年来,有研究初步证实了MRI在评估牙发育方面的可行性,该技术为牙发育评估提供了新的视角和可能性,有望成为更安全且准确的牙龄推断技术手段,但... 详细信息

牙龄推断是法医学年龄推断的重要内容和实现路径之一,影像技术是牙龄推断的重要技术手段。近年来,有研究初步证实了MRI在评估牙发育方面的可行性,该技术为牙发育评估提供了新的视角和可能性,有望成为更安全且准确的牙龄推断技术手段,但仍需进一步验证其准确性和适应性。本文综述了MRI技术在牙发育和年龄推断中的研究现状、研究瓶颈和局限性,为基于MRI技术的牙龄推断研究提供参考和借鉴。

关键词：法医人类学法医齿科学年龄推断磁共振成像牙龄牙发育综述

幽门螺杆菌cgt基因表达量测定活菌的方法建立及应用研究

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四川大学学报(医学版) 2024年第5期 1316-1321页

作者：唐智慧符立发张焱荣周博彦冯天勤杨文娟梁鸽严茜雅郑璨璘别明江王保宁四川大学华西基础医学与法医学院四川大学华西临床医学院四川大学华西公共卫生学院/四川大学华西第四医院四川大学学报(医学版)编辑部

目的本研究旨在建立一种通过幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,***）cgt基因表达量来检测活菌的方法，以便为临床精准治疗开发快速、便捷的检测手段。方法通过培养法对活菌计数，并利用RT-qPCR方法测定相应***胆固醇-α-葡萄糖基转... 详细信息

目的本研究旨在建立一种通过幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,***）cgt基因表达量来检测活菌的方法，以便为临床精准治疗开发快速、便捷的检测手段。方法通过培养法对活菌计数，并利用RT-qPCR方法测定相应***胆固醇-α-葡萄糖基转移酶（cholesterol-α-glucosyltransferase,CGT）保守编码基因cgt （hp0421）的mRNA表达水平，分析菌落数与cgt基因表达量之间的相关性，并构建回归方程；探索该方法可测定的线性范围、灵敏度和特异性。将此方法用于测定克拉霉素杀菌作用，验证其在细菌耐药检测中有效性。结果 ***菌落数为10～2、10～4、10～6、10～8 CFU/mL的cgt的Ct值分别是29.67±0.14、23.37±0.36、17.65±0.37、11.38±0.39，在***菌落数为10～1～10～8 CFU/mL范围内，RT-qPCR法测定的cgt基因表达量和活菌数对应的回归方程：y=-0.350 1x+12.49，决定系数R2=0.999 2、灵敏度为10～1 CFU/mL，此方法与13种其他菌无交叉反应。用0、5、10、20、40μg/mL质量浓度的克拉霉素作用12 h后培养法测定***的活菌lg值分别为2.57±0.02、2.45±0.01、2.19±0.02、1.91±0.07、1.33±0.05，对应cgt基因的Ct值分别为27.76±0.09、28.37±0.24、29.51±0.14、30.11±0.12、31.66±0.11，将cgt基因表达量代入上述方程推算活菌数为2.73±0.03、2.52±0.08、2.11±0.05、1.89±0.02、1.33±0.04，经分析差异无统计学意义（P>0.05）。结论本研究成功建立了通过测定***的cgt基因表达量反映活菌的方法，有效缩短了检测周期，为临床活菌检测提供了新方法。

关键词：幽门螺杆菌 cgt基因基因表达量活菌测定

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原发性肝脏神经内分泌肿瘤2例

临床与实验病理学杂志 2024年 1121-1122页

作者：王玉珏涂隐霞江丹四川大学华西医院病理科四川大学华西基础医学与法医学院

例1男性,32岁,因上腹部疼痛5年余,于2021年4月入院。当地医院诊断“肝包虫”,治疗后无明显好转,遂来我院就诊。查体无明显异常。血清学检查:乙肝标志物HBsAb、HBeAb和HBcAb阳性,肝功能Child-Pugh A级,包虫抗体IgG 0.18 S/CO,肿瘤标志物... 详细信息

例1男性,32岁,因上腹部疼痛5年余,于2021年4月入院。当地医院诊断“肝包虫”,治疗后无明显好转,遂来我院就诊。查体无明显异常。血清学检查:乙肝标志物HBsAb、HBeAb和HBcAb阳性,肝功能Child-Pugh A级,包虫抗体IgG 0.18 S/CO,肿瘤标志物均阴性。全腹增强CT示肝左叶见一大小10.9 cm×7.4 cm低密度影,其内密度欠均匀,边界清晰,增强后呈渐进性明显不均匀强化;肝右后叶下段见一大小2.0 cm×1.4 cm稍低密度结节,增强后呈渐进性强化。遂在全麻下行腹腔镜下左半肝切除术。

关键词：肝脏肿瘤神经内分泌肿瘤病例报道

家庭功能对青少年内外化问题行为的影响:共情和情绪能力的多重中介作用

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 146-152页

作者：彭银辉赵莉李祥龙宇徐新茂张换芳蒋莉华四川大学华西公共卫生学院/四川大学华西第四医院卫生政策与管理学系成都610041 四川大学华西临床医学院/四川大学华西医院全科医学中心/全科医学教研室成都610041

目的探析共情和情绪能力在家庭功能和青少年内外化问题行为关联之间的中介作用。方法采用成都儿童正向成长队列中2022年6–7月调查数据,研究对象为成都市6所中小学5~9年级学生。分别使用Achenbach儿童行为量表(CBCL)、中国家庭评估测量... 详细信息

目的探析共情和情绪能力在家庭功能和青少年内外化问题行为关联之间的中介作用。方法采用成都儿童正向成长队列中2022年6–7月调查数据,研究对象为成都市6所中小学5~9年级学生。分别使用Achenbach儿童行为量表(CBCL)、中国家庭评估测量工具(C-FAI)、人际反应指数中文版共情分量表(C-IRI)、中国积极青年发展量表(CPYD)情绪能力(EC)分量表评估调查对象的内外化问题行为、家庭功能、共情和情绪能力,以各量表总得分分别除以各维度条目数后的平均分为其最终得分。采用独立样本t检验或单因素方差分析,考察在不同人口统计学特征(性别、年级和地区)学生群体间,家庭功能、共情、情绪能力和内外化问题行为间的差异。采用Pearson相关分析考察家庭功能、共情、情绪能力与内外化问题行为之间的关系。使用AMOS 24.0验证假设模型,并通过结构方程模型检验共情和情绪能力在家庭功能与青少年内外化问题行为间的中介作用。结果本研究共纳入研究对象3026名,其中男生1548人(51.16%),女生1478人(48.84%);5年级798人(26.37%),6年级738人(24.39%),7年级567人(18.74%),8年级614人(20.29%),9年级309人(10.21%);城镇2064人(68.21%),农村962人(31.79%)。差异性分析结果显示,青少年内外化问题行为在不同年级学生之间差异有统计学意义(P=0.004),且家庭功能、共情能力得分在不同年级学生间差异也有统计学意义(均P<0.001),而青少年内外化问题行为在不同性别和地区间的差异无统计学意义(P=0.919,0.959)。相关性分析结果显示,家庭功能得分(得分越高家庭功能越差)与共情、情绪能力均呈负相关(r=−0.482、−0.432,P<0.01),与内外化问题行为呈正相关(r=0.220,P<0.01);共情与情绪能力呈正相关(r=0.402,P<0.01);共情、情绪能力与内外化问题行为各维度均呈负相关(r=−0.115、−0.305,P<0.01)。情绪能力在家庭功能与青少年内外化问题行为之间起部分中介作用,中介效应值为0.042(95%CI:0.031~0.057);共情、情绪能力在家庭功能与青少年内外化问题行为之间起链式中介作用,中介效应值为0.010(95%CI:0.007~0.014)。结论家庭功能可直接、并通过共情和情绪能力的链式中介作用影响青少年内外化问题行为。

关键词：家庭功能共情情绪能力青少年内外化问题行为多重中介模型

新型冠状病毒奥密克戎变异株感染住院患者疫苗接种情况与危重型的相关性分析

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中国循证医学杂志 2024年第3期24卷 258-264页

作者：胡粤霞夏鑫田欣王艳艳四川大学华西医院科技部/四川大学华西护理学院成都610041 四川大学华西医院老年医学中心/四川大学华西医院国家老年疾病临床医学研究中心成都610041

目的分析奥密克戎变异株感染住院患者的疫苗接种情况与奥密克戎危重型发生风险的相关性。方法回顾性分析2022年12月1日—2023年1月31日成都市某三甲医院收治的奥密克戎感染患者的临床资料,根据病情及《新型冠状病毒诊疗方案(试行第十版... 详细信息

目的分析奥密克戎变异株感染住院患者的疫苗接种情况与奥密克戎危重型发生风险的相关性。方法回顾性分析2022年12月1日—2023年1月31日成都市某三甲医院收治的奥密克戎感染患者的临床资料,根据病情及《新型冠状病毒诊疗方案(试行第十版)》把患者分为危重组和非危重组;根据疫苗接种情况,把患者分为未完成接种组、完成接种组、加强接种组。采用多因素Logistic回归分析疫苗接种、入院时的症状体征与危重型发生风险之间的关联。结果最终纳入3603例奥密克戎感染住院患者,危重组730例(20.3%),非危重组2873例(79.7%)。未完成接种组2399人(66.6%)、完成接种组433人(12.0%)、加强接种组771(21.4%)。与未完成接种组相比,完成接种组和加强接种组出现危重型的比例降低,随着年龄增加危重占比增高(P<0.05)。校正年龄、性别、基础疾病后,多因素Logistic分析结果显示完全接种[OR=0.67,95%CI(0.50,0.89)]与增强接种[OR=0.76,95%CI(0.61,0.94)]均与危重型发生风险降低有关。结论按次数接种疫苗、接种加强针均可有效降低奥密克戎感染后危重型发生风险。

关键词：新型冠状病毒感染奥密克戎变异株危重症患者疫苗

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肝癌外泌体在肿瘤微环境细胞间通讯中的作用

四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 6-12页

作者：冯唐杨欣蕊王琦为刘肖珩四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最致命的癌症之一。由于HCC发病隐匿、进展迅速且缺乏有效的治疗方法,预后极差,其5年平均生存率低于10%。肿瘤微环境是HCC发生发展所处的内环境,可调节HCC的起源、发展、侵袭和转移。... 详细信息

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最致命的癌症之一。由于HCC发病隐匿、进展迅速且缺乏有效的治疗方法,预后极差,其5年平均生存率低于10%。肿瘤微环境是HCC发生发展所处的内环境,可调节HCC的起源、发展、侵袭和转移。肝癌细胞在癌症进展过程中可以通过释放含有特异信号的外泌体调控肿瘤微环境中的肿瘤细胞、癌相关成纤维细胞、癌相关免疫细胞等不同细胞的生物学行为,进而促进癌症进展。然而,外泌体在这些过程中对具体细胞调控的确切分子机制和作用仍不清楚。本综述首先介绍了HCC微环境的组成和肿瘤微环境中外泌体的来源和特征以及力学因素对外泌体的影响。其次,本综述重点讨论了HCC外泌体对微环境中不同类型细胞的作用。我们看到,在包括肝癌在内的临床癌症治疗中使用外泌体作为载体仍然有许多必须克服的困难。首先,外泌体的同质性很难得到保证。其次,外泌体主要通过皮下注射给药,虽然这种方法简单易行,但吸收效率并不理想。第三,外泌体提取方法有限且效率低,因此难以大量制备外泌体。特别是对于外泌体介导的肿瘤免疫治疗,确保使用的外泌体数量足以引发有效的肿瘤免疫反应非常重要。随着鉴定、分离和纯化技术的改进,外泌体有望成功运用于早期HCC的临床诊断和肝癌的临床治疗中。

关键词：外泌体肿瘤微环境肝细胞肝癌细胞间通讯综述

细胞外基质硬度通过AMPK调控干细胞线粒体的形态异质性

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 47-52页

作者：段沛言刘艺林心怡任洁何佳刘肖珩谢静四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

目的探讨人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)中线粒体形态对细胞外基质硬度的力学响应以及腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)对线粒体力学响应的调控作用。方法首先,通过改变丙烯酰和甲叉双丙烯... 详细信息

目的探讨人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)中线粒体形态对细胞外基质硬度的力学响应以及腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)对线粒体力学响应的调控作用。方法首先,通过改变丙烯酰和甲叉双丙烯酰胺的单体浓度,制备杨氏模量为1 kPa(软)和20 kPa(硬)两种硬度的聚丙烯酰胺水凝胶;随后,将hMSCs培养在不同硬度水凝胶上,通过激光共聚焦显微镜和Western blot检测线粒体的形态变化和线粒体稳态相关蛋白AMPK的激活情况;最后,分别利用AMPK激活剂A-769662和抑制剂Compound C改变软硬基底上细胞AMPK的激活,观察线粒体的形态变化。结果hMSCs中线粒体的形态随水凝胶硬度变化呈现异质性,在1 kPa软基质上,线粒体融合,有74%的线粒体呈现出致密的长纤维网络状结构,而在20 kPa硬基质上高达63.3%线粒体为疏松的短片段化或者点状形貌。Western blot结果显示,硬基质上p-AMPK/AMPK的比例是软基质上的1.6倍,免疫荧光染色结果显示在硬的基质p-AMPK的表达升高,并且呈现出核定位,证明随着细胞外基质硬度的提高,细胞内AMPK的激活程度也不断上升。当在软基质上添加AMPK激活剂A-769662后,线粒体形态由纤维网络状向片段化转变,纤维化程度由74%下降到9.5%,同时AMPK抑制剂Compound C可以促进硬基质上线粒体融合,降低点状线粒体占比。结论细胞外基质硬度通过AMPK的激活调控hMSCs中线粒体的形态。硬基质会促进AMPK激活,导致线粒体分裂,形成大量片段化的短线粒体。这种基质硬度对线粒体形态的影响可以通过改变AMPK的磷酸化水平进行逆转。

关键词：细胞外基质硬度干细胞 AMPK激活线粒体形态分裂和融合

流体剪切力调控血脑屏障的力学生物学机制研究

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 74-80页

作者：杜聆语许博闻程琳岳红燕张怀奕沈阳四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

目的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)主要由脑微血管内皮细胞组成。本研究以大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)为模式细胞,探索正常生理、缺血低灌注和术后高灌注条件下的流体剪切力(flow she... 详细信息

目的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)主要由脑微血管内皮细胞组成。本研究以大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)为模式细胞,探索正常生理、缺血低灌注和术后高灌注条件下的流体剪切力(flow shear force,FSF)对BBB结构功能的保护、损伤和破坏的力学生物学机制。方法以1×10^(5)细胞/cm^(2)的密度接种rBMECs培养48 h,对rBMECs分别施加0.5、2和20 dyn/cm2的FSF,模拟脑血管狭窄的低灌注、正常生理和搭桥术后高剪切力作用下BBB结构的受力情况;同时设置静态培养组rBMECs作为对照(不施加力)。光学显微镜、扫描电子显微镜(SEM)以及激光共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态和骨架的变化。透射电子显微镜(TEM)观察细胞紧密连接,免疫荧光染色检测紧密连接相关蛋白(claudin-5、occludin、ZO-1)、黏着连接相关蛋白(VE-cadherin、PECAM-1)分布的变化。Western blot检测不同强度FSF下紧密连接相关蛋白(claudin-5、ZO-1、JAM4),黏着连接相关蛋白(VE-cadherin)和Rho GTPases信号关键蛋白(Rac1、Cdc42、RhoA)的表达。结果镜下观察发现:静态培养和低剪切作用(0.5 dyn/cm2)下细胞骨架排列紊乱,取向无规律;正常生理剪切作用(2 dyn/cm^(2))下,细胞骨架顺应FSF方向重排,胞间观察到有效的紧密连接结构;高剪切作用(20 dyn/cm^(2))下,细胞间间隙增大,未观察到有效的紧密连接结构。免疫荧光染色发现低剪切作用时,细胞间距减小,但胞间连接处紧密连接相关蛋白和黏着连接相关蛋白分布较少;正常生理条件下细胞连接紧密,大部分紧密连接相关蛋白的分布集中在胞间连接处;高剪切作用时,胞间距离显著增大,连接紧密和黏着连接的结构被破坏。Western blot结果发现:低剪切作用下,claudin-5、ZO-1和VE-cadherin与对照组相比均上调(P<0.05);正常生理剪切作用下,claudin-5、ZO-1、JAM4以及VE-cadherin与对照组相比均呈现高表达(P<0.05);高剪切作用下,claudin-5、ZO-1、JAM4以及VEcadherin的表达与正常生理剪切作用组比较下调(P<0.05);生理条件下胞内的Rho GTPases(Rac1、Cdc42、RhoA)表达上调,高于其他实验组(P<0.05),而低剪切和高剪切作用下的Rho GTPases表达均较正常生理剪切作用组下调(P<0.05)。结论正常生理条件下的FSF有助于维持BBB结构的完整性,而低剪切或高剪切均会损伤或破坏血脑屏障的结构,FSF对BBB的调控与紧密连接相关蛋白和黏着连接相关蛋白的表达和分布密切相关。

关键词：血脑屏障流体剪切力大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白黏着连接相关蛋白

矩形水凝胶微凹槽的空间约束调控人脐静脉内皮细胞的形态和排列

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 87-94页

作者：江文丽钟健欧阳智沈钧怡邱艳曾烨四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室成都610041

目的本研究拟构建微米级矩形水凝胶凹槽,探究人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在三维空间约束条件下的形态和排列规律。方法使用四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯水凝胶制备宽度为60μm、100μm、140μm的矩形... 详细信息

目的本研究拟构建微米级矩形水凝胶凹槽,探究人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在三维空间约束条件下的形态和排列规律。方法使用四臂-聚乙二醇-丙烯酸酯水凝胶制备宽度为60μm、100μm、140μm的矩形微凹槽,检测其尺寸和纤连蛋白(fibronectin,FN)黏附情况;在FN包被的微凹槽中接种HUVECs,培养48 h后检测细胞的形态和取向,利用鬼笔环肽标记细胞骨架和激光共聚焦显微镜观察水凝胶微凹槽中HUVECs细胞骨架取向,以无微图案平面为对照。结果构建的水凝胶微凹槽形态均一、结构完整,边缘清晰,宽度误差<3.5%,不同宽度水凝胶微凹槽的深度差异较小,FN黏附均匀,为细胞提供了微图案化的生长界面。对照组中细胞排列杂乱,取向随机,细胞取向角为(46.9±1.8)°,而水凝胶微凹槽中细胞取向角显著减小(P<0.001),但随着水凝胶微凹槽宽度增加而增大,60μm、100μm、140μm水凝胶微凹槽中细胞取向角分别为(16.4±2.8)°、(24.5±3.2)°、(30.3±3.5)°;与对照组相比较(35.7%),不同宽度水凝胶微凹槽中取向角<30°的细胞数量增多(P<0.001),但随着水凝胶微凹槽宽度增加,取向角<30°的细胞数量逐渐减少(79.9%、62.3%、54.7%),而取向角60°~90°的细胞数量逐渐增加(P<0.001)。微凹槽中细胞胞体变小、变圆,细胞沿微凹槽方向排列,细胞骨架排列发生相应改变,对照组中细胞骨架纤维丝排列方向随机,取向角为(45.5±3.7)°,各取向角内骨架纤维数量分布均匀,但60μm、100μm、140μm的水凝胶微凹槽中的细胞骨架蛋白纤维取向角显著降低,分别为(14.4±3.1)°、(24.7±3.5)°、(31.9±3.3)°,不同宽度水凝胶微凹槽中取向角<30°的骨架纤维数量明显增加(P<0.001),但随着水凝胶微凹槽宽度增加,取向角<30°的骨架纤维数量逐渐减少,而取向角60°~90°的骨架纤维数量逐渐增加(P<0.001)。结论水凝胶微凹槽可调控HUVECs形态与取向,在一定程度上可模拟血管内皮细胞的在体微环境,为研究血管内皮细胞的独特生理功能提供了更符合生理条件的实验模型,但三维空间约束影响血管内皮细胞形态和组装的分子机制有待进一步研究。

关键词：微图案血管内皮细胞细胞形态细胞取向细胞骨架