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三种噬菌体对二氯异氰尿酸钠消毒剂抵抗力的比较

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中华预防医学杂志 2006年第1期40卷 25-28页

作者：陈昭斌张朝武许欣朱敏王国庆四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室

目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体,研究噬菌T4、φχ174D和f2对二氯异氰尿酸钠(NaDCC)消毒剂的抵抗力。方法消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活实验、中和剂鉴定实验,噬菌体的检测采用双层琼脂法。结... 详细信息

目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体,研究噬菌T4、φχ174D和f2对二氯异氰尿酸钠(NaDCC)消毒剂的抵抗力。方法消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活实验、中和剂鉴定实验,噬菌体的检测采用双层琼脂法。结果(1)有效氯浓度为150mg/L的NaDCC溶液与噬菌体T4作用40min,或有效氯浓度为300mg/L作用5min,即可达到消毒水平[对噬菌体T4的灭活对数值或噬菌体T4的对数减少值(log10No-log10Nt)≥4.00log10]。(2)有效氯浓度为300mg/L的NaDCC溶液与噬菌体φχ174D作用5min,或有效氯浓度为400mg/L作用3min达到消毒。(3)有效氯浓度为2000mg/L的NaDCC溶液与噬菌体f2作用20min,或有效氯浓度为4000mg/L作用5min达到消毒。结论上述3种噬菌体对NaDCC的抵抗力为噬菌体f2>噬菌体T4>噬菌体φχ174D。

关键词：噬菌体二氯异氰尿酸钠抵抗力

φχ174D、T4和f2噬菌体对碘伏消毒剂抵抗力的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2006年第2期20卷 78-80页

作者：陈昭斌许欣张朝武朱敏王国庆孙巍四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室

目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体,比较研究了噬菌体φχ174D、T4和f2对碘伏消毒剂的抵抗力。方法消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活试验、中和剂鉴定试验,噬菌体的检测采用双层琼脂法。结果(1)有... 详细信息

目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体,比较研究了噬菌体φχ174D、T4和f2对碘伏消毒剂的抵抗力。方法消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活试验、中和剂鉴定试验,噬菌体的检测采用双层琼脂法。结果(1)有效碘浓度为500mg/L的碘伏溶液与噬菌体φχ174D作用40min,或有效碘浓度为750mg/L,作用10min,或有效碘浓度为1000mg/L,作用5min即可达到消毒水平[对噬菌体φχ174D的灭活对数值(LIV)或噬菌体φχ174D的对数减少值(LRV)(log10No-log10Nt)≥4·00log10]。(2)有效碘浓度为600mg/L的碘伏溶液与噬菌体T4作用40min,或有效碘浓度为700mg/L,作用5min即达到消毒水平。(3)有效碘浓度为50mg/L的碘伏溶液与噬菌体f2作用10min,或有效碘浓度为75mg/L,作用10min或有效碘浓度为100mg/L,作用5min达到消毒效果。结论上述三种噬菌体对碘伏的抵抗力由强到弱为:噬菌体φχ174D>噬菌体T4>噬菌体f2。

关键词：细菌噬菌体T4 细菌噬菌体φχ174 噬菌体f2 碘伏抵抗力

多响应曲面优化-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测食源性致病菌

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高等学校化学学报 2009年第6期30卷 1121-1127页

作者：渠凌丽黎源倩郑波何成艳何玲李永新四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室成都610041

建立了食品中常见致病菌:沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbO157基因、志贺菌的ipaH基因及副溶血性弧菌Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR产物-毛细管电泳快速检测方法.根据沙门菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺菌及副溶血性弧菌... 详细信息

建立了食品中常见致病菌:沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbO157基因、志贺菌的ipaH基因及副溶血性弧菌Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR产物-毛细管电泳快速检测方法.根据沙门菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺菌及副溶血性弧菌的特异性基因保守序列设计出多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系.采用多响应曲面法优化毛细管电泳的分离条件,以含有DNA荧光染料SYBR GreenⅠ的1.0%甲基纤维素为筛分介质,通过毛细管电泳-激光诱导荧光同时检测4种常见致病菌的PCR扩增产物.在优化的多重PCR反应体系和毛细管筛分电泳条件下,此方法可以同时检测出沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbO157基因、志贺菌的ipaH基因及副溶血性弧菌Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR扩增产物,25 min内即可完成检测.迁移时间的日内相对标准偏差为0.92%～1.58%.通过多响应曲面的优化,有效改善了毛细管电泳对DNA分子的分离能力.

关键词：多响应曲面优化毛细管电泳激光诱导荧光检测食源性致病菌多重PCR

T4、φχ174D和f2三种噬菌体对戊二醛消毒剂抵抗力的比较研究

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四川大学学报（医学版） 2006年第2期37卷 270-273页

作者：陈昭斌张朝武许欣朱敏王国庆四川大学华西公共卫生学院医学检验学教研室

目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体。方法比较研究噬菌体T4、φχ174D和f2对戊二醛消毒剂的抵抗力。消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活试验、中和剂鉴定试验、噬菌体的检测采用双层琼脂法。结果13000... 详细信息

目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体。方法比较研究噬菌体T4、φχ174D和f2对戊二醛消毒剂的抵抗力。消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活试验、中和剂鉴定试验、噬菌体的检测采用双层琼脂法。结果13000mg/L的戊二醛对噬菌体T4作用20min,或6000mg/L的戊二醛对噬菌体T4作用5min即可达到消毒水平(对噬菌体T4的灭活对数值(LIV)或噬菌体T4的对数减少值〔LRV)(log10No-log10Nt)≥4.00log10〕;22500mg/L的戊二醛对噬菌体φχ174D作用20min,或5000mg/L的戊二醛对噬菌体φχ174D作用5min达到消毒水平;34000mg/L的戊二醛对噬菌体f2作用40min,或8000mg/L的戊二醛对噬菌体f2作用10min达到消毒水平。结论上述三种噬菌体对戊二醛的抵抗力由强到弱为:噬菌体f2>噬菌体T4>噬菌体φχ174D。

关键词：噬菌体T4 噬菌体ψX174D 噬菌体f2 戊二醛抵抗力

毛细管电泳-激光诱导荧光检测肌腱和肌腱细胞中的羟脯氨酸

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分析化学 2006年第10期34卷 1441-1444页

作者：邹晓莉周春艳黎源倩曾红燕四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室成都610041

建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测（CE-LIF）分析羟脯氨酸的方法。肌腱和肌腱细胞中的胶原蛋白碱水解生成氨基酸,经异硫氰酸荧光素（FITC）衍生,采用LIF-CE分离测定胶原蛋白特异性氨基酸-羟脯氨酸。羟脯氨酸在0.5μg/L;×103μg/L浓度... 详细信息

建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测（CE-LIF）分析羟脯氨酸的方法。肌腱和肌腱细胞中的胶原蛋白碱水解生成氨基酸,经异硫氰酸荧光素（FITC）衍生,采用LIF-CE分离测定胶原蛋白特异性氨基酸-羟脯氨酸。羟脯氨酸在0.5μg/L;×103μg/L浓度范围内线性关系良好;检出限为0.5μg/L。相对迁移率和相对峰高的相对标准偏差（RSD）分别为5.0%和6.1%。测定了60份肌腱和9份细胞样品,加标回收率为95%;10%。将所建立的毛细管电泳方法与高效液相色谱法（HPLC）进行比较,两者测定结果相对误差为-1.9%;.0%。本法仅需一次荧光标记,操作简单、快速灵敏,12min内完成一个分析周期,适于测定肌腱和细胞样品。

关键词：羟脯氨酸激光诱导荧光检测毛细管电泳肌腱细胞

非融合表达β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌的构建和性能研究

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四川大学学报（医学版） 2009年第1期40卷 29-32页

作者：汪川刘衡川裴晓方余倩张朝武四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室成都610041

目的构建能非融合表达高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,并对其酶活性和分泌性能进行研究。方法提取能在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶的重组质粒pMG36e-lacZ1.1480和pMG36e-lacZwch9901,电转化乳酸乳... 详细信息

目的构建能非融合表达高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,并对其酶活性和分泌性能进行研究。方法提取能在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶的重组质粒pMG36e-lacZ1.1480和pMG36e-lacZwch9901,电转化乳酸乳球菌乳酸亚种MG1363。测定重组菌在不同培养时间和乳糖浓度下的β-半乳糖苷酶活性,及在不同培养条件下的酶分泌率。结果携带pMG36e-lacZwch9901的重组乳酸乳球菌(MG1363/pMG36e-lacZ wch9901)具最高酶活性,其β-半乳糖苷酶活性达(16.95±0.09)U/mgpro,为基因初始菌的2.75倍;重组乳酸乳球菌培养24h产酶达高峰;培养基含乳糖时,重组菌酶活测定结果表现为降低;重组乳酸乳球菌表达的β-半乳糖苷酶可分泌到培养基中,当培养基不含红霉素,而含20g/L乳糖时,分泌率最高,达(27.09±0.05)%。结论获得了能非融合表达和分泌高活性β-半乳糖苷酶的重组乳酸乳球菌,可在此基础上进一步研制β-半乳糖苷酶活菌释放体。

关键词： β-半乳糖苷酶乳酸乳球菌乳糖不耐受蛋白表达蛋白分泌

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高氧水耐缺氧、抗疲劳作用机制初探

四川大学学报（医学版） 2005年第1期36卷 74-76页

作者：刘衡川张弘李灶平王波四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室成都610041

目的　观察高氧水耐缺氧、抗疲劳的功能 ,初步研究其作用机制。方法　通过对小鼠体质量值、血清尿素氮、肝糖原、乳酸含量、小鼠负重游泳时间、缺氧生存时间、亚硝酸钠中毒存活时间的测定 ,了解小鼠体能变化情况。结果　小鼠运动后血清... 详细信息

目的　观察高氧水耐缺氧、抗疲劳的功能 ,初步研究其作用机制。方法　通过对小鼠体质量值、血清尿素氮、肝糖原、乳酸含量、小鼠负重游泳时间、缺氧生存时间、亚硝酸钠中毒存活时间的测定 ,了解小鼠体能变化情况。结果　小鼠运动后血清尿素氮含量降低 (P<0 .0 5 ) ;肝糖原储备量增加 (P<0 .0 5 ) ;常压耐缺氧生存时间、急性脑缺血性缺氧生存时间均延长 (P<0 .0 5 )。游泳时间虽无明显差异 ,但有延长的趋势。结论　高氧水能增加能量储备 ,提高小鼠的应激生存能力 ,具有耐缺氧。

关键词：高氧水缺氧抗疲劳小鼠

德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的非融合表达

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四川大学学报（医学版） 2008年第4期39卷 544-546页

作者：汪川张朝武余倩刘衡川裴晓方四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室成都610041

目的在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶,为构建能高效表达β-半乳糖苷酶的食品级益生菌株奠定基础。方法选择德氏乳杆菌保加利亚亚种(1.1480和wch9901)β-半乳糖苷酶基因(lacZ)起始密码ATG上游-18bp到ATG下游... 详细信息

目的在大肠杆菌中非融合表达德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶,为构建能高效表达β-半乳糖苷酶的食品级益生菌株奠定基础。方法选择德氏乳杆菌保加利亚亚种(1.1480和wch9901)β-半乳糖苷酶基因(lacZ)起始密码ATG上游-18bp到ATG下游1bp的一段包含SD位点和ATGA位点的序列为上游引物,PCR扩增lacZ,插入表达质粒pMG36e构建重组表达质粒。转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,提取重组质粒进行酶切鉴定和测序,并测定转化菌β-半乳糖苷酶活性。结果重组质粒酶切鉴定合格;其中插入的外源片段序列与德氏乳杆菌保加利亚亚种lacZ标准序列符合率达99%以上;携带重组质粒pMG36e-lacZ1.1480的大肠杆菌DH5α酶活性为3.074U/mL,酶比活性为6.939U/mgpro;携带重组质粒pMG36e-lacZwch9901的大肠杆菌DH5α酶活性为4.755U/mL,酶比活性为8.537U/mgpro。结论成功在大肠杆菌中非融合表达了德氏乳杆菌保加利亚亚种β-半乳糖苷酶;本研究选择的SD位点和ATGA位点能在大肠杆菌中有效地引导蛋白的非融合表达。

关键词： β-半乳糖苷酶基因非融合表达重组德氏乳杆菌保加利亚亚种

沙门菌REP-PCR分子分型技术的优化及其在耐药菌株中的应用

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卫生研究 2009年第6期38卷 736-739页

作者：汪川余倩马丽雅张朝武裴晓方刘衡川四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室成都610041

目的优化沙门菌REP-PCR分子分型技术,并在沙门菌耐药菌株分型研究中应用,为构建沙门菌同源性追踪体系提供数据。方法以肠炎沙门菌510041基因组DNA为模板,根据参考文献确定REP引物,PCR扩增其基因组中靶序列。对反应体系模板量、Mg2+浓度... 详细信息

目的优化沙门菌REP-PCR分子分型技术,并在沙门菌耐药菌株分型研究中应用,为构建沙门菌同源性追踪体系提供数据。方法以肠炎沙门菌510041基因组DNA为模板,根据参考文献确定REP引物,PCR扩增其基因组中靶序列。对反应体系模板量、Mg2+浓度和引物浓度的优化,采用对优化项目设置梯度,其它条件不变的方法进行。以优化的REP-PCR法分析24株沙门菌流行耐药株REP-PCR指纹图谱。根据指纹图谱条带对菌株进行分型,并将分型结果与菌株耐药谱分型结果作比较。结果PCR反应体系DNA模板量100ng/25μl,Mg2+浓度2.0mmol/L,上下游引物浓度各0.4μmol/L时,指纹图谱条带最清晰、明亮;不同血清群和血清型沙门菌株间REP-PCR指纹图谱差异较大,可在0.5kb到2.5kb范围内出现2至6条条带;24株沙门菌流行耐药株用该法可分为15型,根据耐药谱可分为7型。结论建立了优化的沙门菌REP-PCR分子分型技术;REP-PCR指纹图谱分型比耐药谱分型更加敏感。

关键词：沙门菌 REP-PCR 耐药谱