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四川不同寄主禾谷镰孢菌复合种的群体遗传多样性及相互侵染关系

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四川农业大学学报 2024年第4期42卷 752-761页

作者：李晓迪陈思怡陈国亮刘林文陈华保杨春平常小丽四川农业大学农学院成都611130 四川省玉米大豆带状复合种植工程技术中心成都611130

【目的】探明四川地区小麦、玉米和大豆3种寄主禾谷镰孢菌复合种(Fusarium graminearum species complex,FGSC)的群体遗传多样性及相互侵染关系。【方法】采用多重PCR和PCR-VNTR分子标记技术分析不同寄主来源菌株的毒素类型和群体遗传... 详细信息

【目的】探明四川地区小麦、玉米和大豆3种寄主禾谷镰孢菌复合种(Fusarium graminearum species complex,FGSC)的群体遗传多样性及相互侵染关系。【方法】采用多重PCR和PCR-VNTR分子标记技术分析不同寄主来源菌株的毒素类型和群体遗传多样性,并通过高粱粒接种法检测菌株在不同寄主间的相互侵染作用。【结果】来源于3种寄主的禾谷镰孢菌复合种菌株被鉴定为禾谷镰孢菌(F. graminearum)和亚洲镰孢菌(F. asiaticum),其中禾谷镰孢菌的毒素化学型为3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-ADON)和15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-ADON),而亚洲镰孢菌的毒素化学型为雪腐镰刀菌烯醇(NIV);各寄主菌株的群体遗传多样性存在差异,以小麦菌株群体遗传多样性最高,且与大豆菌株遗传距离较远;同时,各寄主菌株间能够相互侵染,但致病力存在差异。【结论】来源于四川小麦、玉米和大豆3种寄主的禾谷镰孢菌复合种遗传多样性存在差异,但可相互侵染致病,具有加重其所致病害在该地区发生的风险。

关键词：禾谷镰孢菌复合种毒素基因型群体遗传多样性致病性

NOS2基因DNA甲基化编辑调节NO浓度影响肌肉发育通路基因的表达

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畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 984-994页

作者：申琦王凯赵真坚陈栋余杨崔晟頔王俊戈陈子旸吴平先唐国庆四川农业大学动物科技学院农业农村部畜禽生物组学重点实验室成都611130 四川农业大学畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室成都611130 四川农业大学动物科技学院猪禽种业全国重点实验室成都611130 新希望六和股份有限公司北京100102 国家生猪技术创新中心重庆402460

旨在探究对一氧化氮合成酶(NOS)2进行DNA甲基化编辑后对肌红蛋白的调控作用机制,并研究其对神经元一氧化氮合酶(nNOS)和内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)的表达水平是否有影响。本试验采用DNA甲基化编辑技术在猪肾细胞系PK-15细胞对基因NOS2... 详细信息

旨在探究对一氧化氮合成酶(NOS)2进行DNA甲基化编辑后对肌红蛋白的调控作用机制,并研究其对神经元一氧化氮合酶(nNOS)和内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)的表达水平是否有影响。本试验采用DNA甲基化编辑技术在猪肾细胞系PK-15细胞对基因NOS2进行甲基化编辑,在猪肾细胞中检测NOS2基因启动子DNA甲基化水平、NOS2表达水平、细胞内一氧化氮浓度以及肌纤维和肌红蛋白相关基因的表达。结果发现,NOS2基因启动子前500 bp区域平均DNA甲基化水平降低,但差异不显著,而gRNA2结合位点附近的CpG位点甲基化水平增高。此外,对NOS2进行甲基化编辑后,NOS2基因表达量和其iNOS蛋白质表达量显著降低。随着NOS2表达降低,nNOS和eNOS表达显著增加。MYHC-Ⅱb和MYHC-Ⅱx的表达水平显著下降,Myoglobin蛋白表达也显著下降。综上,NOS2基因的异常表达能够影响细胞中的NO生成,同时也会影响NOS1和NOS3的表达,以及和肌肉发育相关基因的表达。

关键词： NOS2 DNA甲基化 NO 肌纤维肌红蛋白

陆地生态系统植物碳、氮和磷含量对增温的响应：Meta分析

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应用生态学报 2024年

作者：黄路路周慧玲王启帆赵欣然陈锦辉游成铭徐琳谭波徐振锋徐红伟四川农业大学林学院碳汇研究中心/长江上游林业生态工程四川省重点实验室

本研究采用Meta分析方法，整合发表在全球的55篇文章的264组数据，研究增温时间和增温强度对植物碳、氮、磷含量的影响。结果表明：增温显著降低植物地上碳（效应值为-1.7%）、地下碳（-4.0%）、枯落物碳（-3.7%）、地上氮（-7.0%）和... 详细信息

本研究采用Meta分析方法，整合发表在全球的55篇文章的264组数据，研究增温时间和增温强度对植物碳、氮、磷含量的影响。结果表明：增温显著降低植物地上碳（效应值为-1.7%）、地下碳（-4.0%）、枯落物碳（-3.7%）、地上氮（-7.0%）和枯落物氮（-6.4%）含量。在生态系统类型水平上，增温显著降低草地植物地上碳（-0.8%）、地上氮（-5.9%）、地下碳（-7.4%）、枯落物碳（-2.1%）和枯落物氮（-13.4%）含量，而显著增加灌丛植物地上碳(+2.7%)和森林的枯落物磷(+42.4%)含量。短期增温（2 ℃增温强度降低植物地上磷（-3.7%）和地下磷（-6.5%）含量。植物地上碳和地上氮的效应值与湿度指数呈显著正相关。增温对陆地生态系统植物碳、氮和磷含量均表现为负效应，且这种影响受增温时间和增温强度的调节。

关键词：增温植物养分含量养分利用效率生态系统功能 Meta分析

硝化/脲酶抑制剂和生物炭对设施农业土壤微生物及碳氮循环影响的研究进展

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江苏农业科学 2024年第9期52卷 1-11页

作者：郭延轲赵长盛刘伟高新国李鲁震刘绪振董亚男齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省分析测试中心山东济南250014

在我国设施农业生产快速发展的形势下,肥料的高投入量和低利用率的问题亟待解决。氮肥以硝态氮淋溶、温室气体排放的方式释放到自然环境中,在影响土壤微生物环境和碳氮循环过程的同时,加剧生态污染。针对氮肥高投入量带来的设施农业土... 详细信息

在我国设施农业生产快速发展的形势下,肥料的高投入量和低利用率的问题亟待解决。氮肥以硝态氮淋溶、温室气体排放的方式释放到自然环境中,在影响土壤微生物环境和碳氮循环过程的同时,加剧生态污染。针对氮肥高投入量带来的设施农业土壤养分流失问题,了解硝化/脲酶抑制剂和生物炭对设施土壤微生物及碳氮循环的影响机制,对维持微生物群落动态平衡、温室气体减排、提高设施农业生产力具有重要指导意义。本文综述硝化/脲酶抑制剂、生物炭影响土壤养分循环的作用机制,对多种抑制剂的现存优缺点和生物炭特性进行系统分析,总结三者近年来在设施农业中的研究应用进展,包括硝化/脲酶抑制剂和生物炭的单独施用与联合施用对微生物活性、温室气体排放、土壤质量、作物产量的影响,探究3种物质在田间的最佳施用方式及施用量。考虑到硝化/脲酶抑制剂和生物炭在现阶段的应用仍存在局限性,本文在讨论新型硝化/脲酶抑制剂发展现状的同时,对3种物质未来发展趋势和使用方法进行展望,以期为硝化抑制剂、脲酶抑制剂、生物炭在设施农业中的合理应用提供科学依据。

关键词：微生物碳氮排放硝化抑制剂脲酶抑制剂生物炭设施土壤

农村学前教育服务质量现状、成因及对策——以四川省为例

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华中农业大学学报（社会科学版） 2024年第4期 166-177页

作者：唐雅琳王天仪徐定德北京大学现代农学院/中国农业政策研究中心北京100871 四川农业大学管理学院/四川省农村发展研究中心四川成都611130

促进农村学前教育服务质量均等化是完善农村教育公共服务、在“幼有所育”上持续发力的重要内容。基于2022年北京大学中国乡村振兴战略智库四川农村学前教育专题调查,分析农村幼儿园整体质量和县−乡−村均等化水平,并结合政策文件和访谈... 详细信息

促进农村学前教育服务质量均等化是完善农村教育公共服务、在“幼有所育”上持续发力的重要内容。基于2022年北京大学中国乡村振兴战略智库四川农村学前教育专题调查,分析农村幼儿园整体质量和县−乡−村均等化水平,并结合政策文件和访谈资料分析潜在的原因。研究表明,农村幼儿园质量均等化建设成效与问题并存。成效包括:在硬件设施和安全卫生方面,县、乡、村幼儿园质量达标率和质量均等化程度较高;问题包括:在教职工队伍、内部管理和保育教育方面,三类幼儿园均面临教职工配备不齐、资质有待提升和课程开设不齐全等挑战,且质量均等化程度较低,其中村级园质量尤为滞后。原因在于,“多管齐下”的经费投入和监管体制保障了较均衡的硬件质量,但“缺编制待遇、缺发展前景”导致村级园教师资质、管理和保教水平落后于县、乡幼儿园。由此提出:发挥县级政府统筹作用,完善县乡村学前教育网络;优化投资结构并完善监管;加强点对点帮扶,创新管理机制;以村级园为重点改善幼儿教师待遇,提升教师资质;外引和内培并举,提升保教质量。

关键词：农村学前教育质量均等化基本公共服务县域统筹

POR基因敲除、回补及过表达LO2细胞株的构建及作为AFB_(1)染毒模型的初步应用

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浙江农业学报 2024年第2期36卷 272-283页

作者：王琳袁建林缪昌马玉晗曹三杰赵勤四川农业大学动物医学院猪病研究中心四川成都611130 农业农村部兽用药物与兽医诊断技术四川科学观测站四川成都611130

为了构建POR基因稳定敲除(POR^(KO))、回补(PORCO)、过表达(POR^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向POR基因的sgRNA并克隆至lentiCRIS... 详细信息

为了构建POR基因稳定敲除(POR^(KO))、回补(PORCO)、过表达(POR^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向POR基因的sgRNA并克隆至lentiCRISPR v2载体,进行慢病毒包装与感染,筛选出LO2 POR^(KO)单克隆细胞后进行测序及Western blot鉴定。其次用同源重组方法构建pcDNA3.1(+)/myc-His B-POR重组质粒,经对POR^(KO)细胞和野生型细胞转染分别构建LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株,以G-418筛选后进行Western blotting鉴定。再用4μmol·L^(-1)及8μmol·L^(-1)AFB_(1)分别对野生型、LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株染毒48 h,观察细胞形态并测定细胞存活率。结果表明,靶向exon5的sgRNA-2可成功敲除POR基因,得到LO2 POR^(KO)细胞株;成功构建表达POR重组蛋白的LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株。对AFB_(1)处理后的各细胞存活率测定结果表明,相较于野生型LO2细胞43.66%±0.58%和27.90%±0.46%的存活率,LO2 POR^(KO)细胞存活率具有极显著性差异,均为100%(P<0.0001);LO2 PORCO细胞存活率仍有显著性差异,分别为57.07%±0.74%和42.54%±0.68%(P<0.05);LO2 POR^(OE)细胞存活率则显著降低,分别为24.58%±0.92%和17.99%±0.81%(P<0.01)。综上所述,本研究成功构建了LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株,并以AFB_(1)染毒处理分别研究了各细胞株的存活率和细胞形态学变化,发现POR基因对AFB_(1)所致细胞毒性的影响巨大。研究结果为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究奠定了基础。

关键词： POR CRISPR/Cas9 LO2细胞 AFB_(1)

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菲律宾蛤仔血细胞吞噬作用的功能分析

海洋湖沼通报 2024年第1期46卷 90-97页

作者：刘静翟冰徐涛黄小丽刘栋胡发文青岛农业大学分析测试中心山东青岛266109 山东省海洋科学研究院山东青岛266104 青岛市浅海底栖渔业增殖重点实验室山东青岛266104

菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)免疫系统属于非特异性免疫,血细胞在其免疫防御中起着重要的作用。本文首先利用扫描电镜和透射电镜观察了大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和鳗弧菌(Vibrio angu... 详细信息

菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)免疫系统属于非特异性免疫,血细胞在其免疫防御中起着重要的作用。本文首先利用扫描电镜和透射电镜观察了大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的形貌结构,随后利用光镜和透射电镜比较和观察了血细胞对三种菌的吞噬作用。实验结果表明,大肠杆菌呈杆状,平均1.6×0.6μm;金黄色葡萄球菌呈球状,菌体平均1.3×1.1μm,呈葡萄串状排列;鳗弧菌呈弧状,有一根细长的极生单鞭毛,菌体平均1.3×0.7μm,鞭毛长平均4.5μm;光镜结果显示血细胞对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鳗弧菌的吞噬率分别为38.7%、30.0%和24.4%;透射电镜观察发现血细胞可以通过丝状伪足、片状伪足,或直接用细胞膜粘附和包裹细菌,被吞噬的细菌能被溶酶体消化,并且发现吞噬大肠杆菌和金黄色葡萄球菌后对血细胞超微结构影响不大,而吞噬鳗弧菌后,血细胞超微结构损伤明显,细胞发生凋亡或死亡。由此作者认为菲律宾蛤仔血细胞对三种菌吞噬能力的差异跟细菌的大小、易聚集程度、致病性有关系。

关键词：菲律宾蛤仔血细胞吞噬大肠杆菌金黄色葡萄球菌鳗弧菌

加味枳术散对断奶仔兔生长性能、血常规、血清生化指标及肠道消化酶的影响

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饲料研究 2024年第7期47卷 66-73页

作者：刘天强王英杰邓阳漆信桥唐华侨通威农业发展有限公司四川成都610041 四川农业大学动物医学院四川成都611130 成都市畜禽遗传资源保护中心四川成都610081

试验旨在研究饲粮中添加加味枳术散对断奶仔兔生长性能、血常规、血清生化指标及肠道消化酶的影响。试验选取90只35日龄、体重相近、健康的新西兰白兔,随机分为5组,每组6个重复,每个重复3只兔。对照组仔兔饲喂基础饲粮,试验组分别在基... 详细信息

试验旨在研究饲粮中添加加味枳术散对断奶仔兔生长性能、血常规、血清生化指标及肠道消化酶的影响。试验选取90只35日龄、体重相近、健康的新西兰白兔,随机分为5组,每组6个重复,每个重复3只兔。对照组仔兔饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加2‰的恩诺沙星粉剂以及1‰、3‰和5‰的加味枳术散粉剂。预试期7 d,正式试验期14 d。结果显示,与对照组相比,加味枳术散组断奶仔兔的平均日增重显著升高(P<0.05),腹泻率明显降低且未出现仔兔死亡。与对照组相比,加味枳术散组断奶仔兔的免疫器官指数显著提高(P<0.05),且呈剂量依赖性。与对照组相比,加味枳术散组的白细胞、淋巴细胞和中性粒细胞数量均显著降低(P<0.05);5‰加味枳术散组的免疫球蛋白M含量显著升高(P<0.05)。加味枳术散可以增强小肠的脂肪酶、α-淀粉酶、纤维素酶和胰蛋白酶的分泌,并通过上调小肠中葡萄糖转运载体的基因表达水平,促进仔兔肠道对能量的吸收。研究表明,断奶仔兔饲粮中添加加味枳术散能够改善断奶仔兔的生长性能,增强机体免疫功能,降低机体的炎症水平,提高肠道的消化吸收能力,饲粮中加味枳术散的适宜添加水平为3‰~5‰。

关键词：加味枳术散断奶仔兔生长性能免疫消化酶

鸭疫里默氏杆菌CH-1株37℃和42℃的转录组测序及比较分析

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微生物学报 2024年第7期64卷 2368-2380页

作者：汪思懿郭方程安春刘马峰西南动物疫病防控技术教育部工程研究中心四川成都611130 四川省动物疫病防控国际联合研究中心四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川成都611130

【目的】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer)是一种感染鸭的革兰氏阴性菌,给养鸭业造成较大经济损失。由于鸭体内温度为42℃,当鸭疫里默氏杆菌感染鸭后必然会调节自身基因表达来适应鸭体内温度。为鉴定鸭疫里默氏杆菌CH-1株感染... 详细信息

【目的】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer)是一种感染鸭的革兰氏阴性菌,给养鸭业造成较大经济损失。由于鸭体内温度为42℃,当鸭疫里默氏杆菌感染鸭后必然会调节自身基因表达来适应鸭体内温度。为鉴定鸭疫里默氏杆菌CH-1株感染鸭的适应性机制,本研究测定和比较了鸭疫里默氏杆菌CH-1株在37℃和42℃下的转录组。【方法】将鸭疫里默氏杆菌RA-CH-1株在37℃培养至对数生长期后,分别在37℃和42℃热应激1 h,收集菌体,提取总RNA。利用转录组测序(RNA-seq)技术获得RA-CH-1在37℃和42℃下的转录组原始数据,筛选得到差异表达基因,通过基因本体论(geneontology,GO)数据库和京都基因与基因组百科全书(Kyotoencyclopediaof genes and genomes,KEGG)数据库对差异表达基因进行富集分析。选取dnaK作为热应激反应基因进行功能初步鉴定。【结果】共筛选获得234个显著差异表达基因,其中169个基因显著上调,65个基因显著下调。显著差异表达基因通过GO富集分析主要富集在核苷代谢过程、糖基化合物代谢过程和核心RNA聚合酶结合转录因子活性等;显著差异表达基因通过KEGG富集分析主要富集在氧化磷酸化、核糖体和细菌分泌系统等通路。与37℃条件下生长能力比较,dnaK缺失后导致鸭疫里默氏杆菌在42℃条件下生长能力受损。【结论】RA-CH-1在37℃和42℃下生长不受影响,通过热休克反应相关蛋白等因子表达上调或下调来应对温度升高后的应激状况。

关键词：鸭疫里默氏杆菌转录组温度