检索结果-南通市图书馆

乙型脑炎病毒囊膜蛋白I176R位点突变株的生物学特性比较研究

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2024年第10期32卷 2391-2401页

作者：唐冕耀赵勤石艳萍曹玉琴文翼平伍锐杜森焱黄小波颜其贵曹三杰四川农业大学动物医学院/猪病研究中心四川农业大学国家级动物类实验教学示范中心农业农村部兽用药物与兽医诊断技术四川科学观测站

乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)是一种危害严重的人畜共患病毒，囊膜蛋白(envelope protein, E)对JEV的神经毒力起关键作用。前期研究发现，重组乙型脑炎病毒(recombinant Japanese encephalitis virus, rJEV)囊膜蛋白I176R位点突变可致弱其神经毒力。为鉴定rJEV-EI176R位点突变后其生物学特性的变化，本研究克隆分析了E176位点突变重组病毒rJEV-EI176R的E基因序列和E蛋白的生物信息学特征；利用qPCR、蚀斑试验和间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)等技术测定rJEV-EI176R的生长曲线、对多种细胞的吸附差异和rJEV-EI176R诱导小鼠小胶质细胞系(mouse microglia cell line, BV-2)细胞炎性水平差异。结果显示，rJEV-EI176R的E蛋白带正电荷的残基增加1个，等电点升高0.37，不稳定指数升高0.39;E蛋白的α螺旋、β折叠、延伸链以及无规则卷曲的数量及占比均发生了改变，同时E176位点氨基酸与附近氨基酸有了不同的连接；rJEV-EI176R在BV-2细胞上的生长曲线没有显著变化且能够感染不同来源的神经细胞和肾细胞；rJEV-EI176R的吸附能力显著提高(P<0.05)但蚀斑大小变化不显著；rJEV-EI176R接种BV-2细胞后，在12和24 h均引起肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)、干扰素γ诱导蛋白-10 (interferongamma-induced protein-10, IP-10)的水平显著低于亲本株(P<0.05)。本研究丰富了JEV毒株E蛋白的生物学特性研究，为后期深入研究JEV减毒机制和疫苗研发提供基础资料。

关键词：乙型脑炎病毒(JEV) 囊膜蛋白(E) I176R位点突变神经毒力致弱生物学特性

马铃薯StSN2信号肽缺失对其定位及蛋白互作的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

基因组学与应用生物学 2024年第5期43卷 755-766页

作者：温和蔡诚诚李罗品刘石锋梁晓王强王西瑶四川农业大学西南作物基因资源发掘与利用国家重点实验室成都611130 四川农业大学农学院马铃薯研究与开发中心成都611130 四川省农业科学院作物研究所成都611130

StSN2属于马铃薯(Solanum tuberosum L.)Snakin/GASA(gibberellic acid-stimulated arabidopsis)蛋白家族,其N端具有信号肽,C端具有12个保守的半胱氨酸残基,主要在植物生长发育和逆境胁迫响应方面发挥重要调控作用。为了明确StSN2蛋白N端信号肽区域对其蛋白亚细胞定位及蛋白互作的影响,本研究首先通过信号肽预测及PCR扩增,获得含信号肽的StSN2基因片段和N端信号肽缺失的StSN2△SP片段,长度分别为315 bp和243 bp。其次,通过酶切连接方法将StSN2△SP基因片段连接在亚细胞定位载体上,获得融合蛋白YFP-StSN2△SP。瞬时表达实验结果发现,N端信号肽缺失后的StSN2△SP蛋白的亚细胞定位发生了变化,只定位在细胞核。最后通过同源重组方式将StSN2以及StSN2△SP分别构建到酵母诱饵载体上,并与pGADT7-SnRK1α进行酵母双杂交实验。结果显示,StSnRK1α与StSN2共转化酵母细胞后,其细胞不能在四缺培养基中生长,而StSnRK1α与N端信号肽缺失的StSN2△SP共转化酵母细胞后,其细胞能在四缺培养基中生长并显色,说明StSN2信号肽缺失后对其亚细胞定位及蛋白互作均有影响。本研究为StSN2蛋白的生物学功能研究提供了理论依据,为进一步完善该基因在马铃薯块茎休眠的功能研究奠定了实验基础。

关键词：马铃薯 StSN2 信号肽亚细胞定位酵母双杂交

低浓度猪链球菌溶血素诱导猪肾细胞凋亡方式研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2024年第2期32卷 355-366页

作者：戴世馨赵勤徐魁牟欣然杜森焱伍锐文翼平黄小波颜其贵曹三杰四川农业大学动物医学院/猪病研究中心/国家级动物类实验教学示范中心/农业农村部兽用药物与兽医诊断技术四川科学观测站

猪链球菌(Streptococcus suis)是一种危害严重的人畜共患病原菌，猪链球菌溶血素(suilysin, Sly)在猪链球菌的侵袭和致病中起关键作用，对多种类型的细胞具有毒性作用，但目前关于Sly的细胞毒性机制研究较少。为了探讨低浓度(0.3～0.6μ... 详细信息

猪链球菌(Streptococcus suis)是一种危害严重的人畜共患病原菌，猪链球菌溶血素(suilysin, Sly)在猪链球菌的侵袭和致病中起关键作用，对多种类型的细胞具有毒性作用，但目前关于Sly的细胞毒性机制研究较少。为了探讨低浓度(0.3～0.6μg/mL) Sly诱导猪肾细胞PK-15(porcine kidney-15)的死亡方式，本研究首先采用原核表达并纯化获得重组猪链球菌溶血素(recombinant suilysin, rSly)，通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放检测rSly对PK-15细胞的毒性作用，并针对4种常见程序性细胞死亡方式，利用qPCR、间接免疫荧光、Werstern blot和流式细胞术对rSly作用于PK-15细胞12及24 h诱导的细胞死亡方式进行验证。结果显示，成功表达具有较高溶血活性(溶血单位为214)的rSly毒素蛋白，确定其对PK-15细胞的毒性作用呈浓度依赖性，并且发现rSly作用PK-15细胞12和24 h均引起PK-15细胞凋亡相关基因—半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine aspartic acid specific protease 3, Caspase 3)、Caspase 9的转录水平显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率与r Sly浓度呈正相关，0.6μg/mL rSly作用PK-15细胞24 h，细胞凋亡率从9.35%增至49.9%；自噬关键基因—微管相关蛋白轻链3B(microtubule associated protein 1 light chain 3β, LC3β)基因转录水平无明显变化且无自噬小体形成；焦亡关键基因—胃泌素D(gasdermin D,GSDMD)的转录水平无明显变化且GSDMD蛋白未发生明显切割；坏死性凋亡相关基因下调，且磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域蛋白(phosphorylated mixed lineage kinase domain-like protein, p-MLKL)表达水平受到抑制。上述结果提示低浓度rSly诱导PK-15细胞死亡的方式主要是凋亡。本研究丰富了Sly毒性作用的细胞模型，有助于揭示参加猪链球菌感染发展的分子机制。

关键词：重组猪链球菌溶血素(rSly) 猪肾细胞(PK-15) 细胞毒性细胞死亡方式细胞凋亡

重组多杀性巴氏杆菌毒素介导FGFRL1诱导Hela细胞增殖研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2024年第8期32卷 1899-1908页

作者：林忠森赵勤袁建林伍锐颜其贵文翼平黄小波杜森焱曹三杰四川农业大学动物医学院/猪病研究中心/国家级动物类实验教学示范中心/农业农村部兽用药物与兽医诊断技术四川科学观测站

成纤维细胞生长因子受体样因子1 (fibroblast growth factor receptor-like 1, FGFRL1)作为成纤维细胞生长因子受体家族成员，在调控细胞增殖、分化上起作用。多杀性巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin, PMT)是多杀性巴氏杆菌(P.... 详细信息

成纤维细胞生长因子受体样因子1 (fibroblast growth factor receptor-like 1, FGFRL1)作为成纤维细胞生长因子受体家族成员，在调控细胞增殖、分化上起作用。多杀性巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin, PMT)是多杀性巴氏杆菌(P. multocida, Pm)产生的重要毒力因子，属于一种促有丝分裂原蛋白，在多种细胞上引起细胞增殖，导致组织增生、占位，使其他正常组织细胞生存受限而死亡，但目前PMT引起促增殖作用的机制以及介导的因子均不清晰。前期CRISPR/Cas9全基因文库筛选发现FGFRL1提高了重组PMT (recombinant PMT, rPMT)蛋白染毒处理的Hela细胞存活率。为探究PMT在Hela细胞上的促增殖作用是否通过FGFRL1介导，本研究分别使用0、0.01、0.1、1.0μg/mL的rPMT蛋白处理正常及FGFRL1基因缺失的Hela细胞各48 h,CCK-8 (Cell Counting Kit-8)法检测细胞增殖率、Ed U-488标记法检测细胞DNA复制情况、划痕试验法检测增殖细胞的迁移率。结果显示，在rPMT浓度为0.1μg/mL处理48 h时，缺失FGFRL1的Hela细胞增殖显著下降(P<0.05)，而划痕恢复率与正常Hela细胞相比下降接近70%(P<0.05)。说明FGFRL1的缺失减弱了rPMT对Hela的促增殖作用。利用实时荧光定量PCR检测rPMT处理后Hela细胞磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol 3kinase/serine-threonine protein kinase, PI3K-AKT)通路上游因子变化水平、Western blot检测该通路关键激活因子AKT的磷酸化水平进行初步验证。结果显示：r PMT处理后PI3K-AKT通路上游因子转录水平显著升高(P<0.05)，缺失FGFRL1的Hela细胞AKT与磷酸化AKT水平极显著低于正常Hela细胞(P<0.01)，说明PI3K-AKT通路激活受到抑制。由此可以初步确认PMT可能通过FGFRL1靶向PI3K-AKT通路引起Hela细胞增殖。本研究丰富了PMT促增殖作用的理论基础，初步探索了PMT引起细胞增殖的通路激活方式，为进一步揭示PMT的促增殖作用提供参考。

关键词：成纤维细胞生长因子受体样因子1(FGFRL1) 重组多杀性巴氏杆菌毒素(rPMT) Hela细胞细胞增殖 PI3K-AKT通路

水稻Pik位点五个等位基因特异分子标记的开发及应用

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

植物病理学报 2024年第3期54卷 571-581页

作者：杨好黄衍焱易春霖谭楮湉任文芮黄富石军李小艳王文明四川农业大学西南作物基因资源发掘与利用国家重点实验室成都611130 四川农业大学农学院成都611130 绵阳市农业科学研究院/厅市共建作物特色资源创制及应用四川省重点实验室绵阳621023 内江市农业科学研究院农业新技术研究所内江641000

由于绝大多数水稻亲本的稻瘟病抗性基因组成不清楚,等位基因间的高度同源,导致分子标记辅助选择技术在水稻抗病育种中的应用受到限制。本研究首先分析了稻瘟病抗性基因Pik位点11个等位基因编码区的核苷酸序列,筛选出Pikp-1、Pikh-1、Pi... 详细信息

由于绝大多数水稻亲本的稻瘟病抗性基因组成不清楚,等位基因间的高度同源,导致分子标记辅助选择技术在水稻抗病育种中的应用受到限制。本研究首先分析了稻瘟病抗性基因Pik位点11个等位基因编码区的核苷酸序列,筛选出Pikp-1、Pikh-1、Pik-1、Pikm-1和Pi1-1特异的多态性位点,再与水稻资源中心(Rice Resource Center)中155个水稻基因组进行比对分析,在序列特异性最强的位置设计引物,成功地为这5个等位基因开发出了特性的分子标记。以24个抗稻瘟病单基因系为对照,应用这些分子标记,明确了109个水稻亲本中含有Pik-1、Pikh-1、Pikp-1、Pi1-1和Pikm-1基因的材料分别有0、1、5、14和20个。对‘绵恢365’中的Pi1基因测序,验证了分子标记的有效性及准确性。本研究为Pik位点在水稻抗稻瘟病育种中的应用提供了明确的亲本资源和可靠的分子标记。

关键词：水稻稻瘟病 Pik基因位点等位基因分子标记

基于遗传解析新模式的小麦寡分蘖QTL的鉴定和验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

作物学报 2024年第6期50卷 1373-1383页

作者：张智源周界光刘家君王素容王同赵聪豪尤佳宁丁浦洋唐华苹刘燕林江千涛陈国跃魏育明马建四川农业大学小麦研究所四川成都611130 四川文理学院四川革命老区发展研究中心四川达州635000 四川省农业科学院经济作物研究所四川成都610300 绵阳师范学院生命科学与技术学院四川绵阳621000

有效分蘖数可直接影响小麦的成穗数,与产量关系极为密切。挖掘小麦分蘖数相关数量性状位点,解析分蘖数与其他重要农艺性状之间的相关性,可为分子育种提供理论依据。本研究首先提出和建立了“多个环境评价-单个性状深入-综合性状兼顾-友... 详细信息

有效分蘖数可直接影响小麦的成穗数,与产量关系极为密切。挖掘小麦分蘖数相关数量性状位点,解析分蘖数与其他重要农艺性状之间的相关性,可为分子育种提供理论依据。本研究首先提出和建立了“多个环境评价-单个性状深入-综合性状兼顾-友好标记开发-不同背景验证”的遗传解析新模式。进一步利用该模式,以寡分蘖自然变异植株msf和川农16(CN16)构建的F6代重组自交系群体(MC群体)为实验材料,以多年多点的有效分蘖数作为表型数据,借助基于16K芯片构建的遗传连锁图谱成功定位和验证了寡分蘖遗传调控位点。QTL定位结果显示,1A、5A和6D染色体上有4个控制寡分蘖的QTL。其中***-MC-1A为稳定主效的寡分蘖QTL,解释了13.39%~60.40%的表型变异,其正效应位点来源于msf。表型分析发现,携带***-MC-1A正效应位点株系的有效分蘖数显著少于携带***-MC-1A负效应位点株系的有效分蘖数。相关性分析表明,有效分蘖数和株高之间存在极显著的正相关,与千粒重、每穗粒数、每穗粒重、旗叶宽之间存在显著的负相关,有效分蘖数与旗叶长、开花期之间无显著相关。遗传分析结果表明,***-MC-1A正效应位点显著增加每穗粒数、每穗粒重和千粒重,但推迟开花期。不同遗传背景下的验证结果表明,携带***-MC-1A正效应位点的株系确实能降低有效分蘖数。综上,本研究建立了一种遗传解析新模式,并基于此模式解析、定位和验证了一个控制寡分蘖的主效QTL ***-MC-1A,为进一步精细定位和了解分蘖形成机制奠定了基础。

关键词：小麦遗传解析新模式 16K SNP芯片 QTL 寡分蘖产量

秸秆覆盖对玉米农田土壤有机碳及其组分的影响

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

土壤通报 2024年第3期55卷 695-706页

作者：胡南南逄蕾路建龙杨锦王小燕肖歆玥郑浩飞马明生刘兵艳杨楠甘肃省干旱生境作物学重点实验室甘肃兰州730070 甘肃农业大学农学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学植物生产类实验教学中心甘肃兰州730070 甘肃农业大学水利水电工程学院甘肃兰州730070 甘肃省农业科学院甘肃兰州730070

【目的】探究旱地秸秆覆盖条件下土壤有机碳组分及碳库管理指数的变化。【方法】2022年依托大田试验,设秸秆带状覆盖(TSM)和秸秆碎秆覆盖(TSR)试验为主效应处理,以地膜覆盖(TPM)和露地平作(TCK)为双对照,测定分析玉米农田播前和收获后0~... 详细信息

【目的】探究旱地秸秆覆盖条件下土壤有机碳组分及碳库管理指数的变化。【方法】2022年依托大田试验,设秸秆带状覆盖(TSM)和秸秆碎秆覆盖(TSR)试验为主效应处理,以地膜覆盖(TPM)和露地平作(TCK)为双对照,测定分析玉米农田播前和收获后0~20 cm、20~40 cm和40~60 cm土层的土壤总有机碳(TOC)、易氧化有机碳(EOC)、可溶性有机碳(DOC)和颗粒有机碳(POC)含量,并计算土壤碳库管理指数。【结果】与播前相比,处理TCK和TPM降低了0~60 cm土层TOC含量,TSM和TSR提高了0~20 cm土层TOC含量;各处理降低了0~60 cm土层EOC、DOC和POC含量及其占TOC比例。收获期,TSM较TCK显著增加了土壤POC、EOC、DOC和TOC含量,提高幅度分别为47.52%、38.47%、20.58%和19.91%;TSR较TCK显著增加了0~20 cm土层TOC和DOC含量,提高幅度分别为3.43%和14.55%;显著提高了0~60 cm土层EOC含量和POC含量,提高幅度分别为5.81%和20.95%。收获期,TSM较TPM显著提高了0~60 cm土层EOC、TOC、POC和DOC含量,提高幅度分别为25.00%、22.51%、19.30%和12.69%。TSR较TPM显著提高了0~20 cm土层DOC、EOC和TOC含量,提高幅度分别为20.04%、7.75%和7.10%,显著提高了0~40 cm土层POC含量,提高幅度为27.64%。与TCK相比,TSM显著提高了0~60 cm土层土壤碳库指数、碳库活度、碳库活度指数和碳库管理指数;TSR提高了0~20 cm土层土壤碳库指数以及0~60 cm土层土壤碳库活度、碳库活度指数和碳库管理指数。与TPM相比,TSM显著提高了0~60 cm土层土壤碳库指数和碳库管理指数,TSR显著提高了0~20 cm土层土壤碳库指数。【结论】秸秆带状覆盖可有效提高土壤有机碳组分含量及碳库管理指数,可为半干旱雨养区农业高产高效种植提供理论支撑。

关键词：秸秆带状覆盖秸秆碎秆覆盖地膜覆盖土壤有机碳组分土壤碳库管理指数

秸秆还田与灌溉方式对大豆玉米带状间作出苗及幼苗生长的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科学 2024年第17期57卷 3366-3383页

作者：杨立达彭新月朱文雪赵静袁晓婷林萍罗凯李易玲罗春明李雨泽杨文钰雍太文四川农业大学农学院/农业农村部西南作物生理生态与耕作重点实验室/四川省作物带状复合种植工程技术研究中心山东省德州市禹城市农业农村局四川省遂宁市安居区农业农村局

【目的】大豆玉米带状间作是我国大豆产能提升工程的重要栽培模式。探究秸秆还田与灌溉方式对大豆玉米带状间作作物出苗及幼苗生长质量的影响，以期为带状间作解决出苗难题提供理论支撑。【方法】试验于2022和2023年在山东省德州市禹城... 详细信息

【目的】大豆玉米带状间作是我国大豆产能提升工程的重要栽培模式。探究秸秆还田与灌溉方式对大豆玉米带状间作作物出苗及幼苗生长质量的影响，以期为带状间作解决出苗难题提供理论支撑。【方法】试验于2022和2023年在山东省德州市禹城市和四川省遂宁市安居区进行，采用二因素裂区试验，设置3种秸秆还田方式（S1，秸秆不还田；S2，秸秆灭茬还田；S3，秸秆留茬还田）和3种灌溉方式（W1，抢墒播种；W2，畦灌造墒；W3，播后喷灌），研究其对带状间作作物出苗及幼苗生长的影响。【结果】灌溉可显著提高土壤含水量并缓解土壤紧实度，进而有效提高大豆、玉米出苗率，缩短出苗时间。禹城S2处理下W3、W2、W1的大豆出苗率分别为71.00%、45.70%、38.50%；安居S2处理下W3、W2、W1的大豆出苗率分别为90.17%、88.50%、61.67%,W2、W3的出苗时间较W1分别缩短3.29、2.92 d。不同灌溉方式下玉米出苗率均可达到90%以上，但出苗时间明显不同。禹城W2、W3的玉米出苗时间较W1分别缩短1.90、3.10 d；安居W2、W3较W1分别缩短0.96、0.60 d。秸秆还田显著提高了土壤含水量并降低土壤紧实度，两地效果均表现为S2>S3>S1。禹城秸秆还田在W1处理下可显著提高大豆出苗率，S2较S1提高45.08%。秸秆还田对两地玉米出苗率均无明显影响。秸秆还田与灌溉均显著提高了安居大豆脂肪酶（LPS）和玉米α-淀粉酶活性（α-AL）,W2、W3的LPS较W1分别高26.86%、37.77%,S2的LPS较S3、S1分别高14.14%、18.05%;W2的α-AL较W1平均高189.47%,S2的α-AL较S3、S1分别高61.52%、127.33%。2个灌溉处理均可促进两地大豆、玉米的生长发育，提高幼苗生长率和整齐度，W3、W2的大豆株高较W1分别平均高21.74%、15.70%，茎粗分别平均高12.52%、28.15%。叶面积分别平均高11.84%、38.78%;W3、W2的玉米株高较W1分别平均高21.80%、20.62%，茎粗分别平均高37.69%、26.39%,W3的叶面积较W2、W1分别平均高36.56%、73.33%。秸秆还田显著影响禹城玉米幼苗长势，表现为S3>S1>S2,S3的株高较S1、S2分别高19.92%、27.31%；茎粗分别高27.59%、59.80%；叶面积分别高42.76%、68.54%。【结论】顺利出苗和构建良好的幼苗群体是实现高产的基础，播后喷灌通过改善耕层物理结构进而促进带状间作出苗并缩短出苗时间，为后续作物生长提供了有利条件。秸秆留茬还田可提高禹城带状间作幼苗生长质量；秸秆灭茬还田具有蓄水和缓解土壤紧实的特点，有利于无灌溉下大豆出苗，对安居带状间作作物形成壮苗具有促进作用。

关键词：大豆玉米带状间作秸秆还田灌溉方式出苗率幼苗生长

安岳红小麦重组自交系产量相关性状的QTL分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

麦类作物学报 2024年

作者：王一鸣张飞飞任毅魏育明陈国跃耿洪伟程宇坤新疆农业大学农学院/新疆农业大学优质专用麦类作物工程技术研究中心/新疆小麦产业体系创新团队四川农业大学小麦研究所西南作物基因资源发掘与利用国家重点实验室

以四川本地高抗病、多小穗、高粒重品种安岳红小麦,和台长29杂交后构建114份重组自交系,利用小麦55K SNP芯片进行全基因组扫描,对2年3点下的小穗数、穗长、有效分蘖、小穗粒数、穗粒数、穗粒重和千粒重7个产量相关性状进行表型鉴定及最... 详细信息

以四川本地高抗病、多小穗、高粒重品种安岳红小麦,和台长29杂交后构建114份重组自交系,利用小麦55K SNP芯片进行全基因组扫描,对2年3点下的小穗数、穗长、有效分蘖、小穗粒数、穗粒数、穗粒重和千粒重7个产量相关性状进行表型鉴定及最佳线性无偏预测(BLUP),对表型数据进行QTL定位。共检测到32个控制小麦产量相关性状QTL,可解释表型变异率为4.67%～24.43%。其中,25个QTL可解释表型变异率超过10%,分布于1A、2A、2B、2D、3A、3D、4A、4D、5A、5D、6B、6D和7D染色体上。其中,位于4D染色体上控制穗长的***-4D.1,在2个实验点中均能稳定表达。同时发现,1A、3A和4D染色体上分别携带有1个具有一因多效QTL。检测到32个与小麦产量性状相关的QTL位点,定位的优良等位基因具有增加小穗数、小穗粒数、穗粒数、穗粒重和千粒重的作用。

关键词：小麦产量性状 SNP标记 QTL分析