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HPV16E6对宫颈癌细胞HeLa细胞活性的影响及微小RNA-466的干预作用

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中国老年学杂志 2024年第14期 3505-3510页

作者：韩杰张梅英张玲刘倩李鹏张晓娅唐山职业技术学院附属医院杭州艾迪康医学检验中心病理科

目的探究HPV16E6对宫颈癌细胞HeLa细胞活性的影响及微小RNA(miR)-466的干预作用。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常宫颈上皮细胞(HUCEC)及4种宫颈癌细胞(HeLa、HT-3、C-33A、AV3)中miR-466表达水平，取宫颈癌细胞将... 详细信息

目的探究HPV16E6对宫颈癌细胞HeLa细胞活性的影响及微小RNA(miR)-466的干预作用。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常宫颈上皮细胞(HUCEC)及4种宫颈癌细胞(HeLa、HT-3、C-33A、AV3)中miR-466表达水平，取宫颈癌细胞将其分为宫颈癌细胞(A)组、宫颈癌细胞+miR-466-NC(B)组，宫颈癌细胞+miR-466 inhibitor(C)组、宫颈癌细胞+miR-466 mimics(D)组、宫颈癌细胞+HPV16E6-NC(E)组、宫颈癌细胞+HPV16E6过表达质粒(F)组、宫颈癌细胞+HPV16E6沉默质粒(H)组、宫颈癌细胞+miR-466 mimics+HPV16E6沉默质粒(I)组，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞的凋亡，Western印迹法检测HPV16E6蛋白表达，双荧光素酶报告实验证实miR-466和HPV16E6的相互作用。结果与正常宫颈上皮细胞系HUCEC相比，宫颈癌细胞系中的miR-466 mRNA表达量均显著降低，HPV16E6 mRNA表达显著升高(P0.05);与B组相比，C组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显升高，细胞凋亡明显降低(P0.05);与E组相比，F组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显升高，细胞凋亡明显降低(P0.05);与H组相比，I组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显降低，细胞凋亡明显升高(P0.05),且miR-466与HPV16E6呈负相关(P<0.001)。结论 HPV16E6对HeLa细胞活性具有显著影响，可抑制细胞凋亡，促进细胞增殖，miR-466干预后，HeLa细胞活性显著改善，其机制可能与抑制HPV16E6有关。

关键词： miR-466 HPV16E6 宫颈癌细胞活性

氧化苦参碱调控PD-L1对弥漫大B淋巴瘤细胞增殖的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第17期40卷 2498-2502页

作者：刘丽云郑立春李秀君刘宝利张研唐山市工人医院病理科河北唐山063000 唐山市工人医院核医学科河北唐山063000

目的探究氧化苦参碱对弥漫大B淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法将人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-LY19随机分为对照组(正常培养)、低剂量实验组(25.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、中剂量实验组(50.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、高... 详细信息

目的探究氧化苦参碱对弥漫大B淋巴瘤细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法将人弥漫大B淋巴瘤细胞OCI-LY19随机分为对照组(正常培养)、低剂量实验组(25.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、中剂量实验组(50.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、高剂量实验组(100.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、氧化苦参碱+si-NC组(转染si-NC+100.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、氧化苦参碱+si-PD-L1组(转染si-PD-L1+100.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、氧化苦参碱+Vector组(转染si-NC+100.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱)、氧化苦参碱+PD-L1组[转染程序性死亡受体配体1(PD-L1)+100.00μmol·L^(-1)氧化苦参碱]。用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)实验检测细胞增殖情况,用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平,用流式细胞术实验检测细胞凋亡情况。结果对照组、高剂量实验组、氧化苦参碱+si-NC组、氧化苦参碱+si-PD-L1组、氧化苦参碱+Vector组、氧化苦参碱+PD-L1组的细胞增殖率分别为(33.88±2.79)%、(15.23±1.32)%、(15.84±1.58)%、(10.13±0.90)%、(16.14±1.20)%和(20.84±1.88)%,周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白相对表达水平分别为0.92±0.11、0.37±0.04、0.35±0.04、0.24±0.03、0.38±0.06和0.71±0.06,细胞凋亡率分别为(3.20±0.07)%、(25.35±2.01)%、(24.81±1.91)%、(30.27±1.65)%、(24.39±2.73)%和(17.97±1.27)%,高剂量实验组的上述指标与对照组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05);氧化苦参碱+si-PD-L1组的上述指标与氧化苦参碱+si-NC组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05);氧化苦参碱+PD-L1组的上述指标与氧化苦参碱+Vector组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论氧化苦参碱可通过下调PD-L1表达抑制OCI-LY19细胞增殖,并诱导凋亡;PD-L1可能是氧化苦参碱治疗弥漫大B淋巴瘤的潜在靶点。

关键词：氧化苦参碱弥漫大B淋巴瘤程序性死亡受体配体1 细胞增殖细胞凋亡

RNAscope原位杂交技术在肺结核病理诊断中的应用价值

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临床与实验病理学杂志 2024年第3期40卷 320-322页

作者：毛昕李红娜吴晨阳罗丹宋旭东华北理工大学附属医院病理科唐山063000

目的探讨RNAscope原位杂交技术在肺结核病理诊断中的应用价值。方法收集72例肺结核临床资料,采用qRT-PCR法、RNAscope原位杂交技术进行检测,分析两种方法检测率的差异。结果qRT-PCR法检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准... 详细信息

目的探讨RNAscope原位杂交技术在肺结核病理诊断中的应用价值。方法收集72例肺结核临床资料,采用qRT-PCR法、RNAscope原位杂交技术进行检测,分析两种方法检测率的差异。结果qRT-PCR法检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为80.56%(58/72)、94.12%(32/34)、96.67%(58/60)、69.57%(32/46)和84.91%(90/106)。RNAscope原位杂交技术检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为70.83%(51/72)、100%(34/34)、100%(51/51)、61.82%(34/55)和80.19%(85/106)。RNAscope原位杂交技术检测肺结核分枝杆菌的特异度和阳性预测值高于qRT-PCR法,敏感度、阴性预测值和准确度则低于qRT-PCR法。统计学分析:两种检测方法差异均无统计学意义(P>0.05)。一致性分析:两者的一致性较好。结论RNAscope原位杂交技术在肺结核病理诊断中具有较高的敏感度和特异度,与qRT-PCR法一致性较高,且未破坏组织的完整性值得在临床中推广。

关键词：结核分枝杆菌 qRT-PCR RNAscope原位杂交

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管状囊性肾细胞癌3例并文献复习

临床与实验病理学杂志 2024年第4期40卷 423-425页

作者：白洁李双杨柳王琦倪璐宋旭东华北理工大学附属医院病理科唐山063000

目的探讨管状囊性肾细胞癌(tubulocystic renal cell carcinoma,TCRCC)的临床病理特征、免疫表型、治疗和预后。方法回顾性分析3例TCRCC的临床资料、组织学特点、免疫表型、随访和预后情况,并复习相关文献。结果3例TCRCC中,2例男性,1例... 详细信息

目的探讨管状囊性肾细胞癌(tubulocystic renal cell carcinoma,TCRCC)的临床病理特征、免疫表型、治疗和预后。方法回顾性分析3例TCRCC的临床资料、组织学特点、免疫表型、随访和预后情况,并复习相关文献。结果3例TCRCC中,2例男性,1例女性,平均发病年龄58.3岁。肿瘤均位于左肾,无明显临床症状。2例肿瘤分期为pT1,1例为pT3。CT或MRI均表现为多房囊性病变。镜下肿瘤完全由大小不等的小管或囊腔组成,囊壁菲薄,仅少量纤维间质分隔。肿瘤细胞呈单层排列,可扁平、立方状、柱状或鞋钉样,胞质丰富嗜酸性,细胞核大,核仁明显(WHO/ISUP核分级:3级),核分裂象少见。肿瘤细胞FH(3/3)均无表达缺失,PAX8(3/3)和P504s(3/3)强阳性,CD10(2/3)、CK7(2/3)、CK19(1/2)和EMA(1/3)部分阳性。2例患者行左肾根治性切除术,1例行肾部分切除术,患者术后随访均未出现复发及转移。结论TCRCC罕见,大部分预后良好,其诊断标准严格,需与其他具有管状囊性结构的肾肿瘤鉴别,确诊需组织学结合免疫组化,必要时可行分子遗传学检测明确。

关键词：肾肿瘤管状囊性肾细胞癌乳头状肾细胞癌临床病理特征

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二叶主动脉瓣伴动脉夹层破裂1例

法医学杂志 2024年第1期40卷 77-79页

作者：徐碧宇吴晨阳姬艳琦李莹莹宋旭东华北理工大学附属医院病理科河北唐山063000

1案例1.1简要案情及病史摘要某男,35岁,因“持续性胸闷18 h”入院。入院后1 h行急性冠状动脉造影检查示:左冠状动脉开口及起源正常,左主干、前降支及回旋支正常,可见前降支至右冠状动脉侧支形成,血流分级(thrombolysis in myocardial in... 详细信息

1案例1.1简要案情及病史摘要某男,35岁,因“持续性胸闷18 h”入院。入院后1 h行急性冠状动脉造影检查示:左冠状动脉开口及起源正常,左主干、前降支及回旋支正常,可见前降支至右冠状动脉侧支形成,血流分级(thrombolysis in myocardial infarction,TIMI)1级;右冠状动脉开口朝上变异,近段次全闭塞,前向血流TIMI1级;结论为右冠状动脉单支病变,右冠状动脉开口朝上变异,冠状动脉分布呈右优势型。遂于右冠状动脉近段植入HELICOS(4.0 mm×22.0 mm)支架1枚。

关键词：法医病理学二叶主动脉瓣主动脉夹层动脉夹层破裂

阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人RPE细胞损伤的抑制作用及其机制

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中华实验眼科杂志 2024年第8期42卷 705-715页

作者：朱德军邹文青曹相枚王潇飞陆钊罡宁夏回族自治区人民医院宁夏眼科医院银川750002 宁夏医科大学基础医学院病理学系银川750002 华北理工大学附属医院病理科唐山063000 宁夏回族自治区人民医院药学部银川750002

目的探讨阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的抑制作用及其机制。方法选取SPF级雄性8周龄2型糖尿病db/db小鼠30只,采用随机数字表法将小鼠分为模型组和阿魏酸组,每组15只,另选取15只同周龄db/m小鼠作... 详细信息

目的探讨阿魏酸对糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的抑制作用及其机制。方法选取SPF级雄性8周龄2型糖尿病db/db小鼠30只,采用随机数字表法将小鼠分为模型组和阿魏酸组,每组15只,另选取15只同周龄db/m小鼠作为对照组。模型组和对照组每日采用生理盐水灌胃(5 ml/kg),阿魏酸组采用阿魏酸溶液灌胃(0.05 g/kg),治疗后2个月处死各组小鼠并摘除眼球。采用苏木精-伊红染色观察小鼠视网膜组织形态学变化;采用免疫荧光染色法和Western blot法检测各组小鼠视网膜组织线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)蛋白荧光强度和表达水平。取人RPE细胞,将其分为对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、高糖组和高糖+阿魏酸组,其中对照组不做任何处理,其余各组用相应试剂培养24 h。采用活性氧簇(ROS)检测试剂盒检测各组RPE细胞ROS水平;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测各组RPE细胞线粒体膜电位水平;采用微丝绿色荧光探针检测各组RPE细胞MCU和微丝荧光强度;通过慢病毒转染技术沉默和过表达MCU蛋白水平探讨MCU与p38 MAPK、p-p38MAPK间的调控关系;采用免疫荧光染色法和Western blot法检测各组RPE细胞MCU、p38 MAPK、p-p38MAPK蛋白荧光强度和表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠视网膜组织外核层、内核层和神经节细胞层细胞间隙增大、排列紊乱,阿魏酸组小鼠视网膜组织明显改善。与对照组比较,模型组、阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p-p38 MAPK和MCU+p-p38 MAPK蛋白荧光强度显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p-p38 MAPK和MCU+p-p38 MAPK蛋白荧光强度显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠视网膜组织MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,阿魏酸组小鼠视网膜组织MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、DMSO组、高糖组和高糖+阿魏酸组细胞ROS荧光强度分别为0.22±0.02、0.22±0.03、0.30±0.02和0.24±0.02,总体比较差异均有统计学意义(F=7.845,P<0.01),其中高糖组细胞ROS荧光强度明显高于对照组和DMSO组,高糖+阿魏酸组细胞ROS荧光强度明显低于高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。高糖组、高糖+阿魏酸组细胞线粒体膜电位水平明显低于对照组和DMSO组,高糖+阿魏酸组细胞线粒体膜电位水平明显高于高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组、DMSO组比较,高糖组MCU荧光强度较高,并伴随着细胞微丝减少和变细;高糖+阿魏酸组MCU蛋白荧光强度明显下降,细胞微丝数量明显增加。与对照组、DMSO组比较,高糖组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白荧光强度和相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);与高糖组比较,高糖+阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白荧光强度和相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组和空载体组比较,MCU过表达组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著升高,MCU shRNA组、MCU过表达+阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与MCU过表达组比较,MCU shRNA组、MCU过表达+阿魏酸组细胞MCU、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白相对表达量显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论阿魏酸能够调控氧化应激和线粒体功能障碍,进而改善糖尿病小鼠视网膜和高糖诱导的RPE细胞损伤,其可能通过MCU及p38MAPK信号通路发挥保护作用。

关键词：阿魏酸糖尿病视网膜视网膜色素上皮细胞线粒体钙离子单向转运蛋白氧化应激线粒体功能障碍

Nectin-4在浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义

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现代泌尿外科杂志 2024年第10期29卷 903-908页

作者：宋慧茹罗丹温俊秀倪璐张可心王琦杨柳宋旭东董丽儒华北理工大学附属医院病理科河北唐山063000 华北理工大学基础医学院病理学系河北唐山063000 深圳市第二医院病理科广东深圳518035

目的研究Nectin-4在浸润性膀胱尿路上皮癌(BUC)组织中的表达及其临床意义,为BUC的临床诊断提供参考。方法应用免疫组织化学染色(IHC)法及RNAscope技术检测60例浸润性BUC及40例膀胱黏膜慢性炎组织中Nectin-4的表达,分析对比两种方法的检... 详细信息

目的研究Nectin-4在浸润性膀胱尿路上皮癌(BUC)组织中的表达及其临床意义,为BUC的临床诊断提供参考。方法应用免疫组织化学染色(IHC)法及RNAscope技术检测60例浸润性BUC及40例膀胱黏膜慢性炎组织中Nectin-4的表达,分析对比两种方法的检测结果,并探讨其与浸润性BUC临床病理特征的关系。在此基础上进一步分析BUC组织中Nectin-4蛋白表达与人类表皮生长因子受体2(Her-2)及程序性死亡因子配体1(PD-L1)的相关性。结果IHC法检测Nectin-4蛋白在浸润性BUC组及炎症组中的阳性表达率分别为78.33%(47/60)、17.50%(7/40);RNAscope技术检测Nectin-4 mRNA在浸润性BUC组及炎症组中表达的阳性表达率分别为83.33%(50/60)、12.50%(5/40);两种方法检测浸润性BUC组及炎症组中Nectin-4表达的Kappa值分别为0.732及0.610,一致性一般;Nectin-4蛋白在浸润性BUC中的表达与肌层浸润、组织学分级、脉管癌栓、淋巴结转移、临床分期相关(P0.05)。结论Nectin-4在浸润性BUC中高表达,且通常和不良预后的病理参数相关,检测浸润性BUC中Nectin-4表达将有助于指导其临床的诊治。

关键词：浸润性膀胱尿路上皮癌 Nectin-4 RNAscope技术免疫组织化学染色临床病理特征

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FOXO3a在子宫内膜样癌中的表达及意义

广东医学 2024年第5期45卷 540-544页

作者：唐慧刘时飞熊艳杰罗丹董丽儒宋旭东华北理工大学附属医院病理科河北唐山063000 北京市肛肠医院病理科北京100026

目的观察叉形头转录因子O3a(forkhead box O transcription factor 3a,FOXO3a)在子宫内膜样癌中的表达特征,分析其在不同临床及病理特征中的表达差异,探讨其对预后的判断价值。方法选取2016年1月至2018年5月期间在华北理工大学附属医院... 详细信息

目的观察叉形头转录因子O3a(forkhead box O transcription factor 3a,FOXO3a)在子宫内膜样癌中的表达特征,分析其在不同临床及病理特征中的表达差异,探讨其对预后的判断价值。方法选取2016年1月至2018年5月期间在华北理工大学附属医院确诊为子宫内膜样癌并行手术根治的患者48例作为观察组,选取同期确诊为子宫内膜单纯性增生的子宫内膜组织32例作为对照组,选取同期确诊为增生期的子宫内膜组织22例作为正常对照组,应用免疫组化EnVision法检测三组中FOXO3a的蛋白表达水平。FOXO3a与术后生存时间的关系应用Kaplan-meier进行生存分析;应用The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库进行生信分析,观察FOXO3a mRNA在子宫内膜样癌组织和正常组织中FOXO3a mRNA表达的差异及其与临床病理特征的相关性;应用UCSC XENA工具分析FOXO3a mRNA表达水平与总体生存率的相关性。结果FOXO3a在子宫内膜样癌组织中表达的阳性率明显低于子宫内膜单纯性增生和增生期子宫内膜组织(FOXO3a在三组中的阳性率分别为14.58%、75%和95.5%),差异有统计学意义(P=0.000);FOXO3a在子宫内膜样癌不同年龄(P=0.311)、分化程度(P=0.730)、有无癌结节/淋巴结转移(P=0.902)、不同浸润深度(P=0.919)、增殖指数(P=0.165)及是否存在错配修复缺陷(P=1.000)的分组中差异无统计学意义(P>0.05);生存分析显示FOXO3a蛋白表达量与子宫内膜样癌术后总体生存时间无相关性(χ^(2)=0.2526,P=0.6152)。生信分析显示子宫内膜癌组织中FOXO3a mRNA的表达具有降低趋势(P0.05)。结论FOXO3a在子宫内膜样癌组织中的表达下调,参与肿瘤的形成;子宫内膜样癌中FOXO3a的表达水平与患者的预后无明显相关性。

关键词：子宫内膜癌叉形头转录因子O3a TCGA数据库免疫组织化学

原发性扁桃体指突状树突细胞肉瘤1例及文献复习

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诊断病理学杂志 2024年第7期31卷 644-647页

作者：孙玉满韩凤艳张玲吴蒙武思丞刘宏侠唐山职业技术学院附属医院病理科河北唐山063000 唐山职业技术学院病理教研室河北唐山063000

目的探讨指突状树突细胞肉瘤(IDCS)的临床病理学特点、免疫学表型、诊断和鉴别诊断要点。方法通过常规HE染色、免疫组织化学标记及EBER原位杂交检测,对1例IDCS进行显微镜下组织学形态观察,并进行文献复习。结果 IDCS细胞呈卵圆及短梭... 详细信息

目的探讨指突状树突细胞肉瘤(IDCS)的临床病理学特点、免疫学表型、诊断和鉴别诊断要点。方法通过常规HE染色、免疫组织化学标记及EBER原位杂交检测,对1例IDCS进行显微镜下组织学形态观察,并进行文献复习。结果 IDCS细胞呈卵圆及短梭形,镜下呈弥漫性浸润生长,表面坏死、渗出,侵犯扁桃体组织。瘤细胞胞浆丰富、嗜酸、界限不清,细胞核主要呈卵圆形、短梭形,细胞有异型,核仁明显,核分裂像易见。肿瘤内散在少数正常小淋巴细胞。免疫组化染色显示肿瘤细胞S-100、CD68、Vimentin呈阳性表达,CD1a、CD23、CD35、CD3、CD20等呈阴性表达,Ki-67增殖指数为70%~80%。原位杂交检测显示EBER阴性表达。结论指突状树突细胞肉瘤是来源于指突状树突细胞的一种少见肉瘤。病理诊断主要依靠病理形态学和免疫组织化学标记,S-100、CD68阳性表达、CD1a、CD23、CD35、CD3、CD20阴性表达是诊断该肿瘤的重要参考依据之一。鉴别诊断主要包括滤泡树突细胞肉瘤、组织细胞肉瘤、朗格汉斯细胞肉瘤、大细胞性B细胞和T细胞淋巴瘤、恶性黑色素瘤、转移性神经内分泌癌等。

关键词：指突状树突细胞肉瘤扁桃体免疫组化病理诊断鉴别诊断