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Mettl3通过PI3K/AKT信号通路调控Ang Ⅱ诱导肾脏纤维化的机制研究

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中华心血管病杂志 2024年第7期52卷 814-826页

作者：邓熠王艳何平平李娇刘围围袁近松赵鸿彦刘志江沈长银石蓓遵义医科大学附属医院心血管内科遵义563000

目的:探讨甲基转移酶3(Mettl3)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导周细胞向肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化过程中的作用及相关机制。方法:使用C57BL/6J小鼠,(1)细胞实验中,采用磁珠分选法培养纯化小鼠肾脏周细胞,并予以1×10 6 mmol/L的Ang ... 详细信息

目的:探讨甲基转移酶3(Mettl3)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导周细胞向肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化过程中的作用及相关机制。方法:使用C57BL/6J小鼠,(1)细胞实验中,采用磁珠分选法培养纯化小鼠肾脏周细胞,并予以1×10 6 mmol/L的Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化,为Ang Ⅱ组;正常培养的周细胞为对照组。采用免疫荧光染色、蛋白质印迹(Western blot)及实时反转录PCR(RT-qPCR)检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以验证转分化成功。采用斑点印迹、RT-qPCR、Western blot检测N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平及相关酶[Mettl3、Mettl14、Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)、肥胖相关蛋白(FTO)、ALKB同源蛋白5(ALKBH5)、YTH结构域家族蛋白(YTHDF)1、YTHDF2、YTHDC1、YTHDC2、YTHDC3]的表达水平。采用慢病毒转染Mettl3 shRNA的方法抑制细胞中的Mettl3表达,为sh-Mettl3组、Ang Ⅱ+sh-Mettl3组;以转染慢病毒空载体作为阴性对照,为Ang Ⅱ+sh-NC组,观察Ang Ⅱ对周细胞转分化的影响,并检测下游磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路蛋白的表达,包括PI3K、AKT(丝氨酸磷酸化位点473)[p-AKT(S473)]、AKT(苏氨酸磷酸化位点308)[p-AKT(T308)]等。加入放线菌素D与各组周细胞共培养以抑制PI3K基因的转录,通过检测不同共培养时间残余PI3K mRNA表达量以计算PI3K mRNA半衰期。在Ang Ⅱ+sh-Mettl3组周细胞中加入AKT激动剂SC79,观察是否可逆转Mettl3抑制对Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用。(2)动物实验中,分为假手术组(仅给予0.9%无菌生理盐水)、Ang Ⅱ组(泵入Ang Ⅱ溶液)、sh-Mettl3组(注射Mettl3 shRNA慢病毒溶液)、Ang Ⅱ+sh-Mettl3组(泵入Ang Ⅱ溶液+注射Mettl3 shRNA慢病毒溶液)、Ang Ⅱ+sh-Mettl3+SC79组(Ang Ⅱ+sh-Mettl3组处理基础上注射SC79),每组6只。手术前后采用尾夹法测定血压,术后4周测定血清肌酐、尿素含量及尿液白蛋白含量。28 d后取肾脏组织,采用苏木精-伊红(HE)及Masson三色法对组织切片进行染色,检测肾脏纤维化程度。结果:(1)磁珠分选法可获得原代肾脏周细胞,以1×10 6 mmol/L的Ang Ⅱ处理周细胞48 h可成功诱导其向肌成纤维细胞转分化。斑点印迹结果显示,Ang Ⅱ组总RNA的m6A修饰水平高于对照组( P<0.05),RT-qPCR及Western blot结果显示,与对照组相比,Ang Ⅱ组中Mettl3 mRNA及蛋白表达水平上调( P均<0.05)。Ang Ⅱ+sh-Mettl3组细胞中的Mettl3蛋白表达水平低于Ang Ⅱ组,α-SMA、波形蛋白、肌间线蛋白、成纤维细胞激活蛋白a(FAPa)以及Ⅰ型胶原蛋白的表达水平亦低于Ang Ⅱ组( P均<0.05)。与对照组相比,Ang Ⅱ组的PI3K mRNA表达水平上调,且p-AKT(S473)和p-AKT(T308)蛋白高表达;Ang Ⅱ+sh-Mettl3组的PI3K mRNA表达水平低于Ang Ⅱ组,p-AKT(S473)和p-AKT(T308)蛋白表达下调( P均<0.05)。Ang Ⅱ+sh-Mettl3组的半衰期短于Ang Ⅱ+sh-NC组(2.34 h比3.42 h)。而Mettl3抑制对Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化的改善作用可被SC79逆转。(2)动物实验结果显示,与假手术组比较,Ang Ⅱ组小鼠的血压更高,血清肌酐、尿素及24 h尿蛋白测量值更高,纤维化面积更大( P均<0.05);而Ang Ⅱ+sh-Mettle3组的纤维化面积小于Ang Ⅱ组( P<0.05),但在加入SC79后肾脏纤维化又加重。结论:Mettl3介导的RNA m6A表观遗传调控参与Ang Ⅱ诱导的肾脏周细胞-肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化,Mettl3可能通过影响PI3K的稳定性,进而影响PI3K/AKT信号通路发挥调控作用。

关键词：血管紧张素Ⅱ 周细胞肌成纤维细胞转分化 N6-甲基腺苷甲基转移酶3

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肌集钙蛋白2与室性心律失常的研究进展

中华心血管病杂志 2024年第2期52卷 199-204页

作者：陈佳翊武立达王如兴南京医科大学附属无锡人民医院心血管内科无锡214023

室性心律失常是一种常见的心律失常,是导致患者心原性猝死的重要原因。肌集钙蛋白2(Casq2)是Casq家族中的一种,广泛存在于哺乳动物肌肉细胞内质网中。近年来,Casq2通过基因突变和翻译后异常修饰等方式在室性心律失常发生发展中的作用逐... 详细信息

室性心律失常是一种常见的心律失常,是导致患者心原性猝死的重要原因。肌集钙蛋白2(Casq2)是Casq家族中的一种,广泛存在于哺乳动物肌肉细胞内质网中。近年来,Casq2通过基因突变和翻译后异常修饰等方式在室性心律失常发生发展中的作用逐渐为人所知。该文主要综述Casq2的在室性心律失常发生中的作用及机制,为临床室性心律失常的治疗提供潜在新靶点。

关键词：肌集钙蛋白2 兰尼碱受体室性心律失常基因转染

达格列净联合沙库巴曲缬沙坦钠治疗急性心肌梗死介入术后心力衰竭患者的临床研究

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中国临床药理学杂志 2024年第7期40卷 954-958页

作者：李美美林晖莉陈少鹏洪新宝福建医科大学附属第二医院心血管内科福建泉州362000

目的观察达格列净片联合沙库巴曲缬沙坦钠片治疗急性心肌梗死(AMI)介入术后心力衰竭(HF)患者的疗效。方法将AMI介入术后HF患者随机分为对照组与试验组。对照组给予常规抗心力衰竭治疗+沙库巴曲缬沙坦钠片(首次50mg,后逐渐增至每次200mg,... 详细信息

目的观察达格列净片联合沙库巴曲缬沙坦钠片治疗急性心肌梗死(AMI)介入术后心力衰竭(HF)患者的疗效。方法将AMI介入术后HF患者随机分为对照组与试验组。对照组给予常规抗心力衰竭治疗+沙库巴曲缬沙坦钠片(首次50mg,后逐渐增至每次200mg,bid)口服;试验组在对照组治疗的基础上,联合达格列净每次10mg,qd,口服。2组均治疗6个月。比较2组患者的临床疗效、心脏功能[左心室射血分数(LVEF)、左心室重构指数(LVRI)、6min步行距离(6MWD)]、心力衰竭标志物[脑钠肽(BNP)、氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、肌钙蛋白(Tn)]、血清相关生化指标[可溶性人基质裂解素-2(ST2)、血管紧张素2(AT-Ⅱ)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)]变化,统计主要不良心血管事件(MACE)发生率及治疗期间药物不良反应率。结果试验期间脱落6例,最终对照组、试验组均纳入46例。治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为91.30%和76.09%,在统计学上差异有统计学意义(P0.05)。结论达格列净片联合沙库巴曲缬沙坦钠片可明显改善AMI介入术后HF患者心功能及相关指标,降低MACE发生率。

关键词：达格列净片沙库巴曲缬沙坦钠片急性心肌梗死心力衰竭临床疗效心功能主要不良心血管事件

miR-133a-3p修饰的间充质干细胞外泌体促进心肌梗死后大鼠心肌修复

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中华心血管病杂志 2024年第1期52卷 72-78页

作者：孙铃朱文武张健赵鹏程朱叶倩张凤祥南京医科大学第一附属医院、江苏省人民医院心血管内科南京210029 徐州市中心医院心血管内科徐州221000

目的探讨miR-133a-3p修饰的人源脐带血间充质干细胞(ucMSC)衍生的外泌体对急性心肌梗死(AMI)后大鼠心肌修复的作用。方法体外扩增培养ucMSC,将携带miR-133a-3p的慢病毒载体及阴性对照载体分别转染至ucMSC,分别提取其分泌的外泌体,命名为... 详细信息

目的探讨miR-133a-3p修饰的人源脐带血间充质干细胞(ucMSC)衍生的外泌体对急性心肌梗死(AMI)后大鼠心肌修复的作用。方法体外扩增培养ucMSC,将携带miR-133a-3p的慢病毒载体及阴性对照载体分别转染至ucMSC,分别提取其分泌的外泌体,命名为miR-133a-3p-Exo及miR-NC-Exo。采用冠状动脉左前降支结扎术构建大鼠AMI模型,分别于梗死区边缘原位注射miR-133a-3p-Exo或miR-NC-Exo进行干预。干预后28 d,采用超声心动图检测大鼠心功能;采用Masson染色检测大鼠梗死后心肌纤维化面积;采用TUNEL染色评估梗死后大鼠心肌凋亡情况;采用免疫荧光染色评估梗死后大鼠血管新生情况。结果与miR-NC-Exo组相比,miR-133a-3p-Exo组在AMI后28 d左心室射血分数较高[(64.2%±8.9%)比(47.4%±9.8%),P血管的数量均较多[CD31:(13.9±2.0)条比(2.9±0.9)条,α-SMA:(11.0±1.6)条比(3.5±0.9)条,P均血管新生,从而改善AMI后大鼠的心功能。

关键词：微RNAs 间充质干细胞外泌体急性心肌梗死心肌修复

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脂肪因子在高血压中的研究进展

中华高血压杂志(中英文) 2024年

作者：宋婷婷姜婷婷金元媛傅羽哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科哈尔滨医科大学附属第一医院全科医学科

高血压是心脑血管疾病的危险因素之一,长期高血压会对心、脑、肾等重要器官的结构和功能造成不可逆转的损伤。众所周知,肥胖与高血压的发生关系密切。人类脂肪组织主要包括三种类型:白色脂肪组织(white a dipose tissue,WAT)、棕色脂肪...

高血压是心脑血管疾病的危险因素之一,长期高血压会对心、脑、肾等重要器官的结构和功能造成不可逆转的损伤。众所周知,肥胖与高血压的发生关系密切。人类脂肪组织主要包括三种类型:白色脂肪组织(white a dipose tissue,WAT)、棕色脂肪组织(brown adiposetissue,BAT)和米色脂肪组织。其中,内脏WAT在血压调节中起着重要作用,其通过分泌促炎脂肪因子、诱导胰岛素抵抗及激活交感神经等多种方式导致血管内皮功能障碍和血压升高。

关键词：

急性心肌梗死患者冠状动脉胆固醇结晶与非罪犯病变中斑块特征的关系:一项OCT研究

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中华心血管病杂志 2024年第6期52卷 659-666页

作者：赵嘉伟赵锐房超陈昱竹徐学明崔丽娜马显钦侯静波代建南于波哈尔滨医科大学附属第二医院心血管内科、寒地心血管病全国重点实验室、心肌缺血教育部重点实验室哈尔滨150001

目的采用光学相干断层成像(OCT)分析急性心肌梗死患者中具有胆固醇结晶的非罪犯病变的斑块特征,并探讨胆固醇结晶与斑块破裂、斑块愈合之间的关系。方法本研究为回顾性队列研究,纳入2017年1至12月行三支冠状动脉OCT检查的急性心肌梗死患... 详细信息

目的采用光学相干断层成像(OCT)分析急性心肌梗死患者中具有胆固醇结晶的非罪犯病变的斑块特征,并探讨胆固醇结晶与斑块破裂、斑块愈合之间的关系。方法本研究为回顾性队列研究,纳入2017年1至12月行三支冠状动脉OCT检查的急性心肌梗死患者,根据非罪犯病变中是否存在胆固醇结晶,在病变水平分为胆固醇结晶组和无胆固醇结晶组,行冠状动脉造影和OCT检查,比较2组非罪犯病变的形态学特征。采用广义估计方程log-binomial多因素回归模型评估非罪犯病变胆固醇结晶与斑块破裂和斑块愈合之间的关系。随访截至2023年10月,绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank检验比较胆固醇结晶和无胆固醇结晶2组之间主要不良心血管事件的发生率。结果本研究共纳入173例患者,年龄(56.8±11.6)岁,男性124例(71.7%)。本研究共纳入710个非罪犯病变,胆固醇结晶组102个(14.4%)非罪犯病变,无胆固醇结晶组608个(85.6%)非罪犯病变。造影结果显示胆固醇结晶组病变的最小管腔直径小,直径狭窄率高,病变长度长(P均心血管事件无关(log-rank P=0.558)。结论急性心肌梗死患者中,伴胆固醇结晶的非罪犯病变狭窄程度更重、易损性更高;非罪犯病变胆固醇结晶与斑块愈合的形成密切相关,与斑块破裂无关。

关键词：心肌梗死光学相干断层成像非罪犯病变胆固醇结晶易损斑块斑块破裂斑块愈合主要不良心血管事件

宽胸气雾剂改善冠心病PCI术后心绞痛患者生活质量临床研究

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：林志彬邓运生徐艳如梁桂连李崇信曾庆春南方医科大学南方医院心血管内科

目的观察宽胸气雾剂对冠心病经皮冠状动脉介入术（PCI）术后心绞痛患者临床疗效及生活质量的影响。方法选取2022年12月—2023年9月在南方医院诊断为冠心病接受PCI治疗后仍有心绞痛的患者72例。将患者随机分为试验组和对照组，每组各3... 详细信息

目的观察宽胸气雾剂对冠心病经皮冠状动脉介入术（PCI）术后心绞痛患者临床疗效及生活质量的影响。方法选取2022年12月—2023年9月在南方医院诊断为冠心病接受PCI治疗后仍有心绞痛的患者72例。将患者随机分为试验组和对照组，每组各36例。对照组给予常规药物治疗，试验组在常规药物治疗的基础上给予宽胸气雾剂舌下喷服，每次2喷，每日3次，连续喷服1个月。比较两组患者治疗前后的生活质量量表（SF-36）、西雅图心绞痛量表（SAQ）评分以及心绞痛缓解临床疗效。结果最终试验组35例和对照组34例患者完成试验。与本组治疗前比较，两组治疗后心绞痛发作频次、心绞痛发作持续时间降低，SAQ各维度评分增高（P0.05），但试验组显效率有升高趋势。结论宽胸气雾剂能降低冠心病PCI术后心绞痛发作次数及持续时间，并改善患者的生活质量。

关键词：宽胸气雾剂冠心病心绞痛生活质量中成药中西医结合

心房颤动伴中度及以上心房功能性二尖瓣反流患者的临床特征

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南京医科大学学报(自然科学版) 2024年

作者：王彦涵张莱王君张琪杨吉猛方旭陶琴南京医科大学附属江宁医院心血管内科

目的：分析心房颤动（atrial fibrillation,AF）伴中度及以上心房功能性二尖瓣反流（atrial functional mitral regurgitation,AFMR）患者的临床特征和相关因素。方法：本研究为单中心横断面研究。连续纳入2023年7月—2024年3月入住南... 详细信息

目的：分析心房颤动（atrial fibrillation,AF）伴中度及以上心房功能性二尖瓣反流（atrial functional mitral regurgitation,AFMR）患者的临床特征和相关因素。方法：本研究为单中心横断面研究。连续纳入2023年7月—2024年3月入住南京医科大学附属江宁医院心血管内科的AF伴AFMR患者共313例，根据二尖瓣反流程度分为中度以下AFMR组（A组，249例）与中度及以上AFMR组（B组，64例）。比较基线资料，采用Logistic回归分析AF伴中度及以上AFMR的相关因素。结果：两组间年龄、CHA2DS2-VASc评分、房颤类型、肾功能不全病史、射血分数保留的心力衰竭（heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF）病史、氨基末端脑钠肽前体（N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP）、三尖瓣反流程度、左房内径、左室舒张末内径、左室射血分数差异有统计学意义（P <0.05）。多因素回归分析显示，左房内径（OR=1.067,95%CI:1.002～1.137,P<0.05）、左室舒张末内径（OR=1.153,95%CI:1.052～1.264,P <0.05）、三尖瓣轻-中度反流（OR=6.571,95%CI:1.362～31.705,P <0.05）、三尖瓣中度反流（OR=10.795,95%CI:3.816～30.543,P <0.05）、三尖瓣中-重度反流（OR=19.525,95%CI:4.593～82.999,P <0.05）、三尖瓣重度反流（OR=20.701,95%CI:5.799～73.896,P <0.05）是AF伴中度及以上AFMR的独立危险因素。结论：与AF伴中度以下AFMR患者相比，AF伴中度及以上AFMR患者具有不同的临床特征，通常有更多的临床伴发疾病，左房内径增大、左室舒张末内径增大和三尖瓣轻度以上反流是AF伴中度及以上AFRM的独立危险因素。

关键词：心房颤动心房功能性二尖瓣反流三尖瓣反流

新型冠状病毒感染心血管后遗症患者的临床特征分析

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中国循环杂志 2024年第4期39卷 392-396页

作者：祁玉珍徐玉妹乔明月金国珍刘志忠南京医科大学附属南京医院心血管内科南京210006

目的:分析新型冠状病毒感染心血管后遗症患者的临床特征。方法:纳入2022年12月至2023年8月因新型冠状病毒感染后主诉“反复胸闷、心悸、乏力”而就诊于本院心血管内科的48例患者为后遗症组,同时期住院拟行外科心脏瓣膜手术且有新型冠状... 详细信息

目的:分析新型冠状病毒感染心血管后遗症患者的临床特征。方法:纳入2022年12月至2023年8月因新型冠状病毒感染后主诉“反复胸闷、心悸、乏力”而就诊于本院心血管内科的48例患者为后遗症组,同时期住院拟行外科心脏瓣膜手术且有新型冠状病毒感染史的非冠心病患者32例作为对照组。分析两组患者的临床资料及冠状动脉造影和24小时动态心电图心率变异性资料。结果:后遗症组和对照组的性别构成比、年龄差异均无统计学意义(P均>0.05)。后遗症组肺部CT检查显示无炎症浸润,且白细胞计数、血沉、C反应蛋白、白细胞介素-6、D二聚体、B型利钠肽水平均正常。后遗症组中所有患者心肌肌钙蛋白I检测为阴性,超声心动图检查未发现局部或整体心肌收缩和舒张功能异常,同时排除心包积液。后遗症组中19例(39.6%)患者经肺动脉CT血管造影(CTA)检查排除肺栓塞。后遗症组9例(18.8%)患者接受3T心脏磁共振钆增强检查,仅2例(22.2%)钆延迟增强(LGE)阳性。后遗症组14例(29.2%)患者接受冠状动脉造影检查,其中12例(85.7%)存在冠状动脉慢血流现象,对照组32例患者接受冠状动脉造影检查,其中6例(18.8%)存在冠状动脉慢血流现象,差异有统计学意义(P二头肌动脉造影,其中7例(87.5%)患者存在肱二头肌动脉慢血流现象。后遗症组心率变异性指标均较对照组显著降低[全部窦性心搏RR间期标准差(SDNN):(67.20±14.41)ms vs.(93.03±22.19)ms,P心血管后遗症患者存在多组织微血管功能障碍和长期自主神经失衡,可能是后遗症的发生原因。

关键词：新型冠状病毒感染心血管后遗症临床特征