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人肺癌中OPB7-1 cDNA片段的克隆定位

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中华医学遗传学杂志 2003年第2期20卷 156-159页

作者：樊红李钰邓艳秋陈英准冯会臣傅松滨张贵寅李璞哈尔滨医科大学遗传教研室 150086 哈尔滨医科大学病理教研室 150086

目的　寻找肺腺癌发生及转移的相关基因 ,探讨肺癌发生发展的分子机理。方法　应用细胞培养、逆转录 PCR、RH基因定位及RNA原位杂交方法研究确定肺癌相关基因。结果　OPB7 1cDNA片段 ,经RH基因定位方法定位于 1p3 1 1p3 4。在正常人肺c... 详细信息

目的　寻找肺腺癌发生及转移的相关基因 ,探讨肺癌发生发展的分子机理。方法　应用细胞培养、逆转录 PCR、RH基因定位及RNA原位杂交方法研究确定肺癌相关基因。结果　OPB7 1cDNA片段 ,经RH基因定位方法定位于 1p3 1 1p3 4。在正常人肺cDNA文库、低转移能力肺腺癌细胞系AGZY83 acDNA中存在的片段大小一致 ,但序列中存在个别碱基的差别。OPB7 1cDNA片段 ( 974bp)与GenBank中已知序列同源性差 ,但与其有同源性的 3个毗连群克隆均位于 1号染色体上 ( 1p3 1 1p3 4)。 2 4例临床病例分析发现 ,该片段在肺癌组织中均有不同程度的表达 ,在正常对照组织中未见明显表达 ,且在有淋巴结转移病例的肺癌组织中表达程度呈明显增高的趋势。结论　提示OPB7 1可能为新的基因 ,与肺癌的发生、转移可能有一定的相关性。

关键词：肺腺癌 RH基因定位 RNA原位杂交基因表达

抑制素亚基基因在哺乳类动物卵巢的表达与调控的研究进展

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生理科学进展 1995年第3期26卷 204-208页

作者：孔德军程治平哈尔滨医科大学生理学教研室

抑制素（ｉｎｈｉｂｉｎ）是由二硫键连接的α和β两个不同亚单位所构成的糖蛋白，它具有抑制卵泡刺激素（ＦＳＨ）的合成和分泌的作用。β亚单位借助二硫键尚可形成β亚单位二聚体──激活素（ａｃｔｉｖｉｎ），它则具有刺激ＦＳＨ分... 详细信息

抑制素（ｉｎｈｉｂｉｎ）是由二硫键连接的α和β两个不同亚单位所构成的糖蛋白，它具有抑制卵泡刺激素（ＦＳＨ）的合成和分泌的作用。β亚单位借助二硫键尚可形成β亚单位二聚体──激活素（ａｃｔｉｖｉｎ），它则具有刺激ＦＳＨ分泌的作用。本文介绍了抑制素亚基ｃＤＮＡ的克隆及抑制素亚基基因在哺乳类卵巢表达与调控的研究进展，并指出在研究抑制素基因表达时应予注意的问题。

关键词：抑制素激活素基因表达哺乳动物纲卵巢

血小板活化因子对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子表达的作用

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生理学报 2008年第2期60卷 275-278页

作者：郑慧丽温海霞刘国艺倪江哈尔滨医科大学生理学教研室

本文旨在研究血小板活化因子（platelet-activating factor,PAF）对大鼠黄体细胞孕酮分泌及血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor,VEGF）mRNA表达的作用。将未成年（25-28d）Sprague-Dawley雌性大鼠颈部皮下注射50IU孕马血清促性腺激素（pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG）,48h后注射25IU人绒毛膜促性腺激素（human chorionicgonadotrophin,hCG）诱导卵泡发育和黄体生成,第6天（hCG注射日为第1天）收集卵巢黄体细胞,体外培养24h后,不加或加入不同剂量（0.1μg/mL、1μg/mL、10μg/mL）PAF,37oC、5%CO2培养箱内培养24h。用放射免疫方法测定培养液中孕酮的含量,流式细胞仪和RT-PCR方法检测黄体细胞凋亡以及VEGF mRNA的表达。结果显示,PAF促进黄体细胞孕酮分泌,1μg/mL PAF作用最强（P〈0.05）;PAF促进黄体细胞凋亡无明显剂量依赖性,但10μg/mL PAF显著促进大鼠黄体细胞凋亡（P〈0.05）;PAF刺激黄体细胞VEGF mRNA表达,1μg/mL PAF效果最显著（P〈0.01）。结果提示,PAF可通过调节黄体细胞孕酮的分泌和VEGF mRNA的表达来促进黄体形成。

关键词：血小板活化因子黄体血管内皮生长因子

PAI-1反义RNA对人主动脉平滑肌细胞中血管内皮生长因子的影响

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中华医学遗传学杂志 2001年第2期18卷 110-113页

作者：富路梅宇李晖哈尔滨医科大学附属第一医院心内科 150001 哈尔滨医科大学生化教研室

目的　探讨纤溶酶原激活物抑制剂 - 1(plasminogen activator inhibitor- 1,PAI- 1)反义 RNA对离体培养的主动脉平滑肌细胞 (smooth muscle cell,SMC) PAI- 1表达的作用及对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法　PCR扩增 PAI- 1第 2外显子 ,将 PCR产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体 pc DNA3.1,构建 PAI- 1反义 RNA重组质粒。将 pc DNA3.1-反义PAI- 1重组质粒转染 SMC中。通过免疫组化、Western印迹、EL ISA检测细胞中 PAI- 1表达的改变 ;通过免疫荧光技术观察细胞中 PAI- 1表达量的变化对 VEGF的影响。结果　转染后第 3天 ,细胞中 PAI- 1含量最低 ,VEGF的表达也减少。第 5天 ,PAI- 1含量逐渐升高 ,VEGF也相应增加。第 7天 ,PAI- 1含量接近于正常 ,VEGF也增至正常水平。结论　反义 PAI- 1RNA能有效阻断 SMC中 PAI- 1的蛋白合成 ,同时抑制细胞中 VEGF的表达。

关键词：纤溶酶原激活物抑制剂-1 反义RNA 血管内皮生长因子平滑肌细胞动脉粥样硬化

三七治疗骨关节炎机制:基于UHPLC-QE-MS、网络药理学及分子动力学模拟

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中国组织工程研究 2025年第8期29卷 1751-1760页

作者：陈跃平陈锋彭清林陈荟伊董盼锋广西中医药大学附属瑞康医院广西壮族自治区南宁市530011 广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530200 哈尔滨医科大学黑龙江省哈尔滨市150086

背景:课题组前期研究发现三七能够修复骨细胞的形态结构,对于治疗骨关节炎具有良好的应用前景,但目前对于三七的具体作用机制尚不清楚。目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(ultra-high performance liquid chromatogr... 详细信息

背景:课题组前期研究发现三七能够修复骨细胞的形态结构,对于治疗骨关节炎具有良好的应用前景,但目前对于三七的具体作用机制尚不清楚。目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-Q exactive-mass spectrometry,UHPLC-QE-MS)技术鉴定三七的主要成分,并结合网络药理学、分子对接和分子动力学模拟探究三七治疗骨关节炎的作用机制。方法:利用UHPLC-QE-MS技术鉴定三七的主要成分后,运用TCMSP数据库筛选活性成分,通过TCMSP和Uniprot数据库查找活性成分靶点,通过疾病数据库筛选骨关节炎靶点。在药物靶点与疾病靶点取交集后,导入STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络筛选关键靶点,通过“活性成分-作用靶点”网络筛选关键活性成分。再对关键靶点进行富集分析,并对关键活性成分和关键靶点进行分子对接验证,最后选取结合能最低的结果进行分子动力学模拟。结果与结论:①在三七溶液中共鉴定出57种活性成分,成分靶点与疾病靶点交集50个,关键活性成分5个(槲皮素、熊脱氧胆酸、山奈酚、柚皮素和红藻氨酸),关键靶点5个(白细胞介素6、基质金属蛋白酶9、白细胞介素1β、白蛋白和趋化因子配体2);②基因本体功能富集642个条目,其中620个条目代表生物过程,21个条目代表分子功能,1个条目代表细胞成分;京都基因与基因组百科全书通路分析63条通路,主要涉及雌激素信号通路、白细胞介素17信号通路和高糖基化终末产物-高糖基化终末产物受体信号通路;③分子对接显示关键活性成分和关键靶点结合活性良好,分子动力学模拟提示槲皮素和基质金属蛋白酶9间的相互作用稳定;④对三七成分进行了较全面研究,初步阐明了其药效物质基础,预测三七可通过多组分、多靶点、多途径和多通路发挥抗炎、软骨保护和免疫调节作用来治疗骨关节炎。

关键词：三七骨关节炎分子动力学模拟质谱分子对接网络药理学

2017—2023年广州某医院常见病原菌临床分布和耐药性

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中华医院感染学杂志 2025年 769-775页

作者：李玉华胡可胜朱正林邹伟浩葛平杨莉莉王碧云彭鸿娟南方医科大学公共卫生学院病原生物学系广东省热带病研究重点实验室华南传染病防治教育部重点实验室(南方医科大学) 武警广东总队医院检验与病理科武警广东总队医院经济管理科

目的分析2017—2023年广州市某三甲医院常见病原菌的临床分布情况及耐药性,为临床诊断和规范使用抗菌药物提供依据。方法收集广州市某三级甲等医院2017年1月—2023年12月住院患者临床分离的需氧菌共计10 086株,对医院常见病原菌的组... 详细信息

目的分析2017—2023年广州市某三甲医院常见病原菌的临床分布情况及耐药性,为临床诊断和规范使用抗菌药物提供依据。方法收集广州市某三级甲等医院2017年1月—2023年12月住院患者临床分离的需氧菌共计10 086株,对医院常见病原菌的组成、标本来源、科室分布及常见抗菌药物耐药性进行回顾性分析。结果2017—2023年从医院住院患者的标本中共检出病原菌10 086株,占比前五位的病原菌是肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌;标本主要来源于痰、中段尿及全血等;医院感染的高发科室为重症医学科、神经内科、老年医学科、神经外科、呼吸内科和泌尿外科等;耐药结果显示,肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌对不同类抗菌药的耐药率呈现出逐渐上升趋势(P<0.05),鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率有所降低,但对多数抗菌药物耐药率达45%以上,未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的革兰阳性球菌。结论临床常见病原菌具有较为普遍的抗药性,为减少耐药菌的产生及传播,临床医生应重视病原菌的培养和药物敏感试验,根据药敏结果选择合理的抗菌药物,提高临床治疗效果,医院必须加强细菌耐药性监测、规范临床抗菌药物管理和合理使用,采取有效措施控制医院内感染。

关键词：病原菌抗菌药物临床分布耐药性医院感染

人类红细胞膜带3蛋白C端域Lys892～Phe895在Cl^-转运过程中作用的研究

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生物化学与生物物理进展 2003年第2期30卷 245-250页

作者：刘利梅傅国辉王天英姜晓姝郭卓维史从宁哈尔滨医科大学病理生理教研室哈尔滨150086

采用酵母表面展示系统 ,表达带 3蛋白膜段结构域 (Gln4 0 4～Val911)至酵母细胞膜 ,功能研究表明 ,表达后的膜段结构域具有离子转运的活性 ,同时 ,带 3蛋白抑制剂 4 ,4′ 二异硫氰 2 ,2′ 二黄酸芪 (DIDS)能够抑制其离子转运的功能 .利... 详细信息

采用酵母表面展示系统 ,表达带 3蛋白膜段结构域 (Gln4 0 4～Val911)至酵母细胞膜 ,功能研究表明 ,表达后的膜段结构域具有离子转运的活性 ,同时 ,带 3蛋白抑制剂 4 ,4′ 二异硫氰 2 ,2′ 二黄酸芪 (DIDS)能够抑制其离子转运的功能 .利用PCR方法 ,以 pFAST Bac mdb3为模板扩增出带 3蛋白膜段结构域的 4种截断突变体 ,分别去除带 3蛋白C端域后 4个 (Ala90 8～Val911)、 16个 (Asp896～Val911)、 2 0个 (Lys892～Val911)、 32个(Asn880～Val911)氨基酸序列 ,测序后将其克隆至表达载体 pYD1上 ,构建酵母表达质粒 pYD1 Trunc4、pYD1 Trunc16、pYD1 Trunc2 0和 pYD1 Trunc32 ,诱导 4组突变体的蛋白质表达 .然后测定Cl-的转运活性 ,结果发现去除后 2 0个 (Lys892～Val911)氨基酸残基后 ,离子转运活性明显下降 ,而去除后 32个 (Asn880～Val911)后 ,离子转运没有进一步下降 ,说明Lys892～Phe895 4个氨基酸残基在带

关键词：人类红细脑膜带3蛋白 C端域Lys892-Phe895 Cl-转运过程截断突变体,酵母表面展示系统

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人类黄体组织抑制素与激活素构型的研究

生理科学进展 1995年第2期26卷 141-144页

作者：孔德军哈尔滨医科大学生理学教研室

本文观察了抑制素／激活素α、βＡ与βＢ亚基基因在人早（３天）、中（８天）及晚（１５天）期黄体组织的表达。α－ｍＲＮＡｓ在早期黄体最高；βＡ－ｍＲＮＡｓ仅在早期出现，而βＢ－ｍＲＮＡｓ从黄体早期至晚期逐步增高。提示人黄... 详细信息

本文观察了抑制素／激活素α、βＡ与βＢ亚基基因在人早（３天）、中（８天）及晚（１５天）期黄体组织的表达。α－ｍＲＮＡｓ在早期黄体最高；βＡ－ｍＲＮＡｓ仅在早期出现，而βＢ－ｍＲＮＡｓ从黄体早期至晚期逐步增高。提示人黄体抑制素可能为抑制素Ｂ（α·βＢ二聚体），晚期黄体可能有激活素Ｂ（βＢ·βＢ）的生成。

关键词：抑制素激活素基因表达人黄体

Effect of acetylcholine on pain-related electric activities in hippocampal CA1 area of normal and morphinistic rats

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Neuroscience Bulletin 2007年第6期23卷 323-328页

作者：肖宇杨晓芳徐满英哈尔滨医科大学生理教研室哈尔滨150081

Objective To examine the effect of acetylcholine（ACh）on the electric activities of pain-excitation neurons （PEN）and pain-inhibitation neurons（PIN）in the hippocampal CA1 area of normal rats or morphinistic rats,and to explore the role of ACh in regulation of pain perception in CA1 area under normal condition and morphine *** The trains of electric impulses applied to sciatic nerve were set as noxious *** discharges of PEN and PIN in the CA l area were recorded extracellularly by glass *** observed the influence of intracerebroventricular （i.c.v.）injection of ACh and atropine on the noxious stimulation-evoked activities of PEN and PIN in the CA1 *** Noxious stimulation enhanced the electric activity of PEN and depressed that of PIN in the CA1 area of both normal and addiction *** normal rats,ACh decrease the pain-evoked discharge frequency of PEN,while increased the frequency of *** effects reached the peak value at 4 min after injection of *** morphinistic rats,ACh also inhibited the PEN electric activity and potentialized the PIN electric activity,but the maximum effect appeared at 6 min after administration. The ACh-induced responses were significantly blocked by muscarinic receptor antagonist *** Cholinergic neurons and muscarinic receptors in the hippocampal CA1 area are involved in the processing of nociceptive information and they may play an analgesia role in pain *** addiction attenuated the sensitivity of painrelated neurons to the noxious information.

关键词： acetylcholine hippocampal CA1 area morphine electric activity