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B淋巴细胞亚群上EZH2的表达对脓毒症患者预后的预测价值

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中华急诊医学杂志 2021年第11期30卷 1340-1348页

作者：赵冬旸李哲包晓玮孙宏杨倩任慧娟刘显东蒋森周晓慧唐伦先同济大学附属东方医院急诊内科上海200120 同济大学附属东方医院转化医学研究中心上海200120

目的探讨脓毒症患者外周血B淋巴细胞(CD19+B)、记忆B细胞亚群(CD19+CD27+B)上组蛋白甲基转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(enhance of zeste homolog 2,EZH2)动态表达变化规律及其对脓毒症患者预后判断的价值。方法采用前瞻性队列研究... 详细信息

目的探讨脓毒症患者外周血B淋巴细胞(CD19+B)、记忆B细胞亚群(CD19+CD27+B)上组蛋白甲基转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(enhance of zeste homolog 2,EZH2)动态表达变化规律及其对脓毒症患者预后判断的价值。方法采用前瞻性队列研究,纳入2018年6月至2020年1月在同济大学附属东方医院重症监护病房就诊的脓毒症患者48例,同期来院的40例健康体检者作为对照组。根据患者28 d存活与否将脓毒症组分为死亡组及存活组。采集确诊脓毒症1 d、3 d、7 d共3个时间点血标本(健康对照组于清晨空腹仅抽取1次),收集不同时间点脓毒症组的血常规、IL-6、血气分析等,统计SOFA和APACHEⅡ评分。运用流式细胞技术检测研究对象不同时间点CD19+B细胞上EZH2阳性率及平均荧光强度、CD19+CD27+B细胞上EZH2的阳性率并绘制受试者工作特征曲线,计算曲线下面积,评估对判断脓毒症患者28 d死亡的预测价值。结果①脓毒症组确诊后第1、3、7天外周血CD19+B淋巴细胞上EZH2的阳性率和平均荧光强度、CD19+CD27+B淋巴细胞上EZH2表达的阳性率较健康对照组均显著增加,且差异具有统计学意义(P<0.05)。随着时间推移,EZH2在CD19+B淋巴细胞、CD19+CD27+B淋巴细胞上表达水平呈升高趋势。②死亡组第1天CD19+B淋巴细胞上EZH2阳性率明显高于存活组,然而死亡组第3和7天CD19+CD27+B细胞上EZH2的阳性率却明显低于存活组(P<0.05)。③脓毒症患者第1天CD19+B淋巴细胞上EZH2阳性率、APACHEⅡ评分、SOFA评分和IL-6水平均为预测患者28 d死亡的独立危险因素。④APACHEⅡ评分的AUC为0.907(95%CI:0.825~0.990),灵敏度为88.89%,特异度为76.67%;SOFA评分的AUC为0.831(95%CI:0.706~0.955),灵敏度为66.67%,特异度为86.67%;CD19+B淋巴细胞上EZH2阳性率的AUC为0.799(95%CI:0.657~0.941),灵敏度为88.89%,特异度为80.77%,灵敏度优于SOFA评分,特异度高于APACHEⅡ评分。结论脓毒症患者B淋巴细胞上EZH2高表达,与患者不良预后相关;动态监测脓毒症患者B淋巴细胞上EZH2的表达有一定的临床意义。

关键词：脓毒症 B淋巴细胞果蝇zeste基因增强子同源物预后

组蛋白甲基转移酶EZH2调控脓毒症诱导的T细胞功能障碍的作用及分子机制

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中华危重病急救医学 2022年第4期34卷 357-361页

作者：李哲赵冬旸周晓慧唐伦先同济大学附属东方医院急诊内科上海200120 同济大学医学院上海200120 同济大学附属东方医院转化医学研究中心上海200120

目的探讨组蛋白甲基转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)调控脓毒症T淋巴细胞功能失调的作用及机制。方法按随机数字表法将24只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脓毒症模型组〔盲肠结扎穿孔术(CLP)+二甲基亚砜(DMSO)组〕及EZH2选择性... 详细信息

目的探讨组蛋白甲基转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)调控脓毒症T淋巴细胞功能失调的作用及机制。方法按随机数字表法将24只雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、脓毒症模型组〔盲肠结扎穿孔术(CLP)+二甲基亚砜(DMSO)组〕及EZH2选择性抑制剂干预组(CLP+GSK126组),每组8只。采用CLP法制备脓毒症小鼠模型;假手术组小鼠不结扎穿刺盲肠,其余操作同CLP+DMSO组。CLP+DMSO组及CLP+GSK126组小鼠术后立即分别腹腔注射DMSO或GSK126(10 mg/kg)。术后24 h处死小鼠取肠系膜淋巴结,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞EZH2表达、T淋巴细胞凋亡率、细胞增殖标志物ki-67抗原阳性T淋巴细胞(ki-67^(+))比例、γ-干扰素阳性T淋巴细胞(IFN-γ^(+))比例、程序性死亡受体-1阳性T淋巴细胞(PD-1+)比例及程序性死亡配体-1阳性T淋巴细胞(PD-L1^(+))比例。结果与假手术组相比,CLP+DMSO组小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞EZH2表达升高。与CLP+DMSO组相比,CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结CD3+比例升高(0.70±0.02比0.50±0.07,P0.05〕,表明抑制EZH2对脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞凋亡无明显影响。与CLP+DMSO组相比,CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结IFN-γ^(+)CD4^(+)、IFN-γ^(+)CD8^(+)比例也显著增加(IFN-γ^(+)CD4^(+):0.31±0.11比0.14±0.06,IFN-γ^(+)CD8^(+):0.30±0.10比0.13±0.06,均P<0.05),表明抑制EZH2可增强脓毒症小鼠淋巴结T淋巴细胞IFN-γ分泌能力;同时,CLP+GSK126组小鼠肠系膜淋巴结PD-1+CD8^(+)比例较CLP+DMSO组显著下降(0.092±0.006比0.135±0.004,P<0.01),表明抑制EZH2可降低脓毒症小鼠淋巴结CD8^(+)细胞PD-1的表达量,但对PD-L1^(+)比例无明显影响。结论EZH2参与了脓毒症诱导的T淋巴细胞功能障碍的调控,该作用可能部分通过调节PD-1表达介导。

关键词：脓毒症 T淋巴细胞组蛋白甲基转移酶 EZH2选择性抑制剂GSK126 程序性死亡受体-1

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经腹肾次全切建立大鼠心肾综合征模型

中华医学杂志 2019年第6期99卷 447-452页

作者：曹浩吉霆威兰琴林芳董云徐安军刘静丁海燕范慧敏刘中民同济大学附属东方医院心外科上海200120 同济大学附属东方医院上海市心力衰竭研究中心上海200120 同济大学附属东方医院心超室上海200120

目的评估经腹肾次全切除术(STNx)后大鼠肾功能和心功能的变化,为慢性肾脏病(CKD)和心肾综合征(CRS)研究提供一个理想动物模型。方法将20只SD大鼠(雄性,5~6周龄)随机分为假手术(Sham)组及STNx组,每组10只。STNx组大鼠经腹一次性完成... 详细信息

目的评估经腹肾次全切除术(STNx)后大鼠肾功能和心功能的变化,为慢性肾脏病(CKD)和心肾综合征(CRS)研究提供一个理想动物模型。方法将20只SD大鼠(雄性,5~6周龄)随机分为假手术(Sham)组及STNx组,每组10只。STNx组大鼠经腹一次性完成右肾切除+左肾2/3动脉结扎;Sham组大鼠仅完成手术操作,但不结扎右肾动静脉及输尿管,不切除右肾,不结扎左肾动脉分支。术后12周,行心脏超声观察心功能的变化,检测大鼠血清肌酐及肾脏病理变化,同时观察心肌细胞大小及纤维化情况。结果术后12周,STNx组大鼠一般状况较差,体型消瘦,梗死区肾组织吸收,表面凹凸不平,残余肾组织代偿性肥大。STNx组大鼠血清肌酐高于Sham组[(52.80±3.34)μmol/L比(22.10±1.64)μmol/L,P研究心肾综合征的理想选择。

关键词：心肾综合征慢性肾脏病肾切除术心功能模型动物

组蛋白甲基转移酶抑制剂对脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞极化的影响

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中华危重病急救医学 2019年第2期31卷 187-192页

作者：张倩倩周晓慧唐伦先同济大学附属东方医院急诊内科上海200120 同济大学附属东方医院转化医学研究中心上海市心力衰竭研究中心上海200120 上海市东方医院吉安医院急诊内科江西吉安343000

目的探讨组蛋白甲基转移酶(EZH2)抑制剂对脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞极化的影响及其作用机制。方法选取36只健康雄性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)和EZH2抑制剂干预组(CLP+3-DZNeP组),每组12只。... 详细信息

目的探讨组蛋白甲基转移酶(EZH2)抑制剂对脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞极化的影响及其作用机制。方法选取36只健康雄性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)和EZH2抑制剂干预组(CLP+3-DZNeP组),每组12只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症动物模型;Sham组不结扎、穿刺盲肠。CLP+3-DZNeP组分别于制模前24 h和制模后1 h腹腔注射3-DZNeP 1 mg/kg。每组取8只小鼠于术后24 h处死,应用高通量液相蛋白芯片分别检测腹腔灌洗液中白细胞介素-?6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;应用流式细胞仪检测巨噬细胞极化标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和CD206表达;以贴壁法分离、纯化小鼠腹腔巨噬细胞,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测巨噬细胞EZH2和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的蛋白表达。各组剩余小鼠于术后48 h处死,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺脏、肾脏组织病理学改变。结果与Sham组比较,CLP组小鼠肺脏和肾脏组织炎性细胞浸润增加,腹腔灌洗液中促炎细胞因子IL-6和TNF-α水平显著升高〔IL-6(ng/L):7794.75±405.56比78.63±74.09,TNF-α(ng/L):147.25±25.19比18.20±5.03,均P<0.01〕,M1型巨噬细胞占比增多〔iNOS+ F4/80+:(13.18±8.80)%比(1.57±0.77)%,P<0.05〕,腹腔巨噬细胞中EZH2蛋白表达明显增高(EZH2/GAPDH:0.84±0.11比0.11±0.03,P<0.01),PPARγ蛋白表达则明显降低(PPARγ/GAPDH:0.09±0.01比0.27±0.09,P<0.01)。与CLP组比较,CLP+3-DZNeP组小鼠肺脏和肾脏组织病理学改变明显缓解,腹腔灌洗液中促炎细胞因子表达水平显著降低〔IL-6(ng/L):4207.10±876.60比7794.75±405.56,TNF-α(ng/L):63.00±25.37比147.25±25.19,均P<0.01〕,M1型巨噬细胞占比显著降低〔iNOS+ F4/80+:(3.64±0.89)%比(13.18±8.80)%,P<0.05〕,M2型巨噬细胞占比显著增高〔CD206+ F4/80+:(17.68±5.63)%比(7.60±3.17)%,P<0.01〕,腹腔巨噬细胞中EZH2蛋白表达明显下降(EZH2/GAPDH:0.53±0.09比0.84±0.11,P<0.05),PPARγ蛋白表达则明显增高(PPARγ/GAPDH:0.39±0.14比0.09±0.01,P<0.05)。结论脓毒症诱导腹腔巨噬细胞EZH2高表达,并可能通过抑制PPARγ蛋白表达诱导M1型巨噬细胞极化,促进炎性细胞因子释放;EZH2特异性抑制剂3-DZNeP能明显抑制腹腔巨噬细胞M1型分化,从而减轻炎症反应。

关键词：脓毒症巨噬细胞极化组蛋白甲基转移酶过氧化物酶体增殖物激活受体γ

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中国第12次北极科学考察队员医疗资料分析

极地研究 2023年第1期35卷 160-165页

作者：郝俊杰陈建同济大学附属东方医院神经内科上海200120 同济大学附属东方医院国家极地考察医疗保障与研究中心上海200120

为提高极地科学考察医疗保障水平,对北极科学考察医疗预防和救治方案提出针对性建议,本研究收集了搭乘“雪龙2”号极地考察船的中国第12次北极科学考察队员在航程中的医疗资料,包括统计就诊人数、各种疾病和外伤例数、各系统疾病和外伤... 详细信息

为提高极地科学考察医疗保障水平,对北极科学考察医疗预防和救治方案提出针对性建议,本研究收集了搭乘“雪龙2”号极地考察船的中国第12次北极科学考察队员在航程中的医疗资料,包括统计就诊人数、各种疾病和外伤例数、各系统疾病和外伤例数及构成比,分析常见疾病和外伤的可能诱发因素。研究发现,在79 d航程期间(2021年7月12日—9月28日),100名中国第12次北极科学考察队员发生疾病和外伤并就诊的有76人(76%);共诊治疾病和外伤143人次(不含复诊),就诊例数前10的疾病和外伤依次为:皮肤损伤、咽炎(并列第1)、软组织损伤、胃炎、上呼吸道感染、手足皲裂或脱皮、失眠、口腔溃疡、视疲劳、痛风、皮癣(并列第10);根据发病系统和专科不同,就诊例数依次为创伤与骨关节疾病、皮肤疾病、耳鼻喉疾病、消化系统疾病、呼吸系统疾病、口腔疾病、眼科疾病、神经心理疾病、代谢与内分泌疾病、心血管疾病、泌尿生殖系统疾病。为此,建议进一步采取职业安全教育、加强安全防护和严格执行作业操作规范以及提高随队医生技能和加强远程医疗等措施。

关键词：北极科考队员疾病外伤医疗保障

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椎间盘退变中的力学信号转导蛋白

中国组织工程研究 2025年第3期29卷 579-589页

作者：高夕林吴思张超朱立国符碧峰王平天津中医药大学第一附属医院天津市300193 国家中医针灸临床医学研究中心天津市300193 中国中医科学院望京医院北京市100102

背景:近年来的研究表明椎间盘退变与异常压力负荷密切相关,而力学信号转导蛋白在其中发挥了关键作用。目的:探讨力学信号转导蛋白在异常机械力刺激诱导椎间盘退变的力化学信号换能过程中发挥的作用及机制,总结目前靶向力学信号延缓椎间... 详细信息

背景:近年来的研究表明椎间盘退变与异常压力负荷密切相关,而力学信号转导蛋白在其中发挥了关键作用。目的:探讨力学信号转导蛋白在异常机械力刺激诱导椎间盘退变的力化学信号换能过程中发挥的作用及机制,总结目前靶向力学信号延缓椎间盘退变的治疗策略。方法:以“椎间盘,髓核,纤维环,软骨终板,细胞,力,信号转导,蛋白,生物力学”为中文检索词,以“intervertebral disc,nucleus pulposus,annulus fibrosus,cartilaginous endplate,cell,mechanical stimulation,signal transduction,protein,biomechanics”为英文检索词,检索PubMed、CNKI数据库中的相关文献,最终纳入88篇文献进行综述。结果与结论:椎间盘细胞能通过多种力学信号转导蛋白感知外界机械刺激并将其转化为细胞内生物学反应,这些转导蛋白主要包括细胞外基质中的胶原蛋白、细胞膜表面受体(如整合素及离子通道)、细胞骨架结构蛋白等。力学信号转导蛋白调控力化学信号换能的过程主要包括多个通路的激活,如PI3K/AKT信号通路、核因子κB信号通路、Ca^(2+)/Calpain2/Caspase3通路等。力学信号转导蛋白在椎间盘细胞机械信号换能中发挥了关键作用,这些蛋白表达异常或由此导致的细胞外基质环境改变会破坏椎间盘细胞的力学平衡,引发椎间盘退变。深入研究椎间盘细胞力学信号转导蛋白的表达及调控机制,寻找关键的病理环节和治疗靶点,对开发椎间盘退变治疗策略具有重要意义,目前靶向力学信号延缓椎间盘退变的策略主要包括对转导蛋白的调控、对细胞外基质的改良等,然而这方面研究还处于初级阶段,随着研究的不断深入,力学信号转导蛋白调控椎间盘退变有望实现新的突破。

关键词：力学信号转导蛋白质椎间盘退变靶向力学信号生物力学

巨噬细胞介导上皮间充质转分化在纤维化疾病中的作用

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中华危重病急救医学 2018年第1期30卷 91-93页

作者：张倩倩周晓慧唐伦先同济大学医学院上海200120 同济大学附属东方医院转化医学研究中心上海市心力衰竭研究中心上海200120 同济大学附属东方医院急诊内科上海200120

纤维化与多器官病变的不良预后密切相关，至今仍缺乏有效治疗措施。近年来研究表明，巨噬细胞与上皮细胞相互作用，诱导上皮间充质转分化（EMT），在多种纤维化疾病发病过程中起关键作用。本文就巨噬细胞在EMT相关纤维化疾病中的致病机... 详细信息

纤维化与多器官病变的不良预后密切相关，至今仍缺乏有效治疗措施。近年来研究表明，巨噬细胞与上皮细胞相互作用，诱导上皮间充质转分化（EMT），在多种纤维化疾病发病过程中起关键作用。本文就巨噬细胞在EMT相关纤维化疾病中的致病机制进行综述，为明确其在纤维化疾病治疗中的潜在临床价值提供参考。

关键词：巨噬细胞上皮间充质转分化纤维化

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肺移植慢性排异反应动物模型研究进展

中国实验动物学报 2015年第2期23卷 199-204页

作者：周文勇周晓慧范慧敏同济大学附属东方医院胸心外科上海200120 同济大学东方转化医学研究中心上海200120

慢性排异反应是导致肺移植后期移植失败的主要原因。闭塞性细支气管炎(obliterative bronchiolitis,OB)是肺移植后慢性排异反应的最主要病理学特征改变。而动物模型在肺移植慢性排异反应研究过程中,起到了不可或缺的作用。到目前为止,... 详细信息

慢性排异反应是导致肺移植后期移植失败的主要原因。闭塞性细支气管炎(obliterative bronchiolitis,OB)是肺移植后慢性排异反应的最主要病理学特征改变。而动物模型在肺移植慢性排异反应研究过程中,起到了不可或缺的作用。到目前为止,已经有多种动物模型被建立并用来模拟人类肺移植后中、远期慢性排异反应。但这些动物移植模型都或多或少存在缺陷。近年来,小鼠原位肺移植模型为研究OB提供了潜在可能。本文通过回顾各类肺相关移植模型的建立,对其优缺点进行分析比较,探讨今后肺移植慢性排异疾病模型建立的可能途径。

关键词：肺移植慢性排异闭塞性细支气管炎动物模型

食管癌和贲门癌术后复发或再发胸食管-胃癌与胸内消化道二次重建术

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中国胸心血管外科临床杂志 2021年第9期28卷 1049-1053页

作者：汪进益王光学陈国涵韩扬李钦传同济大学附属东方医院胸外科上海200120 同济大学附属东方医院转化医学研究中心上海200120

目的探讨食管癌和贲门癌术后复发或再发胸食管-胃癌(thoracic esophageal-gastric cancer,TEGC)的临床特点及胸内消化道二次重建术的安全性和有效性。方法回顾性分析2007年7月至2019年12月接受内镜复查的353例食管癌和贲门癌术后患者的... 详细信息

目的探讨食管癌和贲门癌术后复发或再发胸食管-胃癌(thoracic esophageal-gastric cancer,TEGC)的临床特点及胸内消化道二次重建术的安全性和有效性。方法回顾性分析2007年7月至2019年12月接受内镜复查的353例食管癌和贲门癌术后患者的临床资料。共发现31例(8.78%)术后复发或再发TEGC患者,其中男24例、女7例,平均年龄58.5(42~68)岁;其中腺癌18例(58.06%)、鳞状细胞癌13例(41.94%),且均接受了TEGC切除及胸内消化道二次重建术。随访胸腹部CT与上消化道造影检查,对于可疑患者进行胃镜检查;随访时间截至患者死亡或2019年12月30日。采用Kaplan-Meier方法计算生存率,生存分析采用log-rank检验。结果本组31例患者在接受了TEGC切除之后,再行胸内消化道二次重建术,其中残胃-食管胸内吻合术8例、结肠代食管术13例、空肠代食管术6例(其中食管-空肠Roux-en-Y吻合1例)、颈部食管-胃吻合术4例。患者平均手术时间为404.8(340~475)min;术中平均出血量为378.4(180~620)mL;术后并发症4例,其中肺部感染3例、颈部切口感染l例;术后平均住院时间为17.1(14~21)d。所有入组患者均获得随访,11例Ⅰ~ⅡA期患者中位生存时间为25(19.8~35.0)个月,20例ⅡB~ⅢA期患者中位生存时间为16(12.5~19.5)个月,两者差异有统计学意义(χ^(2)=7.8408,P<0.01)。结论食管癌和贲门癌术后存在复发或再发TEGC,多为异时胃癌或残留食管床肿瘤复发侵及胸胃壁所致,术后定期内镜复查是主要方法。对TEGC患者再手术进行胸内消化道二次重建术的治疗在技术上安全可行,可使患者生存获益。

关键词：食管癌贲门癌胸食管-胃癌胸内消化道二次重建术手术