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运用微流控技术分析虫草素对剪切诱导血小板聚集和活化的抑制效果

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 541-548页

作者：高雪梅张天聪黄小静宦宣容李远重庆医科大学附属永川医院中心实验室重庆402160

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7... 详细信息

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7和50μL·min^(-1)流过带有0.5 mm长的80%狭窄的通道150 s,同时用荧光显微镜实时拍摄血小板在微通道表面的黏附聚集图像;用Image J分析荧光图片,以血小板表面覆盖率作为血小板聚集的量化指标。流式细胞术分析虫草素对血小板钙离子动员,单核细胞-血小板聚集体的抑制效果,并通过凝血检测和溶血实验对虫草素出血风险以及血液相容性做评估。结果虫草素可抑制剪切诱导的血小板聚集。在14.7和50μL·min^(-1)条件下,血小板聚集均可被虫草素抑制。虫草素抑制血小板钙离子动员和单核细胞-血小板聚集具有剪切力相关性,并且对外源性凝血途径和内源性凝血途径无影响,具有良好血液相容性。结论虫草素可有效抑制剪切率诱导的血小板聚集,是一种有潜力的抗血小板药物。

关键词：血小板聚集微流控技术壁剪切率虫草素

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过渡金属积累与细胞衰老

生理学报 2024年第3期76卷 418-428页

作者：谢安娜刘国一张孙正远戴薇薇上海中医药大学附属龙华医院科技中心实验室

衰老是指生物体的生理功能进行性衰退，导致年龄相关性疾病和死亡，细胞衰老是衰老标志之一。过渡金属包括铁、铜和锰等，在人体生理和病理过程中发挥重要作用。大量研究表明，衰老细胞中会积累更多过渡金属，而过渡金属积累又会通过产... 详细信息

衰老是指生物体的生理功能进行性衰退，导致年龄相关性疾病和死亡，细胞衰老是衰老标志之一。过渡金属包括铁、铜和锰等，在人体生理和病理过程中发挥重要作用。大量研究表明，衰老细胞中会积累更多过渡金属，而过渡金属积累又会通过产生过量活性氧(reactive oxygen species, ROS)、引发氧化应激、导致DNA损伤、引起线粒体功能障碍等方式加速细胞衰老进程并引起相关疾病。本文将对铁、铜、锰等过渡金属在衰老细胞中积累的原因以及过渡金属积累进一步促进细胞衰老及相关疾病的机制进行综述，旨在为延缓衰老、治疗过渡金属积累引起的衰老相关疾病提供思路。

关键词：细胞衰老过渡金属积累活性氧氧化应激线粒体功能

某医院基于精益六西格玛法的单病种数据质量综合管理实践

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中华医院管理杂志 2024年第3期40卷 218-223页

作者：刘黎徐美东朱炳蔚罗茜叶明明陈丽峰陈兴屹同济大学附属东方医院医务部上海200120 同济大学附属东方医院消化内镜中心上海200120 同济大学附属东方医院感控科上海200120 同济大学附属东方医院信息管理办公室上海200120

单病种质量管理是医疗质量管理的重点内容,相关监测数据已成为医院等级评审和绩效考核等工作的重要依据。为加强单病种质量管理,提高单病种数据填报的及时性、完整性和准确性,2022年6月,某三级甲等医院基于精益六西格玛法,通过定义、测... 详细信息

单病种质量管理是医疗质量管理的重点内容,相关监测数据已成为医院等级评审和绩效考核等工作的重要依据。为加强单病种质量管理,提高单病种数据填报的及时性、完整性和准确性,2022年6月,某三级甲等医院基于精益六西格玛法,通过定义、测量、分析、改进和控制5个阶段,开展了单病种数据质量综合管理实践。针对临床科室的重视程度不够、事后管理方式的弊端和单病种质量管理系统的不完善,医院采取一系列改进举措,包括建立院科两级单病种质量管理组织架构、实行多人分布式事中过程管理和升级单病种质量管理系统等,以提高医院单病种数据质量和上报效率,促进医疗质量的持续改善。经过1年实践,医院单病种数据自动填充率从2022年6月的88.32%提升至2023年6月的96.51%,数据上报率从18.20%升至80.56%,静脉血栓栓塞症规范预防率、住院患者抗菌药物治疗前病原学送检率和肿瘤治疗前临床TNM分期评估率3项关键医疗质量安全指标分别从36.30%、49.78%、22.63%升至95.58%、92.03%、65.37%。该实践取得良好成效,可为我国其他医疗机构加强单病种质量管理提供参考。

关键词：单病种数据质量管理精益六西格玛医疗质量医院,公立

伴t(10;11)(q22;q23)急性髓系白血病1例并文献复习

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白血病·淋巴瘤 2024年第4期33卷 242-244页

作者：费霞张凌逸江云伟王法春陈巧云江苏大学附属人民医院中心实验室镇江

目的提高对伴t(10;11)(q22;q23)急性髓系白血病(AML)的认识。方法回顾性分析江苏大学附属人民医院2022年7月收治的1例伴t(10;11)(q22;q23)AML患者的临床资料及诊治经过, 并复习相关文献。结果患者, 女性, 53岁。患者外周血全血细胞减少,... 详细信息

目的提高对伴t(10;11)(q22;q23)急性髓系白血病(AML)的认识。方法回顾性分析江苏大学附属人民医院2022年7月收治的1例伴t(10;11)(q22;q23)AML患者的临床资料及诊治经过, 并复习相关文献。结果患者, 女性, 53岁。患者外周血全血细胞减少, 骨髓以原始粒细胞为主, 易见Auer小体。细胞遗传学常规分析发现46, XX, t(10;11)(q22;q23)[16]/46, XX[4], 荧光原位杂交显示MLL基因重排。结论 t(10;11)(q22;q23)异常发生率非常低, 多见于AML, 易合并存在其他染色体异常, 伴有这种细胞遗传学异常的AML可能预后不良。

关键词：白血病, 髓样, 急性 t(10 11)(q22 q23) 基因重排

无流体剪切力条件下ADAMTS13裂解内皮细胞上特大血管性血友病因子的研究

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中国实验血液学杂志 2024年第2期32卷 532-540页

作者：赵善琛李华王萌赵艺鸿李先杰金圣宇延边大学附属医院血液内科吉林延吉133000 延边大学附属医院体检科吉林延吉133000 延边大学附属医院中心实验室吉林延吉133000

目的:研究血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)在无流体剪切力下裂解内皮细胞上特大血管性血友病因子(ULVWF)的分子机制,为探明血栓性血小板减少性紫癜(TTP)和其他血栓性疾病的发病机理提供理论依据。方法:通过免疫荧光显微镜观察ADAMTS1... 详细信息

目的:研究血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)在无流体剪切力下裂解内皮细胞上特大血管性血友病因子(ULVWF)的分子机制,为探明血栓性血小板减少性紫癜(TTP)和其他血栓性疾病的发病机理提供理论依据。方法:通过免疫荧光显微镜观察ADAMTS13在无流体剪切力下裂解内皮细胞表面上ULVWF的情况,采用ELISA测定不同条件下培养基中VWF抗原量的变化。ELISA和Western blot分别测定有无流体剪切力或凝血因子VIII(FVIII)条件培养基中的VWF和蛋白水解片段的数量。多聚体分析评估ADAMTS13裂解内皮细胞上ULVWF的情况。将组胺刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与ADAMTS13和各种N-和C-末端截断的突变体一起孵育,通过免疫荧光显微镜观察与细胞保持结合的ULVWF,ELISA测定内皮细胞释放出的ULVWF,确定降解内皮细胞上ULVWF所需的ADAMTS13结构域。结果:在无流体剪切力下,重组ADAMTS13和血浆ADAMTS13迅速降解了内皮细胞表面上新形成的ULVWF。ULVWF的蛋白水解过程依赖于培养时间、ADAMTS13浓度和剪切力。ADAMTS13介导的蛋白水解释放的VWF分布与组胺刺激下内皮细胞分泌的VWF分布非常相似,提示ULVWF在内皮细胞表面发生裂解。裂解内皮细胞上ULVWF需要ADAMTS13半胱氨酸富集区(Cys-rich,Cys R)结构域和间隔区结构域,但不需要ADAMTS13的7个TSP1重复序列(TSP12-8)和2个补体结合区(CUB)结构域。结论:内皮细胞上ULVWF聚合物在无流体剪切力下也对ADAMTS13的裂解敏感,这为ADAMTS13裂解内皮细胞结合的ULVWF的分子机制提供了新见解,并可能有助于理解TTP和其他血栓性疾病的发病机理。

关键词：血管性血友病因子裂解酶血管性血友病因子血栓性血小板减少性紫癜

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国内首例淋巴浆细胞性斑块

临床皮肤科杂志 2024年第6期53卷 354-357页

作者：席宁远吴南辉周质宇许小向白云梁豫琳徐明圆刘业强上海市皮肤病医院/同济大学附属皮肤病医院病理科上海200443 上海市皮肤病医院/同济大学附属皮肤病医院中心实验室上海200443

报告国内首例淋巴浆细胞性斑块。患儿男,9岁。右前臂伸侧红色斑块7年。皮肤科检查:右前臂伸侧不规则红色斑块,上覆白色鳞屑。皮损组织病理:连续性角化不全,表皮不规则增生,局部颗粒层变薄,基底层液化变性,真皮浅中层较密集的淋巴细胞、... 详细信息

报告国内首例淋巴浆细胞性斑块。患儿男,9岁。右前臂伸侧红色斑块7年。皮肤科检查:右前臂伸侧不规则红色斑块,上覆白色鳞屑。皮损组织病理:连续性角化不全,表皮不规则增生,局部颗粒层变薄,基底层液化变性,真皮浅中层较密集的淋巴细胞、浆细胞及组织细胞浸润。免疫组化:真皮层浅中层浆细胞膜CD38及CD138弥漫散在阳性。诊断:淋巴浆细胞性斑块。给予克立硼罗软膏外涂治疗,2个月后可见红斑较前变平。

关键词：淋巴浆细胞性斑块

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生理学报 2024年第2期76卷 215-223页

作者：武生云程珂茹周妍芸汪引芳上海中医药大学附属普陀医院中心实验室上海200062 安徽医科大学基础医学院合肥230032

本研究旨在探讨微管相关肿瘤抑制因子1(microtubule associated tumor suppressor 1,MTUS1)对血红素诱导的血管内皮细胞凋亡的影响,并探讨其对血红素加氧酶1(hemeoxygenase 1,HMOX1)表达的影响及具体机制。采用RNA测序、RT-qPCR和Wester... 详细信息

本研究旨在探讨微管相关肿瘤抑制因子1(microtubule associated tumor suppressor 1,MTUS1)对血红素诱导的血管内皮细胞凋亡的影响,并探讨其对血红素加氧酶1(hemeoxygenase 1,HMOX1)表达的影响及具体机制。采用RNA测序、RT-qPCR和Western blot分析MTUS1敲低后人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中血红素结合相关蛋白、cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element-binding protein,CREB)和核呼吸因子2(nuclear respiratory factor 2,NRF2)表达的变化,及MTUS1敲低对血红素诱导的HMOX1表达变化,CREB和NRF2过表达对MTUS1敲低介导的293T细胞中HMOX1表达变化的影响;CCK8及Western blot检测MTUS1或者HMOX1敲低对血红素诱导的HUVEC凋亡和存活的影响,NRF2过表达对MTUS1敲低介导的血红素诱导的293T细胞存活的影响。结果显示:小分子干扰RNA有效敲低HUVEC中MTUS1表达(P<0.01),HUVEC中MTUS1敲低后,血红素结合相关蛋白中HMOX1下调显著(P<0.01);MTUS1敲低能够抑制血红素诱导的HUVEC中HMOX1上调(P<0.01),并能促进血红素诱导的HUVEC凋亡;HMOX1敲低能促进血红素诱导的HUVEC凋亡(P<0.01);MTUS1敲低能抑制HUVEC中CREB和NRF2表达,NRF2过表达能部分逆转MTUS1敲低引起的293T细胞中HMOX1下调,并能部分逆转MTUS1敲低加剧的血红素诱导的293T细胞凋亡效应,但是CREB过表达不能。上述结果提示MTUS1部分通过NRF2上调HUVEC中HMOX1表达,从而抑制血红素诱导的血管内皮细胞凋亡。

关键词：血红素血红素加氧酶-1 人脐静脉内皮细胞凋亡核呼吸因子2

circ＿0073585在急性髓系白血病中的表达及功能研究

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中国实验血液学杂志 2024年第4期 1018-1025页

作者：周永勍苏肖宇赵倩邓兆群江苏大学附属人民医院中心实验室镇江市精确诊断与治疗重点实验室

目的:研究环状RNA(circular RNA, circRNA)circ＿0073585在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达水平、临床意义及其在白血病细胞中的功能。方法:采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测106例初诊AML患者及38例对照者骨髓标本中circ＿0073585的表... 详细信息

目的:研究环状RNA(circular RNA, circRNA)circ＿0073585在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达水平、临床意义及其在白血病细胞中的功能。方法:采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测106例初诊AML患者及38例对照者骨髓标本中circ＿0073585的表达水平，比较两组的表达差异并分析其临床意义。根据受试者工作特征(ROC)曲线来评估circ＿0073585的表达对AML的诊断价值。将过表达circ＿0073585载体及空载体的慢病毒感染的THP-1细胞分为circ＿0073585-THP-1和NC-THP-1两组，通过CCK-8法、流式细胞术分析circ＿0073585对THP-1细胞增殖、生存、凋亡及药物敏感性的影响。结果:与对照组相比，circ＿0073585在AML患者骨髓中的表达水平显著降低(P<0.001)。circ＿0073585高、低表达组在白细胞计数(P<0.05)、血小板计数(P<0.01)及染色体危险程度(P<0.05)方面差异有统计意义。与NC-THP-1细胞相比，circ＿0073585-THP-1细胞增殖及生存能力减弱(P<0.01)、凋亡率增加(P<0.01),对高三尖杉酯碱(P<0.05)及柔红霉素(P<0.001)的敏感性增加。结论:circ＿0073585在AML患者中表达水平下降，过表达circ＿0073585可抑制白血病细胞的增殖能力、生存能力，促进凋亡，并提高白血病细胞对化疗药物的敏感性。

关键词：环状RNA circ＿0073585 急性髓系白血病

基于高通量测序技术检测慢性髓性白血病患者ABL激酶区突变的临床价值

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中国实验血液学杂志 2024年第1期32卷 262-268页

作者：周玲王军亮王献伟李扬威邹喆张龑莉吕晓东郑州大学附属肿瘤医院河南省肿瘤医院中心实验室河南郑州450008 郑州大学附属肿瘤医院河南省肿瘤医院血液科河南郑州450008

目的:对比分析高通量测序法与Sanger测序法检测慢性髓性白血病(CML)患者ABL激酶区突变的效能及临床价值。方法:采集2017年7月至2021年3月于河南省肿瘤医院就诊的147例CML患者的198例次样本,同时进行高通量测序和Sanger测序,检测ABL激酶... 详细信息

目的:对比分析高通量测序法与Sanger测序法检测慢性髓性白血病(CML)患者ABL激酶区突变的效能及临床价值。方法:采集2017年7月至2021年3月于河南省肿瘤医院就诊的147例CML患者的198例次样本,同时进行高通量测序和Sanger测序,检测ABL激酶区突变,并收集相关临床数据进行对比分析。结果:高通量测序法检出总体突变比例和≥2个突变的比例明显高于Sanger测序法(P=0.01;P=0.046)。22例次检出≥2个突变,其中发现5例次(22.7%)复合突变。高通量测序法可检出Sanger法无法检出的低比例突变。198例次样本中检出低比例突变25例次(12.6%),高比例突变33例次(16.7%)和高低比例混合突变10例次(5.1%)。相关临床因素分析中,最佳反应期、失败期和警告期突变检出比例和发生低比例突变占比均逐渐升高(突变比例,P=0.016;低比例突变,P=0.005),伴随附加染色体异常出现突变的比例也明显升高(P=0.009)。接受一线、二线治疗的患者检出突变的比例明显低于接受三线及以上治疗的患者(P=0.006)。基于突变位点的VAF值分析有助于可视化评估耐药CML细胞的克隆演变状态。结论:高通量测序法较Sanger测序法检测突变更加敏感、准确,有助于临床精准、可视化评估TKI治疗反应和优化CML治疗策略。

关键词：慢性髓性白血病酪氨酸激酶抑制剂 ABL激酶区突变高通量测序 Sanger测序