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弥漫大B细胞淋巴瘤组织PD-1/PD-L1与C-myc和Bcl-2表达相关性研究

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中华肿瘤防治杂志 2020年第14期27卷 1151-1156页

作者：王平杨文秀周杰贵州医科大学病理教研室贵州贵阳550004

目的程序性死亡受体1及配体1(programmed cell death 1and programmed cell death ligand 1,PD-1/PD-L1)、人髓细胞增生原癌基因(cellular myelocytomatosis oncogene,C-myc)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中表达均与患者不良预后有关,然而他们之间相关性的研究鲜见报道。本研究探讨DLBCL中PD1/PD-L1蛋白与C-myc和Bcl-2蛋白表达的相关性,并比较PD-1和PD-L1蛋白及mRNA在C-myc/Bcl-2双表达淋巴瘤(double expression lymphoma,DEL)与非双表达淋巴瘤(non-double expression lymphoma,non-DEL)间的表达差异。方法收集2010-01-01-2017-12-31贵州医科大学附属医院病理科已确诊为DLBCL病例蜡块组织90例。采用免疫组织化学染色检测C-myc和Bcl-2,分为DEL组和non-DEL组;免疫组织化学染色检测各组PD-1;免疫组化双标记染色检测各组肿瘤细胞PD-L1和肿瘤微环境细胞PD-L1(PD-L1of tumor microenvironment cells,mPD-L1),即肿瘤组织浸润T淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocytes,TILs)胞膜上PD-L1蛋白的表达;实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测各组PD-1、PD-L1的mRNA;采用SPSS 22.0对数据进行统计分析。结果所有病例中,C-myc阳性率为41.11%(37/90),Bcl-2为61.11%(55/90),PD-1为32.22%(29/90),PD-L1为24.44%(22/90),mPD-L1为28.89%(26/90);DEL 28例,non-DEL 62例。PD-1+与C-myc(γ=0.197,P=0.071)和Bcl-2(γ=-0.035,P=0.818)表达无相关性;mPD-L1+与C-myc(γ=0.205,P=0.117)和Bcl-2(γ<0.001,P=1.000)表达无相关性;PD-L1+与C-myc(γ=0.260,P=0.024)和Bcl-2(γ=0.401,P<0.001)表达呈正相关。PD-1蛋白在DEL组与non-DEL组间表达差异无统计学意义(χ2=3.756,P=0.053),PD-1mRNA均值DEL组与non-DEL组比较差异无统计学意义,t=0.245,P=0.807;PD-L1+(χ2=14.373)和mPD-L1+(χ2=5.066)在DEL组与non-DEL组差异有统计学意义,均P<0.05;PD-L1 mRNA均值在DEL组与non-DEL组比较差异有统计学意义,t=7.029,P<0.001。结论 PD-L1蛋白表达与C-myc和Bcl-2正相关,且C-myc/Bcl-2双表达淋巴瘤中PD-L1蛋白和mRNA均上调表达,提示PD-L1在该肿瘤的发病或进展中可能具有重要作用。

关键词：程序性死亡受体1 程序性死亡配体1 人髓细胞增生原癌基因 B淋巴细胞瘤-2 双表达淋巴瘤相关性

还原型谷胱甘肽靶向氧化应激对肝癌干细胞的作用

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临床与实验病理学杂志 2020年第8期36卷 887-892页

作者：高兰龙世棋陈博鑫章俊贵州医科大学病理教研室贵阳550004 贵州医科大学免疫学教研室贵阳550004

目的探讨还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)干细胞性的作用。方法采用总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(T-GSH/GSSG)测试盒检测细胞内T-GSH/GSSG水平;应用CCK-8实验评估细胞活力及干细胞培养基培养干... 详细信息

目的探讨还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)干细胞性的作用。方法采用总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(T-GSH/GSSG)测试盒检测细胞内T-GSH/GSSG水平;应用CCK-8实验评估细胞活力及干细胞培养基培养干细胞球(HCC sphere);运用流式细胞技术分析CD133阳性细胞亚群比例。结果HCC细胞中内源性T-GSH/GSSG水平比正常细胞显著升高。外源性补充GSH减少胞内活性氧物质(reactive oxygen species,ROS)并抑制HCC细胞活力及HCC sphere形成。进一步分析发现GSH显著降低CD133+肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSC)的亚群比例。结论HCC细胞中ROS水平及抗氧化防御能力增强。外源性GSH能够降低胞内的ROS水平,并抑制HCC细胞活力及干细胞性,降低LCSC在HCC细胞中的亚群比例。为靶向异常氧化应激(oxidative stress,OS)及肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)治疗HCC提供了新靶点。

关键词：肝肿瘤肝细胞癌肿瘤干细胞还原型谷胱甘肽氧化应激

延胡索酸水合酶缺陷型子宫平滑肌瘤40例临床病理分析

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临床与实验病理学杂志 2023年第1期39卷 18-22页

作者：高鹏英李琳琳马东慎刘广珍刘慧徐州医科大学附属医院病理科徐州221006 徐州医科大学病理学教研室徐州221002

目的探讨延胡索酸水合酶缺陷型子宫平滑肌瘤(fumarate hydratase-deficient uterine leiomyomas,FH-d UL)的临床病理学特征。方法应用组织芯片结合免疫组化延胡索酸水合酶(fumarate hydratase,FH)和S-(2-琥珀酸)-半胱氨酸[S-(2-succino)-cysteine,2SC]对1389例子宫平滑肌肿瘤(uterine smooth muscle tumors,USMT)进行检测,筛查FH-d UL,采用Sanger测序技术检测FH-d UL中FH基因突变情况,回顾性分析其临床病理学特征,并复习相关文献。结果1389例USMT中筛选出40例FH-d UL,其在不同病理类型USMT中的发生率从高到低依次为子宫平滑肌瘤伴奇异核(leiomyomas with bizarre nuclei,LBN)(55.6%,10/18)、恶性潜能未定的平滑肌肿瘤(smooth muscle tumor of uncertain malignant potential,STUMP)(12.5%,1/8)和普通型子宫平滑肌瘤(2.2%,29/1324)。FH-d UL患者平均年龄为(35.7±8.3)岁,55%(22/40)有临床症状,60%(24/40)为多发性(≥2枚)肌瘤,肌瘤最大径0.3~13.1 cm。组织学上,FH-d UL均表现出一个或多个FH-d形态学。免疫表型:35例为FH-/2SC+,5例为FH+/2SC+。Sanger测序结果显示,5%(2/40)测序失败,23.7%(9/38)检测到体细胞突变。随访期内无死亡,12.5%(5/40)复发,发病年龄(<30岁)、有家族肿瘤史与患者术后的复发风险显著相关(P均<0.05)。结论FH-d UL临床少见,在形态学上与LBN有交叉重叠,联合应用FH和2SC有助于FH-d UL的筛查,但遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征的诊断尚需结合临床病史和胚系突变检测。当患者年龄<30岁、有家族肿瘤史时,需警惕其复发风险。

关键词：子宫肿瘤平滑肌瘤 FH 2SC 免疫组织化学

跑步对CUS抑郁模型小鼠内侧前额叶皮质内PV+中间神经元的影响

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陆军军医大学学报 2023年第3期45卷 209-218页

作者：秦露唐静梁芯綦英强罗艳敏肖倩黄杜娟周梅周宇宁唐勇重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院放射医学教研室重庆400016

目的探讨跑步对慢性不可预知性(chronic unpredictable stress, CUS)抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响和内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex, mPFC)内GABA能中间神经元、PV+中间神经元和GAD67+/PV+细胞比例的影响。方法选取4~6... 详细信息

目的探讨跑步对慢性不可预知性(chronic unpredictable stress, CUS)抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响和内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex, mPFC)内GABA能中间神经元、PV+中间神经元和GAD67+/PV+细胞比例的影响。方法选取4~6周龄的雄性C57BL/6小鼠,CUS建模成功后,利用糖水偏好实验结果将其以分层随机法分为对照组、CUS模型对照组和CUS模型+跑步组。运用糖水偏好实验、强迫游泳实验和悬尾实验评估各组小鼠的行为学水平。采用qRT-PCR检测小鼠mPFC中GAD1、GAD2、PV和CCK的mRNA表达水平。采用免疫组织化学和现代体视学相结合的方法对小鼠mPFC内GABA能中间神经元和PV+中间神经元数量进行精确三维定量,并分析PV+/GAD67+细胞比例。结果与CUS模型对照组小鼠相比,CUS模型+跑步组小鼠和对照组的糖水偏好百分比显著增加(P 0.05);CUS模型对照组小鼠mPFC中PV的mRNA表达水平、PV+中间神经元数量和PV+/GAD67+细胞比例均显著低于CUS模型+跑步组和对照组(P<0.05)。结论跑步可能通过调节PV+中间神经元的数量和基因表达从而发挥抗抑郁效应。

关键词： CUS抑郁模型小鼠跑步 mPFC 体视学 GABA能中间神经元 PV+中间神经元

复合应激性ED大鼠及伊木萨克片干预后阴茎组织差异表达蛋白的生物信息学分析

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中华男科学杂志 2019年第12期25卷 1066-1076页

作者：马文静张盼盼斯依提·阿木提毛吾兰·买买提依明阿地力江·伊明西尔艾力·买买提新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室刘文娟新疆医科大学中心实验室新疆医科大学基础医学院人体解剖教研室新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室

目的:利用iTRAQ联合LC-MS-MS技术和IPA生物信息平台寻找复合冷应激ED大鼠阴茎组织中特异性蛋白标志物以及药物干预靶点蛋白,并探讨该病的发生发展的分子机制。方法:取80只性功能正常的雄性大鼠造模,建立复合应激大鼠模型,筛选ED大鼠后,... 详细信息

目的:利用iTRAQ联合LC-MS-MS技术和IPA生物信息平台寻找复合冷应激ED大鼠阴茎组织中特异性蛋白标志物以及药物干预靶点蛋白,并探讨该病的发生发展的分子机制。方法:取80只性功能正常的雄性大鼠造模,建立复合应激大鼠模型,筛选ED大鼠后,分为正常组(N)(n=10)、ED组(n=15)和伊木萨克片干预组(伊木萨克组)(n=15)共3组,取阴茎组织,提取蛋白质,进行iTRAQ标记结合LC-MS-MS蛋白质组学筛查与鉴定,应用IPA分析平台对大鼠阴茎组织差异蛋白进行生物信息学分析。结果:ED组中获得48种差异表达蛋白,伊木萨克组获得29种差异表达蛋白。IPA分析ED组差异表达蛋白质中与血管内皮功能相关蛋白质18种;与平滑肌活动相关蛋白质5种;与炎症相关蛋白质4种;参与的生物学过程主要集中在糖代谢和酒精分解代谢等;涉及的通路主要是糖代谢通路、钙信号通路和RXR激活通路等。伊木萨克组差异表达蛋白质中与血管内皮功能相关蛋白质5种;与平滑肌活动相关蛋白质1种;与炎症相关蛋白质4种;参与的生物学过程主要为糖代谢、血管扩张和急性期反应等;涉及的信号通路为糖代谢通路、RXR激活通路和急性期反应信号通路等。ED组和伊木萨克组差异蛋白中共获得与ED疾病相关的标志物7种:胶原α-1(III)链(COL3α1)、胶原α-1(I)链(COL1α1)、胶原α-2(I)链(COL1α2)、T-激肽原-1(MAP1)、甘油醛-3磷酸脱氢酶(GAPDH)、双链蛋白聚糖(BGN)以及肌球蛋白-11(MYH11)。结论:阴茎组织中血管内皮及平滑肌功能改变可能是复合应激性ED发生发展的关键机制,并与炎症相关;获得的差异蛋白通过相互作用以及参与相关的信号通路影响阴茎的正常勃起,上述7种蛋白可作为复合应激ED大鼠阴茎组织标志物,MAP1、GAPDH、BGN和MYH11蛋白可能可以作为伊木萨克片药物干预的靶点蛋白。

关键词：环境激素冷应激勃起功能障碍 IPA生物信息学分析组织标志物伊木萨克片

β-catenin和PD-L1在弥漫浸润型星形细胞瘤发生发展中的作用及相关性

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中国临床研究 2023年第1期36卷 139-142,147页

作者：墙宏石柳高勤贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550001 贵州医科大学病理学教研室贵州贵阳550001

星形细胞瘤是发生于神经外胚叶组织的原发性肿瘤,它生长迅速且呈恶性侵袭性发展,具有多种信号通路调控。其中典型的Wnt/β-catenin信号通路参与了星形细胞瘤的发展,当该通路被异常激活时,β-catenin进入细胞核内与T细胞因子(TCF)/淋巴... 详细信息

星形细胞瘤是发生于神经外胚叶组织的原发性肿瘤,它生长迅速且呈恶性侵袭性发展,具有多种信号通路调控。其中典型的Wnt/β-catenin信号通路参与了星形细胞瘤的发展,当该通路被异常激活时,β-catenin进入细胞核内与T细胞因子(TCF)/淋巴样增强因子(LEF)形成功能复合物,进而激活下游基因如c-Myc、cyclin D1的表达,参与调控细胞增殖、迁移等一系列重要过程,从而导致星形细胞瘤的发生。程序性细胞死亡配体1(PD-L1)是一种免疫抑制受体配体,当程序性细胞死亡受体-1(PD-1)与其配体PD-L1结合后,抑制T细胞的活化,从而促进肿瘤细胞免疫逃逸。β-catenin失活能降低PD-L1的表达,β-catenin的激活可能促进星形细胞瘤的免疫逃逸。本文就β-catenin和PD-L1在弥漫浸润型星形细胞瘤发生发展中的作用及相关性进行概述。

关键词：星形细胞瘤,弥漫浸润型 β-连环蛋白程序性细胞死亡配体1 程序性细胞死亡受体1

胶质瘤SHG44细胞p110α表达及对增殖和转移潜能影响机制研究

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中华肿瘤防治杂志 2019年第5期26卷 295-300页

作者：郑美娟杨宇石方艺赵艳李珀徐澍贵州医科大学病理教研室贵州贵阳550025

目的 p110α是磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)的重要成员,与肿瘤的发生发展密切相关,但目前关于p110α与胶质瘤关系的研究甚少。本研究旨在探讨p110α在胶质瘤中的表达情况,对胶质瘤SHG44细胞增殖、侵袭迁移的... 详细信息

目的 p110α是磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)的重要成员,与肿瘤的发生发展密切相关,但目前关于p110α与胶质瘤关系的研究甚少。本研究旨在探讨p110α在胶质瘤中的表达情况,对胶质瘤SHG44细胞增殖、侵袭迁移的影响及其可能的作用机制。方法采用蛋白质印迹法检测正常胶质细胞HEB和胶质瘤细胞SHG44中p110α、P-AKT、AKT、P-mTOR、mTOR蛋白水平的表达。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HEB和SHG44中p110α、AKT、mTOR的mRNA水平。分别检测p110α特异性抑制剂PIK75处理SHG44细胞后,p110α及其下游相关因子的蛋白表达和mRNA水平。采用细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit8,CCK8)法检测细胞增殖能力。采用划痕实验、Transwell侵袭实验检测p110α对SHG44细胞迁移和侵袭的影响。结果 SHG44细胞中p110α、P-AKT、AKT、P-mTOR、mTOR蛋白表达均高于HEB,均P<0.05,且p110α、AKT、mTOR的mRNA水平均高于HEB细胞,均P<0.01。使用PIK75处理SHG44后,p110α、P-AKT、AKT、P-mTOR、mTOR蛋白表达较处理前均降低,均P<0.05,p110α、AKT、mTOR的mRNA水平较处理前均降低,均P<0.01。CCK8实验结果表明,不同浓度的PIK75均能抑制细胞的增殖,并呈剂量依赖性,均P<0.05。划痕实验结果显示,在0.25μmol/L PIK75中SHG44细胞迁移率为(22.43±1.55)%,低于SHG44细胞组的迁移率(54.12±10.79)%,差异有统计学意义,t=5.035,P<0.01。0.25μmol/L PIK75在Transwell侵袭实验中显示能抑制SHG44穿膜细胞数为20.67±1.22,低于SHG44细胞组的44.33±1.90,差异有统计学意义,t=18.14,P<0.001。结论胶质瘤中p110α高表达激活PI3K/AKT/mTOR信号通路并促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制p110α表达可降低胶质瘤恶性生物学行为,p110α可能成为胶质瘤药物治疗的新靶点。

关键词： p110α 胶质瘤迁移侵袭增殖 PI3K/AKT/mTOR

钙黏附蛋白E、N在依维莫司抑制胃癌SGC7901细胞迁移中的作用

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中国临床药理学杂志 2021年第7期37卷 837-841页

作者：陆晨晨胡风兰刘清华刘莹徐州医科大学病理教研室江苏徐州221004

目的探讨钙黏蛋白E、N(E-,N-cadherin)在依维莫司(RAD001)抑制胃癌SGC7901细胞迁移中的作用机制,及其在判断胃癌患者预后方面的作用。方法用不同终浓度的RAD001干预胃癌SGC7901细胞,用Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力,用免疫细... 详细信息

目的探讨钙黏蛋白E、N(E-,N-cadherin)在依维莫司(RAD001)抑制胃癌SGC7901细胞迁移中的作用机制,及其在判断胃癌患者预后方面的作用。方法用不同终浓度的RAD001干预胃癌SGC7901细胞,用Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力,用免疫细胞化学法检测E-,N-cadherin的表达,用Western Blot检测不同药物浓度E-,N-cadherin的变化。在进一步探讨西罗莫司靶蛋白(mTOR)下游对E-,N-cadherin的作用中,用Western Blot检测mTOR下游对E-,N-cadherin蛋白表达的效果。结果当药物浓度达到1.25 nmol·L^(-1)及以上时,细胞迁移能力随药物剂量的增加逐渐降低;浓度达到2.5 nmol·L^(-1)及以上时,细胞中E-cadherin的蛋白表达明显增加。4EBP1-siRNA组的E-cadherin蛋白表达水平下降为0.48±0.08,而N-cadherin蛋白表达水平上升达1.35±0.12,与其余3组相比,差异均有统计学意义(均P0.05)。E-cadherin在胃癌患者中低表达,而N-cadherin在胃癌患者中高表达。E-cadherin的低表达和N-cadherin的高表达与胃癌的预后不良相关。结论 RAD001可能是通过抑制mTOR/重组人翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)/cadherin的通路而发挥作用,并且E-cadherin可以作为判断患者预后的潜在指标之一。

关键词：依维莫司 SGC7901细胞西罗莫司靶蛋白钙黏蛋白

2018—2020年贵阳地区女性宫颈癌HPV、TCT及DNA倍体联合筛查结果分析

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肿瘤 2021年第2期41卷 121-130页

作者：何冬玲韦广月王纯梁璐璐傅小丽李彬刘艳洁贵州医科大学病理教研室贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004

目的:探讨贵阳地区妇科门诊女性高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus,hrHPV)检测、DNA倍体分析(DNA ploidy analysis)及宫颈薄层液基细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)联合检测结果的分布特点。方法:收集2018年5月—2020年7月共计11046例由贵州医科大学附属医院妇科门诊收治患者的病理资料。采用χ~2检验或Fisher精确检验分析hrHPV检测病例在不同TCT诊断中的分布情况,采用Kruskal-Wallis检验分析DNA倍体检测结果及年龄分段资料,并用Spearman进行相关性分析。结果:贵阳地区hrHPV总感染率为12.4%(1371/11046),其中HPV16感染率为2.3%(259/11046),HPV18和(或)HPV45感染率为0.6%(61/11046),HPV16及HPV18/45同时感染者为0.07%(8/11046),其他类型hrHPV感染率为9.5%(1051/11046)。hrHPV阳性感染患者中,未见上皮内病变或恶性病变(negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM)、非典型鳞状细胞-意义不明确(atypical squamous cells-unclear meaning,ASC-US)、低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)、非典型鳞状细胞-不排除高级别鳞状上皮内病变(atypical squamous cells-do not rule out high grade squamous intraepithelial lesions,ASC-H)、高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)、宫颈鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和非典型性腺细胞(atypical glandular cells,AGC)所占百分比分别为74.1%、14.7%、3.5%、4.3%、0.7%、0.1%和0.1%;DNA倍体诊断为阴性、可疑阳性和阳性者分别为61.6%、17.4%和20.9%。在HSIL病例中,HPV感染率为HPV16>其他类型hrHPV>HPV18;SCC病例中,HPV感染率为HPV16>HPV18>其他类型hrHPV;NILM和LSIL病例中,hrHPV感染率则为其他类型hrHPV>HPV18>HPV16。TCT阳性率为6.5%(716/11046),其中AUS-US、LSIL、ASC-H、HSIL、SCC和AGC所占百分比分别为4.5%、0.6%、0.8%、0.4%、0.1%和0.1%。DNA倍体异常的阳性率4.2%(469/11046);DNA倍体为阳性的患者中,NILM、AUS-US、LSIL、ASC-H、HSIL、SCC和AGC所占百分比分别为10.9%、45.2%、13.4%、17.1%、9.8%、2.3%和1.3%。>40岁的女性中,hrHPV阳性率有升高趋势,≤20岁患者中hrHPV感染率较高为14.2%(高于总感染率)。TCT及DNA倍体分析阳性率随年龄升高有上升趋势。Spearman进行相关性分析提示,hrHPV、TCT及DNA倍体检测均呈正相关。结论:贵阳地区门诊女性HPV感染状况、TCT和DNA倍体检测结果存在一定的地域特点,与患者的年龄相关;本研究结果体现了贵阳地区宫颈上皮病变的流行特点,以期为本地区宫颈癌的防治策略提供一些可靠的参考依据。

关键词：宫颈上皮内瘤样病变癌症早期检测薄层液基细胞学检查 DNA倍体检测高危型人乳头状瘤病毒