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抑制共济失调毛细血管扩张突变基因RAD3相关蛋白逆转卵巢癌SKOV3细胞顺铂耐药

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中华肿瘤杂志 2014年第11期36卷 805-810页

作者：杨宗元孙朝阳刘毅龚成陈刚翁丹卉华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030

目的探讨共济失调毛细血管扩张突变基因RAD3相关蛋白（ATR）水平和活性对卵巢癌SKOV3细胞顺铂（DDP）敏感性的影响.方法以ATR-siRNA转染SKOV3细胞48 h下调ATR蛋白水平,以VE-821预处理SKOV3细胞12 h下调ATR激酶活性.采用CCK8实验检测... 详细信息

目的探讨共济失调毛细血管扩张突变基因RAD3相关蛋白（ATR）水平和活性对卵巢癌SKOV3细胞顺铂（DDP）敏感性的影响.方法以ATR-siRNA转染SKOV3细胞48 h下调ATR蛋白水平,以VE-821预处理SKOV3细胞12 h下调ATR激酶活性.采用CCK8实验检测细胞活性,Western blot法检测ATR、磷酸化组蛋白2A变异体（γ-H2AX）和p-ATR蛋白表达,荧光共聚焦检测细胞γ-H2AX和DNA双链修复蛋白（RAD51）的表达,碱性慧星实验检测细胞内DNA双链损伤情况,流式细胞术检测细胞周期分布.结果 DDP可明显引起SKOV3细胞DNA双链损伤,并激活ATR激酶通路.ATR-siRNA可显著下调ATR蛋白水平.CCK8检测结果显示,NC-siRNA组和ATR-siRNA组经DDP作用48 h后,其半数抑制浓度（IC50）值分别为72.12 μmol/L和41.25 μmol/L（P＜ 0.05）.荧光共聚焦检测结果显示,40 μmol/L DDP处理24 h后,ATR-siRNA组RAD51募集明显减少.碱性彗星实验结果显示,与NC-siRNA组比较,ATR-siRNA组能够引起更长的拖尾效应,DNA双链损伤明显增加.DMSO组和VE-821组经DDP作用48 h后,其IC50值分别为75.32 μmol/L和45.64 μmol/L（P＜0.05）.荧光共聚焦检测结果显示,40 μmol/L DDP处理24 h后,VE-821组RAD51募集明显减少.碱性彗星实验结果显示,与DMSO组比较,VE-821组能够引起更长的拖尾效应,DNA双链损伤明显增加.细胞周期检测结果显示,40 μmol/L DDP作用于卵巢癌SKOV3细胞24h后,其G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例分别为71.2％、13.4％和15.4％,而对照组分别为54.2％、21.3％和24.4％,DDP引起明显的G0/G1期阻滞.ATR-siRNA组和VE-821组经DDP作用后,其G0/G1期、S期、G2/M期细胞比例分别为43.2％、20.4％、36.4％和40.2％、22.5％、37.3％,干扰ATR表达和活性后能够逆转DDP引起的细胞周期阻滞。结论抑制ATR可以影响SKOV3细胞同源重组修复过程,增加DNA双链损伤,缓解G0/G1期周期阻滞,增加其对DDP的敏感性。

关键词：卵巢肿瘤顺铂细胞系共济失调毛细血管扩张突变基因RAD3相关蛋白 DNA双链损伤同源重组修复细胞周期

人乳头状瘤病毒16型多肽疫苗的制备及体内外效应观察

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中华妇产科杂志 2009年第12期44卷 903-908页

作者：廖书杰胡晓继韩凌斐蒋学峰夏曦王薇卢运萍王世宣马丁华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16型多肽疫苗的制备，并观察HPV16多肽疫苗的体内外效应。方法（1）针对抗原加工相关转运子（TAP）设计HPV16E7蛋白的主要组织相容性复合物I类分子（MHC—I）的抗原结合表位，利用生物信息学分析平台筛选... 详细信息

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16型多肽疫苗的制备，并观察HPV16多肽疫苗的体内外效应。方法（1）针对抗原加工相关转运子（TAP）设计HPV16E7蛋白的主要组织相容性复合物I类分子（MHC—I）的抗原结合表位，利用生物信息学分析平台筛选出一致性较高、特异性及亲和力较强的HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗用于以下研究，本研究共筛选出3段多肽，分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pc。（2）C57BL／6小鼠注射鼠肺上皮细胞株TC-1细胞（为鼠源性的HPV16阳性的肿瘤细胞株）后，采用等额抽取的随机方法分为5组，E7Pa＋二核苷胞嘧啶（CpG）、E7Pb＋CpG、E7Pe＋CpG[均为实验组，分别加入终浓度为50μg／ml的E7Pa、E7Pb、E7Pc和终浓度为12mg／L的刀豆蛋白（ConA）]、CpG（为阳性对照，加入终浓度为12mg／L的ConA）和空白对照组（不做任何处理）。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组作用不同时间后小鼠脾T淋巴细胞的体外增殖效应，乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测小鼠脾T淋巴细胞在不同效靶比下的体外细胞毒T淋巴细胞（CTL）活性，实时荧光定量RT—PCR技术检测小鼠肿瘤组织中1干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）mRNA的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠外周血中IFN-γ、IL-2的表达水平，通过定期测量比较各组小鼠接种HPV16多肽疫苗后体内肿瘤体积的变化。结果（1）本研究筛选出了一致性较高、特异性及亲和力较强的3段HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗，分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pe。（2）MTT比色法检测显尔，在接种疫苗24、48、72、96h后，以E7Pa＋CpG组的增殖效应最明显，其细胞增殖率分别为（131±32）％、（302±15）％、（552±28）％、（731±24）％，明显高于空白对照组的（72±15）％、（120±57）％、（176±41）％、（288±29）％（P〈0．01）；E7Pb＋CpG、E7Pe＋CpG、CpC组的细胞增殖率也均明显高于空白对照组（P〈0．05）；但E7Pb＋CpG、E7Pc＋CpG、CpG组间比较，差异则无统计学意义（P〉0．05）。LDH释放法检测显示，效靶比为100：1时，E7Pa＋CpG、E7Pb＋CpG、E7Pe＋CpG、CpG和空白对照组CTL活性分别为（85．9±3．0）％、（55．9±2．5）％、（60．2±1．5）％、（41．0±1．7）％和（4．1±1．0）％，E7Pa＋CpG组与空白对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；E7Pb＋CpG、E7Pc＋CpG、CpG组分别与李白对照组比较，差异也有统计学意义（P〈0．05）；但E7Pb＋CpG、E7Pe＋CpG、CpG组间比较，差异则无统计学意义（P〉0．05）。在肿瘤组织及外周血中，小鼠IFN-γ、IL-2的表达水平，E7Pa＋CpG组与空白对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；E7Pb＋CpG、E7Pc＋CpG和CpG组分别与空白对照组比较，差异也均有统计学意义（P〈0．05）；但E7Pb＋CpG、E7Pe＋CpG、CpG组间比较，差异则无统计学意义（P〉0．05）。小鼠体内的肿瘤体积，各实验组肿瘤生长均明显被抑制，接种后第60大，E7Pa＋CpC组与空白对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；E7Pb＋CpG、E7Pc＋CpG和CpG组分别与空白对照组比较，差异也均有统计学意义（P〈0．05）；但E7Pb＋CpG、E7Pc＋CpG、CpG组间比较，差异则无统计学意义（P〉0．05）。结论在动物模型中，针对TAP筛选的HPV16E7多肽联合cpG制备的HPV16多肽疫苗，可以有效治疗HPV16E7阳性的肿瘤。

关键词：乳头状瘤病毒,人乳头状瘤病毒疫苗疫苗,亚单位癌基因蛋白质类,病毒性胞苷酸类细胞系,肿瘤

一氧化氮与妊娠早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的关系

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中华妇产科杂志 2002年第11期37卷 663-665页

作者：汪辉闻良珍凌霞珍浙江大学医学院附属妇产科医院杭州310006 同济医科大学附属同济医院妇产科

目的　探讨一氧化氮与妊娠早期人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的关系。方法　选取既往有自然流产、死胎、胎儿畸形、胎儿生长受限等异常妊娠史并行人工流产术的早孕妇女 81例 ,应用逆转录聚合酶链反应技术检测其胎盘绒毛组织HCMV m... 详细信息

目的　探讨一氧化氮与妊娠早期人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的关系。方法　选取既往有自然流产、死胎、胎儿畸形、胎儿生长受限等异常妊娠史并行人工流产术的早孕妇女 81例 ,应用逆转录聚合酶链反应技术检测其胎盘绒毛组织HCMV mRNA的表达 ;酶联免疫吸附试验法测定其血清HCMV IgM ;原位杂交法检测其蜕膜巨噬细胞诱生型一氧化氮合酶 (iNOS) mRNA的表达并行定量分析。结果　 (1) 81例孕妇中有 6例胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性 ,14例血清HCMV IgM阳性 ,阳性率为 17 3 % (14/ 81)。依据HCMV mRNA与HCMV IgM检测结果 ,81例孕妇分为 3组 :Ⅰ组 :HCMV mRNA与HCMV IgM均阳性 5例 ,其宫内传播率为 3 5 7% (5 / 14) ;Ⅱ组 :HCMV mRNA阴性而HCMV IgM阳性 9例 ;Ⅲ组 :HCMV mRNA与HCMV IgM均阴性 66例。另有 1例HCMV IgM阴性者其胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性。 (2 )Ⅰ组患者蜕膜iNOS mRNA呈强表达 ,其吸光度值为 0 412±0 0 19,明显高于Ⅱ组的 0 172± 0 0 3 3与Ⅲ组的 0 167± 0 0 3 3 ,Ⅰ组与Ⅱ组及Ⅲ组比较 ,差异有显著性(P 0 0 5 )。 1例HCMV IgM阴性而胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性者 ,蜕膜iNOS mRNA也呈强表达 ,其吸光度值为 0 40 3。结论　一氧化氮可?

关键词：宫内活动性感染一氧化氮一氧化氮合酶巨细胞病毒感染妊娠并发症感染性

线粒体网络重塑参与骨骼肌健康和衰老的机制研究进展

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武汉大学学报(医学版) 2025年第01期 119-123页

作者：陈茂洪莉肖雅黄筱雨朱芳谊陈丽颖洪莎莎田小雨武汉大学人民医院妇产科

年龄相关的骨骼肌质量的减少（萎缩）和功能异常是世界范围内的主要健康问题，目前尚无有效的治疗方法。线粒体网络重塑是维持骨骼肌稳态的关键过程，涉及线粒体动力学、线粒体自噬以及线粒体生物发生之间的相互作用等复杂过程。本文对... 详细信息

年龄相关的骨骼肌质量的减少（萎缩）和功能异常是世界范围内的主要健康问题，目前尚无有效的治疗方法。线粒体网络重塑是维持骨骼肌稳态的关键过程，涉及线粒体动力学、线粒体自噬以及线粒体生物发生之间的相互作用等复杂过程。本文对线粒体网络重塑与骨骼肌健康和衰老的已知分子机制进行综述，并提出以线粒体为靶点作为骨骼肌相关疾病的治疗方向，以期为疾病的临床防治研究提供新思路。

关键词：线粒体网络重塑骨骼肌衰老发病机制线粒体自噬

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比较甲硝唑阴道泡腾片3日和7日疗法治疗细菌性阴道病的疗效

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中国新药与临床杂志 2002年第3期21卷 149-151页

作者：刘胜兰李怀芳同济大学医学院附属同济医院妇产科上海200065

目的 :比较甲硝唑泡腾片 3日和 7日疗法治疗妇女细菌性阴道病的疗效和安全性。方法 :细菌性阴道病病人 6 0 0例 ,分为 3日疗法组 (314例 )和 7日疗法组 (2 86例 ) ,采用阴道局部用药 (药置入后穹窿 ) ,每日 1次 ,每次 1片 (2 0 0mg) ,... 详细信息

目的 :比较甲硝唑泡腾片 3日和 7日疗法治疗妇女细菌性阴道病的疗效和安全性。方法 :细菌性阴道病病人 6 0 0例 ,分为 3日疗法组 (314例 )和 7日疗法组 (2 86例 ) ,采用阴道局部用药 (药置入后穹窿 ) ,每日 1次 ,每次 1片 (2 0 0mg) ,分别连续 3日或 7日。结果 :3日疗法组和 7日疗法组总有效率分别为 95 .5 %及 92 .3% (P >0 .0 5 ) ,2组霉菌性外阴阴道炎发生率分别为 7.3%和 2 .5 % (P >0 .0 5 )。结论 :甲硝唑阴道泡腾片 2种疗法均能有效地治疗细菌性阴道病 ,安全性高 ,但

关键词：甲硝唑细菌性阴道病临床试验局部用药

口腔癌术后病人吞咽障碍高危预测模型的构建及预测价值

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循证护理 2025年第1期 143-147页

作者：谢小草喻磊余晓林华中科技大学同济医学院附属同济医院

目的：探讨基于多变量构建的高危预测模型对口腔癌术后吞咽障碍的预测价值。方法：采用便利抽样法，选取华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔科2021年1月—2023年1月收治的110例口腔癌病人为研究对象，调查术后吞咽障碍发生情况，... 详细信息

目的：探讨基于多变量构建的高危预测模型对口腔癌术后吞咽障碍的预测价值。方法：采用便利抽样法，选取华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔科2021年1月—2023年1月收治的110例口腔癌病人为研究对象，调查术后吞咽障碍发生情况，并按照吞咽障碍诊断标准分为障碍组和正常组，采用单因素、多因素Logistic回归分析筛选口腔癌术后吞咽障碍的独立危险因素，构建风险预测模型并检验模型的预测效果。结果：术后29例（26.36%）病人出现吞咽障碍，81例（73.64%）病人未出现吞咽障碍；多因素分析结果显示，年龄≥60岁，TNM分期为T3、T4，临床分期为Ⅲ、Ⅳ期，术后放化疗，切除部位为舌体/根，重建修复方式为带蒂肌皮瓣修复为口腔癌病人术后发生吞咽障碍的独立危险因素（P<0.05）；根据独立预测因子拟合预测模型回归方程，模型HosmerLemeshow（H-L）检验显示，χ2=5.203,P=0.736,ROC曲线下面积为0.794[95%CI（0.750,0.837）],C-index为0.818，预测准确率为81.81%。结论：本研究构建的风险预测模型具有良好拟合程度和区分能力，且准确度较高，能为临床早期预防、早期筛选、早期治疗和干预口腔癌术后吞咽障碍提供一定依据。

关键词：口腔癌吞咽障碍危险因素预测模型护理

子宫下段多方位螺旋式缝合成形术在凶险性前置胎盘手术中的应用

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中华妇产科杂志 2016年第10期51卷 754-758页

作者：刘海意林星光乌剑利乔福元邓东锐曾万江华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉450052

目的探讨子宫下段多方位螺旋式缝合成形术在凶险性前置胎盘（PPP）手术止血中应用的可行性和安全性。方法选择2014年5月至2015年5月在华中科技大学同济医学院附属同济医院住院治疗的PPP产妇38例，行剖宫产术时彻底清除胎盘后，行子宫下... 详细信息

目的探讨子宫下段多方位螺旋式缝合成形术在凶险性前置胎盘（PPP）手术止血中应用的可行性和安全性。方法选择2014年5月至2015年5月在华中科技大学同济医学院附属同济医院住院治疗的PPP产妇38例，行剖宫产术时彻底清除胎盘后，行子宫下段多方位螺旋式缝合成形术，以处理胎盘附着部位的术中急性大出血，部分辅以子宫动脉结扎术。对38例孕妇的临床资料进行分析。结果38例PPP产妇中合并胎盘植入者18例，占47％（18／38）；此法成功治疗38例产妇，其子宫颈管长度为（3．1±0．6）cm，其中4个区域均缝合者12例（32％，12／38）、缝合2—3个区域者23例（61％，23／38），3例（8％，3／38）仅缝合后壁区域；12例（32％，12／38）行单纯子宫动脉结扎术、3例（8％，3／38）行子宫动脉结扎＋COOK球囊放置术补充止血，无产后大出血或行髂内动脉栓塞术者；2例因术中大出血行子宫切除术，占5％（2／38）。38例产妇术中失血量平均为（1696±1397）ml，最多者4500ml，〉1500ml者16例（42％，16／38）；围手术期共发生3例血尿，占8％（3／38）。术后半年随访无一例出现远期并发症。结论子宫下段多方位螺旋式缝合成形术是1种简便易行、安全可靠的手术止血方法，既可有效地控制PPP术中大量出血、避免切除子宫，又可彻底清除胎盘、环状缩窄恢复子宫下段形态，有助于产后子宫复旧。

关键词：前置胎盘妇科外科手术缝合技术止血手术

RhoA、RhoC及其效应分子ROCK-1的表达与卵巢癌细胞系恶性行为相关性的体外研究

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中华肿瘤杂志 2004年第7期26卷 385-388页

作者：韩志强张阿丽吴明富刘玉兰陈刚李辅军高庆蕾廖国宁卢运萍王世宣马丁华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030

目的　研究RhoA、RhoC及其效应分子ROCK 1在卵巢癌细胞中的表达水平 ,探讨其与卵巢癌转移的相关性。方法　逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测RhoA、RhoC及ROCK 1在SW6 2 6、Skov 3、A2 780和Caov 34种卵巢癌细胞中mRNA的表达水平 ;Wester... 详细信息

目的　研究RhoA、RhoC及其效应分子ROCK 1在卵巢癌细胞中的表达水平 ,探讨其与卵巢癌转移的相关性。方法　逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测RhoA、RhoC及ROCK 1在SW6 2 6、Skov 3、A2 780和Caov 34种卵巢癌细胞中mRNA的表达水平 ;Westernblot法检测RhoA和ROCK 1蛋白质的表达情况 ;Boyden小室体外侵袭试验测定 4种卵巢癌细胞的体外迁移与侵袭能力。结果　RhoA、RhoC和ROCK 1在 4种卵巢癌细胞中呈不同程度表达 ,其中仅RhoC的表达水平与癌细胞侵袭力和迁移能力呈正相关 (r=0 .95 ,P <0 .0 1)。RhoA在转录水平和蛋白水平中呈不同步变化 ,且RhoA和RhoC的表达与ROCK 1的表达无相关性。 4种卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移能力相一致 ,其中SW6 2 6最强 ,Caov 3最弱 ,Skov 3和A2 780居中。结论　RhoC的表达与卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移能力相关 ,可能作为一个独立因素在卵巢癌的转移过程中起作用 ,有望成为阻断卵巢癌转移的新靶点。

关键词： RhoA RhoC 效应分子 ROCK-1 基因表达卵巢癌癌细胞恶性行为肿瘤转移

巨细胞病毒感染后晚期mRNA表达与细胞病变相关性的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2004年第4期18卷 351-353页

作者：汪辉闻良珍凌霞珍华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030

目的　研究巨细胞病毒 (HCMV)感染后晚期mRNA的表达与致细胞病变作用 (CPE)及感染细胞的超微结构变化。方法　用HCMVAD16 9株感染人胚肺成纤维细胞 ,通过半定量RT PCR检测HCMV晚期mRNA的表达水平 ,同时动态观察CPE的改变 ,电镜观察细胞... 详细信息

目的　研究巨细胞病毒 (HCMV)感染后晚期mRNA的表达与致细胞病变作用 (CPE)及感染细胞的超微结构变化。方法　用HCMVAD16 9株感染人胚肺成纤维细胞 ,通过半定量RT PCR检测HCMV晚期mRNA的表达水平 ,同时动态观察CPE的改变 ,电镜观察细胞的超微结构变化。结果　HCMV晚期mRNA在感染后 12h开始表达 ,随时间的延长水平逐渐升高 ;而CPE在 4 8h后才出现 ,并逐渐加重。电镜下可见内质网早期囊腔扩张 ,晚期呈空泡变 ,线粒体肿胀 ,线粒体嵴数目减少 ,甚至缺失 ,感染晚期细胞核中有大量成熟待出壳的病毒核衣壳。结论　细胞超微结构变化与HCMV晚期mRNA表达密切相关 ,在病毒循环中起重要作用。

关键词：晚期 HCMV mRNA表达感染后巨细胞病毒感染治疗线粒体超微结构变化出壳核衣壳