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多黏菌素对头孢他啶/阿维巴坦与碳青霉烯共耐药铜绿假单胞菌的体外杀菌作用研究

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中国抗生素杂志 2024年第5期49卷 544-551页

作者：陈玲霞邹雪寒张晓璠李曦潘红英浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院全科医学中心感染病科杭州310014 浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院检验医学中心检验科杭州310014

目的头孢他啶/阿维巴坦(CZA)是治疗碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌(CRPA)的一种有效的替代抗生素,在临床上被广泛应用,然而CZA耐药CRPA菌株的出现使得治疗铜绿假单胞菌感染的难度不断增加。本研究旨在通过体外时间杀菌分析,探讨多黏菌素(COL... 详细信息

目的头孢他啶/阿维巴坦(CZA)是治疗碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌(CRPA)的一种有效的替代抗生素,在临床上被广泛应用,然而CZA耐药CRPA菌株的出现使得治疗铜绿假单胞菌感染的难度不断增加。本研究旨在通过体外时间杀菌分析,探讨多黏菌素(COL)对携带不同碳青霉烯耐药基因的CZA耐药铜绿假单胞菌菌株的体外杀菌活性,为铜绿假单胞菌感染的临床治疗提供科学依据。方法从浙江省的一家三甲医院收集了CZA耐药的铜绿假单胞菌菌株。通过聚合酶链反应(PCR)和全基因组测序筛选了携带不同碳青霉烯耐药基因的5株代表性铜绿假单胞菌菌株,包括携带bla_(KPC-2)的PA4696、携带bla_(KPC-90)的PA2207、携带bla_(KPC-33)的PA1308、携带bla_(VIM)的PA2070、携带bla_(IMP-45)的PA6227。通过微量肉汤稀释法确认了实验菌株的抗生素敏感性。对COL敏感的菌株进行重复的时间杀菌实验。结果 5株CRPA菌株均对CZA耐药(MIC≥16/4 mg/L),对COL敏感(MIC≤2 mg/L);其中携带bla_(IMP-45)的菌株PA6227表现出特殊的药敏表型(ISMR),对亚胺培南(IPM)敏感(MIC=2 mg/L)而对美罗培南(MEM)(MIC=128 mg/L)等其他碳青霉烯类药物耐药。时间杀菌曲线显示,5株CZA耐药的铜绿假单胞菌菌株在前2~8 h被不同浓度的COL完全抑制,但随后恢复生长。结论 COL对CZA耐药的CRPA菌株具有体外杀菌活性,但不能单独使用。不同类型的碳青霉烯耐药基因会影响CZA的作用效果,但与COL的杀菌活性无关,携带不同碳青霉烯耐药基因的分离株均在不同时间恢复生长。在治疗铜绿假单胞菌感染时,可以调整给药间隔或药物浓度,以维持COL的浓度,从而获得更好的治疗效果。同时应注意具有ISMR这一特殊药敏表型的CRPA在临床上的出现,避免抗生素的不合理应用。

关键词：多黏菌素头孢他啶/阿维巴坦碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌时间杀菌曲线

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脐带间充质干细胞外泌体对子宫内膜基质细胞氧化损伤和炎性因子表达的影响

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中国免疫学杂志 2024年

作者：王琳米旭光林秀英付建华刘磊王爱乔杜茜张文琦范美娇方艳秋吉林省人民医院生殖医学中心长春中医药大学

目的：探讨脐带间充质干细胞外泌体（hUCMSCs-Exo）对双酚AF（bisphenol AF，BPAF）诱导的子宫内膜基质细胞（hESCs）氧化损伤和炎性因子释放的影响。方法：将hESCs分为Control组、BPAF组（25μmol/L BPAF处理）、BPAF+Exo组（25μmol/L... 详细信息

目的：探讨脐带间充质干细胞外泌体（hUCMSCs-Exo）对双酚AF（bisphenol AF，BPAF）诱导的子宫内膜基质细胞（hESCs）氧化损伤和炎性因子释放的影响。方法：将hESCs分为Control组、BPAF组（25μmol/L BPAF处理）、BPAF+Exo组（25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo处理）、BPAF+Exo+LY组（25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo+10μmol/L LY294002处理）。MTT法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS水平以及线粒体膜电位水平，Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3以及PI3K/AKT信号通路的蛋白表达，RT-qPCR检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达。结果：与对照组相比，随着BPAF（≥25μmol/L）浓度升高，hESCs细胞存活率逐渐下降（P<0.01），细胞凋亡率逐渐升高。与对照组相比，BPAF组ROS水平升高，线粒体膜电位水平下降，Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达明显增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达明显减少。与BPAF组相比，BPAF+Exo组细胞存活率升高（P<0.01），ROS水平下降，线粒体膜电位水平升高，Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达减少，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达增加。与BPAF+Exo组相比，BPAF+Exo+LY组细胞Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达减少。与对照组相比，BPAF组炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达明显上调（P<0.01），与BPAF组相比，BPAF+Exo组炎症因子mRNA的表达明显下调（P<0.05）。结论：BPAF（≥25μmol/L）抑制hESCs增殖，促进细胞凋亡，hUCMSCs-Exo通过PI3K/AKT信号通路抑制BPAF诱导的子宫内膜基质细胞氧化损伤和炎性因子表达。

关键词：子宫内膜基质细胞外泌体内分泌干扰物磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B 炎症因子

基础研究VEGF对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制

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解放军医学杂志 2024年

作者：张智慧高鸿霞王国庆侯巍邹畅芦小单北华大学医学技术学院吉林省人民医院精准分子医学中心

目的　探讨血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制。方法　利用四环素可逆调节VEGF表达的转基因小鼠模型，采用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定小鼠基因型，通过喂食强力霉素将20只小鼠分为VEGF表达正常组(D... 详细信息

目的　探讨血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠卵巢类固醇合成相关基因表达的影响及其机制。方法　利用四环素可逆调节VEGF表达的转基因小鼠模型，采用聚合酶链式反应(PCR)法鉴定小鼠基因型，通过喂食强力霉素将20只小鼠分为VEGF表达正常组(Dox+)与VEGF表达抑制组(Dox-)(n=10)。采用Western blotting检测卵巢组织中VEGF蛋白的表达情况；荧光定量PCR检测VEGF、KDR及已知在卵泡发育中发挥作用的基因促卵泡激素(FSH)、抑制素B(INHBB) mRNA的表达情况。HE染色观察卵巢组织的变化。取小鼠卵巢组织提取总RNA进行转录组测序，并通过FPKM、log2FC值分析相关差异基因。结果　与Dox+组比较，Dox-组VEGF mRNA和蛋白水平明显降低，KDR mRNA水平明显降低(P<0.05)。HE染色结果显示，与Dox+组比较，Dox-组卵泡发育障碍，并出现闭锁卵泡。根据测序结果分析筛选出两组小鼠的卵泡发育相关基因、类固醇合成相关基因具有明显差异(P<0.05)；富集分析发现小鼠卵巢中VEGF主要参与调控卵巢类固醇生成等通路。荧光定量PCR结果显示，与Dox+组相比，Dox-组小鼠卵巢组织中卵泡发育相关基因(INHBB、FSHR)明显上调(P<0.05)，类固醇合成的关键基因(StAR、CYP11A1、3β-HSD)明显下调(P<0.05)，定量结果与测序结果基本一致。结论　VEGF抑制的小鼠可能通过卵泡发育调控因子FSH、INHBB的相互作用，导致卵巢类固醇激素合成相关基因下调引发胆固醇代谢受阻，从而引起卵泡发育障碍。

关键词：血管内皮生长因子卵泡发育性类固醇激素转录组测序

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即刻种植早期稳定性的影响因素及评价方法

中南大学学报（医学版） 2024年第2期49卷 305-311页

作者：邵雯婷张东甘肃省人民医院口腔医学中心兰州730000 甘肃省人民医院质控处兰州730000

种植修复现已成为口腔修复领域研究的热点,对新材料和新技术的深入研究使即刻种植和即刻、早期负载得以运用,满足了患者对缩短种植修复疗程、获得更美观效果的需求。相比传统延期种植技术,目前临床医师对于即刻种植技术面临的挑战是如... 详细信息

种植修复现已成为口腔修复领域研究的热点,对新材料和新技术的深入研究使即刻种植和即刻、早期负载得以运用,满足了患者对缩短种植修复疗程、获得更美观效果的需求。相比传统延期种植技术,目前临床医师对于即刻种植技术面临的挑战是如何维持或提高种植体初期和长期的稳定性,以提高即刻种植修复的成功率。种植体初期稳定性主要受种植体、患者自身状况、手术过程等多种因素共同影响。总结和分析即刻种植稳定性、骨愈合的影响因素及常用评价方法,可为后期即刻种植修复术前评估、手术方案和种植时机的选择提供参考依据。

关键词：种植体稳定性骨愈合影响因素评价方法

腹腔镜同期双侧肾上腺切除术治疗甲状腺髓样癌致异位ACTH综合征1例报告并文献复习

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中华泌尿外科杂志 2024年第4期45卷 299-305页

作者：沃奇军赵瑜杨伟段婷寿佳沣杨云开祁小龙张大宏浙江省人民医院、杭州医学院附属人民医院泌尿外科、浙江省内分泌腺体疾病诊治研究重点实验室杭州310014 浙江省人民医院、杭州医学院附属人民医院老年医学中心内分泌科杭州310014 浙江省人民医院、杭州医学院附属人民医院检验中心杭州310014 浙江省人民医院、杭州医学院附属人民医院病理科杭州310014

目的按探讨腹腔镜同期双侧肾上腺切除术(BA)治疗甲状腺髓样癌(MTC)致异位促肾上腺皮质激素综合征(EAS)的安全性和疗效。方法患者男,56岁,2023年10月5日因MTC术后15个月,全身乏力7个月入院。既往因MTC行两次甲状腺开放手术。病理诊断:甲... 详细信息

目的按探讨腹腔镜同期双侧肾上腺切除术(BA)治疗甲状腺髓样癌(MTC)致异位促肾上腺皮质激素综合征(EAS)的安全性和疗效。方法患者男,56岁,2023年10月5日因MTC术后15个月,全身乏力7个月入院。既往因MTC行两次甲状腺开放手术。病理诊断:甲状腺髓样癌合并上纵隔、纵隔等处淋巴结转移,CRH(-)、ACTH(胞质弱+)。患者术后出现糖尿病、高血压、低钾血症。入院查体:血压200/95mmHg(1mmHg=0.133kPa),体质量61.5kg,身高160cm,体质量指数24.02kg/cm^(2),腰围83cm,多血质外貌,皮肤变薄。实验室检查:血钾2.71mmol/L,血钙1.47mmol/L,甲状旁腺素6.0pg/ml,空腹血糖10.51mmol/L,糖化血红蛋白8.2%,血降钙素>2000pg/ml,癌胚抗原70.8μg/L。内分泌激素检查:8:00、16:00、24:00时血浆ACTH分别为189.0、125.0、65.0pg/ml;8:00、16:20、24:00时血清皮质醇分别为429.30、408.14、446.61μg/L;24h尿游离皮质醇1200μg/24h;1mg过夜地塞米松抑制试验后8:00时ACTH183.0pg/ml、皮质醇538.27μg/L;非卧位2h醛固酮8.2pg/ml;血、尿儿茶酚胺和甲状腺功能均未见明显异常。^(18)F-FDG-PET/CT检查示颈部等多发淋巴结转移。腹部CT检查示双侧肾上腺增生。垂体增强MR检查示垂体变薄。肺CT、痰培养检查示双肺散在多发感染。经全院多学科讨论,诊断为EAS、MTC术后转移、糖尿病、高血压病、低钾血症、肺部感染、轻度贫血、肝功能不全、甲状旁腺功能减退症、低钙血症。全麻下行经腹腔入路腹腔镜BA。术中先切除左侧肾上腺,翻转体位,再切除右侧肾上腺。结果本例手术顺利。手术时间约60min。术中出血量约20ml。围术期未发生并发症。病理检查:(双侧)肾上腺皮质结节性增生;(双侧)肾上腺髓质增生,ACTH(-)。术后随访3个月,血降钙素仍>2000pg/ml。术后1周,以及1、3个月血ACTH分别为183.0、220.0、731.0pg/ml。但高血压、糖尿病、低钾血症等均迅速缓解。术后1个月血压100/80mmHg,空腹血糖4.4mmol/L,血钾3.87mmol/L;肺部感染好转。未发生肾上腺危像。糖皮质激素替代治疗方案:氢化可的松晨起20mg、午后10mg。甲状腺激素替代治疗方案:左甲状腺素100μg每日1次。基因检测示Ret基因杂合突变,患者应用Ret抑制剂临床试验性治疗。结论对于无法根治的MTC转移病灶导致的EAS,采取腹腔镜同期BA是安全、有效的,可纠正高血压、糖尿病和低钾血症,增加了MTC的治疗机会。

关键词：异位促肾上腺皮质激素综合征甲状腺髓样癌库欣综合征双侧肾上腺切除术

囊胚二次活检对胚胎植入前遗传学检测患者临床结局的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第5期44卷 447-455页

作者：李艳如王祎玟陈圆辉张慧娟殷宝莉张翠莲郑州大学人民医院、河南省人民医院生殖医学中心郑州450003

目的探究囊胚二次活检对胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)患者临床妊娠和新生儿结局的影响。方法回顾性队列研究分析了河南省人民医院生殖医学中心于2019年1月至2022年12月期间行一次活检PGT和二次活检PGT后... 详细信息

目的探究囊胚二次活检对胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)患者临床妊娠和新生儿结局的影响。方法回顾性队列研究分析了河南省人民医院生殖医学中心于2019年1月至2022年12月期间行一次活检PGT和二次活检PGT后助孕患者(分别为453例、60例)的临床妊娠和新生儿结局。采用2∶1倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)方法对两组的女方年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、不孕年限进行匹配,比较两组PGT患者实验室指标及移植助孕结局和新生儿结局相关指标。同时依据PGT类型对二次活检PGT组进行亚组分析,分为胚胎植入前非整倍体遗传学检测(preimplantation genetic testing for aneuploidy,PGT-A)亚组、胚胎植入前染色体结构异常遗传学检测(preimplantation genetic testing for structural rearrangements,PGT-SR)亚组、胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic,PGT-M)亚组,两两比较其二检率、扩增成功率、可移植率等指标。结果PSM后,两组PGT患者间女方年龄、女方BMI、不孕类型、促排卵方案、PGT类型及实验室相关指标的差异均无统计学意义(均P>0.05);同时,二次活检胚胎的种植率、临床妊娠率、活产率均略降低,流产率略增高,但差异均无统计学意义(均P>0.05);然而,二次活检PGT组患者的第3天可利用胚胎率[87.50%(434/496)]明显高于一次活检PGT组[82.19%(812/980),P=0.020],而囊胚形成数[4.00(2.25,6.75)]明显少于一次活检PGT组[5.50(3.00,8.00),P=0.028];同时,二次活检胚胎的染色体整倍体率[35.9%(28/78)]低于一次活检胚胎[49.3%(226/458),P=0.028],且异常率[9.0%(7/78)]高于一次活检胚胎[0.9%(4/458),P0.05)。新生儿出生体质量、胎龄、性别比例、低出生体质量儿、巨大儿、小于胎龄儿、大于胎龄儿、出生缺陷发生率两组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。二次活检PGT组亚组之间两两比较,其二检率、扩增成功率、可移植率的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论对于第一次活检失败的患者,经过二次活检行PGT后的临床妊娠率、活产率和新生儿出生体质量、出生缺陷发生率等与一次活检PGT患者相当。

关键词：囊胚倾向性匹配二次活检胚胎植入前遗传学检测新生儿结局

血清外泌体circRPS6在结直肠癌患者诊断及预后评估中的临床价值

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中华检验医学杂志 2024年第3期47卷 272-277页

作者：郑留昌李俊蒙郑培明河南省人民医院检验科郑州450003 河南省人民医院胃肠外科郑州450003

目的探讨外泌体环状RNA circRPS6(hsacirc0086471)在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达水平及其临床应用价值。方法收集河南省人民医院2019年1月15日至2020年12月31日就诊的115例CRC患者血清标本, 其中男性68例, 女性47例, 年龄(63.0±9.5)... 详细信息

目的探讨外泌体环状RNA circRPS6(hsacirc0086471)在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达水平及其临床应用价值。方法收集河南省人民医院2019年1月15日至2020年12月31日就诊的115例CRC患者血清标本, 其中男性68例, 女性47例, 年龄(63.0±9.5)岁;收集同时期120名健康体检者外周血清标本, 其中男性70名, 女性50名, 年龄(61.0±10.7)岁。此外收集60例接受手术治疗的CRC患者癌及癌旁组织标本。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测血清外泌体及组织中circRPS6的相对表达水平, 并分析其与患者临床病理特征及预后的相关性。电化学发光法检测血清中CEA及CA19-9水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价不同血清学指标的诊断效能。采用Cox比例风险模型进行多变量回归分析。结果 CRC患者癌组织中circRPS6的相对表达水平(3.14±0.11)高于癌旁组织(1.97±0.09)(Z=5.38, P<0.001), 血清外泌体中circRPS6的相对表达水平(4.28±0.13)高于健康对照组(2.04±0.09)(t=14.52, P<0.001)。ROC曲线分析结果显示, 血清外泌体circRPS6诊断CRC的曲线下面积(AUC)为0.882, 高于CEA、CA19-9检测对 CRC 患者的诊断效能。血清外泌体circRPS6相对表达量与TNM分期、淋巴结转移以及远处转移呈正相关(P均<0.05)。生存曲线分析显示血清外泌体circRPS6低表达患者平均生存时间明显优于高表达患者, 进一步多变量回归分析发现血清外泌体circRPS6高表达是CRC患者预后不良的独立危险因素。结论外泌体circRPS6在CRC患者血清中高表达, 且与恶性进展和不良预后相关, 有望成为CRC患者诊断和预后评估的潜在标志物。

关键词：结直肠肿瘤外泌体环状RNA circRPS6 分子标志物

应用子宫输卵管超声造影评估输卵管通畅性:在争议与困境中前行

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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 656-660页

作者：徐子宁王瑶婷孙娟陈双喜邹彦崔艾琳舒静浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院生殖医学中心超声医学科杭州310012 浙江省人民医院杭州医学院附属人民医院生殖医学中心生殖内分泌科杭州310012

近年来,输卵管性不孕的发病率不断上升。在我国,多数输卵管性不孕女性为了尽可能保留输卵管,会优先考虑接受保守治疗或者输卵管重建手术。为了满足这类患者的生育需求,生殖领域的临床医生就需要综合评价各种不孕危险因素,权衡利弊,探求... 详细信息

近年来,输卵管性不孕的发病率不断上升。在我国,多数输卵管性不孕女性为了尽可能保留输卵管,会优先考虑接受保守治疗或者输卵管重建手术。为了满足这类患者的生育需求,生殖领域的临床医生就需要综合评价各种不孕危险因素,权衡利弊,探求更符合患者利益的个体化诊疗方案。对于输卵管的影像学评估水准也相应地提出了更高的要求。子宫输卵管超声造影(hysterosalpingo-contrast sonography,HyCoSy)作为评价输卵管通畅性的一线影像学技术,其价值已得到大量临床实践的肯定,但仍面临着众多争议与困境。本文通过文献回顾和经验总结,为HyCoSy这项技术的前行提供观点。

关键词：子宫输卵管超声造影输卵管通畅性输卵管性不孕

亚精胺对人子宫内膜基质细胞自噬和炎症细胞因子表达的影响

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中国免疫学杂志 2024年第5期40卷 1023-1029页

作者：张雪米旭光林秀英付建华刘磊高心月方艳秋长春中医药大学长春130021 吉林省人民医院生殖医学中心长春130021

目的:探讨克罗米芬(CC)对子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)的损伤作用,并研究亚精胺对受损子宫内膜基质细胞自噬和炎症细胞因子表达的影响。方法:实验分为对照组、亚精胺组、克罗米芬组(CC组)、CC+亚精胺组。MTT法检测hEndoSCs与不同浓度CC... 详细信息

目的:探讨克罗米芬(CC)对子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)的损伤作用,并研究亚精胺对受损子宫内膜基质细胞自噬和炎症细胞因子表达的影响。方法:实验分为对照组、亚精胺组、克罗米芬组(CC组)、CC+亚精胺组。MTT法检测hEndoSCs与不同浓度CC或亚精胺共同孵育24 h后细胞的存活率;流式细胞技术检测4组细胞内活性氧(ROS)含量和细胞凋亡水平。Western blot检测自噬途径相关蛋白ULK1、p-ULK1、LC-3Ⅱ和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase 3的表达。采用RT-qPCR检测IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达量。结果:与对照组相比,CC组细胞存活率下降,细胞凋亡率、ROS含量、Bax、Cleaved-caspase 3表达量升高,Bcl-2表达量降低,自噬相关蛋白p-ULK1、LC-3Ⅱ/Ⅰ水平降低,炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达升高(P0.05)。与CC组相比,CC+亚精胺组细胞存活率显著提高,细胞凋亡率、ROS含量、Bax和Cleaved-caspase 3表达量降低,Bcl-2表达量升高,自噬相关蛋白p-ULK1、LC-3Ⅱ/Ⅰ表达升高,炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达降低(P<0.01)。结论:CC能够抑制子宫内膜基质细胞增殖,促进细胞凋亡,提高炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的转录水平。亚精胺可通过激活细胞自噬,降低CC损伤的子宫内膜基质细胞胞内ROS水平,提高细胞存活率,并抑制炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α表达。

关键词：亚精胺子宫内膜基质细胞炎症自噬细胞凋亡克罗米芬

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