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基于UPLC-Q-TOF-MSE技术分析柴胡加龙骨牡蛎汤化学成分及入血成分

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中国现代应用药学 2024年

作者：吴彤董晗硕刘寅艾春玲孙莉长春中医药大学吉林省中医药科学院

目的应用超高液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MSE）技术结合UNIFI软件对柴胡加龙骨牡蛎汤化学成分及入血进行快速鉴定，同时分析其裂解规律。方法采用ChromCore C18（3μm,3.0×100 mm）色谱柱，以乙腈（A）-0.1%甲酸... 详细信息

目的应用超高液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MSE）技术结合UNIFI软件对柴胡加龙骨牡蛎汤化学成分及入血进行快速鉴定，同时分析其裂解规律。方法采用ChromCore C18（3μm,3.0×100 mm）色谱柱，以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，流速为0.3 mL·min-1，进样量为10μL，分别于正、负离子模式对柴胡加龙骨牡蛎汤水体物及含药血浆进行质谱检测。使用UNIFI软件依据相对分子质量、特征碎片离子、保留时间等信息对化合物进行自动检索匹配，同时结合标准品和文献对柴胡加龙骨牡蛎汤的化学成分及入血成分进行定性鉴定。结果本研究从柴胡柴胡加龙骨牡蛎汤中初步鉴定102种化合物，包括38种皂苷、32种黄酮、12种多酚类化合物、9种蒽醌类化合物以及11种其他类化合物；从大鼠血浆样品中共鉴定出21种原型成分，10种成分来源于人参，5种成分来源于黄芩，2种成分来源于柴胡，2种成分来源于大黄，2种成分来源于半夏，1种成分来源于生姜。结论应用UPLC-Q-TOF-MSE技术结合UNIFI软件可以快速准确的分析柴胡加龙骨牡蛎汤的化学成分及入血成分，初步阐明了柴胡加龙骨牡蛎滩的药效物质基础，为柴胡加龙骨牡蛎汤后续的药效学研究及质量控制提供依据。

关键词：柴胡加龙骨牡蛎汤化学成分入血成分 UPLC-Q-TOF-MS UNIFI

基于LC-MS技术探讨仙鹤草干预非小细胞肺癌A549细胞的代谢组学研究

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药学学报 2024年第3期59卷 704-712页

作者：同泽华郭文军邹瀚锐徐丽伟徐雅娟王卫芳长春中医药大学吉林长春130117 吉林省中医药科学院吉林长春130012 长春中医药大学附属医院吉林长春130021

本研究应用体外细胞实验分析仙鹤草(Agrimonia pilosa, AP)干预A549细胞后, A549细胞的细胞活力、细胞凋亡、细胞周期的变化,探讨仙鹤草在体外的抗肿瘤活性,同时利用液相色谱-质谱(liquid chromatographymass spectrometry, LC-MS)联用... 详细信息

本研究应用体外细胞实验分析仙鹤草(Agrimonia pilosa, AP)干预A549细胞后, A549细胞的细胞活力、细胞凋亡、细胞周期的变化,探讨仙鹤草在体外的抗肿瘤活性,同时利用液相色谱-质谱(liquid chromatographymass spectrometry, LC-MS)联用的代谢组学技术分析细胞内代谢物的变化及代谢通路,为研究仙鹤草治疗非小细胞肺癌A549细胞的作用机制提供理论基础和实验依据。实验结果显示随着仙鹤草药物浓度的增加, A549细胞的细胞核发生皱缩,出现明显的凋亡现象;细胞的存活率降低,在低、高剂量条件下抑制率分别达到21.5%、91.74%;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)含量上升(P <0.05)。代谢组学结果显示两组间代谢差异明显,推测出LysoPC(24:0/0:0)、LysoPC(17:0/0:0)和PC(O-40:5)等33个差异代谢物;通路富集发现,中药仙鹤草主要通过调节A549细胞的甘油磷脂代谢、嘌呤代谢等发挥抗肿瘤作用,其中对甘油磷脂代谢通路的影响最为显著。结合药效结果提示,仙鹤草有可能通过调节A549细胞内LysoPC(24:0/0:0)、LysoPC(17:0/0:0)和PC(O-40:5)代谢物,诱导细胞凋亡和抑制A549细胞的生长。

关键词：仙鹤草代谢组学 A549细胞细胞凋亡细胞周期

柴芍乳增胶囊对肝郁气滞型乳腺增生大鼠神经递质和胃肠激素的影响

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世界科学技术-中医药现代化 2024年第7期26卷 1811-1818页

作者：杨铭张文军于德伟赫慧杨明吉林省中医药科学院新药中心长春130012 长春中医药大学药学院长春130117

目的观察柴芍乳增胶囊对肝郁气滞型乳腺增生模型大鼠的治疗作用及机制。方法采用注射苯甲酸雌二醇加不可预知的应激刺激方法,复制肝郁气滞型乳腺增生大鼠模型。模型大鼠给予柴芍乳增胶囊高、中、低剂量(1.2、0.6、0.3 g·kg^(-1))。连... 详细信息

目的观察柴芍乳增胶囊对肝郁气滞型乳腺增生模型大鼠的治疗作用及机制。方法采用注射苯甲酸雌二醇加不可预知的应激刺激方法,复制肝郁气滞型乳腺增生大鼠模型。模型大鼠给予柴芍乳增胶囊高、中、低剂量(1.2、0.6、0.3 g·kg^(-1))。连续28天。观察大鼠一般状态及行为学指标,乳头直径、乳头高度及乳腺组织病理形态学变化,测血清孕酮(P)、黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)、P物质(SP)。结果与空白对照组比较,模型组大鼠脱毛、倦怠、反应迟钝、易激怒,自主活动次数减少、蔗糖水偏嗜度降低,体质量明显降低(P<0.01);乳头直径增加,乳头高度增大(P<0.01);乳腺小叶增生程度增大(P<0.01)。血清中E2、LH、5-TH、NE、DA、MTL、SP含量升高,P、VIP含量降低(P<0.01)。与模型组比较,柴芍乳增胶囊各剂量组脱毛、倦怠、反应迟钝、易激怒等症状明显改善,自主活动次数增加、蔗糖水偏嗜度升高(P<0.05或P<0.01);乳头直径和乳头高度明显减少(P<0.05或P<0.01);乳腺小叶增生程度降低(P<0.05或P<0.01);血清中P、FSH、VIP含量明显升高,E2、LH、5-TH、NE、DA、MTL、SP含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论柴芍乳增胶囊能缓解肝郁气滞型乳腺增生模型大鼠性激素紊乱,调节神经递质水平,改善胃肠激素异常,减轻肝郁气滞症状,抑制乳腺增生。

关键词：柴芍乳增胶囊乳腺增生肝郁气滞证神经递质胃肠激素

酸碱位移结合喷雾干燥法制备染料木素三元包合物体系

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中草药 2024年第7期55卷 2197-2205页

作者：王明帅宁夏刘华石王井侠段亚辉耿晨阳王伟明黑龙江省中医药科学院黑龙江哈尔滨150036

目的优选染料木素三元包合物的制备工艺,并对其体外抗癌活性进行评价。方法通过相溶解度及分子模拟对染料木素二元与三元包合物的溶解性和稳定性进行评价,优选染料木素包合物的种类。通过处方和制备工艺研究,确定三元包合物的处方组成... 详细信息

目的优选染料木素三元包合物的制备工艺,并对其体外抗癌活性进行评价。方法通过相溶解度及分子模拟对染料木素二元与三元包合物的溶解性和稳定性进行评价,优选染料木素包合物的种类。通过处方和制备工艺研究,确定三元包合物的处方组成和制备工艺。利用傅里叶变换红外光谱、X射线粉末衍射、差示扫描量热法和扫描电子显微镜等对染料木素三元包合物进行表征,采用人乳腺癌MCF-7细胞和人非小细胞肺癌A549细胞对染料木素三元包合物的抗癌活性进行考察。结果染料木素三元包合物与二元包合物相比溶解度更高、稳定性更好。研究表明,以处方染料木素与HP-β-CD物质的量比(1∶1.8),加入染料木素-HP-β-CD总质量5%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30,通过酸碱位移结合喷雾干燥法制备染料木素三元包合物,染料木素的溶解度可达8.8 mg/mL,溶出度为93%;体外抗癌活性实验表明,染料木素三元包合物能明显增强染料木素对MCF-7细胞和A549细胞的抑制作用。结论优选工艺为酸碱位移结合喷雾干燥法制备染料木素三元包合物,能明显提高染料木素的溶解性,并显著增强染料木素对MCF-7细胞和A549细胞的抑制作用。

关键词：染料木素酸碱位移喷雾干燥三元包合物抗癌活性相溶解度分子模拟 MCF-7细胞 A549细胞

左甲状腺素钠片联合碘131治疗分化型甲状腺癌术后患者对其甲状腺功能、血清学指标的影响

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现代医学与健康研究电子杂志 2024年第16期8卷 34-36页

作者：宫磊黄东辉吉林省中医药科学院(吉林省中医药科学院第一临床医院)检验科吉林省中医药科学院(吉林省中医药科学院第一临床医院)内分泌科吉林长春130022

目的探讨分化型甲状腺癌(DTC)术后采用左甲状腺素钠片联合碘131(^(131)I)治疗对患者甲状腺功能、血清学指标及预后的影响。方法选取2022年1月至2024年1月吉林省中医药科学院(吉林省中医药科学院第一临床医院)收治的63例行甲状腺全切术的... 详细信息

目的探讨分化型甲状腺癌(DTC)术后采用左甲状腺素钠片联合碘131(^(131)I)治疗对患者甲状腺功能、血清学指标及预后的影响。方法选取2022年1月至2024年1月吉林省中医药科学院(吉林省中医药科学院第一临床医院)收治的63例行甲状腺全切术的DTC患者,依据随机数字表法分为对比组(31例,^(131)I+常规甲状腺片)和研究组(32例,^(131)I+左甲状腺素钠片)。两组患者均治疗1个月。对比两组患者治疗后临床疗效,治疗前后甲状腺功能指标水平、血清学指标,以及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后,研究组患者治疗总有效高于对比组,临床疗效优于对比组;与治疗前比,治疗后两组患者血清促甲状腺激素(TSH)、甲状腺球蛋白(Tg)、半乳糖血凝素-3(Gal-3)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、血管内皮生长因子(VEGF)水平均降低,且研究组均低于对比组;两组患者血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平均升高,且研究组均高于对比组(均P0.05)。结论左甲状腺素钠片联合^(131)I治疗DTC术后患者疗效显著,有利于提高甲状腺功能,抑制DTC的复发、转移,用药安全性高。

关键词：分化型甲状腺癌碘131 甲状腺片左甲状腺素钠片甲状腺功能半乳糖血凝素-3 可溶性白细胞介素-2受体血管内皮生长因子

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中医药治疗艾滋病的进展

中药药理与临床 2024年第4期40卷 4-8,26页

作者：杨欣怡苏琛刘晶晶张春梅唐丽燕李东晓彭鑫四川省中医药科学院成都610041

中医药介入艾滋病研究已三十余年,在稳定或提高免疫能力,治疗药物不良反应,延缓发病时间及治疗机会性感染等方面发挥了积极作用。而在抗反转录病毒治疗广泛使用的当下,如何找准定位、确定目的是今后开展中医药治疗艾滋病研究需要解决的... 详细信息

中医药介入艾滋病研究已三十余年,在稳定或提高免疫能力,治疗药物不良反应,延缓发病时间及治疗机会性感染等方面发挥了积极作用。而在抗反转录病毒治疗广泛使用的当下,如何找准定位、确定目的是今后开展中医药治疗艾滋病研究需要解决的关键问题。因此,本文对近年来中医药辨治艾滋病的相关研究进行了总结,为下一步深化研究提供参考。目前关于中医药治疗艾滋病相关研究包括了艾滋病及其并发症的证型、体质、药物制剂研究;临床治疗重难点问题有免疫重建不良、机会性感染、药物不良反应和合并疾病等。今后当发挥中医药在抗病毒治疗失败、免疫重建不良及缓解药物不良反应等方面的特长优势,集中力量突破关键问题,多学科合作,加强基础研究,提供高级别循证证据,并结合高新技术手段进行研究,解决艾滋病相关疑难问题。

关键词：艾滋病获得性免疫缺陷综合征中医药免疫重建不良机会性感染药物不良反应

丹酚酸F调控Bax/Caspase-3/GSDME信号通路改善肾小管上皮细胞焦亡作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 56-64页

作者：石贤聪谢治深赵靓王佳俊段亚飞王潘张振强张效威徐江雁河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:基于B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度(2.5、5、10、20μmol·L^(-1))... 详细信息

目的:基于B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度(2.5、5、10、20μmol·L^(-1))丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞相对活力的影响及给予丹酚酸F不同干预时间条件下HK-2细胞的相对活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒和酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒分别检测细胞培养基上清中LDH和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;流式细胞术结合异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)和Hoechst 33342/PI染色检测丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞PI阳性率的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)评价丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中Bax、Bcl-2、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、Caspase-3、GSDME蛋白表达及激活情况的影响。2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法(DCFH-DA)及线粒体膜电位(JC-1)考察丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中活性氧(ROS)产生及线粒体膜电位的影响。结果:与空白组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),乳酸脱氢酶、炎症因子IL-1β、PI阳性细胞比例均显著升高(P<0.01);Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的降低,ROS产生过量蓄积。与模型组比较,丹酚酸F组有效改善高糖诱导所致HK-2细胞的损伤(P<0.05),明显降低细胞培养基上清中LDH及IL-1β含量(P<0.05,P<0.01),显著减少PI阳性细胞的比例(P<0.01);丹酚酸F组降低Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达,明显升高Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的升高,ROS的过量蓄积减少。结论:丹酚酸F通过减少ROS的产生,改善线粒体膜电位失衡,抑制Bax/Caspase-3/GSDME信号通路介导的细胞焦亡发挥改善高糖诱导所致HK-2细胞损伤的作用。

关键词：丹酚酸F B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)信号通路肾小管上皮细胞细胞焦亡

基于PERK/ATF4/CHOP的益肾通络方抑制内质网应激改善肾小管上皮细胞凋亡的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 26-36页

作者：苏烜赵靓王萌萌丁婧张振强张效威徐江雁谢治深河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:验证益肾通络方(YSTLP)对肾小管上皮细胞凋亡的影响,并基于内质网应激通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)探讨其作用机制。方法:将db/db小鼠随机分为模型组、缬沙坦组(10 mg·kg^(... 详细信息

目的:验证益肾通络方(YSTLP)对肾小管上皮细胞凋亡的影响,并基于内质网应激通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)探讨其作用机制。方法:将db/db小鼠随机分为模型组、缬沙坦组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))、YSTLP低、中、高剂量组(1、2.5、5 g·kg^(-1)·d^(-1))给予药物干预8周后取材。同窝的db/m小鼠作为正常组。体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),分为正常组、糖基化终产物(AGEs)组、AGEs+益肾通络方低、中、高质量浓度组(100、200、400 mg·L^(-1));原位末端标记(TUNEL)染色检测HK-2细胞的凋亡情况;细胞活力测定实验检测HK-2细胞存活率;钙离子荧光探针染色,以及荧光素酶报告基因法检测为折叠蛋白反应元件(UPRE)荧光素酶活力,检测内质网应激情况;免疫组化法(IHC)检测小鼠肾脏中磷酸化(p)-PERK蛋白的表达(p-PERK)、CHOP、ATF4的蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠肾脏、HK-2细胞中CHOP、X盒结合蛋白1(XBP1)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肾脏、HK-2细胞中p-PERK、PERK、CHOP、ATF4、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、切割型胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的蛋白表达水平。结果:细胞实验中,与正常组比较,AGEs组HK-2细胞活力显著降低,凋亡率显著升高(P<0.01),凋亡相关因子Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Bax的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01),cleaved Caspase-3的蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与AGEs组比较,YSTLP给药处理后,细胞活力提升,凋亡率降低(P<0.01),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平呈时间、剂量依赖性显著升高(P<0.01),Bax的mRNA和蛋白表达水平呈时间、剂量依赖性显著降低,cleaved Caspase-3的蛋白表达水平呈时间、剂量依赖性显著降低(P<0.01)。与正常组比较,AGEs组细胞内Ca2+失衡,UPRE荧光素酶荧光强度增加(P<0.01),内质网应激相关因子CHOP、XBP1的mRNA水平显著升高(P<0.01),p-PERK、CHOP、ATF4的蛋白表达水平明显提高(P<0.05);与AGEs组比较,YSTLP可有效改善HK-2细胞内Ca2+失衡,剂量依赖性降低UPRE荧光强度(P<0.01),降低内质网应激相关因子CHOP、XBP1的mRNA水平(P<0.01),剂量、时间依赖性降低细胞内p-PERK、CHOP、ATF4的蛋白表达水平(P<0.01)。动物实验中,与正常组比较,模型组小鼠Bcl-2的蛋白表达水平显著降低(P<0.01),cleaved Caspase-3、Bax的蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,YSTLP组Bcl-2的蛋白表达水平呈剂量依赖性提升,cleaved Caspase-3、Bax的蛋白表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠CHOP、XBP1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),p-PERK、CHOP、ATF4的蛋白表达水平明显提高(P<0.05);与模型组比较,YSTLP可显著降低CHOP、XBP1的mRNA表达水平(P<0.01),降低p-PERK、CHOP、ATF4的蛋白表达水平(P<0.01)。结论:YSTLP可有效抑制内质网应激、改善肾小管上皮细胞凋亡情况,其作用机制可能与调节PERK/AFT4/CHOP通路有关。

关键词：益肾通络方内质网应激凋亡机制蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路

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鲜车前草的应用考证及现代临床应用

中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 159-169页

作者：赵日开蒋鑫杨卉妍苗明三河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:探究鲜车前草临床应用规律,为鲜车前草的现代应用提供文献支持及发展思路。方法:以第5版《中华医典》为古籍数据库,以中国知网、维普、万方、中华医学期刊全文数据库为现代数据库,摘录包含鲜车前草应用的内容,并进行归纳整理分析... 详细信息

目的:探究鲜车前草临床应用规律,为鲜车前草的现代应用提供文献支持及发展思路。方法:以第5版《中华医典》为古籍数据库,以中国知网、维普、万方、中华医学期刊全文数据库为现代数据库,摘录包含鲜车前草应用的内容,并进行归纳整理分析。结果:古籍中车前草鲜用的频率很高,功效以清热、凉血、利尿、通淋为主,可用于治疗淋证、小便不通、小便溺血等内科病及疮痈、白虎丹等外科病,治疗面口五官热证如鼻衄、目赤肿痛、乳蛾喉痹等病的疗效极佳,在妇科及儿科疾病中也有广泛的应用。现代文献记载鲜车前草主治范围包括肾系、五官、脾胃、肺系、肝胆、皮肤外科及妇科儿科疾病,主要用于肾系湿热证及由于湿热毒蕴引起的皮肤外科诸证,功效以清热解毒,利尿通淋为主。民间从古至今都有采食鲜车前用于充饥或保健的报道。结论:鲜车前草临床应用广泛,具有极高的医用价值与经济价值,但是现代应用发展滞后,需要集策集力从“药材生产-储存运输-制剂研发-临床应用”各个环节入手推动鲜车前草应用发展。

关键词：鲜药车前草古籍考证临床应用