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猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析

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动物医学进展 2024年第8期45卷 28-34页

作者：张启龙李振河程敏姮栗云鹏高晓龙傅彩霞王林高敏余琦周德刚张玮李志军北京市动物疫病预防控制中心北京102629 北京市平谷区动物疫病预防控制中心北京101200

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,... 详细信息

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。

关键词：猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定 VP2基因遗传进化分析

沙门菌感染IPEC-J2细胞前后上清液外泌体鉴定及其mA相关蛋白表达和转录组分析

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中国畜牧兽医 2024年 5086-5096页

作者：张新国淮安市淮阴区动物疫病预防控制中心

【目的】探究外泌体在沙门菌感染猪小肠上皮细胞（IPEC-J2细胞）过程中的作用及分子调控机制。【方法】利用间接免疫荧光试验观察沙门菌感染前后IPEC-J2细胞中沙门菌抗体分布水平,用超速离心法提取沙门菌感染IPEC-J2细胞上清液中的外泌... 详细信息

【目的】探究外泌体在沙门菌感染猪小肠上皮细胞（IPEC-J2细胞）过程中的作用及分子调控机制。【方法】利用间接免疫荧光试验观察沙门菌感染前后IPEC-J2细胞中沙门菌抗体分布水平,用超速离心法提取沙门菌感染IPEC-J2细胞上清液中的外泌体,并通过透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blotting检测外泌体标记蛋白分子（CD9、CD63、CD81、TSG101）进行外泌体鉴定;利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测N6-甲基腺嘌呤（m6A）相关蛋白表达,同时结合转录组测序筛选上清液外泌体差异表达基因。【结果】间接免疫荧光试验结果显示,感染组IPEC-J2细胞中可观察到大量沙门菌分布,表明沙门菌可感染IPEC-J2细胞;透射电镜和外泌体粒径分析结果显示,IPEC-J2细胞分泌的外泌体为双层膜的囊泡,直径为30～150 nm;Western blotting结果显示,C-J2细胞分泌的外泌体存在CD9、CD63、CD81和TSG101特异性标记蛋白。沙门菌感染后外泌体中m6A修饰相关基因表达检测发现,ALKBH5、YTHDC2及YTHDF1基因的mRNA和蛋白表达均显著或极显著上调（P<0.05;P<0.01）。转录组测序结果显示,沙门菌感染IPEC-J2细胞前后外泌体中存在1 524个差异表达基因,包括842个下调基因和682个上调基因。GO功能富集分析表明,沙门菌感染主要影响免疫系统过程、细胞连接和酶调节剂活性等生物过程;KEGG通路富集分析表明,其与IgA生产的肠道免疫网络、T细胞受体信号通路和Toll样受体信号通路等密切相关。【结论】本研究成功分离和鉴定了沙门菌感染IPEC-J2细胞上清液中的外泌体,并且表明外泌体中m6A修饰可介导免疫信号通路来调控沙门菌感染宿主细胞,该研究可为今后深入探究外泌体对猪肠道沙门菌感染的分子机制提供理论参考。

关键词：猪沙门菌外泌体小肠上皮细胞转录组

2010—2021年甘肃省山羊传染性胸膜肺炎流行病学调查分析

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中国兽医杂志 2024年第9期60卷 47-55页

作者：康新华韩庆彦毋艳萍柴刚王亮甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046 兰州市城关区动物疫病预防控制中心甘肃兰州730031

为了解甘肃省山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)的流行情况,本试验采用流行病学调查方法对全省2010—2021年羊群CCPP的发病情况进行了调查,并从地区、物种、季节、性别、年龄、养殖规模、疫点类型和是否采取治疗措施方面对数据进行了统计分析。... 详细信息

为了解甘肃省山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)的流行情况,本试验采用流行病学调查方法对全省2010—2021年羊群CCPP的发病情况进行了调查,并从地区、物种、季节、性别、年龄、养殖规模、疫点类型和是否采取治疗措施方面对数据进行了统计分析。调查结果显示,2010—2021年全省CCPP平均发病率为8.15%(11 077/135 860),病死率为29.49%(3 267/11 077),CCPP发病率与物种、季节、年龄和是否采取治疗措施有关。山羊CCPP发病率(9.79%,9 038/92 306)极显著高于绵羊(4.68%,2 039/43 554)(P0.05),CCPP的发病也无明显地域性。结果表明,CCPP在甘肃省普遍流行,山羊比绵羊更易感,在年龄较大、寒冷季节和缺乏治疗的情况下发病率增加。因此,养殖场户应当针对风险因素制定预防策略,并通过采取定期调查监测、预防接种和治疗等措施,降低CCPP在甘肃省的发病率。

关键词：山羊传染性胸膜肺炎(CCPP) 流行病学调查分析甘肃省

羊肠道病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王勤欧云文何博刘俐君达州职业技术学院开江县动物疫病预防控制中心达州市动物疫病预防控制中心

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有... 详细信息

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有良好的反应活性，建立的间接ELISA方法检测BDV、BVDV、GPV、ORF、SPA阳性血清均为阴性，对CEV阳性血清的最低检出效价可达1︰25 600，与IFA方法的符合率为93.33%（28/30），检测四川地区816份羊血清样品的CEV阳性感染率达7.72%（63/816）。表明建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性，可用于CEV临床抗体检测及流行病学调查。

关键词：羊肠道病毒 VP1蛋白原核表达间接ELISA 抗体检测

蓝舌病病毒感染对绵羊微血管内皮细胞中Ⅰ型干扰素应答的影响

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畜牧兽医学报 2024年

作者：罗世美陈韵伊李其沙周艳梅胡雪柔李铭悦魏子昱李芳马鲜平易华山西南大学动物医学院重庆市大足区动物疫病预防控制中心

蓝舌病病毒（bluetonguevirus，BTV）是一种严重危害绵羊等反刍动物的虫媒病毒，而绵羊微血管内皮细胞（sheeplungmicrovascularendothelialcells，SLMECs）构成肺半选择性屏障，为研究BTV感染与SLMECs干扰素抗病毒免疫应答的分子机制... 详细信息

蓝舌病病毒（bluetonguevirus，BTV）是一种严重危害绵羊等反刍动物的虫媒病毒，而绵羊微血管内皮细胞（sheeplungmicrovascularendothelialcells，SLMECs）构成肺半选择性屏障，为研究BTV感染与SLMECs干扰素抗病毒免疫应答的分子机制。本研究通过BTV噬斑实验以感染复数（MOI）为1的BTV诱导18、24、36h的SLMECs，通过实时荧光定量PCR分析干扰素相关通路基因mRNA表达特征，以及Westernblot分析MDA5、TRAF3、RIG-I和TBK1蛋白表达。结果表明，在诱导36h时，干扰素信号通路基因mRNA表达的变化最明显，RIG-I、MDA5、IKKε、IFN-β、TBK1和TRAF6基因mRNA上调表达，差异极显著；而IFN-α、VISA、USP18基因mRNA下调表达，差异极显著；在蛋白水平上MDA5、TBK1、RIG-I和TRAF3蛋白都上调表达。本研究发现BTV可感染SLMECs诱导Ι型干扰素免疫应答，为进一步分析IFN-I信号通路的激活在抗BTV感染天然免疫应答中的作用机制研究奠定基础。

关键词：蓝舌病病毒 I型干扰素绵羊肺微血管内皮细胞

日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响

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中国饲料 2024年第13期 76-79页

作者：陈敏艳安加俊贾培龙陕西省动物疫病预防控制中心陕西西安710016 咸阳市动物疫病预防控制中心陕西咸阳713899

为研究日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响,试验选取体重相近、70日龄的健康西门塔尔牛犊牛共18头,随机分为对照组、试验I组、试验II组。试验I组和II组分别在基础日粮基础上,额外添加1.5 g和3 ... 详细信息

为研究日粮中添加复合益生菌对西门塔尔犊牛生长性能、血清指标及瘤胃发酵性能的影响,试验选取体重相近、70日龄的健康西门塔尔牛犊牛共18头,随机分为对照组、试验I组、试验II组。试验I组和II组分别在基础日粮基础上,额外添加1.5 g和3 g益生菌,试验60 d。结果表明:(1)试验II组犊牛平均日增重较对照组提高了18.31%(P 0.05)。(2)血液生化指标中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、胆固醇和甘油三酯各组之间差异不显著(P> 0.05);试验II组Ig G和IL-6等免疫指标较对照组分别提高了26.08%和20.17%(P 0.05)。(3)试验II组瘤胃氨态氮和丁酸含量较对照组分别提高了49.85%和45.17%,乙酸含量降低了34.24%(P 0.05)。以上结果表明,犊牛日粮中添加复合益生菌能够促进犊牛的生长性能,提高免疫功能和瘤胃发酵功能。本试验中,以添加3 g/(头·d)的复合益生菌较适宜。

关键词：犊牛复合益生菌生长性能免疫瘤胃发酵

2020—2022年全球H5亚型高致病性禽流感疫情简况及分析

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中国兽医杂志 2024年第7期60卷 34-40页

作者：王慧强张跃程敏姮殷雨晴郑雪莹李志军北京市动物疫病预防控制中心北京大兴102629

为了解近年全球H5亚型高致病性禽流感(HPAI)疫情具体情况,本文通过对农业农村部畜牧兽医局发布的“一周国际动物疫情动态”和“疫情发布”中的HPAI疫情信息进行统计和分析,对2020—2022年全球H5亚型HPAI疫情的发生和流行情况,空间、时... 详细信息

为了解近年全球H5亚型高致病性禽流感(HPAI)疫情具体情况,本文通过对农业农村部畜牧兽医局发布的“一周国际动物疫情动态”和“疫情发布”中的HPAI疫情信息进行统计和分析,对2020—2022年全球H5亚型HPAI疫情的发生和流行情况,空间、时间和群间分布,以及给养禽业造成的危害进行较为全面的了解。结果显示,2020年全球H5亚型HPAI疫情以H5N8亚型为主;自2021年5月份,呈现H5N1亚型疫情逐渐增多、H5N8亚型疫情逐渐减少的趋势,至11月份,形成以H5N1亚型疫情为主、H5N8亚型疫情零星发生的局面。H5N1亚型HPAI疫情逐渐演变为全球大流行,在欧洲形成“重灾区”,非洲和亚洲疫情也较为严重。2022年存在2次明显的H5亚型HPAI跨洲际传播,分别是2月份从欧洲传播到北美洲和10月份从北美洲传播到南美洲,经分析认为这2次跨洲际传播与候鸟迁徙有密切联系。结果表明,本轮H5N1亚型HPAI疫情全球大流行持续时间长、传播范围广,给世界养禽业造成巨大危害和深远影响。

关键词：全球 H5亚型高致病性禽流感疫情分析

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猫继发性青光眼的诊治

动物医学进展 2024年第2期45卷 142-144页

作者：张维虎廊坊市动物疫病预防控制中心河北廊坊065000

青光眼是小动物临床眼科常见疾病,病因可分为原发性与继发性。在猫科动物中原发性较罕见,临床上更常见的是继发性青光眼,多与眼内炎症有关。现将1例猫继发性青光眼的诊治方法报道,以期为猫青光眼临床诊断和治疗提供参考。

关键词：猫继发性青光眼诊断治疗

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北京市西部山区犬利什曼原虫病的诊断和分析

中国兽医杂志 2024年第6期60卷 54-58页

作者：杜鹃张玮吴迪于海浪杨璐苗东影李刚陈会玲李蕊赵浩军北京市动物疫病预防控制中心北京大兴100026 北京市门头沟区动物疫病预防控制中心北京门头沟102308

本试验对在北京市西部山区调查发现的1例犬利什曼原虫病临床疑似病例开展了诊断和分析,采用血液检查、淋巴穿刺液显微镜检查、血清胶体金抗体检测、皮屑样品荧光定量PCR检测以及核糖体DNA转录间隔区I(ITS-1)基因扩增和测序分析对病例开... 详细信息

本试验对在北京市西部山区调查发现的1例犬利什曼原虫病临床疑似病例开展了诊断和分析,采用血液检查、淋巴穿刺液显微镜检查、血清胶体金抗体检测、皮屑样品荧光定量PCR检测以及核糖体DNA转录间隔区I(ITS-1)基因扩增和测序分析对病例开展全面诊断。结果显示,该病例红细胞数、血红蛋白、红细胞压积、淋巴细胞百分比、白蛋白、碱性磷酸酶低于参考范围,球蛋白、钙离子、肌酸激酶高于参考范围,呈现寄生虫感染的典型特征;显微镜下可以观察到明显利什曼原虫虫体;胶体金抗体检测和荧光定量PCR检测结果均为阳性;基因序列分析结果显示本病例ITS-1基因与以色列婴儿利什曼原虫KM677134.1聚为一支。结合地理来源,表明该地区流行株为山丘型婴儿利什曼原虫。

关键词：利什曼原虫诊断分析