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噬菌体疗法在耐药性细菌感染中应用的研究进展

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吉林大学学报（医学版） 2013年第3期39卷 630-633页

作者：李菁华孙延波吉林大学白求恩医学院病原生物学系吉林长春130021

细菌耐药性已成为全球性的公共卫生问题,特别是"超级细菌"成员的不断增加使针对细菌感染的抗生素疗法面临前所未有的挑战。最近,噬菌体疗法重新受到人们的关注,并取得一些重要研究进展。本文作者就早期噬菌体的研究情况、近年来噬菌体... 详细信息

细菌耐药性已成为全球性的公共卫生问题,特别是"超级细菌"成员的不断增加使针对细菌感染的抗生素疗法面临前所未有的挑战。最近,噬菌体疗法重新受到人们的关注,并取得一些重要研究进展。本文作者就早期噬菌体的研究情况、近年来噬菌体疗法在动物实验中的应用、临床试验的最新实例和噬菌体疗法的优势及局限进行综述。

关键词：噬菌体噬菌体疗法细菌耐药

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸代谢相关酶基因表达的影响

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中国实验诊断学 2010年第2期14卷 162-164页

作者：李昆何海涛李鸿梅刘剑凯洪敏吉林大学白求恩医学院生物化学教研室吉林长春130021 吉林大学护理学院

目的探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸代谢酶的影响。方法将50只雄性Wis-tar大鼠随机分为对照组、海洛因组、海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组。采用real-timePCR的方法检测大鼠脑皮质中腺苷脱氨酶(ADA... 详细信息

目的探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸代谢酶的影响。方法将50只雄性Wis-tar大鼠随机分为对照组、海洛因组、海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组。采用real-timePCR的方法检测大鼠脑皮质中腺苷脱氨酶(ADA)、黄嘌呤氧化酶(XO)、次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、腺嘌呤磷酸核糖转移酶(APRT)和腺苷激酶(AK)mRNA的表达水平。结果海洛因组ADA、XO的mRNA比对照组明显升高(P<0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组与海洛因组相比明显降低(P<0.05)。海洛因组HGPRT、APRT和AK的mRNA比对照组明显降低(P<0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组与海洛因组相比有不同程度升高,以HGPRT的升高程度尤为显著(P<0.05)。海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组的各项指标差异无显著性。结论海洛因在大鼠基因水平上促进嘌呤核苷酸的分解代谢,降低合成代谢,而补偿嘌呤核苷酸可以抑制或拮抗海洛因的上述作用。

关键词：嘌呤核苷酸海洛因腺苷脱氨酶黄嘌呤氧化酶次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶腺嘌呤磷酸核糖转移酶腺苷激酶

自身免疫调节因子在小鼠肠系膜和外周淋巴结中的表达及其意义

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吉林大学学报（医学版） 2012年第1期38卷 1-5,F0002页

作者：孙际童吴静贾婷刘雪岩杨巍吉林大学白求恩医学院免疫学系吉林长春130021

目的:研究自身免疫调节因子(Aire)在小鼠肠系膜和外周淋巴结表达的分布,探讨Aire在外周免疫耐受中的作用,阐明淋巴结表达Aire在维持耐受及防止自身免疫病中的作用机制。方法:分别采用RT-PCR和Western blotting法检测BALB/c小鼠肠系膜淋... 详细信息

目的:研究自身免疫调节因子(Aire)在小鼠肠系膜和外周淋巴结表达的分布,探讨Aire在外周免疫耐受中的作用,阐明淋巴结表达Aire在维持耐受及防止自身免疫病中的作用机制。方法:分别采用RT-PCR和Western blotting法检测BALB/c小鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结中Aire mRNA和蛋白的表达情况;采用RT-PCR法检测BALB/c小鼠淋巴结基质和非基质组分中Aire mRNA表达情况;采用RT-PCR法和免疫细胞化学染色法检测小鼠淋巴结基质细胞中Aire的表达情况。结果:肠系膜淋巴结和外周淋巴结均有Aire mRNA和蛋白的表达,表达水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05);淋巴结基质与非基质组分均检测到Aire mRNA的表达,其中Aire mRNA在非基质组分的表达水平高于基质组分(P<0.05)。成功分离培养淋巴结基质细胞,即上皮细胞(EPIs)与纤维原网状细胞(FRCs),阳性率约为70%;Aire mRNA及蛋白在EPIs与FRCs中均有表达,且在EPIs中的表达强于FRCs。结论:Aire可表达于小鼠肠系膜和外周淋巴结以及淋巴结基质细胞中,提示Aire可能通过多种机制共同参与外周免疫耐受的维持。

关键词：自身免疫调节因子肠系膜淋巴结外周免疫耐受

黄蘑多糖不同组分对D-半乳糖致衰老模型小鼠SOD、MDA的影响

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中国老年学杂志 2006年第1期26卷 86-88页

作者：李晓林孙国光马岩吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心吉林长春130021 吉林大学基础医学院生物化学教研室吉林长春130021

目的探讨黄蘑多糖不同组分对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用。方法用D-半乳糖(D-gal)诱导致衰老模型小鼠,以碱溶性黄蘑多糖(多糖Fb-2b),水溶性黄蘑多糖(多糖Fw-2b)灌胃,6w后分别检测SOD活力和MDA含量变化。结果多糖Fb-2b能够明显提... 详细信息

目的探讨黄蘑多糖不同组分对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用。方法用D-半乳糖(D-gal)诱导致衰老模型小鼠,以碱溶性黄蘑多糖(多糖Fb-2b),水溶性黄蘑多糖(多糖Fw-2b)灌胃,6w后分别检测SOD活力和MDA含量变化。结果多糖Fb-2b能够明显提高D-gal致衰老小鼠血清、肝中SOD活力,脑中此作用不明显。同时,多糖Fb-2b能够明显降低D-gal致衰老小鼠血清、脑、肝中MDA含量,而多糖Fw-2b以上作用不明显。结论黄蘑多糖Fb-2b有明显抗衰老作用,不同组分的多糖抗衰老作用有显著差异。

关键词：黄蘑多糖致衰老小鼠 SOD MDA

褐藻多糖硫酸酯对老龄小鼠过氧化酶和脂褐素的影响

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中国老年学杂志 2005年第11期25卷 1392-1393页

作者：孙国光李晓林马岩李晓梅陆艳娟吉林大学基础医学院生物化学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心吉林长春130021

目的研究褐藻多糖硫酸酯(APS)对老龄小鼠过氧化物酶(POD)、脂褐素(LPF)的影响。方法愈创木酚比色法(Ⅰ法)测定对照组、APS组POD活性,荧光分光光度法测定对照组、APS组LPF含量。结果老龄小鼠APS组脑、心、肝、肾POP活性明显升高,与对照... 详细信息

目的研究褐藻多糖硫酸酯(APS)对老龄小鼠过氧化物酶(POD)、脂褐素(LPF)的影响。方法愈创木酚比色法(Ⅰ法)测定对照组、APS组POD活性,荧光分光光度法测定对照组、APS组LPF含量。结果老龄小鼠APS组脑、心、肝、肾POP活性明显升高,与对照组比较差异显著(P<0.05,P<0.01);APS组脑、心、肝、肾LPF含量明显降低,与对照组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论APS能够提高POD活性,降低LPF含量,增强机体抗衰老作用。

关键词：褐藻多糖硫酸酯过氧化物酶脂褐素

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色素上皮细胞衍生因子原核表达重组体的构建

中国老年学杂志 2005年第5期25卷 512-514页

作者：杨楠马颖哲张桂荣杨翰仪吉林大学基础医学院生物化学教研室吉林长春130021

目的构建色素上皮细胞衍生因子(PEDF)原核表达重组体。方法从胚胎绒毛中提取总RNA,经RTPCR扩增,获得编码人PEDF的全基因序列,采用TA克隆法,将PEDF基因克隆入pMD18T载体中并转化入***109,经DNA测序正确后构建原核表达重组体pET28aPEDF,转... 详细信息

目的构建色素上皮细胞衍生因子(PEDF)原核表达重组体。方法从胚胎绒毛中提取总RNA,经RTPCR扩增,获得编码人PEDF的全基因序列,采用TA克隆法,将PEDF基因克隆入pMD18T载体中并转化入***109,经DNA测序正确后构建原核表达重组体pET28aPEDF,转化***5a。结果经酶切及DNA测序鉴定,获得了PEDF原核表达重组体pET28aPEDF。结论构建了PEDF原核表达重组体pET28aPEDF,为获得重组PEDF奠定了基础。

关键词：色素上皮细胞衍生因子克隆载体

外源性嘌呤核苷酸减弱吗啡促PC12细胞核苷酸分解代谢的作用

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中国老年学杂志 2008年第1期28卷 19-21页

作者：孙婷何海涛孙聪洪敏吉林大学基础医学院生物化学教研室吉林长春130021

目的探讨外源性嘌呤核苷酸对吗啡致神经细胞核苷酸分解代谢增强的影响。方法应用MTT比色法检测给予吗啡同时给予嘌呤核苷酸(AMP和GMP及ATP和GTP)对PC12细胞存活率的影响;RT-PCR法检测腺苷脱氨酶(ADA)和黄嘌呤氧化酶(XO)mRNA表达。结果... 详细信息

目的探讨外源性嘌呤核苷酸对吗啡致神经细胞核苷酸分解代谢增强的影响。方法应用MTT比色法检测给予吗啡同时给予嘌呤核苷酸(AMP和GMP及ATP和GTP)对PC12细胞存活率的影响;RT-PCR法检测腺苷脱氨酶(ADA)和黄嘌呤氧化酶(XO)mRNA表达。结果同时给予吗啡和嘌呤核苷酸可改善吗啡对PC12细胞增殖的抑制作用。给予吗啡并补充AMP和GMP使得ADA mRNA表达与对照组及吗啡组比较均无差异,XO mRNA表达低于吗啡组(P<0.01);给予吗啡及ATP和GTP使得ADA mRNA表达仍高于对照组(P<0.05),XO mRNA表达低于吗啡组(P<0.05)。结论补充嘌呤核苷酸可改善吗啡对PC12细胞增殖的抑制作用,减弱吗啡所致的PC12细胞ADA和XO基因表达升高。

关键词：嘌呤核苷酸吗啡 PC12细胞腺苷脱氨酶黄嘌呤氧化酶

成年糖尿病大鼠重要器官组织SOD、MDA含量变化

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中国老年学杂志 2005年第4期25卷 412-413页

作者：李晓林李晓梅陆艳娟周磊王忠山范茹军吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心吉林长春130021 吉林大学白求恩制药厂

目的研究成年糖尿病大鼠重要器官组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化。方法测定对照组(C)、胰岛素治疗糖尿病组(ID)、糖尿病组(D)大鼠重要器官组织SOD活力、MDA含量。结果大鼠心、肝、肺、脾、胰组织D组与C组比较,SOD活力下... 详细信息

目的研究成年糖尿病大鼠重要器官组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化。方法测定对照组(C)、胰岛素治疗糖尿病组(ID)、糖尿病组(D)大鼠重要器官组织SOD活力、MDA含量。结果大鼠心、肝、肺、脾、胰组织D组与C组比较,SOD活力下降(P<0.05、P<0.01),肝、脾、胰组织ID组与C组比较,SOD活力下降(P<0.05),肺D组与ID组比较,ID组SOD活力提高(P<0.05),肾组织SOD活力无变化;D组心、肺、胰、脾组织中MDA含量升高,与C组比较,有显著差异(P<0.05,P<0.01);ID组心、胰、脾组织MDA含量与C组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01),心、脾组织MDA含量ID组与D组比较,有显著差异(P<0.05,P<0.01),肝、肾组织MDA含量无变化。结论糖尿病大鼠重要器官组织抗氧化酶水平低下,经胰岛素治疗后,有提高趋势。

关键词：糖尿病 SOD MDA 成年大鼠

FGFR3真核表达载体的构建及其在人白血病细胞系K562中的表达

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吉林大学学报（医学版） 2014年第3期40卷 465-470页

作者：许会静杜彤华孙艳李校堃肖业臣吉林大学基础医学院生物化学教研室吉林长春130021 吉林医药学院检验学院临床生物化学检验教研室吉林吉林132013 吉林大学第二医院肿瘤血液内科吉林长春130041

目的:构建成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)真核表达载体MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/purofgfr3-DN,并检测FGFR3蛋白在人白血病细胞系K562中的表达。方法:通过PCR法获得FGFR3全长基因(fgfr3-WT)和截短失活型的FGFR3(fgfr3-DN),经双酶切后与真核表达载体MSCV/puro连接,构建MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN重组表达质粒。经PCR、双酶切及测序鉴定正确后,脂质体介导转染至人白血病细胞系K562中,经puromycin抗性筛选后,Western blotting法和流式细胞术检测细胞中FGFR3蛋白的表达。结果:PCR法鉴定MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN重组质粒,2个质粒分别扩增出2 400bp的fgfr3-WT全长基因片段和1 200bp的fgfr3-DN截短型片段,表明成功扩增fgfr3-WT全长基因和1 200bp的fgfr3-DN基因;双酶切MSCV/puro-fgfr3-WT重组质粒,获得2 400bp的目的基因片段;测序显示,fgfr3-WT片段大小为2 400bp,Blast对比分析表明测序结果与GenBank中的FGFR3序列完全一致。fgfr3-DN片段大小与预先设计的序列完全一致,表明成功构建野生型FGFR3和突变失活型FGFR3真核表达载体;Western blotting检测,与对照组(K562-MSCV)比较,MSCV/puro-fgfr3-WT转染组(K562-WT)FGFR3蛋白表达水平增加,表达水平是对照组的10倍以上;MSCV/puro-fgfr3-DN转染组(K562-DN)的截短型的FGFR3(K562-DN)高表达,而对照组和K562-WT转染组则无此片段;流式细胞术检测,K562-WT组有57.5%的细胞高表达FGFR3,K562-DN组有41.5%的细胞高表达FGFR3-DN。结论:成功构建高表达野生型和突变型FGFR3的人白血病细胞系K562。

关键词：受体,成纤维细胞生长因子,3型真核表达载体 K562 细胞系基因转染白血病,粒-单核细胞,慢性