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医学免疫学课程“B to B”循环模式的构建与实践

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中国免疫学杂志 2024年第7期40卷 1507-1509页

作者：闫东梅杨巍付海英李冬倪维华齐妍袁红艳吉林大学基础医学院免疫学系长春130021

医学免疫学的培养目标是使学生注重免疫学理论联系临床实际,熟悉专业英语,自觉关注前沿知识,具备自主学习与终身学习的能力。但已有的教学模式缺少临床疾病相关事件讲解,实验内容及项目安排与临床严重脱节,对解决临床问题方面的科学研... 详细信息

医学免疫学的培养目标是使学生注重免疫学理论联系临床实际,熟悉专业英语,自觉关注前沿知识,具备自主学习与终身学习的能力。但已有的教学模式缺少临床疾病相关事件讲解,实验内容及项目安排与临床严重脱节,对解决临床问题方面的科学研究明显不足。本教研团队从临床实际(Bedside)问题出发,回到基础研究(Bench),再去临床解决实际问题(Bedside),建立免疫学教学的“B to B”循环模式,全面培养具有临床胜任能力、科研思维能力以及创新精神、国际视野的高级医学专业人才。

关键词：免疫学临床基础循环结合评价

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脓毒症患者中性粒细胞内钙水平下降影响细胞迁移研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第3期44卷 212-216页

作者：齐妍王闰楠王贺元柳忠辉吉林大学基础医学院免疫学系长春130021 吉林大学基础医学院遗传学系长春130021 吉林大学第一临床医院内分泌代谢科长春130021

目的探究细胞内钙水平与脓毒症患者中性粒细胞迁移功能障碍的关系。方法纳入吉林大学第一医院2017年12月—2018年9月临床诊断为脓毒症的21例患者血样,另外选取20名健康人作为对照组。采用磁珠分选试剂盒分离健康对照及脓毒症患者外周血... 详细信息

目的探究细胞内钙水平与脓毒症患者中性粒细胞迁移功能障碍的关系。方法纳入吉林大学第一医院2017年12月—2018年9月临床诊断为脓毒症的21例患者血样,另外选取20名健康人作为对照组。采用磁珠分选试剂盒分离健康对照及脓毒症患者外周血中性粒细胞,多通道微流控芯片技术检测中性粒细胞的趋化迁移能力。利用钙指示剂Fluo-4,采用流式细胞术检测健康对照和脓毒症患者中性粒细胞内钙水平,以及钙螯合剂BAPTA-AM与EDTA共同孵育的健康对照中性粒细胞内的钙水平。结果与健康对照组相比,脓毒症患者中性粒细胞内钙水平显著下降(P<0.01)。钙螯合剂BAPTA-AM与EDTA联合处理后,健康对照中性粒细胞内钙水平显著下降(P<0.01)。微流控技术发现细胞内钙下降后,中性粒细胞在微流控中的迁移速度、迁移距离以及间隙通过率均显著降低(P<0.01)。结论脓毒症患者中性粒细胞内钙水平降低可能是导致中性粒细胞迁移能力下降的重要原因。本研究为通过调节细胞内钙水平改善中性粒细胞迁移障碍提供了新的研究思路。

关键词：中性粒细胞脓毒症细胞迁移细胞内钙水平微流控技术

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微流控技术在抗感染免疫研究中的应用

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第1期44卷 34-38页

作者：柳博洋朱琳静方芳齐妍崔雪玲吉林大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学系吉林省神经免疫与临床免疫重点实验室长春130021 吉林建筑大学科学研究处长春130118 吉林大学基础医学院免疫学系长春130021

抗感染免疫是机体免疫系统抵抗病原体感染的第一道免疫防线,涉及多种免疫细胞活化、迁移及病原体清除过程。因此,免疫细胞行为及病原体检测就成为疾病诊断和预测的重要指标。近年来,基于微流控芯片开发的多种免疫细胞行为检测技术,以及... 详细信息

抗感染免疫是机体免疫系统抵抗病原体感染的第一道免疫防线,涉及多种免疫细胞活化、迁移及病原体清除过程。因此,免疫细胞行为及病原体检测就成为疾病诊断和预测的重要指标。近年来,基于微流控芯片开发的多种免疫细胞行为检测技术,以及细菌生长和药物筛查方法,因具有微型化、高通量、高敏感度、快速分析及低消耗等优势,已经在生物学、药理学及临床疾病研究和诊断中广泛使用。因此,本文对微流控技术在固有免疫细胞迁移、细胞核变形、致病菌及病毒快速检测等抗感染免疫研究中的应用进行综述,希望能进一步推动微流控技术在抗感染免疫研究和临床诊断中的应用发展。

关键词：微流控芯片感染免疫细胞迁移细菌快速检测

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IL-33的免疫调控作用

中国免疫学杂志 2024年第6期40卷 1335-1344,F0003页

作者：柳人莉刘利萍魏超杰李冬空军军医大学第一附属医院临床免疫科西安710005 吉林大学基础医学院免疫学系长春130000

IL-33是IL-1细胞因子超家族的成员,是机体病理性炎症、免疫稳态和纤维化过程中的关键调节剂。IL-33受体ST2在固有免疫细胞表面均有表达,在B细胞和T细胞的部分亚型表面也有所表达。IL-33是一种双重功能蛋白。正常情况下,IL-33的N端部分... 详细信息

IL-33是IL-1细胞因子超家族的成员,是机体病理性炎症、免疫稳态和纤维化过程中的关键调节剂。IL-33受体ST2在固有免疫细胞表面均有表达,在B细胞和T细胞的部分亚型表面也有所表达。IL-33是一种双重功能蛋白。正常情况下,IL-33的N端部分驻留在其表达细胞的细胞核中,当细胞发生损伤或坏死时作为细胞因子释放到细胞外发挥免疫调节特性。IL-33不同表达形式的细胞定位不同,可能发挥的免疫学作用也不相同。IL-33的免疫学作用具有很强的多样性,细胞因子IL-33在固有免疫应答中起放大增强的作用,而细胞核内储存的全长型(FL)IL-33通过结合抑制NF-κB发挥抑制炎症的作用。IL-33/ST2轴在先天性和获得性免疫反应中都起着关键作用。在先天免疫中,IL-33和第2组先天淋巴细胞(ILC2)为快速免疫应答和组织稳态提供了一个重要的轴。在获得性免疫中,IL-33与树突状细胞、Th2细胞、滤泡辅助性T细胞(Tfh)和调节性T细胞(Tregs)相互作用。IL-33/ST2信号传导以自分泌和旁分泌方式触发不同细胞类型的促肿瘤免疫反应或抗肿瘤免疫反应。此外IL-33和细胞代谢之间的相互作用也是影响免疫系统的潜在机制之一。

关键词： IL-33 FLIL-33 MIL-33 免疫调节肿瘤免疫代谢

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烟曲霉锌稳态相关基因研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第1期44卷 81-85页

作者：兰冠达贺丹王丽吉林大学基础医学院病原生物学系长春130021

烟曲霉是一种通过空气传播的机会性致病真菌。其感染免疫功能低下患者肺部并引起严重的侵袭性曲霉病。锌是微生物生长所必需的微量元素,所有真菌包括烟曲霉生长都需要锌元素。有研究表明宿主体内的真菌毒力高低与真菌摄取锌的能力直接... 详细信息

烟曲霉是一种通过空气传播的机会性致病真菌。其感染免疫功能低下患者肺部并引起严重的侵袭性曲霉病。锌是微生物生长所必需的微量元素,所有真菌包括烟曲霉生长都需要锌元素。有研究表明宿主体内的真菌毒力高低与真菌摄取锌的能力直接相关。由于元素锌在人体内大部分与锌结合蛋白结合导致在宿主组织微环境中的离子浓度远低于真菌最适生长浓度。烟曲霉演化出几种锌转运蛋白,使烟曲霉能够在锌缺乏的条件下有效吸收锌元素,同时抵抗锌元素过量,防止对烟曲霉细胞造成损害。本文将总结概述烟曲霉锌稳态调控对其生长发育及毒力的作用以及相关基因。明确烟曲霉对元素锌水平调控基因的研究现状并探讨干扰烟曲霉锌稳态是否会成为开发治疗侵袭性曲霉病的新一代辅助治疗措施和真菌治疗方案。

关键词：烟曲霉锌稳态毒力药物靶点

基于幽门螺杆菌hp0169基因三维结构的生物信息学分析

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 739-748页

作者：林玲辉李娜尹晓燕王晓凌胡亚平刘威费瑞田新利邢台医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室河北邢台054000 陆军军医大学基础医学院全军免疫学研究所重庆400038 吉林大学基础医学院细胞生物学系吉林长春130021

目的:克隆幽门螺杆菌(Hp) hp0169基因并进行晶体学研究,分析其二级结构和三维结构。方法:由UniProt数据库中检索Hp NCTC26695菌株hp0169基因及其编码蛋白序列,采用生物信息学方法分析Hp重组胶原蛋白酶(HpPrtC)蛋白理化性质,SOPMA和DNASt... 详细信息

目的:克隆幽门螺杆菌(Hp) hp0169基因并进行晶体学研究,分析其二级结构和三维结构。方法:由UniProt数据库中检索Hp NCTC26695菌株hp0169基因及其编码蛋白序列,采用生物信息学方法分析Hp重组胶原蛋白酶(HpPrtC)蛋白理化性质,SOPMA和DNAStrar软件预测HpPrtC蛋白二级结构特征,SWISS-MOPEL软件构建HpPrtC蛋白三维结构,IEDB和ABCpred软件预测HpPrtC蛋白B淋巴细胞抗原表位,SYFPEITHI网站预测T淋巴细胞抗原表位,专家库(EP)算法和随机森林(RF)算法预测HpPrtC蛋白可结晶性。原核表达HpPrtC重组蛋白,经Ni^(2+)亲和层析和分子筛技术纯化蛋白,结晶试剂盒筛选HpPrtC的结晶条件。结果:hp0169基因共包含1 269个碱基配对,编码蛋白全长422个氨基酸,理论等电点为7.64,相对分子质量为47 300。HpPrtC蛋白为亲水性、可溶性蛋白。HpPrtC蛋白α螺旋的氨基酸数量占全部氨基酸数量百分率为35.78%,β片层为18.72%,β转角为6.87%,无规则卷曲为38.63%。抗原表位分析,HpPrtC蛋白含有B淋巴细胞的5个优势线性表位和3个构象表位及多个T淋巴细胞潜在优势抗原表位。同源建模,HpPrtC蛋白呈二聚体,单体由β折叠围成桶状结构,周围被α螺旋和无规则卷曲围绕。HpPrtC蛋白为中等难度结晶,且无信号肽和跨膜螺旋,在0.2 mol·L^(-1)氯化镁、 0.1 mol·L^(-1)三羟甲基氨基甲烷(Tris)、3.4 mol·L^(-1)己二醇和pH 8.5条件下出现细小成簇的针状晶体。结论:HpPrtC是一种亲水型蛋白,呈二聚体构造,在适宜条件下呈细小成簇针状晶体,其具有T淋巴细胞和B淋巴细胞优势抗原表位,可作为Hp疫苗设计的抗原,用于构建多价融合疫苗或多表位疫苗,本研究结果为Hp的防治提供了实验基础。

关键词：幽门螺杆菌 hp0169基因抗原表位蛋白结晶生物信息学

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金钱白花蛇核酸试纸条快速鉴定及其试剂盒的研发

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中药材 2024年 1390-1396页

作者：于涵刘美琳王艺潼王艳双母润红张丽华吉林大学白求恩第一医院病理科吉林大学白求恩第一医院神经内科北华大学基础医学院吉林雷宁食品药品检测技术服务有限公司

目的:建立金钱白花蛇PCR-免疫胶体金试纸条快速分子鉴定方法,并组合成快速基因检测的试剂盒。方法:筛选基因组DNA的提取方法及试剂,根据金钱白花蛇mt DNA cytb基因设计种属特异性引物并标记,优化最佳反应条件,研发一体化PCR快速基因检... 详细信息

目的:建立金钱白花蛇PCR-免疫胶体金试纸条快速分子鉴定方法,并组合成快速基因检测的试剂盒。方法:筛选基因组DNA的提取方法及试剂,根据金钱白花蛇mt DNA cytb基因设计种属特异性引物并标记,优化最佳反应条件,研发一体化PCR快速基因检测试剂盒,采用分子克隆及基因测序技术制备对照药材DNA克隆液,利用免疫胶体金试纸条进行结果检测,并对试剂盒的特异性、重现性、灵敏度、稳定性进行评价。结果:基因组DNA的完整性、浓度、纯度均满足PCR的要求,引物在退火温度57℃时,循环20次时,免疫胶体金试纸条显示金钱白花蛇对照药材及正品出现两条红色条带,混淆品及空白对照品仅出现一条红色条带。对照药材克隆测序结果与金钱白花蛇mt DNA cytb基因同源性为100%。一体化快速基因检测试剂盒的特异性、重现性、稳定性、灵敏度均更优于相同样品在琼脂糖凝胶电泳的结果。结论:PCR-免疫胶体金试纸条鉴定方法能够有效地识别金钱白花蛇及其混淆品,且操作简便快速、结果判断直观,更适合实地现场检测、具有良好的推广应用前景。

关键词：金钱白花蛇免疫胶体金试纸条分子克隆聚合酶链式反应(PCR) 真伪鉴定

单细胞组学揭示免疫补体系统抑制作为牙周炎与阿尔茨海默病的共同病理机制

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国际老年医学杂志 2024年第4期45卷 390-396页

作者：孙天萌孙泽文赵天元徐梦钰孙宏晨安政雯吉林大学白求恩口腔医学院长春130021

目的牙周炎和阿尔茨海默病(AD)作为老年人常见病,发病率随年龄增长而增高。为了探究两种疾病之间是否存在共同致病因素,从而为AD的早期诊断提供理论依据,本研究利用单细胞转录组数据和Bulk RNA-seq测序数据解析牙周炎与AD之间致病风险... 详细信息

目的牙周炎和阿尔茨海默病(AD)作为老年人常见病,发病率随年龄增长而增高。为了探究两种疾病之间是否存在共同致病因素,从而为AD的早期诊断提供理论依据,本研究利用单细胞转录组数据和Bulk RNA-seq测序数据解析牙周炎与AD之间致病风险的相关性。方法从基因表达数据集(GEO)数据库下载牙周炎(GSE164241)和AD(GSE157827)单细胞数据,包括3例患者样本与3例对照。对单细胞数据进行质控、数据整合、降维聚类、细胞类型注释及差异表达基因鉴定。比较两种疾病组间差异表达基因,获取共有的差异表达基因。随后对共有差异表达基因进行富集分析,并针对基因所编码蛋白构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络以了解蛋白之间的相互作用关系。从GEO数据库下载牙周炎(GSE16134)与AD(GSE63060)的Bulk RNA-seq芯片测序表达矩阵与样本信息,验证单细胞数据中PPI的核心基因表达量,评估基因与疾病的相关性。结果通过对比牙周炎和AD的样本数据分析,发现牙周炎与AD中共有的免疫细胞为CD163+髓系细胞群,其中牙周炎来源的髓系细胞,疾病组/对照组发现1 934个下调的差异表达基因,AD来源的髓系细胞,疾病组/对照组发现232个下调的差异表达基因,两者取交集后得到49个共有的下调差异表达基因,对其进行富集分析,主要富集于髓系细胞和补体相关反应等。进一步分析表明补体通路中的STAB1基因表达与牙周炎和AD呈显著负相关(P免疫细胞,其中补体通路中STAB1基因是两种疾病发生过程中共同下调的免疫相关基因,并且与疾病的发生呈显著负相关,提示牙周炎患者中STAB1基因表达的检测可作为AD早期诊断和治疗的潜在靶点。

关键词：牙周炎阿尔茨海默病免疫反应髓系细胞补体

白屈菜碱对小鼠肺癌细胞皮下移植瘤生长和血管生成的抑制作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 612-619页

作者：金学军卢楚沅延边大学分子药物研究中心吉林延吉133002 延边大学医学院口腔医学系吉林延吉133002

目的:探讨白屈菜碱对肺癌移植瘤小鼠肿瘤生长和血管生成的影响,并阐明其作用机制。方法:选取32只健康C57BL/6小鼠,制备Lewis肺癌移植瘤小鼠模型。将小鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠)、低剂量白屈菜碱组(25 mg·kg^(-1)白屈菜碱)、高剂量... 详细信息

目的:探讨白屈菜碱对肺癌移植瘤小鼠肿瘤生长和血管生成的影响,并阐明其作用机制。方法:选取32只健康C57BL/6小鼠,制备Lewis肺癌移植瘤小鼠模型。将小鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠)、低剂量白屈菜碱组(25 mg·kg^(-1)白屈菜碱)、高剂量白屈菜碱组(50 mg·kg^(-1)白屈菜碱)和阳性对照组(60 mg·kg^(-1)环磷酰胺),每组8只。称量各组小鼠移植瘤质量并计算抑瘤率,计算各组小鼠胸腺指数和脾脏指数,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清中白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(INF-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况并计算微血管密度(MVD)及VEGF蛋白表达评分,Westernblotting法检测各组小鼠肿瘤组织中核因子κB(NF-κB)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达水平。结果:与模型组比较,低和高剂量白屈菜碱组及阳性对照组小鼠移植瘤质量均降低(P免疫器官和抑制肿瘤血管生成,可能通过靶向NF-κB/HIF-1α信号通路和下调NF-κB及HIF-1α蛋白表达水平发挥治疗作用。

关键词：白屈菜碱核因子κB 缺氧诱导因子1α 肺癌移植瘤血管生成