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新藤黄酸调控糖原代谢途径抑制犬骨肉瘤细胞恶性生物学行为的机制研究

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畜牧兽医学报 2025年

作者：康慧杰沙季辰杨天元张云彤侯晓昱李思瑶王维千侯庆典张帅杨昊天赵元范宏刚东北农业大学动物医学学院黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院

本研究基于肿瘤细胞糖原代谢途径探究新藤黄酸（gambogenic acid，GNA）抑制犬骨肉瘤（osteosarcoma，OS）细胞恶性生物学行为的作用及机制。选用Mckinely犬OS细胞系，通过CCK-8试验确定GNA的给药剂量；通过平板克隆试验探究GNA对犬OS... 详细信息

本研究基于肿瘤细胞糖原代谢途径探究新藤黄酸（gambogenic acid，GNA）抑制犬骨肉瘤（osteosarcoma，OS）细胞恶性生物学行为的作用及机制。选用Mckinely犬OS细胞系，通过CCK-8试验确定GNA的给药剂量；通过平板克隆试验探究GNA对犬OS细胞增殖的抑制作用；通过划痕愈合试验、Transwell试验及Western blot试验探究GNA对犬OS细胞迁移及侵袭的抑制作用；通过糖原代谢物试剂盒、酶活力试剂盒、RT-PCR及Western blot试验探究GNA对犬OS糖原代谢途径的影响。通过CCK-8试验确定了后续细胞试验所需剂量，低剂量(0.24 μmol·L-1)、中剂量(0.28 μmol·L-1)及高剂量(0.32 μmol·L-1)；细胞恶性生物学行为相关试验结果表明，GNA呈剂量依赖性地显著抑制犬OS的增殖、迁移及侵袭行为（P0.05）；Western blot试验结果与RT-PCR结果基本一致；细胞免疫荧光检测结果表明，GNA能抑制PYGL入核，且PYGL的平均荧光强度随GNA浓度升高而逐渐降低（P<0.05）。GNA能抑制Mckinely犬OS细胞的增殖、迁移与侵袭且与PYGL所介导的糖原分解途径被抑制相关。

关键词：犬骨肉瘤新藤黄酸糖原恶性生物学行为

稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的THP-1细胞系的建立与应用

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中国兽医科学 2025年

作者：李玲霞张旭辉令小东韩生义吴锦艳尚佑军青海大学农牧学院青海大学畜牧兽医科学院中国农业科学院兰州兽医研究所

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与... 详细信息

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与慢病毒包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共同转染至HEK293T细胞，通过包装获得表达N蛋白的慢病毒。接着将慢病毒感染THP-1细胞，再使用嘌呤霉素筛选，之后利用细胞有限稀释法得到稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，最后采用ELISA和Western-blot检测该细胞系对PPRV激活炎症反应的影响。结果表明，成功构建了THP-1-N细胞系，不仅该细胞系活力较好，而且具备稳定传代的能力。且稳定表达N蛋白的THP-1细胞可显著促进由PPRV感染所诱导的IL-1β表达，进而激活炎症反应。综上所述，成功建立了一种能够稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，为PPRV感染及致病机制研究提供了重要的生物材料。

关键词：小反刍兽疫病毒 N蛋白慢病毒细胞系炎症小体

4例犬恶性黑色素瘤病理学和PNL-2免疫组织化学染色检查

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 19-24页

作者：贾茜涵石俊超张竞马莹刘政陆慧君贺文琦吉林大学动物医学学院吉林长春130062

为了对4例疑似犬肿瘤的临床病例进行确诊,本文对临床送检的4例疑似犬肿瘤的肿物样本进行组织切片制作,经苏木精-伊红(H.E.)染色后,镜下可见增生的细胞排列呈束状、片状、巢状和螺纹状等,细胞呈梭形或多角形,部分细胞胞浆内含有黑色素颗... 详细信息

为了对4例疑似犬肿瘤的临床病例进行确诊,本文对临床送检的4例疑似犬肿瘤的肿物样本进行组织切片制作,经苏木精-伊红(H.E.)染色后,镜下可见增生的细胞排列呈束状、片状、巢状和螺纹状等,细胞呈梭形或多角形,部分细胞胞浆内含有黑色素颗粒,符合黑色素细胞肿瘤的特征;为了进一步观察细胞形态并对肿物进行确诊,使用黑色素瘤相关抗原(PNL-2)对肿瘤细胞进行免疫组织化学(IHC)染色,并用二氨基联苯胺(DAB)和3-氨基-9-乙基卡唑(AEC)显色液对其显色,结果均为恶性黑色素瘤(MM)。本试验通过对肿物的细胞形态学特征和IHC染色结果综合分析,将4例病例诊断为MM。试验结果不仅为犬MM的病理诊断提供参考,还为比较医学中MM的确诊提供参考依据。

关键词：犬恶性黑色素瘤(MM) 苏木精-伊红(H.E.) 免疫组织化学(IHC) 黑色素瘤相关抗原(PNL-2)

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抗猪链球菌植物乳杆菌细菌素生物学特性及其编码基因簇分析

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饲料工业 2025年

作者：邹鸣晓王云飞苏惠李涵诺许诺李国江董文龙吉林农业科技学院动物科技学院吉林农业大学动物科学技术学院吉林省预防兽医学重点实验室吉林省猪生态养殖及疫病防控科技创新中心

研究基于猪链球菌（Streptococcus suis，S. suis）耐药性加剧现状，分析植物乳杆菌细菌素抗菌生物学特性及其编码基因簇，旨在探究植物乳杆菌细菌素作为猪链球菌替抗产品的潜力。通过16S rRNA基因测序方法对分离获得的乳酸菌菌株进行... 详细信息

研究基于猪链球菌（Streptococcus suis，S. suis）耐药性加剧现状，分析植物乳杆菌细菌素抗菌生物学特性及其编码基因簇，旨在探究植物乳杆菌细菌素作为猪链球菌替抗产品的潜力。通过16S rRNA基因测序方法对分离获得的乳酸菌菌株进行鉴定，建立并分析菌株生长曲线及其发酵上清液抑菌动力学曲线，确定菌株最佳培养时间，并测定发酵上清液蛋白酶稳定性、热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性。通过全基因组测序技术分析菌株基因组信息及细菌素编码基因簇。结果显示：分离得到植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum，L. plantarum）一株（W-1），其发酵上清液对猪链球菌有较好的抗菌活性。植物乳杆菌W-1的对数生长期为发酵4～6 h，24 h内其最佳培养时间约为18 h，此时其发酵上清液抗菌活性最强。植物乳杆菌W-1发酵上清液对胰蛋白酶敏感性较高，推测其中产生的抗菌活性的物质细菌素。该细菌素具有优异的热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性，于40～100 ℃、pH 2.0～10.0、紫外线处理30～120 min后均能保持较强的抗菌活性。全基因组测序结果表明，植物乳杆菌W-1染色体基因组大小为3 297 581 bp，GC占比44.47％。细菌素编码基因簇结果中，由结构基因编码参与合成ClassⅡb类细菌素PlnJK、PlnEF的核心肽起重要抗菌作用。植物乳杆菌W-1所产植物乳杆菌素对猪链球菌具有良好且稳定的抗菌效果，有作为猪链球菌替抗品的潜质。

关键词：细菌素猪链球菌全基因组测序基因簇植物乳杆菌

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经验的重铸:曹文轩儿童文学创作的方法论

当代文坛 2025年第1期 44-49页

作者：张丛皞吉林大学文学院

曹文轩的创作始终在与随机应变的日常生活做斗争。他为了能够让作品获得深入人心的超时空的情感认同,不断调动自己个人化的童年经验,并且借助心灵的创伤与弥合,成长的动荡与得失,自然的生趣与天性等方式,营造小说的情节模式与心灵秩序... 详细信息

曹文轩的创作始终在与随机应变的日常生活做斗争。他为了能够让作品获得深入人心的超时空的情感认同,不断调动自己个人化的童年经验,并且借助心灵的创伤与弥合,成长的动荡与得失,自然的生趣与天性等方式,营造小说的情节模式与心灵秩序。而这种观念与方法,与曹文轩作为中文系教授的身份也有着内在联系,专业知识和经典体系一直是他文学创作的重要参照。

关键词：曹文轩儿童文学创伤成长

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裂解基因E和核酸酶基因串联表达载体的构建及大肠杆菌菌影的制备

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中国生物制品学杂志 2007年第8期20卷 557-561页

作者：王丽哲雷连成韩文瑜吉林大学畜牧兽医学院预防兽医系长春130062

目的构建噬菌体裂解基因E和核酸酶基因串联表达载体,制备高质量的大肠杆菌菌影。方法自行设计一对引物,PCR扩增PhiX174噬菌体裂解基因E,将该基因亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建大肠杆菌菌影的表达载体pGEX-E。在E基因基础上与辅助... 详细信息

目的构建噬菌体裂解基因E和核酸酶基因串联表达载体,制备高质量的大肠杆菌菌影。方法自行设计一对引物,PCR扩增PhiX174噬菌体裂解基因E,将该基因亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建大肠杆菌菌影的表达载体pGEX-E。在E基因基础上与辅助基因葡萄球菌核酸酶A(SN)基因串联,并插入pGEX-6P-1载体,构建双基因串联高效表达载体pGEX-E-5aaLinker-SN和pGEX-E-15aaLinker-SN,采用CaCl2法将其转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,制备大肠杆菌菌影。结果裂解基因E单基因及串联基因已成功插入融合表达载体pGEX-6P-1,所构建的大肠杆菌菌影表达载体pGEX-E、pGEX-E-5aaLinker-SN和pGEX-E-15aaLinker-SN,诱导后经透射电镜及活菌计数显示大肠杆菌已发生不同程度裂解,制成了大肠杆菌菌影。电镜下菌影形态完整,内容物已释放到胞外。结论已成功构建了噬菌体裂解基因E单基因及裂解基因和核酸酶基因串联基因表达载体,并制成了大肠杆菌菌影,为进一步研究菌影这一新型的疫苗及佐剂形式奠定了基础。

关键词：噬菌体PhiX174 裂解基因E 葡萄球菌核酸酶A 菌影

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托勒密时期的埃及王权形象塑造与身份认同

史学集刊 2025年第1期 109-120页

作者：史海波李智琳吉林大学历史文化学院世界史系吉林长春130012

作为外族统治者的托勒密王朝历代国王,通过采用埃及传统王权符号、沿袭前朝本土法老的外观和王名等方式,在具象层面构建了正统的埃及王权形象。同时,托勒密统治者对埃及本土宗教和仪式表现出虔敬的态度,并以此塑造合法的埃及法老身份,... 详细信息

作为外族统治者的托勒密王朝历代国王,通过采用埃及传统王权符号、沿袭前朝本土法老的外观和王名等方式,在具象层面构建了正统的埃及王权形象。同时,托勒密统治者对埃及本土宗教和仪式表现出虔敬的态度,并以此塑造合法的埃及法老身份,包括神化自身,强调神圣世系的继承,以及宣传恢复国家秩序和维护传统宗教仪式等方式。然而从现实情况来看,托勒密统治者更为重视希腊君主的身份,法老身份只是他们用于维持统治的宣传工具。由于现实中经济、阶层和种族矛盾的存在,包括祭司、权贵和平民在内的埃及臣民对外族法老身份的认同也相对有限。在征服与统治的背景下,不同文明之间很难形成完全的互相认同。

关键词：托勒密时期古埃及王权形象身份认同

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海洋生物鲎抗菌肽研究进展

中国水产 2007年第8期 81-82页

作者：韩艳韩文瑜雷连成冯新王教玉程福亮吉林大学畜牧兽医学院预防兽医系

抗菌肽是基因编码的肽类抗菌分子，广泛分布于整个生物界，是脊椎动物、无脊椎动物和植物先天免疫的关键因子。本文综述了海洋动物鲎目前抗菌肽的种类、结构、功能及分子生物学等研究状况。

关键词：抗菌肽海洋生物无脊椎动物分子生物学鲎基因编码先天免疫海洋动物

RNA干扰IDH2基因对HCT-8细胞增殖能力的影响

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吉林大学学报（医学版） 2012年第4期38卷 649-652,604页

作者：徐晓芳宋晗星邢沈阳吕强高江明赵娜常乐高峰宫鹏涛李建华张国才张西臣吉林大学畜牧兽医学院动物科学系吉林长春130062 吉林大学白求恩医学院临床医学系吉林大学畜牧兽医学院预防兽医系吉林长春130062

目的:研究RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞IDH2基因表达的抑制作用及干扰后对HCT-8细胞增殖的影响,为结肠癌的基因靶向治疗提供理论依据。方法:实验分siRNA干扰质粒转染组、阴性质粒对照组和HCT-8细胞空白对照组。构建靶向基因IDH2的si... 详细信息

目的:研究RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞IDH2基因表达的抑制作用及干扰后对HCT-8细胞增殖的影响,为结肠癌的基因靶向治疗提供理论依据。方法:实验分siRNA干扰质粒转染组、阴性质粒对照组和HCT-8细胞空白对照组。构建靶向基因IDH2的siRNA真核绿色荧光载体重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2,利用FuGENE HD转染剂转染HCT-8细胞,通过荧光定量PCR检测IDH2mRNA的表达情况及MTT法检测结肠癌HCT-8细胞增殖变化。结果:在荧光显微镜下进行细胞计数,细胞转染率为74%。实时荧光定量PCR检测,siRNA重组质粒PGPU6/GFP/Neo-IDH2对IDH2基因表达的抑制率为85.02%,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。MTT检测,干扰质粒转染组细胞的增殖能力明显低于空白对照组(P<0.05)。结论:抑制IDH2基因的表达可影响结肠癌细胞的增殖能力,提示IDH2基因在结肠癌的发生发展中起重要作用,抑制IDH2基因的表达可能成为一种治疗结肠癌的方法。

关键词： RNA干扰 IDH2基因人结肠癌HCT-8细胞

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