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小檗碱对多囊卵巢综合征小鼠模型的作用及其机制:基于肠道菌群分析

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中华妇产科杂志 2024年第3期59卷 215-226页

作者：信鸽张凌云邱虹溶王杨淳隋雨宏薛百功王红蕾长春工业大学化学与生命科学学院食品科学与工程系长春130012 吉林大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学系长春130012

目的探究小檗碱(又名:黄连素)对多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠的作用,同时探究黄连素对肠道菌群及肠道菌群对PCOS的影响。方法以脱氢表雄酮辅以高脂饲料喂养建立PCOS小鼠模型,并给予黄连素进行干预治疗,实验分为C组(即空白对照)、M组(即... 详细信息

目的探究小檗碱(又名:黄连素)对多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠的作用,同时探究黄连素对肠道菌群及肠道菌群对PCOS的影响。方法以脱氢表雄酮辅以高脂饲料喂养建立PCOS小鼠模型,并给予黄连素进行干预治疗,实验分为C组(即空白对照)、M组(即PCOS模型小鼠)和T组(即PCOS模型小鼠予黄连素治疗),定时对小鼠监测体重、动情周期,行腹腔葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验;实验结束后,对小鼠肝脏、卵巢及脂肪垫称量湿重,并行HE染色观察,验证是否造模成功及黄连素的效果。同时取粪便样本进行16S rRNA肠道菌群分析。结果 PCOS造模成功,黄连素缓解了T组小鼠的动情周期紊乱,且显著缓解了小鼠的脂肪积聚和糖代谢异常,T组小鼠脂肪垫细胞截面积为(2 858±146)μm^(2),显著低于M组[(9 518±347)μm^(2)],两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论黄连素可能通过干预肠道菌群的变化缓解PCOS症状。

关键词：多囊卵巢综合征小檗碱肠道微生物组疾病模型,动物

生物化学与分子生物学教学实验室精细化管理的探索与实践

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基础医学教育 2024年第8期26卷 660-664页

作者：廖志银翁登坡霍朝霞邹玲周恒达于晓虹浙江大学医学院基础医学教学实验中心杭州310058

生物化学与分子生物学教学实验室是培养学生基本实验技能和科研实践能力的重要场所,其管理水平直接影响着实验教学的教学质量和教学效率。浙江大学基础医学教学实验中心充分利用网络优势,以人为核心,建立多个线上教学管理平台,同时利用... 详细信息

生物化学与分子生物学教学实验室是培养学生基本实验技能和科研实践能力的重要场所,其管理水平直接影响着实验教学的教学质量和教学效率。浙江大学基础医学教学实验中心充分利用网络优势,以人为核心,建立多个线上教学管理平台,同时利用二维码对学科细节进行优化管理,为实验教学线下资源转化为数字化、信息化、精细化管理提供了新途径;另外,对实验耗材、生化固废、玻璃容器等的常规管理进行了细节优化,也为实验室优化管理和创新教学积累了宝贵经验。

关键词：生物化学与分子生物学实验教学教学实验室二维码精细化管理

基于TLR4/NF-κB p65信号通路研究左归丸防治产前应激子代大鼠卵巢储备功能下降的分子机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 67-76页

作者：吕银娟张玮珩陈思易田文静龚健孟宇豪何欢江晓翠赵敏萧闵湖北中医药大学基础医学院武汉430065 湖北时珍实验室武汉430061 湖北中医药大学中医学院武汉430061 湖北中医药大学实验动物中心武汉430065

目的:观察左归丸对产前应激(PS)模型大鼠子代雌性大鼠卵巢储备功能的影响,基于Toll样受体4/核转录因子-κB p65(TLR4/NF-κB p65)信号通路探讨其作用机制。方法:制备32只孕鼠,随机分为正常组、模型组、左归丸组(18.9 mg·kg^(-1))、维生... 详细信息

目的:观察左归丸对产前应激(PS)模型大鼠子代雌性大鼠卵巢储备功能的影响,基于Toll样受体4/核转录因子-κB p65(TLR4/NF-κB p65)信号通路探讨其作用机制。方法:制备32只孕鼠,随机分为正常组、模型组、左归丸组(18.9 mg·kg^(-1))、维生素E组(1.44 mg·kg^(-1))4组,每组8只,除正常组以外,其余3组在确定妊娠的第11天开始通过慢性不可预测轻度应激法(CUMS)复制PS孕鼠模型,造模的同时进行相应药物的灌胃治疗,直至生产。以蔗糖偏好实验(SPT)、旷场实验(OFT)、血清皮质酮(CORT)含量评估PS孕鼠模型。通过监测发情周期、观察卵巢形态学变化、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测75日龄子代大鼠血清雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒管激素(AMH)水平评价卵巢储备功能;计算卵巢指数和子宫指数;ELISA检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察出生当天和75日龄子代卵巢组织形态的改变;免疫荧光法(IF)检测75日龄子代大鼠卵巢中NF-κB p65的入核情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织TLR4、NF-κB p65等相关蛋白的表达。结果:与正常组比较,出生当天模型组子代仔鼠原始卵泡数大幅度显著减少(P<0.01),75日龄模型组子代大鼠动情周期紊乱,卵巢指数、子宫指数显著降低(P<0.01),黄体数减少,闭锁卵泡显著增多(P<0.01),性成熟模型组子代大鼠血清AMH、E2水平显著降低(P<0.01),LH、FSH水平升高(P<0.01),IL-1β、TNF-α水平明显升高(P<0.05,P<0.01),TLR4、NF-κB p65、髓分化因子88(MyD88)、磷酸化NF-κB抑制因子α(p-IκBα)蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,出生当天左归丸组,维生素E组仔鼠原始卵泡数显著增多(P<0.01),75日龄左归丸组、维生素E组大鼠动情周期恢复,卵巢指数明显升高(P<0.05,P<0.01),子宫指数均明显升高(P<0.05),黄体数均显著增加(P<0.01),闭锁卵泡数均显著减少(P<0.01),血清AMH、E2水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),LH、FSH水平明显降低(P<0.05,P<0.01),IL-1β、TNF-α水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),TLR4、NF-κB p65、MyD88、p-IκBα蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:左归丸能有效改善先天肾虚子代大鼠卵巢储备功能,作用机制可能与TLR4/NF-κB p65信号通路有关。

关键词：产前应激子代 Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB p65(NF-κB p65)信号通路左归丸卵巢储备功能

MAOA/FOXA1在前列腺癌神经内分泌化进展中的动态变化特征

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中国实验动物学报 2024年第6期32卷 683-690页

作者：韩昊李惠张彩勤赵菊梅魏晓丽师长宏延安大学基础医学院陕西延安716000 空军军医大学实验动物中心西安710032

目的探索前列腺癌神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation,NED)进展中单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)和叉头框蛋白A1(forkhead box A1,FOXA1)的动态变化特征,为临床神经内分泌型前列腺癌(neuroendocrine prostate cancer,NEPC)的治疗提供新的策略。方法通过恩杂鲁胺(enzalutamide,ENZ)长期持续诱导的方式建立NED的细胞模型和小鼠移植模型;采用Western Blot和Real-time PCR方法检测MAOA、FOXA1在NED中的动态表达;选用GEO数据库分析在多种NED模型中MAOA与FOXA1的动态变化趋势;构建前列腺癌细胞系小鼠移植模型,通过免疫组化分析体内模型中MAOA、FOXA1在NED中的动态表达;通过慢病毒转染干预MAOA,检测MAOA对FOXA1的调控作用。结果MAOA与FOXA1在NED过程中均呈现先升高后降低的动态变化特征;敲低前列腺癌细胞中MAOA可以导致FOXA1的表达降低,这可能是MAOA通过FOXA1在NED的不同阶段发挥不同作用。结论MAOA和FOXA1在NED过程中呈先升高后降低的趋势,MAOA的表达能影响FOXA1的水平,MAOA/FOXA1可能在NED过程中发挥动态调控的作用。

关键词：神经内分泌分化恩杂鲁胺 MAOA FOXA1

案例导入结合Boppps教学法在中医临床基础课程教学中的应用探索与实践

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时珍国医国药 2024年第8期35卷 2005-2007页

作者：郭迪长春中医药大学基础医学院吉林长春130000

中医临床基础课程是培养中医临床思维的重要课程。通过研究发现其在培养学生中医临床思维方面存在以下问题:教学内容重理论,轻实践;教学过程偏讲授,少互动;课程思政缺少特色;教学评价手段单一。针对以上问题进行改革,落实“以学生为中... 详细信息

中医临床基础课程是培养中医临床思维的重要课程。通过研究发现其在培养学生中医临床思维方面存在以下问题:教学内容重理论,轻实践;教学过程偏讲授,少互动;课程思政缺少特色;教学评价手段单一。针对以上问题进行改革,落实“以学生为中心”教育理念,采用线上线下混合教学模式。通过课前学生线上自学、采集医案、制作视频,激励学习意识,促进课内向课外的迁移;通过课上开展现场互动,实时反馈,渗透传统伦理文化,共享新科研的成果为学生创造灵活、凝聚的学科情境;通过课后义诊活动,将理论运用于实践,强化学习需求。打破了过去学生“坐享其成”“默不作声”“应付作业”的学习方式,使其参与到课前准备、课上活动、课后义诊的整个教学活动中,真正成为课堂的主人。

关键词：中医临床思维教学情境案例教学法

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胡椒碱逆转氟西汀所致骨破坏作用的实验研究

中国药理学通报 2024年第5期40卷 920-928页

作者：潘凤好王俊如李瑜张光伟李晨睿西北工业大学生命学院陕西西安710072 西安培华学院医学院中心实验室陕西西安710199 西安医学院基础医学部陕西西安710021

目的针对氟西汀的骨破坏作用,研究胡椒碱与其联用的骨保护作用并探讨作用机制。方法建立SD大鼠去卵巢模型,分别灌胃给予雌二醇、氟西汀、胡椒碱及氟西汀与胡椒碱联用处理共8周。双能X射线吸收法测量骨密度;microCT检测骨微观结构;三点... 详细信息

目的针对氟西汀的骨破坏作用,研究胡椒碱与其联用的骨保护作用并探讨作用机制。方法建立SD大鼠去卵巢模型,分别灌胃给予雌二醇、氟西汀、胡椒碱及氟西汀与胡椒碱联用处理共8周。双能X射线吸收法测量骨密度;microCT检测骨微观结构;三点弯曲检测骨生物力学性能;ELISA法检测血清骨转换生化指标。培养大鼠原代成骨细胞,检测药物处理对细胞成骨分化及矿化的影响。结果与去卵巢组比,雌二醇及胡椒碱明显提高骨密度和生物力学性能,并改善骨小梁微观结构;给予氟西汀后,骨密度、骨生物力学性能和骨小梁微观结构进一步恶化,并加速骨转换;胡椒碱与氟西汀联用后,能明显减少氟西汀对骨的破坏作用。氟西汀明显降低原代成骨细胞的分化和矿化能力;胡椒碱明显提高其成骨分化。结论氟西汀引起去卵巢大鼠骨质进一步流失,其机制可能与抑制成骨细胞分化及矿化相关,氟西汀与胡椒碱联用可逆转氟西汀对骨的破坏作用。

关键词：骨质疏松氟西汀胡椒碱去卵巢大鼠成骨细胞成骨分化

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银杏叶提取物调控PI3K/AKT信号通路对人脑血管外膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第11期40卷 1556-1559页

作者：毕晓晨孔晓彬赵娜顾晶晶浙江中医药大学基础医学院实验教学中心浙江杭州310000 浙江中医药大学基础医学院病理与病理生理教研室浙江杭州310000

目的研究银杏叶提取物(GBE)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖和凋亡的影响。方法将HBVAFs分为空白组(正常培养,未做处理)和低、中、高剂量实验组(25、50和100 mg·L^(-1)的GBE处... 详细信息

目的研究银杏叶提取物(GBE)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路对人脑血管外膜成纤维细胞(HBVAFs)增殖和凋亡的影响。方法将HBVAFs分为空白组(正常培养,未做处理)和低、中、高剂量实验组(25、50和100 mg·L^(-1)的GBE处理24 h)及联合组(100 mg·L^(-1)GBE和2 nmol·L^(-1)胰岛素样生长因子-1处理24 h)。用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测细胞磷酸化PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)及AKT蛋白的表达水平。结果低、中、高剂量实验组和联合组、空白组的细胞存活率分别为(66.78±8.21)%、(53.51±7.40)%、(42.33±6.01)%、(75.69±5.87)%和(96.77±12.80)%,细胞凋亡率分别为(24.83±2.47)%、(30.07±3.06)%、(37.02±4.66)%、(16.71±2.11)%和(8.99±0.19)%,p-PI3K/PI3K比值分别为0.75±0.07、0.62±0.06、0.43±0.04、0.72±0.05和0.90±0.09,p-AKT/AKT比值分别为0.70±0.07、0.60±0.06、0.38±0.03、0.69±0.06和0.90±0.09。低、中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,联合组的上述指标与高剂量实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论GBE可降低HBVAFs增殖,促进凋亡,其机制与抑制PI3K/AKT信号通路相关。

关键词：银杏叶提取物磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路人脑血管外膜成纤维细胞增殖凋亡

基于PKC/ERK通路探讨益肾达络饮对脂多糖诱导的星形胶质细胞活化的作用机制

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时珍国医国药 2024年第1期35卷 75-78页

作者：尚晓玲王忠敏任嘉彦何静文王响长春中医药大学基础医学院吉林长春130117

目的基于PKC/ERK通路探讨益肾达络饮对脂多糖诱导的星形胶质细胞的作用机制。方法将60只C57BL/6 J雌性小鼠随机分为分为空白组,激素组和益肾达络饮高、中、低剂量组,其中正常组20只(其中空白组10只,模型组10只),其余每组10只,空白组... 详细信息

目的基于PKC/ERK通路探讨益肾达络饮对脂多糖诱导的星形胶质细胞的作用机制。方法将60只C57BL/6 J雌性小鼠随机分为分为空白组,激素组和益肾达络饮高、中、低剂量组,其中正常组20只(其中空白组10只,模型组10只),其余每组10只,空白组给予生理盐水,其余各组给予相应药物处理,连续灌胃7 d,最后一次灌胃2 h后眼球取血,制备空白血清和含药血清。提取新生48 h C57BL/6 J乳鼠原代星形胶质细胞,以脂多糖(LPS)诱导星形胶质细胞活化,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)作为星形胶质细胞鉴定和活化的标志,实验分为空白组、模型组、益肾达络饮高、中、低剂量组、激素组,给予相应血清预处理24 h,除空白组外其余各组加入1μg/mL LPS作用24 h诱导星形胶质细胞活化,CCK-8检测各组细胞活性,免疫荧光法检测细胞GFAP表达变化,蛋白免疫印迹法检测细胞蛋白激酶C(PKC)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、p-ERK和GFAP的蛋白表达。结果与空白组比较,模型组细胞活性、GFAP、PKC和p-ERK/ERK蛋白表达量显著升高(P<0.01),且细胞体明显变大;与模型组比较,益肾达络饮高、中、低剂量组和激素组细胞活性和PKC蛋白表达量显著降低(P<0.01),益肾达络饮高剂量组和低剂量组GFAP和p-ERK/ERK蛋白表达量显著降低(P<0.01或P<0.05),益肾达络饮中剂量组p-ERK/ERK蛋白表达量显著降低(P<0.01),激素组GFAP蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论益肾达络饮可以改善由LPS所引起的星形胶质细胞的活化,降低GFAP的表达,抑制炎症反应,其作用机制可能与抑制PKC/ERK通路的激活有关。

关键词：益肾达络饮星形胶质细胞 GFAP PKC ERK

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单胺氧化酶A：神经起源的肿瘤免疫新靶点

中国实验动物学报 2024年

作者：马一凡李惠陈函沐师长宏甘肃中医药大学第一临床医学院空军军医大学实验动物中心延安大学基础医学院

单胺氧化酶A（monoamine oxidase A，MAOA）是一种膜结合线粒体酶，几乎存在于所有脊椎动物组织中，催化生物源性单胺和膳食衍生单胺的降解。MAOA主要调节神经递质代谢，但与抗肿瘤免疫反应密切相关。以往研究更多关注MAOA在肿瘤细胞中... 详细信息

单胺氧化酶A（monoamine oxidase A，MAOA）是一种膜结合线粒体酶，几乎存在于所有脊椎动物组织中，催化生物源性单胺和膳食衍生单胺的降解。MAOA主要调节神经递质代谢，但与抗肿瘤免疫反应密切相关。以往研究更多关注MAOA在肿瘤细胞中的作用，新近研究发现，MAOA在肿瘤相关免疫细胞中同样发挥重要作用。本文综述了MAOA对抑制性肿瘤微环境（tumor microenvironment，TME）的调节作用，以及通过直接影响免疫细胞内单胺类物质及其代谢，进而对各类肿瘤相关免疫细胞（如CD8+ T细胞和肿瘤相关巨噬细胞）发挥的抑制作用；阐明开发新型MAOA抑制剂药物和多药联合可能提高肿瘤免疫治疗效果，提出MAOA可能作为1个肿瘤免疫新靶点，影响肿瘤免疫治疗效果。

关键词：单胺氧化酶A 肿瘤免疫 CD8+T细胞肿瘤相关巨噬细胞