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复方中草药添加剂在黄金鲫日粮中适宜添加量的研究

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饲料工业 2024年

作者：曲桂娟张田雨张笑颖孟鹤媛董晓庆王桂芹吉林农业大学动物医学院

为了探讨复方中草药在黄金鲫日粮中的适宜添加量，试验选取10g左右的300尾黄金鲫鱼为研究对象，随机分为5组，每组60尾鱼，每组设3个重复。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加浓度为0.6%（Ⅰ组）、1.2%（Ⅱ组）、1.8%（Ⅲ... 详细信息

为了探讨复方中草药在黄金鲫日粮中的适宜添加量，试验选取10g左右的300尾黄金鲫鱼为研究对象，随机分为5组，每组60尾鱼，每组设3个重复。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加浓度为0.6%（Ⅰ组）、1.2%（Ⅱ组）、1.8%（Ⅲ组）和2.4%（Ⅳ组）的复方中草药，饲喂42 d。测定各组鱼的生长指标，肌肉营养成分以及脏体指数。结果表明：添加0.6%浓度的复方中草药可以显著提高黄金鲫鱼的增重率、特定生长率、蛋白质含量、脏体指数(P<0.05)，添加1.2%浓度时，可以显著降低饲料系数，增加肥满度以及脏体指数(P<0.05)。通过回归分析得出，添加1.35%浓度时，增重率和特定生长率达到最高值。综上得出，本复方中草药添加剂在黄金鲫鱼日粮中最适添加量为0.6%～1.35%。

关键词：中草药添加剂黄金鲫鱼生长性能肉品质添加量

猪伪狂犬病病毒gG、gE和TK基因多重PCR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2024年第9期45卷 7-12页

作者：吴晓敏陈润山李华明项维徐梦然杨荣荣雷连成张付贤长江大学动物科学学院湖北荆州434023 湖北省十堰市房县畜牧兽医服务中心湖北十堰442100 吉林大学动物医学学院吉林长春130062

建立准确鉴别猪群伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)野毒株和基因缺失疫苗株高效多重PCR方法,对PRV gG、gE和TK基因保守区域设计合成特异性引物,优化反应体系和条件,建立多重PCR鉴别检测方法,对临床样品进行检测应用。结果... 详细信息

建立准确鉴别猪群伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)野毒株和基因缺失疫苗株高效多重PCR方法,对PRV gG、gE和TK基因保守区域设计合成特异性引物,优化反应体系和条件,建立多重PCR鉴别检测方法,对临床样品进行检测应用。结果成功建立了鉴别PRV gG、gE和TK基因缺失疫苗株和野毒株感染的多重PCR检测方法,该方法对PRV gG、gE和TK基因可进行特异性扩增,对猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒和猪副猪嗜血杆菌等相关病原均无扩增,对携带gG、gE和TK混合阳性质粒的最低检测限为2.5×10^(-5) ng/μL,具有良好的重复性。用该方法检测53份猪组织样品,检出PRV野毒感染的样品7份,与国标方法和单一PCR法检测结果符合率为100%。建立的猪伪狂犬病病毒野毒株和基因缺失疫苗株多重PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,在生产中可快速、高效鉴别猪群PRV野毒感染和基因缺失疫苗免疫,可为PRV的快速鉴别检测、流行病学调查和防控提供技术支持。

关键词：猪伪狂犬病病毒 gG基因 gE基因 TK基因多重PCR

猪瘟病毒2.1亚型流行株E2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定

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中国预防兽医学报 2024年

作者：张艺潇吴梦米士江刘钟迪涂长春龚文杰吉林大学动物医学学院中国农业科学院长春兽医研究所重庆市畜牧科学院

为了获得仅与我国猪瘟病毒(CSFV)基因2.1亚型优势流行株反应的单克隆抗体(MAb)，并揭示疫苗株与流行株E2蛋白的抗原差异，本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达CSFV基因2.1b亚型JL23的E2蛋白，纯化蛋白免疫BALB/c小鼠，通过电融合将免疫... 详细信息

为了获得仅与我国猪瘟病毒(CSFV)基因2.1亚型优势流行株反应的单克隆抗体(MAb)，并揭示疫苗株与流行株E2蛋白的抗原差异，本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达CSFV基因2.1b亚型JL23的E2蛋白，纯化蛋白免疫BALB/c小鼠，通过电融合将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，利用半固体选择性培养基筛选杂交瘤细胞，间接免疫荧光试验(IFA)鉴定与JL23株反应的杂交瘤细胞上清(MAb)，亚克隆得到与JL23株反应的稳定杂交瘤细胞系；采用IFA和western blot鉴定MAb与猪瘟疫苗株和不同基因型流行株的反应谱；采用氨基酸截短和点突变的方法鉴定其识别的抗原表位；采用固定病毒稀释抗体方法鉴定MAb的中和水平。结果显示，本实验获得了一株仅与CSFV基因2.1亚型反应，但不与疫苗株和其他基因亚型CSFV反应的MAb TCH061。基于截短E2蛋白的western blot结果显示，TCH061识别的抗原表位位于E2蛋白aa1～aa90，进一步对该区域氨基酸序列比对发现，TCH061识别CSFV E2蛋白aa20的脯氨酸(P)，不识别在该位点为亮氨酸(L)的CSFV。利用点突变对该位点及其邻近的氨基酸残基替换，结果发现G19、P20、L21和G22构成了TCH061识别的抗原表位，其中P20是关键氨基酸。MAb中和能力鉴定结果显示，TCH061对基因2.1亚型流行株具有中和能力，但不能中和疫苗C株。综上所述，本研究首次获得了一株区别CSFV疫苗株和基因2.1亚型优势流行株的鉴别MAb TCH061，为研发疫苗免疫和流行株感染的血清学鉴别诊断产品提供了重要的MAb资源，同时揭示了疫苗株与流行株E2蛋白的抗原差异。

关键词：猪瘟病毒单克隆抗体病毒反应谱抗原表位

参苓白术散药味增减对溃疡性结肠炎模型小鼠的治疗效果

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黑龙江畜牧兽医 2024年第2期 105-110页

作者：任天宇韩谨泽刘潼张加力吉林农业大学动物医学院长春130022

为了探寻参苓白术散药味增减对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗效果,试验将30只雌性C57BL/6小鼠(6~8周龄,体重为18~20 g)随机分成5组,分别为空白对照组、模型组及高、中、低剂量组,每组6只。第1周各组适应性饲养;第2周除空白... 详细信息

为了探寻参苓白术散药味增减对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗效果,试验将30只雌性C57BL/6小鼠(6~8周龄,体重为18~20 g)随机分成5组,分别为空白对照组、模型组及高、中、低剂量组,每组6只。第1周各组适应性饲养;第2周除空白对照组外,每组用3%葡聚糖硫酸钠水溶液自由饮水,连用7 d,建立急性溃疡性结肠炎模型;第3周更换正常饮水,空白对照组和模型组灌胃生理盐水,高、中、低剂量组按体重分别灌胃0.2,0.1,0.05 mL/10 g中药药液。观察并记录小鼠临床症状,采集全血分离血清,检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸的质量浓度,同时制作小鼠结肠组织病理切片。结果表明:与空白对照组比较,模型组血清中IL-8、IgA、IgG、DAO、D-乳酸的质量浓度极显著升高(P<0.01),IL-10的质量浓度极显著降低(P<0.01);给药后,高、中、低剂量组小鼠的炎症均有不同程度缓解,IL-8、IgA、IgG、DAO、D-乳酸的质量浓度均有不同程度下降,IL-10的质量浓度上升。说明参苓白术散药味增减对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,在本试验条件下,按体重0.2 mL/10 g给药治疗效果最好。

关键词：溃疡性结肠炎参苓白术散炎症因子免疫球蛋白病理切片

一株产气荚膜梭菌烈性噬菌体的分离鉴定及特性分析

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中国兽医学报 2024年第8期44卷 1691-1697页

作者：李梦娇宋战昀刘博许智强刘月王秋霖冯新吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 长春海关技术中心吉林长春130062

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种常见的革兰阳性厌氧条件致病菌,在自然界中广泛存在,可引起腹泻、气性坏疽等疾病。临床上采用抗生素治疗产气荚膜梭菌感染,但细菌会通过突变、耐药质粒传播等方式产生耐药性,使产气荚膜梭... 详细信息

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种常见的革兰阳性厌氧条件致病菌,在自然界中广泛存在,可引起腹泻、气性坏疽等疾病。临床上采用抗生素治疗产气荚膜梭菌感染,但细菌会通过突变、耐药质粒传播等方式产生耐药性,使产气荚膜梭菌在抗生素的环境压力下得以存活。因此寻找和开发新制剂来替代抗生素或作为饲料添加剂以定向清除机体携带的产气荚膜梭菌或预防感染是十分重要的。本研究从污水中分离得到了一株产气荚膜梭菌烈性噬菌体vB_CPP_AT。利用透射电镜观察噬菌体形态,通过裂解谱、MOI、酸碱及温度耐受性等分析该产气荚膜梭菌噬菌体基本生物学特性。研究发现vB_CPP_AT噬菌体为短尾噬菌体,在60 min时呈暴发式增长,最佳MOI为0.1,专一性裂解产气荚膜梭菌,裂解率为40%(8/20),与参试的其他细菌不发生裂解反应,具有良好的热稳定及酸碱耐受性。vB_CPP_AT噬菌体基因组为双链DNA,全长16 790 bp,具有20个开放阅读框。基因组分析vB_CPP_AT噬菌体为1株新的产气荚膜梭菌烈性噬菌体。该结果为噬菌体vB_CPP_AT应用于产气荚膜梭菌的临床治疗奠定了基础。

关键词：产气荚膜梭菌噬菌体生物学特性基因组

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环境中抗生素抗性基因的传播及抗生素的降解

家畜生态学报 2024年第6期45卷 82-87页

作者：赵博雨郝鹏张佳奇许湘竹巴桑旺堆高云航吉林农业大学动物科学技术学院长春吉林130118 吉林大学动物医学学院长春吉林130015 西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所拉萨西藏850004

畜禽养殖业快速发展的同时伴随着抗生素的大量使用,因抗生素不能被机体完全代谢而通过粪尿排出,粪尿中积累的抗生素通过多种途径进入环境,从而引起抗生素残留及耐药性问题,并对人畜健康及生态环境造成潜在威胁,因此有效去除环境中的抗... 详细信息

畜禽养殖业快速发展的同时伴随着抗生素的大量使用,因抗生素不能被机体完全代谢而通过粪尿排出,粪尿中积累的抗生素通过多种途径进入环境,从而引起抗生素残留及耐药性问题,并对人畜健康及生态环境造成潜在威胁,因此有效去除环境中的抗生素至关重要。而去除抗生素不仅要注重降解效果,也要注意二次污染、降解成本等问题。本文介绍了养殖环境中抗生素与抗性基因来源及传播途径,重点阐述了现有的抗生素降解方法、原理和特点,包括物理吸附法、高级氧化技术及生物降解,并对现存抗生素污染问题提出建议,以期为抗生素高效降解提供参考。

关键词：养殖环境抗生素物理吸附高级氧化技术生物降解

卤化合成α螺旋抗菌肽Cl-FR18的抑菌活性、安全性及稳定性研究

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畜牧与兽医 2024年第5期56卷 58-63页

作者：王晨裴志花吉林农业大学动物医学院吉林长春130000

为了对α螺旋抗菌肽FR18进行卤化并了解卤化抗菌肽Cl-FR18的功能特性,对α螺旋抗菌肽FR18的N端第1个苯丙氨酸进行氯代,得到合成肽Cl-FR18,并进行抗菌活性、溶血活性、细胞毒性及稳定性检测。结果显示:Cl-FR18对7株指示菌均有良好的抑菌... 详细信息

为了对α螺旋抗菌肽FR18进行卤化并了解卤化抗菌肽Cl-FR18的功能特性,对α螺旋抗菌肽FR18的N端第1个苯丙氨酸进行氯代,得到合成肽Cl-FR18,并进行抗菌活性、溶血活性、细胞毒性及稳定性检测。结果显示:Cl-FR18对7株指示菌均有良好的抑菌活性,其中对大肠杆菌K88和鲍曼不动杆菌js1的最小抑菌浓度(MIC)为4μg/mL,高于未修饰肽FR18;Cl-FR18的溶血活性明显低于蜂毒肽和未修饰肽,在浓度为16μg/mL时仅引起221%的羊红细胞溶血。Cl-FR18保留了未修饰肽FR18较好的细胞选择性和安全性的特点,经Cl-FR18作用12 h后的细胞存活率均在90%以上,且Cl-FR18在不同的盐离子、蛋白酶溶液和温度环境中表现出一定的敏感性,MIC增至2~8倍。结果表明,经卤化后的抗菌肽Cl-FR18抑菌谱广,抑菌活性明显,且具有良好的安全性,其卤化合成策略为优化抗菌肽的改造方法提供了理论参考。

关键词：抗菌肽抑菌活性稳定性毒性

新城疫病毒HN-mRNA疫苗在SPF鸡中的攻毒保护效果评价

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中国兽医学报 2024年

作者：崔苗苗冯嘉轩李金斗丁佳欣郭春红姜峰刘晓雷丁壮吉林大学人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室动物医学学院长春中医药大学临床医学院

为评估NDV HN-mRNA疫苗提供的保护效率，本研究将HN-mRNA疫苗通过肌肉注射方式免疫至SPF鸡体内，通过血凝抑制试验、淋巴细胞增殖试验、RT-qPCR和病理切片等方法评估HN-mRNA候选疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫及攻毒保护效果。结果显示2... 详细信息

为评估NDV HN-mRNA疫苗提供的保护效率，本研究将HN-mRNA疫苗通过肌肉注射方式免疫至SPF鸡体内，通过血凝抑制试验、淋巴细胞增殖试验、RT-qPCR和病理切片等方法评估HN-mRNA候选疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫及攻毒保护效果。结果显示2.5 μg、5.0 μg和7.5 μg HN-mRNA以剂量依赖性的方式诱导血凝抑制抗体，其中7.5 μg HN-mRNA诱导的HI抗体略高于商品弱毒疫苗（La Sota株）。此外，针对NDV灭活病毒的刺激，2.5 μg、5.0 μg和7.5 μg HN-mRNA免疫组及商品疫苗组淋巴细胞均能发生增殖及活化。为进一步评估HN-mRNA免疫后提供的攻毒保护效果，将105ELD50NDV强毒株NA-1株采用滴鼻、点眼方式对7.5 μg HN-mRNA免疫组和商品弱毒疫苗（La Sota株）及PBS组进行攻毒。结果显示7.5 μg HN-mRNA免疫组和商品疫苗组存活率均为100%，且能保护组织器官免受病毒感染导致的损伤，并且7.5 μg HN-mRNA免疫组相较于商品疫苗组能缩短体外排毒时间和体内病毒载量。本研究成果为NDV HN-mRNA候选疫苗的临床应用提供理论依据，并为禽类新型mRNA疫苗的研发提供参考。

关键词：新城疫 HN-mRNA疫苗血凝抑制抗体攻毒保护效果评价

蛋白酶抑制剂DUBs-IN-1抑制马立克病病毒在鸡细胞内的增殖

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中国兽医学报 2024年第8期44卷 1622-1628页

作者：艾馨许家翠谢佳良马浩原于凯刘洺丞王馨悦林俊彦高旭延边大学农学院吉林延吉133400 吉林大学动物科学学院吉林长春130062

接种疫苗是防御鸡马立克病的主要手段,但疫苗不能扼制马立克病病毒(MDV)的感染、增殖、传播以及毒力增强,因此,抑制MDV在鸡细胞内的增殖是增强疫苗防御效果的重要手段。本研究以MDV编码的大被膜蛋白MDV049为靶点,应用泛素探针从蛋白酶... 详细信息

接种疫苗是防御鸡马立克病的主要手段,但疫苗不能扼制马立克病病毒(MDV)的感染、增殖、传播以及毒力增强,因此,抑制MDV在鸡细胞内的增殖是增强疫苗防御效果的重要手段。本研究以MDV编码的大被膜蛋白MDV049为靶点,应用泛素探针从蛋白酶抑制剂库中筛选出一种化合物DUBs-IN-1,可抑制MDV049的酶活性。分子对接分析发现,DUBs-IN-1可以与MDV049的催化活性中心袋口处的7个残基互作,阻止泛素底物与活性中心的CYS98结合,进而抑制MDV049酶的活性。应用CEF细胞病变(CPE)模型研究发现,0.35、0.70μmol/L的DUBs-IN-1可显著抑制MDV所致的CPE,定量分析揭示DUBs-IN-1可显著抑制MDV在CEF细胞内的增殖(P动物水平的研究发现,使用80和150μg/kg的DUBs-IN-1每日给药处理,DUBs-IN-1可显著抑制MDV在鸡T细胞内的增殖(P<0.01)。总之,本研究发现蛋白酶抑制剂DUBs-IN-1通过竞争性抑制方式抑制MDV049酶活性,并有效抑制MDV在鸡细胞内增殖,这一发现为研发抗MDV的药物奠定了理论基础。

关键词：马立克病病毒蛋白酶抑制剂 DUBs-IN-1 CEF MDV049