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BALB/c小鼠肠道主要原虫感染情况的分子流行病学调查

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中国兽医学报 2025年第03期 514-518页

作者：郑瑜张西臣荣尧李建华宫鹏涛王晓岑岳涛涛李新张旭张楠吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室/人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室

分别对国内4家BALB/c小鼠供应商提供的540只BALB/c小鼠进行肠道原虫检测。其中，供应商A 140只，供应商B 130只，供应商C 135只，供应商D 135只。分别采集每只小鼠的新鲜粪便样本以提取基因组，并根据人五毛滴虫(Pentatrichomonas homin... 详细信息

分别对国内4家BALB/c小鼠供应商提供的540只BALB/c小鼠进行肠道原虫检测。其中，供应商A 140只，供应商B 130只，供应商C 135只，供应商D 135只。分别采集每只小鼠的新鲜粪便样本以提取基因组，并根据人五毛滴虫(Pentatrichomonas hominis,***)、泰泽隐孢子虫18S rRNA基因序列引物进行巢氏PCR扩增，利用鼠三毛滴虫(Tritrichomonas muris,***)16S-like rRNA基因序列引物进行PCR扩增并测序，以检测BALB/c小鼠肠道原虫的感染状况。结果显示，供应商A提供的140份小鼠粪便样本中，总肠道原虫感染率为7.1%(10/140),其中，***虫阳性率为7.1%(10/140)、泰泽隐孢子虫(Cryptosporidium tyzzeri,***)阳性率为2.1%(3/140)、***阳性率为7.1%(10/140),2种肠道原虫共感染率为7.1%(10只：***+***)、3种肠道原虫共感染率为2.1%(3只：***+***+***)。供应商C提供的135份小鼠粪便样本中，总肠道原虫感染率为7.4%,其中，***阳性率为7.4%(10/135),未检出***和***感染。供应商B提供的130份小鼠粪便样本和供应商D提供的135份小鼠粪便样本中均未检出肠道原虫感染。遗传进化分析结果显示，本研究扩增的*** 16S-like rRNA基因序列与GenBank发表的***的16S-like rRNA基因具有98.52%的同源性(GenBank No:AY886846.1),并且在遗传进化树中聚类为一独立分支；*** 18S rRNA基因序列与GenBank发表的*** 18S rRNA基因具有98.27%的同源性(GenBank ***156964.1),聚为一独立分支；*** 18S rRNA基因序列与GenBank发表的*** 18S rRNA基因同源性为99.87%(GenBank ***000486.1)。综上，本研究对不同实验动物供应商提供的BALB/c小鼠进行肠道寄生虫检测，发现存在不同程度的肠道原虫感染情况，并发现有***、***和***等3种以上寄生虫共感染的现象，从而为今后预防和制定有效的防控策略提供科学依据。

关键词：鼠三毛滴虫人五毛滴虫泰泽隐孢子虫 BALB/c小鼠

自噬与蛋白酶体途径在布鲁菌感染巨噬细胞过程中的相互作用

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中国兽医学报 2025年第03期 507-513页

作者：董炳梅梁萌萌许文雅王君宋立立任洪林沧州师范学院生命科学学院吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究所人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室/人兽共患病研究教育部重点实验室

为了探明巨噬细胞(macrophage, Mφ)感染布鲁菌(Brucella)后泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome system, UPS)和自噬-溶酶体途径(autophagy-lysosome pathway, ALP)在对抗Brucella过程中的相互作用关系，一方面将猪种布鲁菌(Brucella suis,***)分别体外感染Mφ和腹腔接种BALB/c小鼠，并对细胞上清液和腹腔液中LC3Ⅱ、P62与20S蛋白酶体水平进行了测定，结果显示***感染过程中UPS首先被激活，随后ALP途径发挥作用；另一方面，应用3-MA、乳胞素分别制备ALP抑制态Mφ与UPS抑制态Mφ并接种***,随后对细胞上清中LC3Ⅱ、P62与20S蛋白酶体水平进行测定，结果显示当MφUPS功能被抑制时，ALP作用被显著提高；而ALP功能被抑制时，UPS活性未有显著变化。最后，将不同状态Mφ接种***后，对***的胞内增殖能力进行测定，结果显示当UPS与ALP功能被同时抑制时，***的胞内增殖能力显著降低，且UPS对***胞内增殖的促进作用强于ALP。结果表明，Brucella感染Mφ过程中UPS与ALP存在相互作用关系，在理论上可为Brucella与宿主细胞相互作用机制的研究提供新思路。

关键词：自体吞噬泛素蛋白酶体途径布鲁菌巨噬细胞

猪链球菌2型PPCDC蛋白对血脑屏障通透性的影响

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微生物学通报 2025年第2期52卷 632-642页

作者：贾文丹梅纪坤王梓萌李丰阳雷连成李娜吉林大学动物医学学院人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室

【背景】猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2, SS2)是引起全球经济和公共卫生问题的重要人兽共患病病原菌，引发脑膜炎、关节炎和败血症等临床症状。磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(phosphopantothenoylcyteine decarboxylase,PPCDC)在前... 详细信息

【背景】猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2, SS2)是引起全球经济和公共卫生问题的重要人兽共患病病原菌，引发脑膜炎、关节炎和败血症等临床症状。磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(phosphopantothenoylcyteine decarboxylase,PPCDC)在前期构建的猪体外血脑屏障模型与猪链球菌全基因组噬菌体随机展示文库的相互作用中被筛选出来，但其影响血脑屏障的机制尚不清楚。【目的】探究PPCDC在SS2诱导脑膜炎过程中发挥的作用。【方法】利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统诱导表达重组蛋白rPPCDC，通过体外构建人脑微血管内皮细胞单层屏障模型和体内小鼠感染模型探究其对血脑屏障通透性的影响，制备rPPCDC疫苗进行小鼠免疫保护试验。【结果】成功纯化出可溶性重组蛋白rPPCDC，发现其在体外可以降低单层屏障模型的细胞跨膜电阻值，增加突破单层屏障的SS2数量。体内可促进SS2对小鼠的致病性。进一步研究发现，接种rPPCDC疫苗的小鼠血清中有更高的rPPCDC抗体水平，存活率升高。【结论】PPCDC能够增强血脑屏障通透性，促进SS2对小鼠血脑屏障的破坏和脑部感染，并具有免疫保护效力，为后续SS2致病机制研究和疫苗研发提供新思路。

关键词：猪链球菌2型磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶血脑屏障免疫保护

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可诱导驯化免疫的屎肠球菌分离筛选及其抗感染效果评价

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微生物学通报 2025年第2期52卷 785-798页

作者：初红王贺贾秀文李娜李丰阳雷连成吉林大学动物医学学院人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室吉林大学第二医院康复医学中心

【背景】天然免疫应答作为机体的第一道免疫防御屏障，在动物抵抗病原微生物感染的初始阶段发挥着关键作用。从驯化免疫的角度，增强动物天然免疫，提高动物抗病能力是预防控制疾病的有效措施。【目的】从猪肠道菌群中筛选分离具有潜在... 详细信息

【背景】天然免疫应答作为机体的第一道免疫防御屏障，在动物抵抗病原微生物感染的初始阶段发挥着关键作用。从驯化免疫的角度，增强动物天然免疫，提高动物抗病能力是预防控制疾病的有效措施。【目的】从猪肠道菌群中筛选分离具有潜在驯化免疫作用的细菌，为挖掘新的免疫刺激物奠定基础。【方法】从健康猪粪便中分离纯化细菌，选择大蜡螟(Galleria mellonella)幼虫驯化免疫模型用于筛选肠道共生菌，对有潜在驯化免疫功能的细菌进行16SrRNA基因序列鉴定和生长曲线的测定，并利用小鼠模型对细菌进行体内驯化效果评价。【结果】通过使用大蜡螟幼虫模型，我们筛选出了一株具有诱导驯化免疫能力的屎肠球菌(Enterococcus faecium) SC-2；通过小鼠模型进一步证实菌株SC-2预刺激可以提高小鼠外周血与肺脏中的中性粒细胞和巨噬细胞占比，显著降低猪链球菌(Streptococcus suis)感染后其主要脏器中的菌载量，显著提高小鼠存活率。【结论】屎肠球菌SC-2具有诱导驯化免疫的作用，该菌株的分离鉴定为免疫调控新成分的挖掘提供了基础。

关键词：屎肠球菌驯化免疫大蜡螟分离鉴定

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新城疫病毒HN-mRNA疫苗在SPF鸡中的攻毒保护效果评价

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中国兽医学报 2025年第03期 436-442页

作者：崔苗苗冯嘉轩李金斗丁佳欣郭春红姜峰刘晓雷丁壮吉林大学动物医学学院人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室长春中医药大学临床医学院

为评估新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV） HN-mRNA疫苗提供的保护效率，本研究将HN-mRNA疫苗通过肌肉注射方式免疫SPF鸡，通过血凝抑制试验、淋巴细胞增殖试验、RT-qPCR和病理切片等方法评估HN-mRNA候选疫苗诱导的体液免疫、... 详细信息

为评估新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV） HN-mRNA疫苗提供的保护效率，本研究将HN-mRNA疫苗通过肌肉注射方式免疫SPF鸡，通过血凝抑制试验、淋巴细胞增殖试验、RT-qPCR和病理切片等方法评估HN-mRNA候选疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫及攻毒保护效果。结果显示，2.5、5.0、7.5μg HN-mRNA以剂量依赖性的方式诱导血凝抑制抗体，其中7.5μg HN-mRNA诱导的HI抗体略高于商品弱毒疫苗（La Sota株）。此外，针对NDV灭活病毒的刺激，2.5、5.0、7.5μg HN-mRNA免疫组及商品疫苗组淋巴细胞均能发生增殖及活化。为进一步评估HN-mRNA免疫后提供的攻毒保护效果，将105ELD50NDV强毒株NA-1株采用滴鼻、点眼方式对7.5μg HN-mRNA免疫组和商品弱毒疫苗（La Sota株）及PBS组进行攻毒，结果显示7.5μg HN-mRNA免疫组和商品疫苗组存活率均为100%,且能保护组织器官免受病毒感染导致的损伤，并且7.5μg HN-mRNA免疫组相较于商品疫苗组能缩短体外排毒时间和体内病毒载量。本试验结果为NDV HN-mRNA候选疫苗的临床应用奠定基础，并为禽类新型mRNA疫苗的研发提供参考。

关键词：新城疫病毒 HN-mRNA疫苗血凝抑制抗体攻毒保护效果评价

人兽共患细菌病的流行现状及其病原耐药性的应对策略

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微生物学通报 2025年第2期52卷 571-586页

作者：谢芳夏小静雷连成中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室河南科技学院动物科技学院吉林大学动物医学学院人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室

人兽共患病是由同一病原引起、在人和脊椎动物之间自然传播的疾病，已成为全球共同面临并亟待解决的重大问题。当前人兽共患传染病在人类新发和现有传染病中占比达60%，其中布鲁氏菌(Brucella)、牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)、炭疽... 详细信息

人兽共患病是由同一病原引起、在人和脊椎动物之间自然传播的疾病，已成为全球共同面临并亟待解决的重大问题。当前人兽共患传染病在人类新发和现有传染病中占比达60%，其中布鲁氏菌(Brucella)、牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)、炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)、猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)、沙门氏菌(Salmonella)及肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae,KP)等引起的人兽共患细菌病严重威胁畜牧业健康发展、公共卫生安全和国家生物安全，其防控形势日益严峻。本文就上述6种重要人兽共患细菌病的流行现状及其相关耐药机制和抗菌新策略进行综述，为科学防控人兽共患细菌病提供参考。

关键词：人兽共患病原菌流行特征耐药机制治疗策略

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细粒棘球绦虫3 d幼虫cDNA表达文库的构建及鉴定

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中国兽医学报 2025年第02期 305-311页

作者：吴小霞刘晓雷刘明远孙树民赵永军丁静吉林大学动物医学学院/人畜共患传染病重症诊治全国重点实验室/人兽共患病研究教育部重点实验室云南农业大学动物医学院内蒙古民族大学动物科技学院

构建细粒棘球绦虫3 d幼虫cDNA表达文库，并进行初步鉴定。从新鲜带有包囊的患病羊源肝脏内分离采集原头蚴，人工经口感染实验犬，第3天剖检取幽门后小肠约1.5 m,沿纵轴将其剪开置38～40℃生理盐水中稍加摆动使虫体自行脱落，收集细粒棘... 详细信息

构建细粒棘球绦虫3 d幼虫cDNA表达文库，并进行初步鉴定。从新鲜带有包囊的患病羊源肝脏内分离采集原头蚴，人工经口感染实验犬，第3天剖检取幽门后小肠约1.5 m,沿纵轴将其剪开置38～40℃生理盐水中稍加摆动使虫体自行脱落，收集细粒棘球绦虫3 d幼虫。采用TRIzol试剂提取总RNA,PolyATtract?mRNA Isolation Systems分离纯化mRNA,反转录合成cDNA,加5′接头后与pBluescript sk-载体连接经电转导入大肠杆菌，构建细粒棘球绦虫3 d幼虫cDNA表达文库。构建的文库初始库容量为1.15×107CFU/mL,扩增后文库的滴度为1×1010CFU/mL,重组率为100%,插入片段长度平均为1.0～1.2 kb。构建的cDNA表达文库库容量及插入片段大小合适，有望用于细粒棘球绦虫终末宿主犬疫苗候选基因及诊断抗原分子的筛选。

关键词：棘球蚴病/包虫病细粒棘球绦虫 3 d幼虫 cDNA表达文库

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青霉噻唑酸对雄性小鼠生殖功能的毒性作用

吉林农业大学学报 2024年

作者：胡瑞雪郭健柳增善赵柯胡盼卢士英李岩松任洪林王洋人兽共患传染病重症诊治全国重点实验室人兽共患病研究教育部重点实验室人兽共患病研究所吉林大学动物医学学院

抗生素残留正在成为国际食品贸易中最容易引发贸易冲突的敏感问题。抗生素残留超标已经给我国的动物性食品带来很大的经济损失，其中以青霉素的残留最为常见。青霉噻唑酸（Benzylpenicilloic acid，BPNLA）是青霉素的热解产物之一。先... 详细信息

抗生素残留正在成为国际食品贸易中最容易引发贸易冲突的敏感问题。抗生素残留超标已经给我国的动物性食品带来很大的经济损失，其中以青霉素的残留最为常见。青霉噻唑酸（Benzylpenicilloic acid，BPNLA）是青霉素的热解产物之一。先前研究表明，青霉噻唑酸对雄性生殖系统具有损伤作用，但其潜在机制尚不明确。为了探究青霉噻唑酸的毒性表现及作用机制，使用C57BL/6 雄性小鼠构建了急性毒性体内模型，评估了组织病理学、精子质量和骨髓微核率。结果表明：青霉噻唑酸导致了睾丸组织曲精小管排列疏松，细胞间隙变宽，精子数量、存活率以及骨髓微核率显著降低，同时精子畸形率明显增加，证实了其具有生殖毒性作用。使用正常小鼠睾丸Sertoli细胞（TM4细胞）构建了体外模型，利用转录组测序分析了青霉噻唑酸处理后引起的差异基因和信号通路的表达变化，同时通过ELISA检测炎症因子，发现细胞上清中TNF-α、IL-6和IL-1β明显升高。综上，青霉噻唑酸能够导致雄性生殖障碍，其作用机制可能与调控炎症反应的信号通路相关。

关键词：青霉噻唑酸雄性生殖系统急性毒性转录组测序炎症

Balb/c小鼠肠道主要原虫感染情况的分子流行病学调查

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中国兽医学报 2024年

为了解Balb/c小鼠肠道主要原虫的感染状况，进一步防控肠道原虫感染提供依据。本研究分别对国内4家Balb/c小鼠供应商提供的540只Balb/c小鼠进行肠道原虫检测，其中供应商A 140只，供应商B 130只，供应商C 135只，供应商D 135只。分别采... 详细信息

为了解Balb/c小鼠肠道主要原虫的感染状况，进一步防控肠道原虫感染提供依据。本研究分别对国内4家Balb/c小鼠供应商提供的540只Balb/c小鼠进行肠道原虫检测，其中供应商A 140只，供应商B 130只，供应商C 135只，供应商D 135只。分别采集每只小鼠的新鲜粪便样本以提取基因组，并根据人五毛滴虫、泰泽隐孢子虫18s rRNA基因序列引物进行巢氏PCR扩增，利用鼠三毛滴虫16s-like rRNA基因序列引物进行PCR扩增并测序，以检测Balb/c小鼠肠道原虫的感染状况。结果表明，供应商A提供的140份小鼠粪便样本中，总肠道原虫感染率为7.1%（10/140）。其中，鼠三毛滴虫阳性率为7.1%（10/140），泰泽隐孢子虫阳性率为2.1%（3/140），人五毛滴虫阳性率为7.1%（10/140），2种肠道原虫共感染率为7.1%（10只：鼠三毛滴虫+人五毛滴虫），3种肠道原虫共感染率为2.1%（3只：鼠三毛滴虫+人五毛滴虫+泰泽隐孢子虫）；供应商C提供的135份小鼠粪便样本中，总肠道原虫感染率为7.4%。其中，鼠三毛滴虫阳性率为7.4%（10/135），未检出泰泽隐孢子虫和人五毛滴虫感染；供应商B提供的130份小鼠粪便样本和供应商D提供的135份小鼠粪便样本中均未检出肠道原虫感染。遗传进化分析结果显示，本研究扩增的鼠三毛滴虫16S-like rRNA基因序列与Genbank 发表的***（Tritrichomonas muris）的16S-like rRNA基因具有98.52%的同源性（Genbank No. AY886846.1），并且在遗传进化树中聚类为一独立分支；人五毛滴虫18S rRNA基因序列与Genbank 发表的***（Pentatrichomonas hominis）18S rRNA基因具有98.27%的同源性（Genbank ***156964.1），聚为一独立分支；泰泽隐孢子虫18S rRNA基因序列与Genbank 发表的***（Cryptosporidium tyzzeri）18S rRNA基因同源性为99.87%（Genbank ***000486.1）。综上，本研究对不同实验动物供应商提供的Balb/c小鼠进行肠道寄生虫检测，发现存在不同程度的肠道原虫感染情况，并发现有鼠三毛滴虫、人五毛滴虫和泰泽隐孢子虫等2种以上寄生虫共感染的现象，从而为今后预防和制定有效的防控策略提供科学依据。

关键词：鼠三毛滴虫人五毛滴虫泰泽隐孢子虫 Balb/c小鼠