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姜黄素通过抑制乙酰转移酶P300表达促进HeLa细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1197-1204页

作者：赵行宇丁思源何奇张巍吉林医药学院生化教研室吉林吉林132013

目的:探讨姜黄素(Cur)通过下调HeLa细胞腺病毒E1A相关300 kD蛋白(P300)调控HeLa细胞的活力及凋亡。方法:将对数生长期的HeLa细胞分别采用20、40、60和80μmol/L Cur处理,并以未处理组细胞作为对照,用CCK-8法检测细胞活力;选取20和40μmo... 详细信息

目的:探讨姜黄素(Cur)通过下调HeLa细胞腺病毒E1A相关300 kD蛋白(P300)调控HeLa细胞的活力及凋亡。方法:将对数生长期的HeLa细胞分别采用20、40、60和80μmol/L Cur处理,并以未处理组细胞作为对照,用CCK-8法检测细胞活力;选取20和40μmol/L Cur处理细胞,以流式细胞术检测细胞凋亡,RT-qPCR、Western blot法检测E6基因的mRNA和蛋白表达及凋亡相关蛋白、P300和组蛋白的表达;构建沉默质粒shE6和阴性对照质粒shNC转染HeLa细胞,设置shNC,shNC+Cur(40μmol/L),shE6以及shE6+Cur(40μmol/L)四组,以CCK-8、流式细胞术以及Western blot法分别检测细胞活力、凋亡以及凋亡相关蛋白的表达;构建沉默质粒siP300和阴性对照质粒siNC转染HeLa细胞,RT-PCR、Western blot法分别检测P300的mRNA和蛋白表达、E6的蛋白表达。结果:与未处理组相比,用不同浓度Cur处理HeLa细胞后能显著抑制其活力并可使早期凋亡率增高(P处理HeLa细胞后,E6的mRNA及蛋白表达均下调,而敲减E6与未敲减E6的Cur处理组相比,敲减组的早期凋亡率以及促凋亡相关蛋白表达均低于未敲减组(P处理HeLa细胞后,P300及相关组蛋白表达均下调(P<0.01)。结论:Cur抑制HPV18阳性宫颈癌细胞的活力并促进其凋亡,机制可能与其下调P300而抑制E6蛋白乙酰化有关。

关键词：姜黄素乙酰化 HeLa细胞 P300

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慢性间歇性低压低氧对糖尿病小鼠糖代谢关键酶基因表达和启动子区甲基化的影响

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环境与职业医学 2024年第8期41卷 911-918页

作者：隋春红何岩涛徐亚维纪朋艳常影张东芳赵东海金连海王程吉林医药学院药学院吉林医药学院临床医学院吉林农业科技学院生物工程学院吉林医药学院基础医学院

[背景]慢性间歇性低压低氧（CIHH）能有效改善2型糖尿病（T2DM）。其过程是否与糖代谢关键酶基因启动子区域DNA甲基化这一表观遗传学调控机制有关尚待明确。[目的]研究CIHH对T2DM小鼠糖代谢关键酶基因表达和启动子区甲基化的影响，探讨C... 详细信息

[背景]慢性间歇性低压低氧（CIHH）能有效改善2型糖尿病（T2DM）。其过程是否与糖代谢关键酶基因启动子区域DNA甲基化这一表观遗传学调控机制有关尚待明确。[目的]研究CIHH对T2DM小鼠糖代谢关键酶基因表达和启动子区甲基化的影响，探讨CIHH调节糖代谢的可能机制。[方法] 40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为常压常氧对照（NN/CON）组、慢性间歇性低压低氧干预对照（CIHH/CON）组、常压常氧糖尿病模型（NN/DM）组、慢性间歇性低压低氧干预糖尿病模型（CIHH/DM）组。高脂高糖饲料喂养NN/DM组和CIHH/DM组小鼠7周后，连续5 d按每天40 mg·kg-1（以体重计）剂量腹腔注射50 mmol·L-1链脲佐菌素（STZ）建立T2DM小鼠模型。CIHH/DM组和CIHH/CON组小鼠每天按模拟5 000 m海拔低压低氧干预6 h,NN/DM组和NN/CON组小鼠一直处于常压常氧环境中，连续4周，期间检测血糖变化。CIHH干预实验后评估小鼠葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性，测定小鼠肝中糖酵解关键酶葡萄糖激酶（GK）、丙酮酸激酶（PK）和糖异生关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）的酶活力、基因mRNA相对表达水平和启动子区域DNA甲基化水平。[结果]与NN/DM组相比，CIHH/DM组小鼠在CIHH干预第25天后血糖降低（P <0.05）。NN/DM组和CIHH/DM组小鼠均呈现糖尿病性耐量曲线，但CIHH/DM组曲线下面积（AUC）低于NN/DM组（P <0.05）。与NN/DM组相比，CIHH/DM组小鼠血清胰岛素含量和胰岛素抵抗指数（HOMA-IRI）降低（P <0.05），肝GK和PK酶活力升高且基因mRNA表达上调（P <0.05）,PEPCK和G6P酶活力下降且基因m RNA表达下调（P <0.05）。各组小鼠肝GK、PK、PEPCK和G6P基因启动子区域DNA平均甲基化水平的差异无统计学意义，且与mRNA表达的关联性也无统计学意义。[结论] CIHH干预可降低T2DM小鼠血糖，改善葡萄糖耐受性和缓解胰岛素抵抗，协调调控糖代谢关键酶活力及其基因m RNA表达，但上述现象与这些糖代谢关键酶基因的启动子区域DNA甲基化水平无关。

关键词：慢性间歇性低压低氧干预糖尿病葡萄糖代谢关键酶 DNA甲基化

超声法与闪式提取法提取刺五加中刺五加苷B的工艺对比研究

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中国饲料 2024年第11期 47-52页

作者：关皎丁思宇季玲玲胡子君王军民朱鹤云韩丽琴吉林医药学院药学院吉林吉林132013 吉林医药学院附属医院吉林吉林132013

本试验采用正交试验优化超声法和闪式提取法提取刺五加中刺五加苷B的提取工艺,并对两种提取方法的最佳工艺进行对比研究。以刺五加苷B的提取率为评价指标,设计L_(9)(3^(4))超声法和闪式提取法的正交试验,以高效液相色谱法测定刺五加苷B... 详细信息

本试验采用正交试验优化超声法和闪式提取法提取刺五加中刺五加苷B的提取工艺,并对两种提取方法的最佳工艺进行对比研究。以刺五加苷B的提取率为评价指标,设计L_(9)(3^(4))超声法和闪式提取法的正交试验,以高效液相色谱法测定刺五加苷B的含量。结果显示:超声法提取率高于闪式提取法,最佳提取工艺为提取溶剂30%乙醇,超声功率200 W,提取时间0.75 h,料液比1:5(g/mL)。本研究可为刺五加在饲料领域的开发和利用提供参考。

关键词：超声法闪式提取法刺五加刺五加苷B 高效液相色谱法

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草苁蓉颗粒提取和成型工艺优化

中国兽医杂志 2024年第2期60卷 73-82页

作者：于欢宫敬利张晓美吴迪马莹慧张慧锋吉林医药学院药学院吉林吉林132013

为了提高草苁蓉颗粒的均一性和稳定性,本试验对其提取和成型工艺进行优化,以提取时间、料液比和提取次数作为关键工艺参数,以浸膏得率为关键质量属性,通过Box-Behnken设计响应面法建立模型,考察关键工艺参数与关键质量属性之间的交叉作... 详细信息

为了提高草苁蓉颗粒的均一性和稳定性,本试验对其提取和成型工艺进行优化,以提取时间、料液比和提取次数作为关键工艺参数,以浸膏得率为关键质量属性,通过Box-Behnken设计响应面法建立模型,考察关键工艺参数与关键质量属性之间的交叉作用,优化草苁蓉提取工艺的设计空间。以填充剂配比、浸膏用量和润湿剂浓度为考察因素,以颗粒合格率、溶化性、吸湿率和感官评价的总评归一值(OD值)作为评价指标,采用单因素试验结合Box-Behnken设计响应面法优化草苁蓉颗粒成型工艺。结果显示,草苁蓉最佳提取工艺为:提取时间60 min,液料比10∶1,提取次数2次。最佳成型工艺为:辅料乳糖∶糊精=3∶1,浸膏用量为7%,润湿剂为75%乙醇。该方法稳定可行且重复性好,可用于草苁蓉颗粒的提取和成型工艺。

关键词：质量源于设计 Box-Behnken设计响应面法草苁蓉颗粒提取工艺成型工艺

苦参总黄酮对醋酸铅诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激的改善作用及对Keap1/Nrf2信号通路的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 320-325页

作者：刘玥欣来永巍王艳春徐博路倩安英任旷范红艳吉林医药学院药学院药理学教研室吉林吉林132013 吉林医药学院基础医学院机能实验室吉林吉林132013

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用... 详细信息

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、50和80µmol·L^(-1))LA和不同浓度(0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1))SF分别干预24 h后的TM3细胞存活率;将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组。除空白对照组外,其他各组均采用50µmol·L^(-1)LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型,其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L^(-1)SF。利用MTT法检测TM3细胞存活率;WST-1法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。结果:MTT法检测,与0µmol·L^(-1)LA组比较,10、20、50和80µmol·L^(-1)LA组TM3细胞存活率明显降低(P<0.01);与0 mg·L^(-1)SF组比较,12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1)SF组TM3细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01);与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高(P<0.01);WST-1法和TBA法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01);Western blotting法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用,并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平,升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平。

关键词：苦参总黄酮醋酸铅睾丸间质细胞氧化应激 KELCH状ECH相关蛋白1 核因子E2相关因子2

高同型半胱氨酸血症对心血管病进程的加速作用

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生理科学进展 2024年第3期55卷 248-256页

作者：王淑美刘雅欣赵一桐任清照林凡琪李明光吉林医药学院检验学院吉林132013

同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)作为人体甲硫氨酸的代谢产物,其体内水平与多种疾病的发病相关。高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia, HHcy)是全身动脉粥样硬化、心血管病(cardiovascular disease, CVD)以及中风发病的独立危险... 详细信息

同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)作为人体甲硫氨酸的代谢产物,其体内水平与多种疾病的发病相关。高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia, HHcy)是全身动脉粥样硬化、心血管病(cardiovascular disease, CVD)以及中风发病的独立危险因素。Hcy诱导的炎症反应、脂代谢异常、凝血功能障碍等,将严重影响血管的正常结构与功能,从而加速动脉粥样硬化的进程。服用叶酸和B族维生素,可以有效降低HHcy患者血液Hcy水平。本文将围绕HHcy加速CVD进程的机制进行综述,从而为临床预防和治疗HHcy提供新思路。

关键词：同型半胱氨酸高同型半胱氨酸血症心血管病致病机制 H型高血压

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黄芪桂枝五物汤复方颗粒成型工艺优化

中成药 2024年第2期46卷 569-573页

作者：刘杨顾晋亿沈小宽葛胜宇金莉莉关皎朱鹤云吉林医药学院药学院吉林吉林132013 延边大学药学院吉林延边133002

目的优化黄芪桂枝五物汤复方颗粒成型工艺。方法以制软材难易程度、制粒难易程度、颗粒性状、颗粒成型率、颗粒溶化性为评价指标,优化颗粒稀释剂及其配比;以颗粒吸湿性、成型性、堆密度、休止角、溶化性为评价指标,正交试验优化成型... 详细信息

目的优化黄芪桂枝五物汤复方颗粒成型工艺。方法以制软材难易程度、制粒难易程度、颗粒性状、颗粒成型率、颗粒溶化性为评价指标,优化颗粒稀释剂及其配比;以颗粒吸湿性、成型性、堆密度、休止角、溶化性为评价指标,正交试验优化成型工艺。结果最优制粒浸膏密度为1.27 g/mL,稀释剂为可溶性淀粉,浸膏与可溶性淀粉的比例为1∶2.5;润湿剂为70%乙醇,用量为20%。结论该方法合理可行,可为制备黄芪桂枝五物汤复方颗粒提供科学依据。

关键词：黄芪桂枝五物汤复方颗粒成型工艺正交试验

有机催化4-羟基香豆素与靛红、丙二腈的不对称Michael加成/环化串联反应

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化学研究与应用 2024年第9期36卷 2073-2079页

作者：孙玉虹顾盈盈王黎明金瑛吉林医药学院药学院吉林吉林132013 延边大学药学院吉林延吉133000

含有杂环的光学活性螺环羟吲哚衍生物因其多种多样的生物活性而备受关注。靛红衍生物的不对称Michael/环化串联反应是构建手性螺环羟吲哚化合物的重要方法。本文将11种有机催化剂用于靛红、4-羟基香豆素与丙二腈的不对称Michael加成/环... 详细信息

含有杂环的光学活性螺环羟吲哚衍生物因其多种多样的生物活性而备受关注。靛红衍生物的不对称Michael/环化串联反应是构建手性螺环羟吲哚化合物的重要方法。本文将11种有机催化剂用于靛红、4-羟基香豆素与丙二腈的不对称Michael加成/环化串联反应。筛选出最佳的催化剂体系为:10 mol%金鸡纳碱衍生物催化剂1f,二氯甲烷(1 m L)为溶剂,室温反应。将最佳条件用于不同取代靛红的反应,以80~88%的产率和最高达96%的对映选择性获得了螺[羟吲哚-3,4′-吡喃色烯]化合物。本研究拓宽了该反应的催化剂类型和底物范围。

关键词：金鸡纳碱衍生物有机催化不对称Michael加成/环化串联反应 4-羟基香豆素靛红

复方中药制剂对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响

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中国畜牧兽医 2024年第6期51卷 2717-2725页

作者：董媛王嘉宁刘佳琪马广辉朱洁于欢王会岩吉林医药学院检验学院吉林132013 吉林医药学院抗体工程科技协同创新中心吉林132013

【目的】探究蛹虫草、灵芝、黄芪、五味子、党参、当归、茯苓复方中药制剂对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。【方法】建立H22荷瘤小鼠模型,随机将小鼠分为模型组、复方中药制剂高(250 mg/(kg·d))、中(50 mg/(kg·d))和低(10 mg/(kg·d))... 详细信息

【目的】探究蛹虫草、灵芝、黄芪、五味子、党参、当归、茯苓复方中药制剂对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。【方法】建立H22荷瘤小鼠模型,随机将小鼠分为模型组、复方中药制剂高(250 mg/(kg·d))、中(50 mg/(kg·d))和低(10 mg/(kg·d))剂量组,各剂量组灌胃给药,1次/d,模型组灌胃同等体积生理盐水,试验期3周,另设置正常组进行常规饲喂。末次给药后采集抗凝全血,检测小鼠血细胞数量、血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)、细胞因子水平。用流式细胞术检测外周血CD4~+/CD8~+ T细胞亚群;通过小鼠脾淋巴细胞转化试验、碳粒廓清试验考察荷瘤小鼠免疫活性。【结果】与正常组相比,模型组小鼠血液中白细胞(WBC)、血小板(PLT)、淋巴细胞(W-SCR)数量极显著或显著减少(P<0.01;P<0.05),白细胞介素-2(IL-2)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、SOD、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性以及细胞色素C(Cyt C)浓度均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05)。与模型组相比,高、中和低剂量组小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α含量和SOD、Caspase-3活性均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),MDA含量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05);中剂量组小鼠血液中WBC、PLT数量极显著或显著增加(P<0.01;P<0.05);高剂量组小鼠血液中PLT数量极显著增加(P<0.01),Cyt C浓度显著升高(P<0.05)。流式细胞检测结果显示,模型组小鼠血液T淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群细胞数量较正常组显著减少(P<0.05)。与模型组相比,复方中药制剂高、中剂量组小鼠血液T淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群细胞数量显著增加(P<0.05),高、中剂量组小鼠刺激指数、半数溶血值和吞噬指数均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。【结论】复方中药制剂能提高H22荷瘤小鼠免疫活性,进而促进肝癌细胞凋亡。

关键词：复方中药制剂荷瘤小鼠免疫调节肝癌