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汉族人群LRRK2基因突变携带者与非携带者患家族性帕金森病的风险预测

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中国老年学杂志 2024年第5期44卷 1099-1101页

作者：赵丽丽张硕张洋王鹏姜立刚吉林医药学院附属医院吉林吉林132000 北华大学基础医学院

目的探索汉族人群LRRK2基因突变携带者与非携带者患家族性帕金森病(PD)风险差异。方法收集58例家族性PD患者为试验组,58例非PD患者为对照组,磁共振成像(MRI)确认分组结果;抽取外周血,提取基因组DNA作为模板进行聚合酶链反应(PCR)扩增... 详细信息

目的探索汉族人群LRRK2基因突变携带者与非携带者患家族性帕金森病(PD)风险差异。方法收集58例家族性PD患者为试验组,58例非PD患者为对照组,磁共振成像(MRI)确认分组结果;抽取外周血,提取基因组DNA作为模板进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并以产物进行Sanger测序,分析结果。结果 p.G2385R基因突变型在汉族人群中所占的比例最高,且试验组LRRK2基因p.G2385R位点突变型频率分布显著高于对照组(P0.05)。结论 4类突变位点中,p.R1441C、p.G2019S和p.K616R 3突变位点对家族性PD风险预测是无意义突变;而p.G2385R突变型与家族性PD具有相关性,且该位点具备预测家族性PD患病的潜在价值。

关键词：家族性帕金森病 LRRK2基因基因突变 Sanger测序

前驱性便秘的帕金森病患者血清炎性因子IL-6、IL-1β及IL-17的变化及其临床意义

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中国老年学杂志 2024年第4期44卷 845-847页

作者：赵丽丽高健张硕张洋王鹏姜立刚吉林医药学院附属医院吉林吉林132000 北华大学基础医学院

目的分析血清炎性因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β及IL-17在前驱性便秘(PC)的帕金森病(PD)患者外周静脉血血清中的临床意义。方法选取原发性PD患者,参照《中华医学会慢性功能性便秘诊断标准》分为两组,研究组为具有PC症状PD患者;对照组为... 详细信息

目的分析血清炎性因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β及IL-17在前驱性便秘(PC)的帕金森病(PD)患者外周静脉血血清中的临床意义。方法选取原发性PD患者,参照《中华医学会慢性功能性便秘诊断标准》分为两组,研究组为具有PC症状PD患者;对照组为无PC的PD患者。采集两组一般特征及日常饮水量、运动情况,酶联免疫吸附试验检测血清IL-6、IL-1β及IL-17含量。结果两组日饮水量和适量运动量构成比有统计学差异(P<0.05),研究组外周血清IL-6、IL-1β和IL-17水平均高于对照组,其中两组IL-6水平差异有统计学意义(P<0.05)。研究组外周血清IL-6、IL-1β和IL-17含量与患者年龄、便秘病程和程度加重的增长趋势相同(P<0.05)。结论饮食习惯、活动状态是PD患者发生PC的危险因素,炎症反应在PD患者的前驱性便秘发病中起一定作用。

关键词：前驱性便秘帕金森病炎症因子

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结核病蛋白亚单位疫苗佐剂研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第6期44卷 489-500页

作者：周帅牛红霞浙江中医药大学基础医学院病原生物与免疫学教研室杭州310053

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的全球传染病,是导致人类死亡的十大主要原因之一。卡介苗(BCG)是目前唯一临床应用的结核病疫苗,但其对成人结核病的保护作用不明确。在结核病新型疫苗中,蛋白亚单位疫苗因其成分明确、安全性高的特点,... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的全球传染病,是导致人类死亡的十大主要原因之一。卡介苗(BCG)是目前唯一临床应用的结核病疫苗,但其对成人结核病的保护作用不明确。在结核病新型疫苗中,蛋白亚单位疫苗因其成分明确、安全性高的特点,且具有强化BCG效应的优势,近年来备受关注。然而,亚单位结核病疫苗中的蛋白抗原所诱导的免疫应答较弱,通常需要佐剂辅助以增强其免疫效果。本综述旨在关注结核病疫苗新制剂中使用的各类佐剂(包括已进入临床试验阶段和尚处于临床前开发阶段的佐剂),对各类佐剂的优缺点及可应用性进行客观评价,并指出目前佐剂研究中存在的问题及未来的研究方向。

关键词：结核病亚单位疫苗佐剂中药佐剂

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家族性高胆固醇血症教学案例设计与实践

基础医学教育 2024年 833-836页

作者：刘洋金玉姬孙奇王弘珺吉林医药学院基础医学院细胞生物学教研室

从培养整合思维和提高分析能力的角度,文章以受体介导的胞吞作用为知识点构建了家族性高胆固醇血症案例,阐述教学案例的设计与实施,并对案例教学进行分析总结。通过自学和讨论家族性高胆固醇血症的发病机制、临床表现以及疾病的预防与治... 详细信息

从培养整合思维和提高分析能力的角度,文章以受体介导的胞吞作用为知识点构建了家族性高胆固醇血症案例,阐述教学案例的设计与实施,并对案例教学进行分析总结。通过自学和讨论家族性高胆固醇血症的发病机制、临床表现以及疾病的预防与治疗,学生将细胞生物学与医学知识相结合,提升了整合思维能力。基于跨学科的案例教学促进学生的自主学习和分析讨论,是培养创新型人才的重要手段。

关键词：细胞生物学家族性高胆固醇血症整合教学案例教学教学方法

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“医学微生物学”课程思政教学改革实施路径

教育教学论坛 2024年第20期 78-81页

作者：刘迪孙宏宇刘水冯宪敏吉林医药学院基础医学院吉林吉林132013

新时代教育背景下,如何实现医学专业课程思政新角度、新深度、新效度,实现医学人文教育、医德教育和职业素养教育,是专业课程和授课教师必须思考的问题。“医学微生物学”是连接医学知识与临床应用的桥梁课程,课程中蕴含的思政元素渗透... 详细信息

新时代教育背景下,如何实现医学专业课程思政新角度、新深度、新效度,实现医学人文教育、医德教育和职业素养教育,是专业课程和授课教师必须思考的问题。“医学微生物学”是连接医学知识与临床应用的桥梁课程,课程中蕴含的思政元素渗透了历史、人文、政治、民生、经济、军事等各个领域。以“医学微生物学”课程为例,优化思政教学内容、创新思政教学方法和考核评价体系,并通过问卷调查分析改革实施效果,探索“医学微生物学”课程思政教学改革路径,提升学生的道德素养、责任意识、职业认知和服务能力。

关键词：课程思政医学微生物学教学改革

基于酵母双杂交技术对与纳尔逊海湾正呼肠孤病毒σNS相互作用宿主蛋白的筛选

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吉林大学学报（医学版） 2024年第5期50卷 1313-1321页

作者：孙绿茵马竹萍李润林李永刚陶晓莉锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨小鼠成纤维L929细胞中与纳尔逊海湾正呼肠孤病毒(NBV)σNS蛋白相互作用(互作)的宿主蛋白,阐明宿主蛋白对病毒复制的影响。方法:构建表达σNS蛋白的诱饵质粒pGBKT7-S3,采用测序技术验证诱饵质粒在Y2H酵母细胞中的准确表达。将pG... 详细信息

目的:探讨小鼠成纤维L929细胞中与纳尔逊海湾正呼肠孤病毒(NBV)σNS蛋白相互作用(互作)的宿主蛋白,阐明宿主蛋白对病毒复制的影响。方法:构建表达σNS蛋白的诱饵质粒pGBKT7-S3,采用测序技术验证诱饵质粒在Y2H酵母细胞中的准确表达。将pGBKT7-S3和pGADT7质粒分别和共同转化至Y2HGold酵母细胞中,涂布于固体培养基进行培养,观察菌落生长情况,确认σNS蛋白对酵母细胞无毒性,不能自行激活报告基因。诱饵质粒pGBKT7-S3与小鼠成纤维L929细胞的cDNA文库进行杂交,对编码互作蛋白的阳性克隆进行质粒抽提,阳性测序结果通过Uniprot数据库检索筛选得到与NBVσNS互作的蛋白。对互作蛋白进行基因本体论(GO)功能富集分析、京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析和STRING生物信息学分析。结果:成功筛选出61个阳性克隆。DNA测序分析和BLAST比对分析去除23个未匹配到数据库和测序基本相同的阳性克隆。阳性测序结果通过Uniprot数据库检索筛选得到38个与NBVσNS互作的蛋白,31个蛋白参与细胞生物过程,36个蛋白是细胞解剖成分,31个蛋白具有结合功能,5个蛋白是线粒体呼吸链组成部分,7个蛋白是核糖体蛋白和核糖体大小亚基的组成部分,2个蛋白参与铁代谢稳态。GO功能富集分析,互作蛋白参与的生物过程(BP)富集在细胞过程、代谢过程、生物学调节、定位和对刺激的反应等;细胞组分主要是细胞解剖成分和含蛋白复合物;分子功能集中在结合、催化活性、结构分子活性和转运活性等方面。KEGG信号通路富集分析,蛋白在遗传信息处理途径的翻译、折叠、分类和降解信号通路中高度富集,在机体系统中主要与消化系统有关联;与多种病毒性传染病和癌症有关联。STRING分析,互作蛋白涉及核糖体蛋白类、蛋白修饰类、代谢类和免疫蛋白类等功能蛋白。结结论论:成功筛选出与NBVσNS蛋白互作的蛋白,宿主蛋白在病毒复制中具有重要作用。

关键词：纳尔逊海湾正呼肠孤病毒酵母双杂交实验 σNS蛋白蛋白互相作用生物信息学

水泡性口炎病毒对体外血管内皮屏障功能的损伤作用及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第5期50卷 1275-1285页

作者：曹宇璇陈为孙成彪赵娜王燕董明鑫许娜刘文森李咏梅北华大学基础医学院病原生物学教研室吉林吉林132013 中国农业科学院长春兽医研究所动物性食品安全与生物交叉研究室吉林长春130122 河南科技大学应用工程学院食品医药教研组河南三门峡472099 吉林医药学院教务处吉林吉林132013

目的:探讨水泡性口炎病毒(VSV)对血管内皮(VE)屏障的损伤作用,并阐明其作用机制。方法:采用犬肾细胞对VSV进行扩增,采用小鼠脑血管内皮瘤bEnd. 3细胞检测VSV的半数组织培养感染剂量(TCID_(50)),采用300倍TCID_(50)进行后续实验。将bEnd... 详细信息

目的:探讨水泡性口炎病毒(VSV)对血管内皮(VE)屏障的损伤作用,并阐明其作用机制。方法:采用犬肾细胞对VSV进行扩增,采用小鼠脑血管内皮瘤bEnd. 3细胞检测VSV的半数组织培养感染剂量(TCID_(50)),采用300倍TCID_(50)进行后续实验。将bEnd. 3细胞分为感染0 h组、感染4 h组、感染8 h组和感染12 h组,进行VSV感染损伤VE屏障实验;将bEnd. 3细胞分为对照组、感染组和纠正组,进行抑制VSV复制与VE屏障恢复实验。将bEnd. 3细胞接种于Transwell小室,构建体外VE屏障模型,采用细胞电压电阻仪检测感染VSV不同时间后各组bEnd. 3细胞中跨上皮电阻(TER),采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖渗漏实验检测各组渗透系数,采用免疫荧光染色法观察VSV感染后各组bEnd. 3细胞骨架及黏附连接(AJs)中VE-钙黏蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)和磷酸化β-连环蛋白(p-β-catenin)定位变化,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中Wnt和β-catenin mRNA表达水平,采用Western blotting法检测各组细胞中Wnt、β-catenin和p-β-catenin表达水平。结果:VSV的TCID_(50)为10^(-4.5)·100μL^(-1)。Transwell小室实验检测,与感染0 h比较,其他各组细胞中TER明显降低(P0.05)。Western blotting法检测,与感染0 h比较,其他各组细胞中Wnt蛋白表达水平明显降低(P0.05),p-β-catenin表达水平明显升高(P室实验检测,与感染组比较,纠正组bEnd. 3细胞中TER明显升高(P0.05),p-β-catenin表达水平明显降低(P<0.05)。结论:VSV感染后可引起LDLR失活,降低Wnt蛋白表达水平,造成β-catenin磷酸化水平升高并发生内化,破坏AJs稳定性,最终导致VE屏障损伤。

关键词：水泡性口炎病毒血管内皮屏障黏附连接低密度脂蛋白受体 Wnt/β-连环蛋白信号通路

发热伴血小板减少综合征病毒非结构蛋白的表达和定位及宿主互作蛋白的筛选和分析

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吉林大学学报（医学版） 2024年第5期50卷 1286-1296页

作者：骆丽可程子文程廓李永刚王大为杨宝玲锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学畜牧兽医学院基础兽医学教研室辽宁锦州121000

目的:通过免疫沉淀联合质谱分析的方法筛选发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)非结构蛋白(NSs)的宿主互相作用(互作)蛋白,探讨互作蛋白的功能、亚细胞定位及参与的生物途径,为阐明SFTSV的复制和致病机制提供依据。方法:将真核表达载体pS... 详细信息

目的:通过免疫沉淀联合质谱分析的方法筛选发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)非结构蛋白(NSs)的宿主互相作用(互作)蛋白,探讨互作蛋白的功能、亚细胞定位及参与的生物途径,为阐明SFTSV的复制和致病机制提供依据。方法:将真核表达载体pSFTSV-NSs-Flag (实验组)和Flag-CMV-3 (阴性组)分别转染进人胚胎肾293T细胞中,同时设置空白组(不进行任何处理)。收集各组细胞裂解液,采用间接免疫荧光和Western blotting法验证SFTSV NSs在宿主细胞中的表达及定位。蛋白裂解液经protein A/G处理,采用免疫沉淀法富集与NSs结合的宿主蛋白,通过银染和考马斯亮蓝染色初步分析捕获的互作蛋白,观察各组蛋白差异条带。采用液相色谱和串联质谱技术得到蛋白质的序列信息,保留可信蛋白基于UniProt数据库检索,对鉴定到的蛋白进行基因本体论(GO)功能富集分析、蛋白结构域和功能位点数据库(IPR)、真核生物同源蛋白簇(KOGs)功能注释、京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析、亚细胞定位和转录因子(TF)功能注释,确定互作蛋白的亚细胞结构、基因功能及参与的生物过程。结果:SFTSV NSs在相对分子质量33 000处表达单一特异性条带,免疫荧光检测其定位于细胞质中,且聚集呈砂粒体包涵体样。银染和考马斯亮蓝染色,实验组和阴性组均存在显著差异条带。质谱筛选出46种潜在互作蛋白;GO功能富集分析、KOGs功能注释和KEGG信号通路富集分析,与病毒翻译、细胞代谢及蛋白质运输相关的生物途径富集到较多数目的蛋白,注释中有8种蛋白具有中间丝蛋白结构域。亚细胞定位所占百分率最高的是细胞质蛋白;与NSs定位场所一致。TF功能注释,有1种蛋白来自NF-Y家族。结论:互作蛋白在协助蛋白质正确折叠、参与核糖体翻译和构成细胞骨架等进程中发挥作用,可能参与了抗病毒复制,可作为候选蛋白进一步研究SFTSV的复制机制。

关键词：发热伴血小板减少综合征病毒非结构蛋白蛋白-蛋白互相作用免疫沉淀质谱

基于自然杀伤(NK)细胞的肝癌免疫疗法研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第1期40卷 80-88页

作者：朱鑫月周玉付朱诗国上海中医药大学基础医学院免疫学与病原生物学教研室上海201203

肝细胞肝癌(HCC)异质性高,晚期诊断和化疗耐药使其成为我国难治性肿瘤之一。自然杀伤(NK)细胞在机体的免疫监视过程中充当重要角色。但在肝癌的进展过程中,NK细胞的功能受损致肿瘤免疫逃逸。该文总结了HCC中基于NK细胞的不同免疫治疗策... 详细信息

肝细胞肝癌(HCC)异质性高,晚期诊断和化疗耐药使其成为我国难治性肿瘤之一。自然杀伤(NK)细胞在机体的免疫监视过程中充当重要角色。但在肝癌的进展过程中,NK细胞的功能受损致肿瘤免疫逃逸。该文总结了HCC中基于NK细胞的不同免疫治疗策略,包括直接输注过继性NK细胞免疫疗法、基因工程NK细胞免疫疗法、靶向NK细胞受体免疫疗法、改变免疫抑制微环境免疫疗法、细胞因子增强NK细胞肿瘤毒性免疫疗法以及中医药增强NK细胞肿瘤毒性免疫疗法,这些基于NK细胞的免疫治疗策略已显示出巨大的治疗潜力。

关键词：自然杀伤细胞肝癌肿瘤逃逸免疫疗法综述