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新肾病1号方调控miR-199b-5p抑制肾小管上皮间充质转化改善肾纤维化的作用研究

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中草药 2024年第5期55卷 1600-1608页

作者：曾聪聪俞文秀王成功姜程曦程锦国温州医科大学附属第一医院中医科浙江温州325000 温州医科大学浙江温州325000 温州医科大学药学院浙江温州325000

目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻... 详细信息

目的研究miR-199b-5p在新肾病1号方抗肾纤维化中的作用。方法36只大鼠随机分为假手术组、模型组及新肾病1号方低、中、高剂量(9.69、19.38、38.76 g/kg)组和氯沙坦(50 mg/kg)组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧单侧输尿管梗阻方法建立大鼠肾纤维化模型,给予药物干预14 d后,检测各组大鼠肾功能;苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察肾脏组织病理变化;对假手术组、模型组和新肾病1号方高剂量组大鼠肾脏组织进行miRNA测序,筛选差异表达miRNAs,qRT-PCR验证,并进行靶基因的基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,生物信息学分析miRNAs与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、肾纤维化的关联性。免疫荧光法和Western blotting检测肾组织EMT相关蛋白表达情况。结果与模型组比较,新肾病1号方组大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平均明显降低(P<0.05、0.01),肾组织病理变化有所改善。miRNA测序分析发现,miR-199b-5p在模型组表达上调,而在新肾病1号方高剂量组表达下调,qRT-PCR验证了其mRNA相对表达量与测序结果基本一致;miR-199b-5p的靶基因中与EMT、肾纤维化相关功能的90个。与模型组比较,新肾病1号方组肾组织中EMT相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,αSMA)和波形蛋白(Vimentin)表达下调(P<0.05、0.001),E-钙黏蛋白(E-cadherin)和紧密连接蛋白-1(Zonula occludens1,ZO-1)表达上调(P<0.05)。结论新肾病1号方可能通过下调miR-199b-5p表达,抑制EMT,从而发挥抗肾纤维化的作用。

关键词：新肾病1号方上皮间充质转化肾纤维化 RNA测序 miR-199b-5p 柴胡皂苷黄芪甲苷盐酸小檗碱

补阳还五汤通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4197-4206页

作者：张修红傅开龙林侃李楠姚明龙郑关毅福建医科大学附属协和医院中医科福建福州350001

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制,180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miR-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组,每组36只;每组又按再灌注时间分为第3、7... 详细信息

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制,180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miR-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组,每组36只;每组又按再灌注时间分为第3、7、14天3个亚组。除假手术组外,其余各组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血90 min后再灌注。补阳还五汤组、激动剂组、激动剂阴性对照组建模24 h后开始给予补阳还五汤灌胃,每日2次;假手术组、模型组灌胃等量生理盐水,直至处死的前1 d。激动剂组和激动剂阴性对照组建模24 h后分别于侧脑室注射miR-26a-5p激动剂和miR-26a-5p激动剂阴性对照剂,其他各组注射等量生理盐水。各组建模24 h后腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU),每日1次,直至处死的前1 d。采用改良版神经损伤严重程度评分(mNSS)评价神经功能缺损,2,3,5-三苯四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,免疫荧光双标记法检测BrdU/NeuN双阳性(BrdU^(+)/NeuN^(+))细胞数评估新生神经元,双荧光素酶实验验证PTEN是miR-26a-5p的靶基因,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测PTEN及miR-26a-5p的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PTEN、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的表达。结果显示,与模型组比较,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,缩小脑梗死体积,增加BrdU+/NeuN+细胞数,上调miR-26a-5p的表达,调控PTEN/PI3K/Akt信号通路,促进神经元新生;侧脑室注射miR-26a-5p激动剂后加强上述效应。综上所述,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,减小脑梗死体积,促进脑缺血大鼠神经元新生,其机制可能是通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路。

关键词：补阳还五汤脑缺血再灌注神经保护 miR-26a-5p 大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血 PTEN/PI3K/Akt

外泌体调节复发性流产小鼠子宫内膜细胞上皮间质转化的作用机制研究

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中国全科医学 2024年

作者：李梦元李冠杉韩倩李思瑶郑舒畅辛明蔚尹晓丹王景尚武颖何军琴首都医科大学附属北京妇产医院中医科

背景复发性流产（RSA）是常见的生殖障碍性疾病，在胚胎植入过程中，子宫内膜发生上皮间充质转化（EMT）,RSA的发生与该过程减弱密切相关。子宫内膜来源外泌体及其携带的miRNA参与细胞间通讯，影响细胞EMT，与RSA关系密切，但具体作用... 详细信息

背景复发性流产（RSA）是常见的生殖障碍性疾病，在胚胎植入过程中，子宫内膜发生上皮间充质转化（EMT）,RSA的发生与该过程减弱密切相关。子宫内膜来源外泌体及其携带的miRNA参与细胞间通讯，影响细胞EMT，与RSA关系密切，但具体作用机制尚不明确。目的本研究聚焦于外泌体在细胞EMT中的功能，通过实验验证子宫内膜来源外泌体及其分泌的miRNA-221对RSA小鼠子宫内膜细胞EMT的调控作用。方法 2021年10月—2022年5月，选取SPF级、健康8周龄雌性小鼠24只，随机选取12只作为正常对照组，剩余12只小鼠制作RSA模型，造模结束后雌雄合笼，妊娠第4日处死雌性小鼠，分离和培养子宫内膜上皮细胞并收集外泌体，通过透射电镜和WB进行外泌体鉴定；通过CCK8、Transwell和流式细胞术检测外泌体干预前后两组细胞增殖、侵袭、迁移能力；细胞EMT相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP7、MMP9）及外泌体标志蛋白（CD63、CD81、TSG101）的表达；外泌体处理后的细胞EMT标志蛋白（CD24-APC、CD44-FITC）的表达；转染miRNA-221模拟物和抑制物分析外泌体源性miRNA-221对小鼠子宫内膜上皮细胞EMT的作用，并通过WB和双荧光素酶报告基因检测进行分析。结果RSA组小鼠的子宫内膜上皮细胞具有异常的EMT，小鼠子宫内膜上皮细胞能够分泌外泌体。添加外泌体的RSA组细胞增殖率、迁移能力、侵袭能力、CD44+/CD24+表达水平高于细胞上清液RSA组（P<0.05）。与细胞上清液RSA组相比，添加外泌体的RSA组细胞的EMT标志蛋白E-cadherin水平升高，间质样标志蛋白N-cadherin和Vimentin以及基质标志蛋白MMP7、MMP9蛋白水平降低（P<0.05）。RSA组miR-221表达水平低于正常对照组（P<0.05）。与随机mi RNA相比，miRNA-221模拟物激活了PI3K-AKT通路、NF-kB通路和p38通路（P<0.05）。与随机miRNA相比，miRNA-221模拟物降低了PTEN mRNA的表达水平（P<0.05），而miRNA-221抑制剂转染则增加了PTEN mRNA的表达水平（P<0.05）。结论子宫内膜来源外泌体miRNA-221可通过负向调控Pten基因，激活PI3K-AKT通路，促进子宫内膜上皮细胞EMT，影响RSA妊娠结局。

关键词：复发性流产上皮-间充质转化外泌体 miRNA-221 Pten基因 PI3K-AKT通路

含有3,4-二氯苯基的酰胺类化合物的合成及抗肿瘤活性研究

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有机化学 2024年第1期44卷 232-241页

作者：王博珍张婕粘春惠金茗茗孔苗苗李物兰何文斐吴建章温州医科大学附属眼视光医院浙江温州325027 温州医科大学药学院浙江温州325035 温州医科大学附属第一医院浙江温州325035

为了寻找高效抗肿瘤活性化合物,根据药物化学拼合原理,在姜黄素骨架中引入酰胺键和3,4-二氯取代,设计并合成了19个新型含有3,4-二氯苯基的酰胺类化合物.用噻唑蓝比色法(MTT)检测化合物对AGS和BGC-823胃癌细胞的体外抗肿瘤活性.结果表明... 详细信息

为了寻找高效抗肿瘤活性化合物,根据药物化学拼合原理,在姜黄素骨架中引入酰胺键和3,4-二氯取代,设计并合成了19个新型含有3,4-二氯苯基的酰胺类化合物.用噻唑蓝比色法(MTT)检测化合物对AGS和BGC-823胃癌细胞的体外抗肿瘤活性.结果表明,部分化合物表现出良好的抑制胃癌细胞生长的活性,其中(2E)-3-(3,4-二氯苯基)-1-(2-{3-[4-(三氟甲基)苯基]丙酰基}乙氮基)丙-2-烯-1-酮(17)对AGS细胞的半数抑制浓度(IC50)值为(1.94±0.94)μmol/L.此外,细胞集落形成、划痕、流式细胞术以及蛋白质印迹(Western blot)实验结果表明,化合物17能明显抑制AGS细胞的生长和迁移,阻滞细胞周期于G0/G1期,并诱导促凋亡相关蛋白多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶降解产物(CleavedPARP)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)呈剂量依赖性上调,诱导抗凋亡蛋白Bcl-2下调,从而诱导细胞凋亡.初步的机制研究显示,化合物17可能通过抑制双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)-蛋白激酶B(PKB,AKT)信号通路起到体外抗胃癌作用.综上所述,研究结果表明含有3,4-二氯苯基的酰胺类化合物可能是一类有药用研究前景的小分子化合物,化合物17有望成为一种抗肿瘤候选化合物.

关键词：姜黄素类似物 3,4-二氯苯基酰胺键合成抗肿瘤活性

含(杂)芳磺酰基哌嗪的蛇床子素衍生物的合成及抗菌活性

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高等学校化学学报 2024年第7期45卷 68-77页

作者：杨家强吴学姣卢子聪陈阳密佘慧娴刘讴灵遵义医科大学药学院遵义563000

设计合成了25个含(杂)芳磺酰基哌嗪的蛇床子素衍生物,经核磁共振波谱(1H NMR和13C NMR)及元素分析确证了其结构.抗菌活性测试结果表明,化合物4q对金黄色葡萄球菌(***)、大肠杆菌(***)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐氟喹诺酮大肠... 详细信息

设计合成了25个含(杂)芳磺酰基哌嗪的蛇床子素衍生物,经核磁共振波谱(1H NMR和13C NMR)及元素分析确证了其结构.抗菌活性测试结果表明,化合物4q对金黄色葡萄球菌(***)、大肠杆菌(***)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐氟喹诺酮大肠杆菌(FREC)的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.5,1,2和2μg/mL,化合物4s对***,***,MRSA和FREC的MIC分别为0.25,0.5,1和2μg/mL,化合物4u对***,***,MRSA和FREC的MIC分别为0.5,2,1和4μg/mL,3个化合物的抗***活性与对照药苯唑西林相似,且优于诺氟沙星;抗***,MRSA和FREC活性优于对照药苯唑西林和诺氟沙星.研究结果表明,(杂)芳磺酰基哌嗪的引入能有效提高抗菌活性,扩大抗菌谱.

关键词：蛇床子素衍生物哌嗪磺酰胺抗菌活性

熟地熄风汤联合达灵复治疗帕金森病的疗效及对患者血清脑神经营养因子、炎症反应的影响

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中药材 2024年 2081-2085页

作者：季静杨宁王海东夏毅南京医科大学附属脑科医院中医科

目的:观察熟地熄风汤联合达灵复治疗帕金森病(PD)的疗效及对血清脑神经营养因子、炎症反应的影响。方法:将南京医科大学附属脑科医院收治的132例PD患者随机分为两组,对照组65例用达灵复治疗,观察组67患者联合熟地熄风汤治疗,3个月后评... 详细信息

目的:观察熟地熄风汤联合达灵复治疗帕金森病(PD)的疗效及对血清脑神经营养因子、炎症反应的影响。方法:将南京医科大学附属脑科医院收治的132例PD患者随机分为两组,对照组65例用达灵复治疗,观察组67患者联合熟地熄风汤治疗,3个月后评估临床疗效,并观察治疗前后中医证候积分(主症评分、次症评分、总分)、脑神经营养因子(BDNF、NGF、GDNF、NT-3)、炎症因子(IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α)、氧化应激(SOD、MDA、GSH-Px)、认知和运动能力(UPDRS评分)、非运动症状(HAMA、HAMD、PDSS评分)、生活质量(PDQ-39)变化情况,对用药安全性进行评价。结果:与治疗前比较,治疗后两组患者中医证候(主症评分、次症评分、总分)及血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平和UPDRS、HAMA、HAMD、PDQ-39评分显著降低,血清BDNF、NGF、GDNF、NT-3、IL-10、SOD、GSH-Px水平及PDSS评分显著升高(P中医证候积分(主症评分、次症评分、总分)及血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平和UPDRS、HAMA、HAMD、PDQ-39评分显著低于对照组,血清BDNF、NGF、GDNF、NT-3、IL-10、SOD、GSH-Px水平及PDSS评分显著高于对照组(P<0.05)。观察组总有效率显著高于对照组,不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论:熟地熄风汤联合达灵复能改善PD症状,疗效显著,能促进脑神经营养因子表达,抑制机体炎症反应,调节氧化应激水平,提高生活质量,用药安全。

关键词：熟地熄风汤达灵复帕金森病神经营养因子炎症反应氧化应激

基于红外热成像技术探究原发性痛经女性图像特点研究

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中国实用妇科与产科杂志 2024年第4期40卷 459-462页

作者：陈亿斌陈春林刘萍吕英宫凤英南方医科大学南方医院妇产科广东广州510515 南方医科大学南方医院古中医科广东广州510515

目的应用红外热成像技术分析原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)女性体表温度的分布特点和规律。方法于2021年10至12月募集南方医科大学健康女性志愿者200名,根据是否有PD分为PD组(n=100)与正常组(n=100)。志愿者通过视觉模拟评分法(V... 详细信息

目的应用红外热成像技术分析原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)女性体表温度的分布特点和规律。方法于2021年10至12月募集南方医科大学健康女性志愿者200名,根据是否有PD分为PD组(n=100)与正常组(n=100)。志愿者通过视觉模拟评分法(VAS)对痛经程度进行分级,同时使用红外热成像系统进行热图拍摄,并测量相应区域温度进行分析。结果与正常组相比,PD组手掌、下肢前区、脐部、下腹部及膝盖大腿内侧部温度偏低(P<0.05),而脊柱及会阴部差异无统计学意义;PD组成像多表现为左右肢体颜色分布不对称,左侧下肢前区温度[(30.56±0.63)℃]较右侧[(29.84±0.92)℃]高,而左侧膝盖大腿内侧部温度[(30.64±0.83)]较右侧[(31.35±0.48)℃]低(均P<0.05);PD组中手掌、下腹部在重度痛经组中的温度均低于轻度及中度痛经组(P<0.05),而轻度与中度痛经组之间无差异。手掌、下腹部温度与痛经程度呈负相关(rs=-0.509,P=0.001;rs=-0.275,P=0.006)。结论痛经女性有多处体表温度较正常者低,且左右侧肢体或区域温度失衡。手掌、下腹部对痛经评估和疗效预测具有参考价值。

关键词：原发性痛经红外热成像技术痛经程度温度差异

基于血浊理论探讨氧化应激与心肌纤维化的关系及中医辨治

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北京中医药大学学报 2024年第6期47卷 741-746页

作者：贾思涵连妍洁尚菊菊刘红旭李思耐首都医科大学附属北京中医医院北京100010 首都医科大学北京市中医药研究所

心肌纤维化以细胞外基质病理性重构为主要特征,是多种心血管疾病发展至一定阶段的共同病理改变。脏腑气化失常,精微积聚停滞,血浊内生,导致疾病发生,血浊理论被广泛用于解释疾病的病理变化,并指导疾病的预防与治疗。血浊作为特殊的致病... 详细信息

心肌纤维化以细胞外基质病理性重构为主要特征,是多种心血管疾病发展至一定阶段的共同病理改变。脏腑气化失常,精微积聚停滞,血浊内生,导致疾病发生,血浊理论被广泛用于解释疾病的病理变化,并指导疾病的预防与治疗。血浊作为特殊的致病因素与病理产物,在心肌纤维化氧化应激过程中发挥了关键作用。心脾气虚,血浊伏脉,心血不畅,无力维持心肌细胞氧化还原系统平衡,为病起之本。血浊蓄积,痰瘀互结,心脉壅塞,代谢产物积累为病进之渐。浊久蕴毒,心体胀大,心神涣散,细胞外基质重构为病重之势。治疗早期以扶正运脾、降浊复清为主,中期以化痰逐瘀、祛浊留清为要,晚期以解毒化浊、和脉复清为重。遵循病机特点运用中药干预,可以抑制氧化应激,避免细胞外基质病理性重构,改善心肌纤维化。

关键词：血浊理论心肌纤维化氧化应激辨证论治

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电化学修饰氨基酸和多肽类化合物的研究进展

有机化学 2024年第3期44卷 903-926页

作者：方新月黄雅雯胡新伟阮志雄广州医科大学药学院广州511436

随着多肽类化合物在治疗肿瘤疾病和生物医学应用中重要性的与日俱增,开发和构建多肽分子的新方法已成为有机合成化学家的研究热点.近年来有机电化学作为一种绿色高效的反应工具,被逐步运用于有机小分子合成领域,其温和可控的特征适合解... 详细信息

随着多肽类化合物在治疗肿瘤疾病和生物医学应用中重要性的与日俱增,开发和构建多肽分子的新方法已成为有机合成化学家的研究热点.近年来有机电化学作为一种绿色高效的反应工具,被逐步运用于有机小分子合成领域,其温和可控的特征适合解决现有生物偶联策略存在的化学和区域选择性问题,为多肽分子的选择性修饰提供了一种重要的合成手段.综述了近五年来利用电化学手段修饰氨基酸和多肽类化合物的反应,阐述了电化学合成技术的优势及其在开发新型生物相容性方法中的适用性.

关键词：有机电化学氨基酸多肽修饰化学和区域选择性