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羊肠道病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王勤欧云文何博刘俐君达州职业技术学院开江县动物疫病预防控制中心达州市动物疫病预防控制中心

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有... 详细信息

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有良好的反应活性，建立的间接ELISA方法检测BDV、BVDV、GPV、ORF、SPA阳性血清均为阴性，对CEV阳性血清的最低检出效价可达1︰25 600，与IFA方法的符合率为93.33%（28/30），检测四川地区816份羊血清样品的CEV阳性感染率达7.72%（63/816）。表明建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性，可用于CEV临床抗体检测及流行病学调查。

关键词：羊肠道病毒 VP1蛋白原核表达间接ELISA 抗体检测

猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析

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动物医学进展 2024年第8期45卷 28-34页

作者：张启龙李振河程敏姮栗云鹏高晓龙傅彩霞王林高敏余琦周德刚张玮李志军北京市动物疫病预防控制中心北京102629 北京市平谷区动物疫病预防控制中心北京101200

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,... 详细信息

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。

关键词：猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定 VP2基因遗传进化分析

2013-2020年广西重点种鸡场禽白血病净化效果分析

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中国动物传染病学报 2024年第3期32卷 149-153页

作者：胡杰尹彦文温丽霞粟艳琼谢守玉杨蓉屈素洁施开创广西动物疫病预防控制中心南宁530001

按照检测-淘汰-分群-再检测-再淘汰的原则,建立“生物安全+病原监测+淘汰”模式对2013—2020年广西11家重点种鸡场的种公鸡、种母鸡、育成鸡和雏鸡采集精液、蛋清、泄殖腔拭子、胎粪等样品进行禽白血病病原检测;公鸡和母鸡同时采集血浆... 详细信息

按照检测-淘汰-分群-再检测-再淘汰的原则,建立“生物安全+病原监测+淘汰”模式对2013—2020年广西11家重点种鸡场的种公鸡、种母鸡、育成鸡和雏鸡采集精液、蛋清、泄殖腔拭子、胎粪等样品进行禽白血病病原检测;公鸡和母鸡同时采集血浆蛋白进行禽白血病病毒(ALV)分离。通过多方式联合净化禽白血病,ALV阳性率逐年下降,净化效果非常显著。其中公鸡精液中ALV阳性率由2013年的7.45%下降到2020年的0.14%,母鸡蛋清样本ALV阳性率由2013年12.32%下降到2020年0.23%,雏鸡胎粪ALV阳性率由2018年3.60%下降到2020年0.47%。公鸡血浆蛋白病毒检出率由2013年的3.46%下降到2020年的0.78%,母鸡血浆蛋白病毒检出率由2013年的2.22%下降到2020年的0.20%。可以看出ALV净化效果非常显著,说明所建立的禽白血病净化方法在广西行之有效。

关键词：禽白血病净化效果

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湖羊感染羊源性伪狂犬病病毒致病特征的研究

中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 58-64页

作者：齐新永王晓旭鞠厚斌赵洪进刘健陆雪林孙泉云徐锋沈莉萍王建上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为探讨羊源性伪狂犬病病毒分离株SH1407对湖羊的致病性。将7只健康湖羊随机分成试验组和对照组,其中试验组5只,对照组2只。用分离株SH1407对试验组湖羊进行人工攻毒,取发病死亡羊内脏组织用于组织病理学检查和免疫组化分析。湖羊在攻毒... 详细信息

为探讨羊源性伪狂犬病病毒分离株SH1407对湖羊的致病性。将7只健康湖羊随机分成试验组和对照组,其中试验组5只,对照组2只。用分离株SH1407对试验组湖羊进行人工攻毒,取发病死亡羊内脏组织用于组织病理学检查和免疫组化分析。湖羊在攻毒后3 d开始出现症状,第4 d症状进一步加剧,表现为局部奇痒、体温升高、精神沉郁、食欲废绝等症状,4只发病死亡,存活1只,死亡率达到80%。剖检主要表现为脑膜充血,肺淤血,轻度实变。病理组织学检查:大脑、延髓神经元变性,细胞核溶解、消失,呈病理性细胞凋亡;肺脏呈间质性肺炎病变;脾脏、肾脏出血。免疫组化染色显示,PRV在肝脏、肺脏、大脑、脾脏等组织器官广泛存在,病毒在肝脏中主要存在于库弗氏细胞中,在肺脏中主要存在于Ⅱ型肺泡细胞中,在脾脏中主要存在于巨噬细胞、单核细胞中,而在脑组织中,神经元呈现较强的信号,说明病毒主要存在于神经细胞中。实时荧光定量PCR测定内脏器官病毒载量,肝脏、脾脏、肺脏和脑组织中PRV大量增值,其中PRV在脑组织中大量增值导致中枢神经严重的病理改变。

关键词：伪狂犬病病毒病理组织学免疫组化病毒载量

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城市宠物源细菌耐药性研究进展

中国动物传染病学报 2024年第3期32卷 227-236页

作者：吴雨珊孙冰清姜芹张妤顾欣张文刚上海市动物疫病预防控制中心上海201103

随着宠物抗菌药物使用量的逐年增多,宠物源细菌耐药水平不断攀升。本文就国内外宠物源细菌耐药性危害、宠物源大肠埃希菌、肠球菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌等的耐药性进行综述,并针对我国宠物源耐药性现状,提出应建立宠物源细菌耐药性... 详细信息

随着宠物抗菌药物使用量的逐年增多,宠物源细菌耐药水平不断攀升。本文就国内外宠物源细菌耐药性危害、宠物源大肠埃希菌、肠球菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌等的耐药性进行综述,并针对我国宠物源耐药性现状,提出应建立宠物源细菌耐药性监测体系,分析宠物源细菌耐药性变化及趋势,加强宠物用抗菌药物的使用管理与统计,加强科学养宠与科学用药的宣传教育等应对措施,为遏制动物源细菌耐药性问题提供参考。

关键词：伴侣动物细菌抗菌药物耐药性监测体系

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纳米孔测序技术在动物疫病中应用的研究进展

畜牧与兽医 2024年第9期56卷 119-124页

作者：李鑫沈海潇葛菲菲杨德全鞠厚斌王建白艺兰桂亚萍赵洪进上海市动物疫病预防控制中心上海201103

第三代纳米孔测序是一种便携、方便、相对快速且经济有效的技术,具有长读长、高通量、实时提供测序数据等特点,在现场检测、临床诊断、流行病学调查和微生物鉴别等方面都有巨大的发展潜力。本文主要比较了下一代测序技术和第三代测序技... 详细信息

第三代纳米孔测序是一种便携、方便、相对快速且经济有效的技术,具有长读长、高通量、实时提供测序数据等特点,在现场检测、临床诊断、流行病学调查和微生物鉴别等方面都有巨大的发展潜力。本文主要比较了下一代测序技术和第三代测序技术的优缺点,讨论了纳米孔测序数据的相关分析,以及该技术在动物疫病临床应用的例子,展望了纳米孔测序技术的发展以及在动物疫病诊断与防控领域的潜在前景。

关键词：纳米孔测序数据分析动物疫病检测

超高效液相色谱-串联质谱法测定添加剂预混合饲料中3种异噻唑啉酮杀菌剂的研究

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饲料研究 2024年第17期47卷 138-143页

作者：吴雨珊张婧吴剑平王博曹莹严凤上海市动物疫病预防控制中心上海201103

试验旨在建立添加剂预混合饲料中3种噻唑啉酮类药物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法(UPLC-MS/MS)。饲料样品经乙腈提取后,使用Prime HLB小柱净化,以SB-C18(100 mm×3 mm,1.8μm)作为分析柱,甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱。在电喷... 详细信息

试验旨在建立添加剂预混合饲料中3种噻唑啉酮类药物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法(UPLC-MS/MS)。饲料样品经乙腈提取后,使用Prime HLB小柱净化,以SB-C18(100 mm×3 mm,1.8μm)作为分析柱,甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾正离子模式下,进行检测;使用基质匹配外标法测定3种异噻唑啉酮类药物的含量,并对所建方法的线性关系、检出限、定量限、回收率、准确度、精密度等指标进行考察。结果显示,在0.25~500.00μg/L范围内线性关系良好,3种目标物的相关系数(R^(2))均大于0.9900;检出限、定量限分别为10μg/kg和30μg/kg。3种异噻唑啉酮类药物的回收率在69.8%~99.9%之间,相对标准偏差(RSD)在4.2%~10.0%之间。研究表明,试验所用方法操作简单、灵敏度高且定量准确,适用于测定添加剂预混合饲料中3种异噻唑啉酮类药物含量,可为养殖环节投入品中异噻唑啉酮类药物污染筛查提供准确高效的技术手段,从源头保障动物源性产品安全。

关键词：添加剂预混合饲料超高效液相色谱-串联质谱异噻唑啉酮杀菌剂

非洲猪瘟病毒感染调控炎症反应机制的研究进展

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中国预防兽医学报 2024年第6期46卷 653-658页

作者：许凤明杨作丰山东省单县动物疫病预防控制中心山东单县274300 辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁沈阳110164

炎症反应是一种常见的病理过程,可发生在机体各组织中,是机体识别危险信号并激活天然免疫系统的重要途径。作为一种自我保护机制,机体内产生的炎症反应能够在一定程度上清除不利于机体的刺激信号,但一旦超过机体可承受的范围,炎症反应... 详细信息

炎症反应是一种常见的病理过程,可发生在机体各组织中,是机体识别危险信号并激活天然免疫系统的重要途径。作为一种自我保护机制,机体内产生的炎症反应能够在一定程度上清除不利于机体的刺激信号,但一旦超过机体可承受的范围,炎症反应则会破坏机体的平衡,加剧炎症效应,最终引发疾病。非洲猪瘟(Africanswinefever,ASF)是一种高度传染性疾病,其致死率接近100%,自发现以来已给全球养猪业造成重大经济损失。其病原非洲猪瘟病毒(ASFV)感染后可观察到宿主淋巴结组织单核细胞严重破碎,扁桃体等免疫相关组织内单核细胞/巨噬细胞的数量增加,并检测到促炎细胞因子的过量表达,尤其是TNF-α和IL-1,这种现象的发生同时伴随着淋巴细胞的凋亡[1-2]。

关键词：重大经济损失非洲猪瘟病毒刺激信号传染性疾病养猪业淋巴结组织天然免疫系统自我保护机制

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不同类型的酸化剂在断奶仔猪上应用效果

中国饲料 2024年第4期 25-28页

作者：王仕凡临沭县动物疫病预防控制中心山东临沭276700

文章比较了3种不同类型的酸化剂(有机酸型酸化剂、有机酸-有机酸盐型酸化剂、包被酸化剂)在断奶仔猪上的应用效果。试验选取120头28日龄杜大长三元杂交断奶仔猪为试验对象,按体重、性别随机分成4组,每组5个重复,每个重复6头猪。分别向... 详细信息

文章比较了3种不同类型的酸化剂(有机酸型酸化剂、有机酸-有机酸盐型酸化剂、包被酸化剂)在断奶仔猪上的应用效果。试验选取120头28日龄杜大长三元杂交断奶仔猪为试验对象,按体重、性别随机分成4组,每组5个重复,每个重复6头猪。分别向日粮中添加3‰的有机酸酸化剂、有机酸-有机酸盐型酸化剂和包被酸化剂,对照组不加酸化剂。试验结果表明,断奶后35 d,3种不同酸化剂组日增重比空白对照组分别提高2.13%、7.54%和6.34%;料肉比分别降低2.00%、5.50%、4.50%;断奶后2周腹泻率分别降低66.25%、76.27%和78.74%。3种不同类型的酸化剂均可提高断奶仔猪的生长性能,改善腹泻状况。其中,在3‰的添加量下,有机酸-有机酸盐型酸化剂和包被酸化剂优于有机酸型酸化剂,分别在提高生长性能和抗腹泻方面具有最佳效果。

关键词：断奶仔猪酸化剂生长性能腹泻率