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血管紧张素Ⅱ通过上调富含半胱氨酸蛋白61表达诱导HEK293T细胞凋亡

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南方医科大学学报 2019年第7期39卷 810-815页

作者：王俊杰姜艳 Soulixay Senouthai 付冬冬尤燕舞右江民族医学院附属医院肾内科广西百色533000 右江民族医学院科学实验中心广西百色533000

目的探讨富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HEK293细胞功能中的改变及作用。方法HEK293T细胞于体外培养,并应用CRISPR/Cas9技术敲低HEK293T细胞Cyr61基因。将细胞分为四组:(1)对照组;(2)Cyr61敲低组;(3)AngⅡ组;(4)An... 详细信息

目的探讨富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HEK293细胞功能中的改变及作用。方法HEK293T细胞于体外培养,并应用CRISPR/Cas9技术敲低HEK293T细胞Cyr61基因。将细胞分为四组:(1)对照组;(2)Cyr61敲低组;(3)AngⅡ组;(4)AngⅡ+Cyr61敲低组,以10-7mol/L AngⅡ处理细胞,48 h收集细胞用流式细胞仪检测细胞凋亡,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术及蛋白质免疫印迹技术检测细胞Cyr61及Bcl-2的mRNA及蛋白表达量。结果 Cyr61敲低组Cyr61蛋白水平较正常对照组明显下降(P<0.05),AngⅡ干预48 h后Cyr61蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显下降(P<0.05),敲低Cyr61后Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.05),与对照组凋亡率(11.88±1.46)%相比,Cyr61敲低组凋亡率为(3.87±0. 83)%,AngⅡ干预组HEK293T细胞凋亡率为(26.94±3.73)%(P<0.05),与AngⅡ干预组相比,Cyr61敲低+AngⅡ组凋亡率为(15.76±1.31)%(P<0.05)。结论 Cyr61表达量的上调与AngⅡ诱导的HEK293T细胞损伤有关,下调Cyr61的表达可以有效地保护AngⅡ诱导的细胞损伤。

关键词： HEK293T细胞 CRISPR/Cas9 Cyr61 AngⅡ 凋亡

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鸡骨草不同提取部位体外抗肿瘤活性筛选

中国老年学杂志 2022年第19期42卷 4755-4759页

作者：李庭树莫仁高雷智冬黄锁义右江民族医学院基础医学院广西百色533000 右江民族医学院临床医学院广西中医药大学药学院右江民族医学院药学院右江民族医学院科学实验中心

目的阐明鸡骨草体外抗肿瘤活性及明确其活性部位。方法广西鸡骨草全草乙醇提取物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取后,采用CCK-8法检测不同浓度的鸡骨草石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位体外对3种肿瘤细胞株生长的抑制... 详细信息

目的阐明鸡骨草体外抗肿瘤活性及明确其活性部位。方法广西鸡骨草全草乙醇提取物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取后,采用CCK-8法检测不同浓度的鸡骨草石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位体外对3种肿瘤细胞株生长的抑制作用及对肿瘤细胞形态的影响,从而确定抗肿瘤活性部位;通过Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡形态来评价鸡骨草乙酸乙酯部位BEL-7404肿瘤细胞凋亡的影响。流式细胞术检测鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404肿瘤细胞周期的影响;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)检测鸡骨草乙酸乙酯提取物对BEL-7404肿瘤细胞凋亡的影响。结果4种提取物均具有与浓度相关的体外抗肿瘤作用(P鸡骨草正丁醇提取物>鸡骨草水提取物>鸡骨草石油醚提取物,鸡骨草乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位对上述3种肿瘤细胞的生长均有不同程度的抑制作用,且均能显著改变细胞形态,其中乙酸乙酯提取物作用最强;而鸡骨草石油醚提取物对上述3种细胞株生长抑制作用最弱,对细胞形态的改变较小。Hoechst33258染色结果显示鸡骨草乙酸乙酯部位能促进BEL-7404肿瘤细胞的凋亡;流式结果显示,随着鸡骨草乙酸乙酯提取物浓度的增加,G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.05),G2/M期细胞比例显著下降,细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论鸡骨草具有抑制肿瘤细胞增殖作用,其主要有效成分集中在乙酸乙酯部位。鸡骨草乙酸乙酯萃取部位可能通过阻滞BEL-7404细胞周期于G0/G1期和诱导肿瘤细胞凋亡来抑制BEL-7404肿瘤细胞的增殖。

关键词：鸡骨草细胞抑制率 Hoechst33258 细胞周期

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超声-酶法提取两面针中别隐品碱的工艺优选

天然产物研究与开发 2016年第3期28卷 457-461页

作者：陆世惠陈冉卢红梅林瑶韦健全右江民族医学院药学院右江民族医学院科学实验中心百色533000

以别隐品碱提取率为指标,先考察提取溶剂加酸和酶解预处理对两面针超声提取的适用性,再用正交试验优化超声功率、提取次数和溶剂量,最后动态过程优化超声提取时间。结果证明提取溶剂p H≤3不利于别隐品碱的提取。最佳工艺条件为:复合酶... 详细信息

以别隐品碱提取率为指标,先考察提取溶剂加酸和酶解预处理对两面针超声提取的适用性,再用正交试验优化超声功率、提取次数和溶剂量,最后动态过程优化超声提取时间。结果证明提取溶剂p H≤3不利于别隐品碱的提取。最佳工艺条件为:复合酶预处理后,以体积分数60%乙醇超声(250 W)提取3次,第1次以7倍量溶剂提取18 min,第2次以3倍量溶剂提取12 min,第3次以2倍量溶剂提取12 min,别隐品碱提取率为89.5%。该工艺经济、高效、节能、省时,可为开发利用别隐品碱提供实验基础。

关键词：两面针别隐品碱超声酶法工艺

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长期饮酒致高血压伴肝损伤小鼠模型的建立

中国老年学杂志 2022年第3期42卷 648-651页

作者：赵士博吴忠港张艺馨谢开仁于雪滢郑淮远潘智黄锁义右江民族医学院基础医学院广西百色533000 右江民族医学院科学实验中心广西百色533000 右江民族医学院广西高校右江流域特色民族药研究重点实验室广西百色533000

目的建立由长期饮酒导致的简便、稳定、实用的高血压伴肝损伤病变小鼠模型。方法100只SPF级昆明种小鼠经标准饲料适应性喂养1 w后随机均分为模型组和对照组。模型组采用自由饮酒法,普通饲料喂养72 d;对照组自由饮水,普通饲料喂养72 d。... 详细信息

目的建立由长期饮酒导致的简便、稳定、实用的高血压伴肝损伤病变小鼠模型。方法100只SPF级昆明种小鼠经标准饲料适应性喂养1 w后随机均分为模型组和对照组。模型组采用自由饮酒法,普通饲料喂养72 d;对照组自由饮水,普通饲料喂养72 d。实验中测定食量、体重、自主活动度、抓力、尾动脉收缩压、舒张压、平均动脉压。同时电镜下观察肝组织病变情况并测定肝功能4项指标。结果模型组血压显著升高,电镜下可见肝细胞水肿、脂肪变性伴坏死等病理特征,且谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)等指标显著高于对照组(P<0.01)。结论以自由饮酒法搭配普通饲料喂养是一种简单快速的高血压合并肝损伤小鼠模型的建立方法。

关键词：长期饮酒高血压肝损伤动物模型

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龙脷叶研究的新进展

微量元素与健康研究 2022年第4期39卷 42-44页

作者：李童黄锁义右江民族医学院基础医学院右江民族医学院药学院右江民族医学院科学实验中心广西百色533000

作为广西的特色药材之一和两广地区的常用壮瑶药材,龙脷叶不仅符合民族性、传统性和地域性的特点和要求,而且越来越深受医学界的重视。从龙脷叶的生物学性状、药用价值等方面分别进行了总结和归纳。

关键词：龙脷叶生物学性状药用价值

连翘和野菊花及其配伍对高脂血症小鼠血脂、血糖及肝肾功能的影响

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中国老年学杂志 2023年第1期43卷 97-101页

作者：赵士博张艺馨卢丹妮何长欢沈烨东孙悦林世科谭冰黄锁义右江民族医学院临床医学院广西百色533000 右江民族医学院全科医学院广西百色533000 右江民族医学院国际交流与合作处广西百色533000 右江民族医学院科学实验中心广西百色533000 右江民族医学院广西高校右江流域特色民族药研究重点实验室广西百色533000

目的复制高脂血症小鼠模型,探究连翘和野菊花及其配伍对高脂血症小鼠降脂效果及最优配比。方法选用SPF级昆明种小鼠60只,体重30~45 g,按雌雄比例1∶1随机分为5组,即连翘组、野菊花组、连翘野菊花配伍1∶1组、连翘野菊花配伍1∶2组、连... 详细信息

目的复制高脂血症小鼠模型,探究连翘和野菊花及其配伍对高脂血症小鼠降脂效果及最优配比。方法选用SPF级昆明种小鼠60只,体重30~45 g,按雌雄比例1∶1随机分为5组,即连翘组、野菊花组、连翘野菊花配伍1∶1组、连翘野菊花配伍1∶2组、连翘野菊花配伍2∶1组。每组12只。各组给予高脂饲料与清水常规喂养造模。定期测定小鼠食量、体重与抓力。在血清胆固醇含量明显升高以后开始给药,实验组给药按体重20 g/kg(药液质量浓度1 g/ml)给予相应的中药提取液。每天灌胃1次,连续灌胃给药14 d。第14天给药后断食断水12 h,采用眼球取血法,收集血液低温离心并测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血糖(GLU)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)含量。结果与连翘组和野菊花组相比,配伍2∶1组降脂效果最好(P<0.05),配伍1∶2组降糖效果明显(P<0.05),配伍组对肾功能的影响显著比单味药低(P<0.05)。结论连翘和野菊花配伍对高脂血症小鼠降血脂降GLU有协同作用,同时可以降低血清中尿酸含量。配伍2∶1组综合效果较好。

关键词：连翘野菊花高脂血症高血糖肝肾功能

CX3CL1/fractalkine通过激活Wnt/β-catenin信号通路抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7细胞凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第2期38卷 110-115页

作者：巩奇明姜艳潘秀虹尤燕舞广西百色市右江民族医学院附属医院肾内科广西百色533000 广西百色市右江民族医学院科学实验中心广西百色533000

目的研究CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡的机制。方法用含红色荧光蛋白的过表达或敲低FKN的慢病毒质粒感染以及LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞;使用流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡,Western... 详细信息

目的研究CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡的机制。方法用含红色荧光蛋白的过表达或敲低FKN的慢病毒质粒感染以及LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞;使用流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡,Western blot法检测RAW264.7细胞FKN、 Wnt4、β联蛋白(β-catenin)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 c-caspase-9、 B细胞淋巴瘤因子2相关X蛋白(BAX)和细胞色素C(CytC)的蛋白水平,免疫荧光细胞化学染色检测c-caspase-3和c-caspase-9在RAW264.7细胞的表达和定位。结果与空白对照组相比,LPS组的细胞凋亡率,FKN、 Wnt4、β-catenin、 c-caspase-3、 c-caspase-9、 BAX和CytC蛋白含量明显升高;与LPS组相比,FKN过表达联合LPS组细胞凋亡率明显下降,FKN、 Wnt4、β-catenin蛋白含量增加,而c-caspase-3、 c-caspase-9、 BAX和CytC蛋白含量降低,c-caspase-3和c-caspase-9在细胞质中的定位减弱;FKN敲低联合LPS组则结果相反。结论 CX3CL1/FKN激活Wnt/β-catenin信号通路减少线粒体凋亡途径关键蛋白的表达减轻LPS诱导的RAW264.7细胞凋亡。

关键词： CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN) 巨噬细胞细胞凋亡 Wnt β联蛋白(β-catenin)

鸡骨草的化学成分、药理作用及临床应用研究进展

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中国实验方剂学杂志 2019年第10期25卷 226-234页

作者：李庭树黄锁义右江民族医学院基础医学院药学院科学实验中心广西百色533000

鸡骨草是豆科植物相思子属植物,在我国广东、广西等地均有分布。鸡骨草在我国有着悠久的用药历史,常以全株入药,具有利湿退黄、清热解毒、舒肝止痛等功效。通过查阅中国知网,万方,维普,Science Direct,FMRS,Pubmed等国内外多个数据库,... 详细信息

鸡骨草是豆科植物相思子属植物,在我国广东、广西等地均有分布。鸡骨草在我国有着悠久的用药历史,常以全株入药,具有利湿退黄、清热解毒、舒肝止痛等功效。通过查阅中国知网,万方,维普,Science Direct,FMRS,Pubmed等国内外多个数据库,对近年来关于鸡骨草植物化学成分、药理作用及临床应用的相关文献进行归纳和总结,经全面分析后,分类归纳成综述。经调研大量相关的文献发现,鸡骨草含有大量丰富的化学成分,如白桦酸等三萜类成分,儿茶素等黄酮类成分,相思子碱等生物碱类成分,大黄酚等蒽醌类成分以及无机元素。鸡骨草丰富的物质基础使其具有广泛的药理作用,鸡骨草作为民间传统药材,临床上常用于湿热黄疸,胁肋不舒,胃脘胀痛,乳痈肿痛,脂肪性肝病、肝炎和跌打内伤的治疗。此外,鸡骨草还具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎镇痛、促进伤口愈合、免疫调节等多种药理作用。目前,临床上有鸡骨草单味药或与中药复方联用,其中以与中药复方联用为主,鸡骨草通过与其他药材配伍更好地发挥药效。鸡骨草广泛的药理作用,加之廉价易栽培的特点,使其具有极高的经济价值和社会效益,有着巨大的开发潜力和广阔的市场前景。基于近30年来国内外对鸡骨草的研究,本文从化学成分、生物活性及临床应用等方面对鸡骨草的研究现状进行了综述,以期能为进一步合理开发和综合利用鸡骨草的药用资源提供参考。

关键词：鸡骨草化学成分药理作用临床应用黄酮类多糖抗肿瘤降脂保肝

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基于区块链技术的事业单位内部控制建设研究

会计之友 2022年第14期 154-158页

作者：周艳娥何林娜陈军右江民族医学院右江民族医学院财务处

随着技术革命的发展,区块链技术在内部控制建设中的应用成为必然趋势。基于区块链去中心化、公开透明、不可篡改、可追溯、全程留痕、集体维护等特点,将其分布式记账、安全密钥、时间戳、智能合约等核心技术应用于事业单位内部控制建设... 详细信息

随着技术革命的发展,区块链技术在内部控制建设中的应用成为必然趋势。基于区块链去中心化、公开透明、不可篡改、可追溯、全程留痕、集体维护等特点,将其分布式记账、安全密钥、时间戳、智能合约等核心技术应用于事业单位内部控制建设的预算管理、资金支出管理、政府采购管理、项目建设管理、合同管理、资产管理六大经济模块,能推动内部控制建设进程,提高业务处理效率,提升管理效能和管理水平,防范风险,防止舞弊和错误,最终实现单位经济活动的合法合规、财产安全和使用有效、管理服务效率的提高以及预防腐败风险等全覆盖的内部控制目标。

关键词：区块链内部控制建设去中心化智能合约分布式记账