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端粒和端粒酶紊乱促进阿尔茨海默病的机制研究进展

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生命科学 2024年第2期36卷 177-189页

作者：陈娟琳姜敏艳汪旭郭锡汉云南师范大学生命科学学院生物能源持续开发与利用教育部工程研究中心昆明650500 台州耶大基因与细胞治疗研究院台州318000

端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构,由DNA与蛋白质复合而成,可保护染色体末端免于降解和融合。随着细胞分裂,端粒逐渐缩短,从而驱动细胞和个体衰老,但是部分细胞可以通过表达端粒酶或其他方式延长端粒。阿尔茨海默病(Alzheimer’s dis... 详细信息

端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构,由DNA与蛋白质复合而成,可保护染色体末端免于降解和融合。随着细胞分裂,端粒逐渐缩短,从而驱动细胞和个体衰老,但是部分细胞可以通过表达端粒酶或其他方式延长端粒。阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种与衰老密切相关的神经退行性疾病,大量研究揭示了血液或大脑细胞端粒长度改变与个体AD风险以及AD病程密切相关。AD小鼠模型研究数据表明,延缓端粒缩短可显著改善学习记忆能力,端粒酶可以通过依赖和不依赖其酶活性的方式改善小鼠的认知能力和病理表型。该文总结了端粒的结构与功能,综述了端粒长度改变与AD风险间的相关性研究,讨论了端粒酶预防AD发生发展的分子机制,系统性解析端粒及端粒酶紊乱与AD间的联系,对于扩大AD研究的广度和深度具有积极意义。

关键词：端粒端粒酶阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白小鼠模型

CD133在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年

作者：嵇心悦蒋敬庭扬州大学医学院江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心苏州大学细胞治疗研究院

目的：探讨CD133（PROM1）在胰腺癌（pancreatic cancer，PC）组织中的表达及其与PC患者临床病理特征和预后的关系。方法：利用GEPIA网站分析TCGA数据库中胰腺癌患者CD133的表达情况。基于TCGA数据库分析人PC组织中PROM1mRNA表达与肿瘤... 详细信息

目的：探讨CD133（PROM1）在胰腺癌（pancreatic cancer，PC）组织中的表达及其与PC患者临床病理特征和预后的关系。方法：利用GEPIA网站分析TCGA数据库中胰腺癌患者CD133的表达情况。基于TCGA数据库分析人PC组织中PROM1mRNA表达与肿瘤干细胞家族基因的相关性，利用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）染色技术研究CD133在PC组织中的表达及其临床意义。用Wilcoxon秩和检验分析PC组织及其癌旁组织中CD133表达水平的差异，用卡方检验分析PC组织中CD133的表达与临床病理特征之间的关系，用Kaplan-Meier法及Log-rank检验分析CD133不同表达水平的生存差异，拟合Cox模型评价不同指标的预后价值。用风险比（hazard ratio，HR）及95%置信区间（95%CI）评估CD133表达水平与胰腺癌患者死亡风险的关联强度。结果：TCGA数据库分析显示，与癌旁组织相比，CD133在胰腺癌组织中的表达显著上调（P细胞家族EPCAM、POU5F1、CD24、CD44和CXCR4相关；PC组织中CD133的表达水平与胰腺肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移有相关性（P治疗的潜在新靶点。

关键词：胰腺癌 CD133 免疫组织化学

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肿瘤免疫治疗新视角:RUNX的作用与意义

中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第6期31卷 541-551页

作者：刘颖婷蒋敬庭苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心细胞治疗研究院江苏常州213003

RUNX属于转录因子家族,是哺乳动物发育过程中不可或缺的调控因子,在哺乳动物的细胞增殖、分化、谱系发育、成骨和神经形成中发挥重要作用。围绕RUNX的研究已揭示了其功能的多样性以及在肿瘤发生发展过程中的功能。RUNX家族成员在不同类... 详细信息

RUNX属于转录因子家族,是哺乳动物发育过程中不可或缺的调控因子,在哺乳动物的细胞增殖、分化、谱系发育、成骨和神经形成中发挥重要作用。围绕RUNX的研究已揭示了其功能的多样性以及在肿瘤发生发展过程中的功能。RUNX家族成员在不同类型的肿瘤中具有不一的作用,与肿瘤微环境中的各组分也有不同程度的关联。RUNX家族成员可以调节肿瘤微环境中CD4+辅助性T(Th)细胞和CD8+细胞毒性T细胞(CTL)的谱系发育分化,调控组织驻留T淋巴细胞的表型、分化和存活,驱动NK细胞的增殖活化和组织驻留。RUNX家族缺失会导致MDSC的增殖和成熟活化,从而诱导肿瘤免疫抑制微环境的产生。RUNX家族成员的表达也与肿瘤微环境中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)的浸润程度、不同免疫细胞的浸润、免疫检查点基因表达和药物敏感性显著相关,它们可作为潜在的肿瘤预后标志物和免疫治疗靶点,与CAR-T细胞疗法的联用具有很大的应用前景。本文从RUNX的基本结构和功能研究及其参与调控肿瘤免疫和微环境中各类组分的作用进展进行综述,旨在为未来以RUNX为主要靶点的肿瘤免疫治疗提供新的视角。

关键词： RUNX 肿瘤微环境免疫细胞生物学功能

余甘子水提物对黑腹果蝇寿命及攀爬能力的保护作用

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癌变．畸变．突变 2024年第2期36卷 143-149页

作者：李玲芝胡雪琴黄娅楠贾祎祯汪旭郭锡汉云南师范大学生命科学学院生物能源持续开发与利用教育部工程研究中心云南昆明650500 台州耶大基因与细胞治疗研究院浙江台州318000

目的:余甘子(PE)是一种富含多种酚类物质和有机酸等化合物的药食两用植物资源。本研究拟探讨PE水提物对正常生理条件和镉(Cd)胁迫条件下果蝇寿命及攀爬能力的影响。方法:采用1.6、8、16 mg/mL PE水提物分别作用于野生型雌雄红黑腹果蝇,... 详细信息

目的:余甘子(PE)是一种富含多种酚类物质和有机酸等化合物的药食两用植物资源。本研究拟探讨PE水提物对正常生理条件和镉(Cd)胁迫条件下果蝇寿命及攀爬能力的影响。方法:采用1.6、8、16 mg/mL PE水提物分别作用于野生型雌雄红黑腹果蝇,寻找有效提高其寿命及攀爬能力的最佳PE水提物浓度和最佳处理时间,并检测最佳浓度PE水提物处理后对雌雄果蝇体内SOD、CAT活性、MDA含量的影响。用5、10、20、40 mg/L CdCl_(2)单独作用于雌雄果蝇,摸索有效降低果蝇寿命的最适CdCl_(2)浓度,在此基础上采用1.6、8、16 mg/mL PE水提物联合最适浓度CdCl_(2)处理雌雄果蝇,探讨PE水提物对Cd胁迫下雌雄果蝇寿命及攀爬能力的影响。结果:与对照组相比,16 mg/mL PE水提物有助于延长正常生理条件下雌雄果蝇寿命(P0.05)。结论:PE水提物有助于延长正常生理条件下雌雄果蝇的寿命和攀爬能力,延长Cd胁迫下雄果蝇的寿命但降低其攀爬能力,表明PE对果蝇的保护作用存在性别差异。

关键词：余甘子镉胁迫寿命攀爬能力黑腹果蝇

槲皮素通过调控内质网应激信号通路改善非酒精性脂肪肝大鼠肝脏损伤

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南京医科大学学报（自然科学版） 2024年第4期44卷 445-454页

作者：罗瑞熙王文佳王平田维毅贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学干细胞治疗研究中心贵州贵阳550025

目的:基于内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路探讨槲皮素(quercetin,Que)对高脂饲料诱导的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠模型的干预作用及其机制。方法:高脂饲料喂养SD大鼠8周建立NAFLD模型,之后随机分为模型组、Que低剂量组(25 mg/kg)和Que高剂量组(50 mg/kg),另设正常饮食大鼠作为正常对照组,给药期间监测大鼠体重、进食量。继续饲养8周后,检测各组大鼠血清中胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST)以及肝脏组织中TC、TG的含量变化;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、油红O染色、马松(Masson)染色观察大鼠肝脏组织的病理学变化;血糖仪检测大鼠血糖值并通过糖耐量试验评估大鼠糖耐量受损情况;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)试剂盒检测各组大鼠空腹胰岛素水平;实时荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测各组大鼠肝脏组织ERS相关基因Bip、Atf6、Atf4、Xbp-1s和Chop的表达变化;Western blot法检测各组大鼠肝脏组织ERS相关蛋白BiP、CHOP、ATF4、ATF6、XBP-1s和XBP-1u的表达变化。结果:实验期间,各组大鼠体重、进食量差异无统计学意义;与正常对照组比较,模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C、AST、ALT浓度升高,HDL-C浓度降低(P大鼠血清TG、TC、LDL-C、AST、ALT浓度降低(P大鼠血清TG、TC、AST、ALT浓度降低(P大鼠肝脏体积增大,重量增加,肝细胞形态明显肿胀且呈空泡化,脂质沉积明显增加,且纤维化区域明显增加,同时大鼠出现胰岛素抵抗和糖耐量受损情况;与模型组比较,以上病理改变在Que低、高剂量组大鼠中有较明显改善。RT-qPCR和Western blot结果显示,与正常对照组比较,模型组大鼠肝脏组织中Bip、Atf6、Atf4、Xbp-1s和Chop mRNA表达显著升高,BiP、CHOP、ATF4、ATF6和XBP-1s蛋白表达显著升高;与模型组比较,Que低、高剂量组大鼠肝脏组织Bip、Atf6、Atf4、Xbp-1s和Chop m RNA表达降低,BiP、CHOP、ATF4、ATF6和XBP-1s蛋白表达也显著降低。结论:Que可以改善高脂饲料诱导的NAFLD大鼠脂代谢异常、糖耐量受损、肝脏脂质沉积以及病理损伤,其机制可能是通过调控ERS信号通路发挥作用。

关键词：非酒精性脂肪肝内质网应激槲皮素

年轻和老年小鼠脂肪来源干细胞生物学特性对比

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中国组织工程研究 2024年

作者：林美玉姚翔高景赵玺龙潘兴华阮光萍解放军联勤保障部队第九二〇医院基础医学实验室干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程研究中心(昆明) 云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室

背景：脂肪来源干细胞具有抗衰老的作用，但来自不同年龄供者的脂肪来源干细胞是否有区别，还需深入研究。目的：对比老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞的生物学特性。方法：分别从8周龄、14周龄C57BL小鼠脂肪组织中提取脂肪来源干细胞，对... 详细信息

背景：脂肪来源干细胞具有抗衰老的作用，但来自不同年龄供者的脂肪来源干细胞是否有区别，还需深入研究。目的：对比老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞的生物学特性。方法：分别从8周龄、14周龄C57BL小鼠脂肪组织中提取脂肪来源干细胞，对比分析老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞的细胞周期、凋亡、增殖能力的差异，定量PCR和Western blot检测老年和年轻小鼠脂肪来源干细胞衰老相关P21、P27基因和蛋白的表达。结果与结论：与老年小鼠脂肪来源干细胞相比，年轻小鼠脂肪来源干细胞更有活力，形态更规则，凋亡更少，增殖更快，衰老相关P21、P27基因和蛋白表达量更低，说明年轻小鼠脂肪来源干细胞具有更好的抗衰老作用。

关键词：脂肪来源干细胞脂肪组织年轻老年小鼠抗衰老

慢性髓系白血病干细胞差异微小RNA筛选及其靶基因生物信息学分析

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临床内科杂志 2024年第3期41卷 194-196页

作者：郭佳丽潘晨华李依刘晓倩蒋慧常伟武汉市普仁医院血液科武汉430080 武汉市普仁医院生物细胞治疗研究中心武汉430080

目的利用生物信息学分析方法寻找慢性髓系白血病干细胞(CML-LSCs)的潜在靶点。方法从GEO数据库中选择合适的数据集,下载后通过perl语言及R语言联合对数据进行整理和清洗。使用R语言进行差异表达分析,筛选出差异微小RNA(microRNA,miRNA)... 详细信息

目的利用生物信息学分析方法寻找慢性髓系白血病干细胞(CML-LSCs)的潜在靶点。方法从GEO数据库中选择合适的数据集,下载后通过perl语言及R语言联合对数据进行整理和清洗。使用R语言进行差异表达分析,筛选出差异微小RNA(microRNA,miRNA)。通过miRWalk数据库对差异miRNAs进行靶基因预测,同时构建miRNA-mRNA调控网络,从中筛选出关键miRNAs。运用Metascape数据库对关键miRNAs的靶基因进行基因本体(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析。利用STRING数据库构建靶基因蛋白质-蛋白质作用网络(PPI),通过Cytoscape插件筛选出核心基因。运用R语言对核心基因再次进行GO和KEGG富集分析。结果筛选出6个与CML发病及耐药相关的基因:CCND1、KIT、YWHAZ、BCL2L11、MCL1、SIRT1。GO富集分析结果发现,其与生殖系统发育、性别分化、转录抑制因子复合物、死亡域结合等生物过程和分子功能相关。KEGG富集分析结果发现,其主要参与PI3K-Akt信号通路、FOXO信号通路及急性髓系白血病等信号通路。通过构建PPI网络发现,这6个靶基因主要受miR-193b-3p、miR-9-5p调控。结论通过生物信息学确定了调控CML-LSCs的两个关键miRNAs:miR-193b-3p、miR-9-5p,以及受其调控的靶基因:CCND1、KIT、YWHAZ、BCL2L11、MCL1、SIRT1。因此针对miR-193b-3p、miR-9-5p的后续研究有利于为CML-LSCs的治疗提供新的靶点和生物标志物,有助于提高对其作用机制的理解,为CML的治疗提供了新的策略。

关键词：慢性髓系白血病白血病干细胞微小RNA 生物信息学 GEO数据库

表达荧光素酶的胰腺癌细胞系的建立及其在免疫细胞杀伤效力检测中的应用

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第1期44卷 58-66页

作者：梁谦许崇凤李国亚张丽霞吴雪伶周小雅孟淑芳中国食品药品检定研究院生物制品检定研究所细胞资源保藏研究中心北京102600

目的构建表达报告基因荧光素酶和肿瘤相关抗原间皮素(mesothelin,MSLN)基因的胰腺癌细胞系,评估其作为靶细胞在评价免疫细胞的肿瘤杀伤效力中的应用。方法构建表达荧光素酶、MSLN基因的慢病毒载体,包装慢病毒,感染胰腺癌细胞系,抗生素... 详细信息

目的构建表达报告基因荧光素酶和肿瘤相关抗原间皮素(mesothelin,MSLN)基因的胰腺癌细胞系,评估其作为靶细胞在评价免疫细胞的肿瘤杀伤效力中的应用。方法构建表达荧光素酶、MSLN基因的慢病毒载体,包装慢病毒,感染胰腺癌细胞系,抗生素筛选后,有限稀释法获得单细胞克隆,并验证目的基因的稳定表达。实时无标记细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)和荧光素酶活性检测方法体外检测免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤效力。将构建的细胞系接种B-NDG小鼠建立表达荧光素酶的胰腺癌肿瘤模型,利用活体成像技术检测荧光素酶表达水平,监测小鼠体内胰腺癌肿瘤生长情况。在胰腺癌小鼠模型中验证嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞的肿瘤杀伤能力。结果本研究建立了稳定表达荧光素酶和MSLN基因的胰腺癌细胞系panc-1-luc、panc-1-luc-MSLN和capan-2-luc细胞。3种细胞的报告基因表达水平较高,与细胞数量呈正相关,panc-1-luc-MSLN细胞的MSLN阳性率达95.6%。体外肿瘤细胞杀伤试验结果表明MSLN-CAR-T细胞能特异性杀伤MSLN抗原阳性的panc-1-luc-MSLN细胞和capan-2-luc细胞,最小杀伤率分别为(70.00±18.19)%和(57.00±5.29)%,而对MSLN阴性的panc-1-luc细胞无杀伤作用。RTCA结果显示MSLN-CAR-T细胞对构建的3种胰腺癌细胞均有杀伤能力,最小杀伤率分别为(56.33±7.64)%、(93.00±2.65)%和(26.33±28.15)%;NK-92MI细胞对靶细胞的杀伤不受MSLN限制。免疫缺陷小鼠胰腺癌模型结果显示,体内杀伤效力与体外荧光素酶活性检测结果一致。体内外试验证明,检测靶细胞荧光素酶表达活性,可以反映免疫细胞对靶细胞的杀伤效力。结论本研究建立了稳定表达荧光素酶的多株胰腺癌单克隆细胞系,可用于体内外免疫治疗产品肿瘤杀伤效力的研究评价。

关键词：胰腺癌荧光素酶间皮素活体成像技术免疫治疗

中国造血干细胞移植后巨细胞病毒感染管理的现状与进展

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中华内科杂志 2024年第2期63卷 217-224页

作者：许兰平北京大学人民医院、北京大学血液病研究所、国家血液系统疾病临床医学研究中心、造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室北京100044

巨细胞病毒(CMV)感染是造血干细胞移植(HSCT)后常见的合并症之一,可造成诸多直接或间接的不良后果,严重影响移植疗效。近年来,随着新的检测技术和抗病毒药物的出现,中国在CMV感染的诊断、预防及治疗中均取得了较多进展。传统抗病毒药物... 详细信息

巨细胞病毒(CMV)感染是造血干细胞移植(HSCT)后常见的合并症之一,可造成诸多直接或间接的不良后果,严重影响移植疗效。近年来,随着新的检测技术和抗病毒药物的出现,中国在CMV感染的诊断、预防及治疗中均取得了较多进展。传统抗病毒药物能减少早期CMV疾病发生率,但存在较强的毒性,而免疫细胞,尤其是细胞毒性T淋巴细胞对控制CMV活化起重要作用。因此,过继免疫疗法成为CMV感染防治的新思路。本文就异基因HSCT后CMV感染的流行病学、危险因素、诊断监测、预防治疗、免疫探索以及过继免疫疗法进行中国经验的总结,以期为临床工作提供参考。

关键词：造血干细胞移植巨细胞病毒感染预防抢先治疗免疫治疗