检索结果-南通市图书馆

中药材 2004年第5期27卷 373-374页

作者：赵航梁文权杭州泰士生物科技有限公司杭州310012 浙江大学药学院杭州310031

目的:用正交试验法优选隐孔菌挥发油的提取工艺。方法:以挥发油提取量为指标,以浸泡时间、提取时间、加水量为因素进行正交实验。结果:最佳提取工艺条件为:加水10倍浸泡1h,加热提取8h。结论:提取工艺简便易行。

关键词：正交法隐孔菌挥发油提取工艺中药

新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量及影响因素分析

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食品工业科技 2021年第6期42卷 233-240页

作者：严国蔡亚杨易吴光慧车凯尹执又揭国良遵义茶溶天下生物科技有限公司贵州遵义316021

目的:探究新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量的影响因素。方法:本研究优化了新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量测定的前处理方法和色谱条件,样品经匀浆、87%乙醇混匀、超声提取、离心、氮吹结合水浴浓缩,过0.45μm滤膜后,在220 nm... 详细信息

目的:探究新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量的影响因素。方法:本研究优化了新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量测定的前处理方法和色谱条件,样品经匀浆、87%乙醇混匀、超声提取、离心、氮吹结合水浴浓缩,过0.45μm滤膜后,在220 nm波长下,采用C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)、以乙腈-0.05%磷酸水溶液(3∶97,V/V)为流动相进行等度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,通过高效液相色谱法(HPLC)对遵义市汇川区采集的不同等级大小、不同产地以及不同栽培方式的72份新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量进行分析测定。结果:方法学验证结果表明,在3个加标浓度下,天麻素、对羟基苯甲醇2种成分在相应范围内线性关系良好,R^(2)>0.9999,回收率在81.20%~107.30%之间,RSD<5%,得到所测72份样品中天麻素与对羟基苯甲醇总含量范围为0.262%~1.150%。本研究使用的鲜天麻前处理制样方法简便、快速且提取效果良好,分析检测方法具有良好的精密度、重现性和分离效果,适用于新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量的研究分析。通过进一步分析不同等级大小、不同产地以及不同栽培方式对新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量影响,结果表明鲜天麻的质量等级越大,天麻素与对羟基苯甲醇总含量越高;由于各天麻种植基地所在的海拔高低、环境植被种类、地理位置、光照等存在差异,且每个种植基地林下种植天麻的发展时间有所不同,因此,不同产地的鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量也存在显著差异;而对不同栽培方式的鲜天麻进行比较分析,发现有性繁殖优于无性繁殖。结论:汇川区不同产地、不同栽培方式及不同等级大小的新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量的影响具有一定的差异性。

关键词：新鲜天麻天麻素对羟基苯甲醇含量影响因素

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食品行业如何倡导良性竞争共赢发展?

食品工业科技 2006年第7期27卷 26-28页

作者：胡金平 Jarrod Li 杨松涛万军武汉科泰生化科技有限公司凯技（中国）有限公司青岛德慧海洋生物科技有限公司山西三润精细化工有限公司

市场中的竞争是存在的,优胜劣汰是自然界中的法则,然而,竞争并非完全等同于你死我活,行业的多样化,也需要共同发展,毕竟“独木不成林”;如若反其道而行之,采取恶性竞争攻击对手,弄不好反会伤了自身。

关键词：恶性竞争食品行业良性优胜劣汰自然界多样化市场等同

肠道病毒71型在Cellspin系统中无血清微载体培养工艺的建立

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中国生物制品学杂志 2013年第3期26卷 411-415页

作者：周正高晗杨志建夏德镇张高峡上海泽润生物科技有限公司疫苗研发部上海201203

目的建立肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)在Cellspin系统中无血清微载体培养工艺,为生物反应器培养EV71工艺的建立奠定基础。方法在Cellspin培养系统中对Vero细胞进行微载体培养,考察不同种类培养基MEM、DMEM/F12、VP-SFM、Opti-SFM、... 详细信息

目的建立肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)在Cellspin系统中无血清微载体培养工艺,为生物反应器培养EV71工艺的建立奠定基础。方法在Cellspin培养系统中对Vero细胞进行微载体培养,考察不同种类培养基MEM、DMEM/F12、VP-SFM、Opti-SFM、Opti-pro、MD505-199及不同微载体浓度3、5、10 g/L对细胞密度的影响。分别以MOI为0.2及2.0接种EV71至Vero细胞,考察病毒接种量对病毒增殖的影响。分别按培养上清、微载体洗脱液模式收毒,比较不同组分中EV71的抗原含量及TCID50。结果采用5 g/L微载体、VP-SFM培养基时,Vero细胞的密度达4.40×106个/ml;按MOI为2.0染毒,72 h后即可收毒,较MOI为0.2的收毒时间早48 h,按MOI为0.2染毒,收获液上清中的抗原含量达193.5 U/ml,病毒滴度达8.43 Log10TCID50/ml;按上清加洗脱液模式收毒,抗原含量可达573 U/ml。结论成功建立了无血清微载体培养Vero细胞生产EV71的方法,为生物反应器培养EV71工艺的建立奠定了基础。

关键词：肠道病毒属培养基,无血清微载体悬浮培养

乳糖醇调节液态发酵红曲菌生长及莫纳可林K代谢的研究

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食品与发酵工业 2022年第22期48卷 241-247页

作者：许世锦胡文林陈罗华周聂增宇陈玲娟广东天益生物科技有限公司广东湛江524300

以紫色红曲菌TY02为出发菌株,以黏米粉为碳源,大豆水解液和玉米浆为氮源,通过添加莫纳可林K(Monacolin K,MK)代谢促进剂:麦芽糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、乳糖醇和异麦芽糖醇,进行了液态发酵MK的研究。研究发现最佳的... 详细信息

以紫色红曲菌TY02为出发菌株,以黏米粉为碳源,大豆水解液和玉米浆为氮源,通过添加莫纳可林K(Monacolin K,MK)代谢促进剂:麦芽糖醇、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、乳糖醇和异麦芽糖醇,进行了液态发酵MK的研究。研究发现最佳的糖醇种类为乳糖醇,对MK的代谢具有显著的促进作用(P<0.05)。随后通过实验发现,在摇瓶发酵初始时(0 d)添加80 g/L的乳糖醇,紫色红曲菌TY02产总MK、胞外MK由对照组的87、37 mg/L,提高至1031、754 mg/L,分别提高了10.85倍、19.38倍;胞外MK占比、发酵液开环MK占比由对照组的42.53%、25.33%,提高至73.13%、98.56%,分别提高了71.95%、289.10%。发酵液的检测结果显示,乳糖醇的残留量为1.84 g/L,符合GB 2760—2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》;桔青霉素的含量为6μg/kg,亦符合QB/T 2847—2007《国家轻工行业标准功能性红曲米(粉)》,从而满足了功能红曲作为保健食品的原料要求,实验结果为实现功能红曲的液态发酵量产提供了理论参考。

关键词：紫色红曲菌液态发酵莫纳可林K 乳糖醇桔青霉素残留量

嗜糖假单胞菌麦芽四糖酶基因在地衣芽孢杆菌中的异源表达

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食品与发酵工业 2021年第1期47卷 50-54页

作者：楼志华刘翔张劲楠江苏省奥谷生物科技有限公司江苏常州213300 溧阳维信生物科技有限公司江苏常州213300

为了考察重组地衣芽孢杆菌的异源表达特性,进一步提高麦芽四糖酶的发酵水平,以适用于工业化生产,研究构建了木糖诱导型的重组地衣芽孢表达系统,表达了来源于嗜糖假单胞菌的麦芽四糖酶基因,并进行了初步发酵优化。结果显示,构建的表达系... 详细信息

为了考察重组地衣芽孢杆菌的异源表达特性,进一步提高麦芽四糖酶的发酵水平,以适用于工业化生产,研究构建了木糖诱导型的重组地衣芽孢表达系统,表达了来源于嗜糖假单胞菌的麦芽四糖酶基因,并进行了初步发酵优化。结果显示,构建的表达系统经过核酸电泳以及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定均正确,该系统在发酵过程中经过木糖诱导,重组酶能够成功地分泌至发酵液中,然后通过对诱导剂添加时间、诱导温度和发酵时间优化后,摇瓶水平的最大酶活力可达(168. 2±9. 41) U/m L。最佳的发酵条件为,在24 h添加诱导剂,诱导温度30℃,发酵至稳定期结束停止发酵。该研究为重组地衣芽孢杆菌的异源表达研究以及麦芽四糖酶的工业化应用提供了参考。

关键词：麦芽四糖酶地衣芽孢杆菌嗜糖假单胞菌发酵优化异源表达木糖诱导

肠道病毒71型在Vero细胞中培养条件的优化

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中国生物制品学杂志 2013年第1期26卷 105-108页

作者：陈丽江元翔夏德镇杨志建张高峡上海泽润生物科技有限公司疫苗研发中心上海201203

目的优化肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)在Vero细胞中的培养条件。方法分别采用吸附法和直接接种法将EV71接种于Vero细胞中进行增殖,检测病毒滴度;选择最佳接种方法接种病毒,考察血清浓度、收毒方式、病毒接种量(MOI)和收毒时间对... 详细信息

目的优化肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)在Vero细胞中的培养条件。方法分别采用吸附法和直接接种法将EV71接种于Vero细胞中进行增殖,检测病毒滴度;选择最佳接种方法接种病毒,考察血清浓度、收毒方式、病毒接种量(MOI)和收毒时间对病毒滴度的影响。结果将MOI为0.02～0.2的病毒直接接种于不含血清的培养基中,培养60 h,胞外收毒,可获得较高的病毒滴度。结论优化了EV71在Vero细胞中的培养条件,为EV71的大规模培养及其疫苗研发奠定了基础。

关键词：肠道病毒71型 Vero细胞病毒培养

人视黄醇结合蛋白4在杆状病毒系统中的表达及其多克隆抗体制备

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生物工程学报 2013年第7期29卷 974-985页

作者：任玉莹陈丹郭玉争史洪娜刘娟班靖洋刘亚宁吴晓芳王维龙程海李鼎锋刘勇王立良北京安百胜生物科技有限公司北京100176

旨在利用杆状病毒系统表达、制备人视黄醇结合蛋白(RBP4)并检测其免疫原性。将人RBP4基因片段及信号肽SS64片段亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-dual(pFBd)中,获得相应的重组转移质粒;转化大肠杆菌菌株DH10bac,转座后经筛选获得重组... 详细信息

旨在利用杆状病毒系统表达、制备人视黄醇结合蛋白(RBP4)并检测其免疫原性。将人RBP4基因片段及信号肽SS64片段亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-dual(pFBd)中,获得相应的重组转移质粒;转化大肠杆菌菌株DH10bac,转座后经筛选获得重组穿梭质粒rbacmid,将重组穿梭质粒转染孔板培养的Sf9细胞,获得含人RBP4表达框的重组杆状病毒,经过扩增获得毒种。毒种感染对数生长期的Sf9细胞并表达人RBP4蛋白(I-RBP4),通过SDS-PAGE和Western blotting对表达蛋白进行检测和鉴定。用毒种感染悬浮培养的Sf9细胞制备一批RBP4蛋白,完成SDS、Western blotting的检测及少量的多抗制备。纯化重组蛋白并与***重组人RBP4(E-RBP4)分别免疫家兔。实验结果,酶切鉴定及测序证实重组转移质粒构建正确;成功构建重组RBP4-bacmid;人RBP4蛋白在昆虫细胞获得高效表达。表达的RBP4蛋白可以分泌到培养基中,分子量约为23 kDa,经过计算表达量为100 mg/L;纯化蛋白免疫兔子制备了多抗血清,血清滴度为1∶100 000,高于原核表达的抗体滴度(1∶10 000),与人体提纯蛋白制备的抗体滴度相近。杆状病毒系统高效表达了人的RBP4蛋白,具有较好的抗原性,并获得高亲和力的抗血清,为下一步的人血RBP4检测试剂盒的制备打下了坚实的基础。

关键词：视黄醇结合蛋4(RBP4) 杆状病毒表达系统基因表达蛋白纯化多抗制备

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功能红曲液态发酵的研究进展

食品与发酵工业 2022年第19期48卷 320-327页

作者：尚学平许世锦陈罗华周陈玲娟广东天益生物科技有限公司广东湛江524300

红曲菌液态发酵可以产生众多的次级代谢产物,尤其以功能红曲Monacolin K及其类似物为代表的活性物质,为当今研究的重点。该文概述了Monacolin K的生物活性与生物合成,以及功能红曲液态发酵的控制策略,重点分析了在红曲菌液态发酵中,通... 详细信息

红曲菌液态发酵可以产生众多的次级代谢产物,尤其以功能红曲Monacolin K及其类似物为代表的活性物质,为当今研究的重点。该文概述了Monacolin K的生物活性与生物合成,以及功能红曲液态发酵的控制策略,重点分析了在红曲菌液态发酵中,通过菌种筛选、培养基构建、补料工艺构建、发酵条件构建、代谢途径控制方法构建等方面来提高Monacolin K产量的途径。同时,对当前功能红曲行业的现状、以不含甘油的原料为碳源的液态发酵如何突破低产Monacolin K的瓶颈和相关政策法规的完善进行了探讨。

关键词：红曲菌 Monacolin K 生物合成液态发酵控制策略

纳米颗粒跟踪分析和纳米流式细胞仪对脂肪间充质干细胞的细胞外囊泡检测结果评价

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中国现代应用药学 2023年第18期40卷 2543-2549页

作者：张则一王静李萍西比曼生物科技(上海)有限公司上海200030

目的探讨纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)和纳米流式细胞仪(nano-flow cytometry,nanoFCM)对对照品微球和脂肪间充质干细胞(adipose mesenchymal stem cells,AdMSCs)的细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)的检测能力,为EVs的鉴定和质量控制提供依据。方法首先使用对照品微球来验证NTA和nanoFCM的检测能力。随后,对于聚乙二醇6000沉淀-超速离心法制备的AdMSCs-EVs,通过Western blotting和电子透射显微镜进行一般特征鉴定后,使用NTA和nanoFCM来检测其粒径分布和PKH67染色后的荧光颗粒占比。结果NTA和nanoFCM在颗粒浓度方面的检测能力相近,但是nanoFCM的精度更高,粒径区分度更好。用NTA检测EVs的检测结果显示NTA粒径分布较广,nanoFCM粒径分布较窄;NTA的PKH67的荧光检测阳性率显著低于nanoFCM。结论NanoFCM拥有较高的精度,但也存在着一定应用局限性。NTA的粒径区分度相对较差,但是可检测的粒径范围更广。因此,NTA可以满足EVs的粒径分布检测,对荧光检测具有较高灵敏度的nanoFCM更适合分析EVs的表面标志物比例。

关键词：脂肪间充质干细胞细胞外囊泡纳米颗粒跟踪分析纳米流式细胞仪