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催化发夹自组装联合CRISPR-Cas12a传感技术在外泌体源性微小RNA-21的应用

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中华检验医学杂志 2024年第2期47卷 152-158页

作者：王彬潘汤晓琦赵爽陈鸣唱凯陆军军医大学第一附属医院检验科重庆400038

目的建立一种催化发夹自组装(CHA)联合成簇间隔的短回文重复序列及其关联蛋白12a(CRISPR-Cas12a)的传感技术,用于外泌体源性微小RNA-21(miR-21)的检测并分析其性能。方法选取2023年9—10月在陆军军医大学第一附属医院确诊为乳腺癌的患者... 详细信息

目的建立一种催化发夹自组装(CHA)联合成簇间隔的短回文重复序列及其关联蛋白12a(CRISPR-Cas12a)的传感技术,用于外泌体源性微小RNA-21(miR-21)的检测并分析其性能。方法选取2023年9—10月在陆军军医大学第一附属医院确诊为乳腺癌的患者8例为乳腺癌组;选取同期健康体检者8名为健康对照组。采用试剂盒提取血浆外泌体及其miR-21。针对miR-21序列设计DNA发夹和CRISPR RNA序列。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光分光光度计验证检测技术可行性。进一步优化发夹浓度、CHA反应时间、Cas12a蛋白浓度和Cas12a蛋白反应时间。在此基础上,检测不同浓度(0、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 nmol/L)的miR-21,收集荧光强度采用一元线性回归方法做线性分析以评价方法学的灵敏度,同时检测不同类型miRNA(miR-31、miR-26a、miR-192、miR-25-3p)及空白对照以评价方法学特异性。采用病例对照研究,用该检测技术和逆转录PCR方法检测乳腺癌组和健康对照组血浆外泌体源性miR-21的相对表达水平以评价其临床样本检测能力。结果应用CHA联合CRISPR-Cas12a技术建立了外泌体源性miR-21的检测方法。该方法检测miR-21的浓度与荧光强度呈良好的线性关系(相关系数为0.9667),线性检测范围为0.1~10.0 nmol/L,检测限为87.81 pmol/L。miR-21的检测荧光强度为450.27±23.96,高于miR-31、miR-26a、miR-192、miR-25-3p和空白对照组(分别为98.89±7.35、98.12±2.07、98.93±2.45、96.66±2.45、82.93±3.54),差异均有统计学意义(P均0.05)。结论建立了CHA联合CRISPR-Cas12a检测外泌体源性miR-21的高灵敏度与高特异性的传感技术,其检测血浆外泌体源性miR-21的结果与逆转录PCR结果一致,可用于乳腺癌患者筛查。

关键词：乳腺肿瘤外泌体微小RNA 催化发夹自组装

2022年西安交通大学第一附属医院细菌耐药性监测

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中国感染与化疗杂志 2024年第5期 581-587页

作者：贺侠琴杨青青王晓倩刘梦李雯曾晓艳西安交通大学第一附属医院检验科

目的了解西安交通大学第一附属医院2022年临床分离菌的分布及对抗菌药物的耐药性，为临床抗菌药物的合理应用提供参考依据。方法回顾性收集该院2022年1月1日—12月31日临床分离的非重复细菌，采用纸片扩散法、全自动仪器法进行体外抗... 详细信息

目的了解西安交通大学第一附属医院2022年临床分离菌的分布及对抗菌药物的耐药性，为临床抗菌药物的合理应用提供参考依据。方法回顾性收集该院2022年1月1日—12月31日临床分离的非重复细菌，采用纸片扩散法、全自动仪器法进行体外抗菌药物敏感性试验，按2021年CLSI文件标准判读结果，用WHONET 5.6软件进行数据分析。结果共分离细菌8 638株，革兰阴性菌60.8%(5 253/8 638)，革兰阳性菌39.2%(3 385/8 638)。葡萄球菌属中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)、表皮葡萄球菌(MRSE)、其他凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为33.0%、75.8%、51.9%，未发现万古霉素耐药株。肠球菌属中屎肠球菌万古霉素耐药株的检出率为0.6%，粪肠球菌中未发现万古霉素耐药株，粪肠球菌对利奈唑胺的耐药率(5.2%)高于屎肠球菌(0.7%)。碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌的检出率为7.9%，其中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药株检出率分别为12.1%和1.6%。碳青霉烯类耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌检出率分别30.9%和77.0%。结论细菌耐药形势严峻，临床应加强医院感染部位的标本送检，提高病原菌学的诊断能力及耐药性监测，助力临床合理使用抗菌药物，减少多重耐药菌的进一步蔓延。

关键词：细菌耐药性监测抗菌药物药敏试验甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌碳青霉烯类耐药革兰阴性菌

2023—2024年西安市某医院儿童呼吸道病原体流行病学特征分析

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西安交通大学学报(医学版) 2024年

作者：肖洋杨尚栋习文刘军辉王方西安交通大学第一附属医院检验科

目的分析2023年7月—2024年6月西安交通大学第一附属医院疑似急性呼吸道感染（ARIS）儿童的病原类型及流行病学特征，为儿童呼吸道感染疾病的精确诊疗及预防控制提供依据。方法采集研究时间段内来院就诊的患儿咽拭子标本共计12 169例，... 详细信息

目的分析2023年7月—2024年6月西安交通大学第一附属医院疑似急性呼吸道感染（ARIS）儿童的病原类型及流行病学特征，为儿童呼吸道感染疾病的精确诊疗及预防控制提供依据。方法采集研究时间段内来院就诊的患儿咽拭子标本共计12 169例，其中男性患儿6 535例，女性患儿5 634例，年龄M(Q1，Q3)为6（3，9）岁，应用多重实时荧光定量PCR技术对样本进行6种呼吸道病原体核酸检测。按照性别和年龄进行分组研究，采用χ2检验进行各组间的差异分析，并从时间维度和感染类型角度探究呼吸道病原体的流行特征。结果 12 169例样本中共检出呼吸道病原体8 241例（67.72%），其中病原体单一感染检出6 823例（56.07%），多重感染检出1 418例（11.65%）。肺炎支原体（MP）检出率位居首位，为21.81%。6种病原体中，仅鼻病毒（HRV）在性别差异上有统计学意义（P=0.003）。不同年龄组病原体检出率差异具有统计学意义（P一致的变化趋势，但在全年各个月份，腺病毒（ADV）和MP在3～14岁年龄段均表现出较高的检出率，与之相反呼吸道合胞病毒（RSV）在一病原体感染类型为主，其中MP检出率最高。随着患儿年龄的增长，ADV、乙型流感病毒（FluB）和MP检出率呈增长趋势，而RSV呈现下降趋势；全年除HRV在春秋两季分别具有2个检出率高峰外，其他5种病原体均呈现出在冬春季节“错峰暴发”的趋势。患儿多重感染类型以双重感染多见，HRV+RSV双重感染在婴幼儿群体（<3岁）为优势感染类型，而ADV+MP双重感染在学龄儿童群体（3～14岁）为优势感染类型。

关键词：呼吸道病原体感染儿童流行病学特征

医工结合型检验医学研究生培养体系的探索与实践

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中华检验医学杂志 2024年第1期47卷 94-97页

作者：杨翔府伟灵陆军军医大学第一附属医院检验科重庆400038

培养医工结合型检验医学研究生对于重新定位检验学科发展,大力促进人才建设和提高行业人员素质具有重要意义。本文介绍了我科室在医工结合型检验医学研究生培养过程中的一系列探索实践。通过采取多种研究生特色培养措施,包括特色理念构... 详细信息

培养医工结合型检验医学研究生对于重新定位检验学科发展,大力促进人才建设和提高行业人员素质具有重要意义。本文介绍了我科室在医工结合型检验医学研究生培养过程中的一系列探索实践。通过采取多种研究生特色培养措施,包括特色理念构建、研究生导师团队建设、针对性课程设置以及与工学院所交流学习等,在人才培养和科研产出方面取得了显著教学成效,对探索新型检验医学专业人才培养模式具有重要价值。

关键词：检验医学医工结合研究生培养教学

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侵袭性霉菌感染实验室诊断临床应用专家共识

中华检验医学杂志 2024年第6期47卷 597-609页

作者：中国初级卫生保健基金会检验医学研究与转化专业委员会中国医院协会临床微生物实验室专业委员会全国真菌病监测网侵袭性霉菌感染监测项目组王贺马筱玲徐英春曹存巍杜君洋范欣辜依海黄晶晶刘亚丽王俊瑞徐春晖徐和平不详侵袭性真菌病机制研究与精准诊断北京市重点实验室中国科学技术大学附属第一医院检验科中国医学科学院北京协和医院检验科广西医科大学第一附属医院皮肤性病科首都医科大学附属北京朝阳医院感染和临床微生物科三二○一医院微生物免疫科南京医科大学附属淮安第一医院检验科内蒙古医科大学附属医院检验科中国医学科学院血液病医院临床检测中心厦门大学附属第一医院检验科

侵袭性真菌病发病率在世界范围内逐渐增加,世界卫生组织和美国疾病预防控制中心相继发布了重要文件,呼吁提高对侵袭性真菌病的重视程度和认知水平,以应对侵袭性真菌病对全球造成的威胁。霉菌是侵袭性真菌病的重要病原菌之一,且发病率高... 详细信息

侵袭性真菌病发病率在世界范围内逐渐增加,世界卫生组织和美国疾病预防控制中心相继发布了重要文件,呼吁提高对侵袭性真菌病的重视程度和认知水平,以应对侵袭性真菌病对全球造成的威胁。霉菌是侵袭性真菌病的重要病原菌之一,且发病率高、死亡率高,临床诊断和治疗面临极大挑战。中国初级卫生保健基金会检验医学研究与转化专业委员会、中国医院协会临床微生物实验室专业委员会和全国真菌病监测网侵袭性霉菌感染监测项目组组织专家制定该文件,对曲霉菌属、毛霉菌目、镰刀菌属、赛多孢菌属、节荚孢霉属、拟青霉属、暗色霉菌、双相真菌(马尔尼菲篮状菌和荚膜组织胞浆菌)共8种临床重要侵袭性霉菌的实验室诊断方法及要点形成共识,并对实验室诊断及与临床沟通过程中遇到的六大常见问题形成专家共识,旨在为提升侵袭性霉菌感染的实验室诊断能力提供借鉴和指导。

关键词：真菌病霉菌曲霉菌属毛霉菌目临床实验室技术诊断,鉴别

活化部分凝血活酶时间的凝固曲线波形分析在鉴别血友病A和狼疮抗凝物阳性患者的临床应用研究

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中华检验医学杂志 2024年第8期47卷 920-926页

作者：韩立业翟宏续薇俞秋阳曲林琳黄晶安倍莹吉林大学第一医院检验科长春130021

目的通过活化部分凝血活酶时间(APTT)的凝固曲线波形分析(CWA)快速鉴别血友病A(HA)和狼疮抗凝物(LA)阳性患者, 探讨APTT-CWA在HA和LA阳性患者中的诊断效能。方法收集2022年7月25日至2023年12月28日吉林大学第一医院就诊单独APTT延长患者... 详细信息

目的通过活化部分凝血活酶时间(APTT)的凝固曲线波形分析(CWA)快速鉴别血友病A(HA)和狼疮抗凝物(LA)阳性患者, 探讨APTT-CWA在HA和LA阳性患者中的诊断效能。方法收集2022年7月25日至2023年12月28日吉林大学第一医院就诊单独APTT延长患者145例, 其中男性106例, 女性39例, 年龄(29.3±15.8)岁, 临床明确诊断HA94例及LA阳性51例。采用Mann WhitneyU检验方法回顾性描述分析血友病A(HA)和狼疮抗凝物(LA)阳性患者APTT结果及其CWA参数的一阶导数最大反应速度|min1|、二阶导数的最大加速度|min2|和最大减速度|max2|的差异。依据APTT延长时间的不同将患者分为轻度延长(33 s53 s)3组, 分别比较3组HA和LA阳性患者的APTT结果及CWA参数|min1|、|min2|和|max2|数值和图形有无差异。采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价CWA参数诊断效能并计算临界(cut-off)值。结果 HA患者和LA阳性患者APTT结果分别为70.2 s和41.5 s, 差异有统计学意义(P一阶导数|min1|参数可视化为"速度曲线", |min1|值大小可视化曲线峰值的高低, HA患者的CWA图形|min1|峰值高度小于LA阳性患者, 在重度延长组中, HA患者的|min1|与LA患者相比较, 峰值减低更明显, 曲线平缓图形不完整。ROC曲线分析显示, 在APTT延长的轻中重分组中, |min1|、|min2|和|max2|的AUC均大于0.8(P<0.01);|min1|、|min2|和|max2|的cut-off值在轻度延长组分别为3.205%/s、0.423 %/s^(2)和0.300%/s^(2);中度延长组分别为2.884%/s、0.340%/s^(2)和0.231%/s^(2);重度延长组分别是为2.209%/s、0.190%/s^(2)和0.095%/s^(2)。结论 APTT延长相同范围内时, HA患者与LA患者CWA参数存在明显差异, ROC曲线结果显示CWA参数区分HA患者和LA阳性患者具有良好的鉴别效能, APTT-CWA可作为低成本、高效及特异的参数可用于HA患者和LA阳性患者的鉴别诊断。

关键词：活化部分凝血活酶时间凝固曲线波形分析血友病A 狼疮抗凝物

2017—2022年华东地区新型隐球菌抗真菌药物流行病学折点的建立

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中华检验医学杂志 2024年第6期47卷 639-643页

作者：王莉莉周姿奕王子文田文杰张燕曾令兵吴文娟舟山市妇女儿童医院检验科舟山316000 空军特色医学中心临床检验科北京100142 同济大学附属东方医院南院医学检验科上海200123 南京大学医学院附属鼓楼医院检验科南京210008 南昌大学第一附属医院检验科南昌330006

目的通过多中心体外药物敏感性试验,建立我国华东地区新型隐球菌对抗真菌药物的流行病学折点(ECV)。方法回顾性收集2017年1月1日至2022年12月31日华东地区侵袭性真菌感染监测协作组收集的临床分离新型隐球菌共479株,采用质谱和基因测序... 详细信息

目的通过多中心体外药物敏感性试验,建立我国华东地区新型隐球菌对抗真菌药物的流行病学折点(ECV)。方法回顾性收集2017年1月1日至2022年12月31日华东地区侵袭性真菌感染监测协作组收集的临床分离新型隐球菌共479株,采用质谱和基因测序进行菌种鉴定;在上海、江西、江苏省3个分中心真菌实验室建立统一的药敏检测体系,并通过一致性评价后,分别独立完成新型隐球菌的药敏检测。依据美国临床实验室标准化委员会M57的原则和流程建立本地区新型隐球菌对氟康唑、伏立康唑、两性霉素B、5-氟胞嘧啶、艾沙康唑、泊沙康唑和伊曲康唑的流行病学折点。结果通过室间一致性评价,观察到每个中心的所有药物MIC值相差均≤1个稀释梯度,华东地区新型隐球菌ECV为:氟康唑16 mg/L,伏立康唑0.12 mg/L,两性霉素B 1 mg/L,5-氟胞嘧啶8 mg/L,艾沙康唑0.12 mg/L,泊沙康唑0.5 mg/L,伊曲康唑0.5 mg/L。结论初步揭示了华东地区临床隐球菌的药物敏感性特征,建立了华东地区新型隐球菌抗真菌药物的流行病学折点。

关键词：隐球菌,新型抗真菌药流行病学折点

血小板计数、D-二聚体与凝血四项对颅脑外伤患者预后的预测价值

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西藏医药 2024年第4期45卷 22-24页

作者：陈文青邱素娟蔡巧萍厦门大学附属第一医院杏林院区检验科福建厦门361022 厦门大学附属第一医院检验科福建厦门361000

目的目的探究血小板计数、D-二聚体与凝血四项对颅脑外伤患者预后的预测价值。方法方法收集我院2021年4月~2023年4月收治的颅脑外伤患者89例。根据患者预后进行分组,分为预后良好为良好组(68例)和预后不良为不良组(21例)。比较患者一般... 详细信息

目的目的探究血小板计数、D-二聚体与凝血四项对颅脑外伤患者预后的预测价值。方法方法收集我院2021年4月~2023年4月收治的颅脑外伤患者89例。根据患者预后进行分组,分为预后良好为良好组(68例)和预后不良为不良组(21例)。比较患者一般资料、血小板计数、D-二聚体、PT、APTT、TT、FIB;受试者操作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析血小板计数、D-二聚体、PT、APTT、TT、FIB对颅脑外伤患者预后的预测价值。结果结果两组性别、年龄、体质量指数、吸烟、高血压、糖尿病比较差异无统计学意义(P>0.05)。不良组血小板计数、FIB低于良好组,D-二聚体、PT、APTT、TT高于良好组,(P一指标较好,AUC最大,为0.968,灵敏度为0.857,特异度为0.985。血小板计数、D-二聚体与凝血四项的预测阈值分别为189.080×10^(9)/L、0.795mg/L、13.610s、31.475s、15.840s、2.980g/L。结论结论血小板计数、D-二聚体与凝血四项对颅脑外伤患者预后的预测价值良好,可作为临床上颅脑外伤患者预后的评估因子。

关键词：血小板计数 D-二聚体凝血四项颅脑外伤

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导航技术在神经外科手术中的应用与创新

中华医学杂志 2024年第31期104卷 2957-2961页

作者：师忠杰陈四方朱宏伟郭剑峰肖德勇王占祥厦门大学医学院厦门厦门大学附属第一医院神经外科厦门

神经导航技术, 作为一种先进的高精度手术定位技术, 促进了微创神经外科的发展。随着神经成像技术和计算机算力的提升, 导航系统也呈现功能多样化, 广泛地应用在脑肿瘤、脑出血、脑血管畸形等病变手术中。光学导航的出现, 解决了有框架... 详细信息

神经导航技术, 作为一种先进的高精度手术定位技术, 促进了微创神经外科的发展。随着神经成像技术和计算机算力的提升, 导航系统也呈现功能多样化, 广泛地应用在脑肿瘤、脑出血、脑血管畸形等病变手术中。光学导航的出现, 解决了有框架立体定向的创伤性问题, 成为当前主流的神经导航系统。电磁导航的应用解决了光学导航的视线遮挡问题, 但是由于其磁场的不稳定性, 目前并不能完全取代光学导航。基于混合现实技术的虚拟导航, 为临床医师带来沉浸式体验, 摆脱了传统导航的"手眼分离"问题。3D打印定位导板技术, 由于其成本低、操作简洁, 在诸多的临床报道中也取得了不错的效果。神经导航机器人的出现, 引领了智能导航的发展。但是, 如何在保证导航精度的前提下, 降低导航的研发成本, 简化其临床使用流程, 仍需进一步探索。

关键词：神经导航立体定向虚拟导航 3D打印手术规划