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荧光素标记检测乙型肝炎病毒表面抗原特异性杀伤性T淋巴细胞方法的探讨

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病毒学报 2005年第2期21卷 113-117页

作者：吴婷陈敏欧山海何水珍程通张军夏宁邵厦门大学福建省医学分子病毒学研究中心福建厦门361005

用绿色荧光前体化合物CalceinAM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。通过对一系列标记条件的研究:不同浓度CalceinAM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度... 详细信息

用绿色荧光前体化合物CalceinAM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。通过对一系列标记条件的研究:不同浓度CalceinAM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度、不同洗涤次数、不同裂解液配方,确定CalceinAM荧光素标记法的最佳条件。用该方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的DNA疫苗免疫Balb/c小鼠对P815S细胞的CTL效应,E/T比为10时,杀伤效率接近饱和,达到65%。通过荧光显微镜直接观察杀伤后的P815S细胞,细胞破裂程度与计算出的杀伤效率有一定相关性。

关键词： CTL 乙型肝炎病毒表面抗原 T淋巴细胞特异性杀伤靶细胞荧光素标记培养上清浓度孵育洗涤次数

β-环糊精存在下直链脂肪醇诱导1-溴萘室温磷光光谱研究

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高等学校化学学报 1997年第12期18卷 1935-1938页

作者：杜新贞张勇江云宝林丽榕黄贤智陈国珍厦门大学化学系厦门大学环境科学研究中心厦门361005

研究了β-环糊精（β-CD）溶液中直链脂肪醇（A）诱导1-溴萘（1-BrN）的室温磷光光谱性质．结果表明，三元包络物中1-BrN分子的磷光起初随醇中碳原子数的增加而增强，正戊醇对磷光呈现最大的敏化作用，随后从正己醇至正辛醇，磷光强度... 详细信息

研究了β-环糊精（β-CD）溶液中直链脂肪醇（A）诱导1-溴萘（1-BrN）的室温磷光光谱性质．结果表明，三元包络物中1-BrN分子的磷光起初随醇中碳原子数的增加而增强，正戊醇对磷光呈现最大的敏化作用，随后从正己醇至正辛醇，磷光强度逐渐下降．测定了包络物组成和稳定常数，发现1-BfN和A：β-CD包络物的结合强度是三元包络物磷光强弱的决定性因素，并从三元包络物可能的结构解释了醇分子大小对室温磷光的影响．

关键词： 1-溴萘 β-环糊精脂肪醇包络物室温磷光

纸质空心金纳米笼SERS传感器的制备及对非小细胞肺癌患者痰液中miRNAs的快速高灵敏检测

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高等学校化学学报 2021年第8期42卷 2393-2402页

作者：薛谨曹小卫刘依帆王敏扬州大学广陵学院扬州225001 扬州大学医学院转化医学研究中心扬州225001 大连医科大学第一临床学院大连116000

利用油水界面自组装法获得了单层空心金纳米笼(HGNCs)阵列基底.通过时域有限差分方法,证明HGNCs间隙可提供大量"热点",从而使基底表现出优异的表面增强拉曼散射(SERS)性能.同时,将拉曼信号分子标记的发夹结构DNA与基底链接,在与目标miR... 详细信息

利用油水界面自组装法获得了单层空心金纳米笼(HGNCs)阵列基底.通过时域有限差分方法,证明HGNCs间隙可提供大量"热点",从而使基底表现出优异的表面增强拉曼散射(SERS)性能.同时,将拉曼信号分子标记的发夹结构DNA与基底链接,在与目标miRNAs互补杂交后进行SERS信号检测.结果表明,基于单层HGNCs阵列基底的SERS传感器具有优良的灵敏度、可重复性和特异性,对痰液中miR-196a和miR-21的检出限分别为10.00和36.15 amol/L.为了验证该SERS传感器在临床检测中的准确性,利用其对非小细胞肺癌(NSCLC)患者痰液中miR-196a和miR-21进行检测,并将结果与实时定量多聚核苷酸链式反应技术(qRT-PCR)的检测结果进行了比较. 2种检测方法均显示NSCLC患者痰液中miR-196a和miR-21的表达高于健康人,检测结果间没有统计学差异,且相对标准偏差均低于10%.因此,纸质空心金纳米笼SERS传感器在NSCLC诊断中具有应用价值,可能成为生物医学诊断领域miRNAs研究的一个替代工具.

关键词：空心金纳米笼油水界面自组装表面增强拉曼光谱柔性基底

基于SPECT和PET的免疫成像技术研究进展

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影像科学与光化学 2022年第1期40卷 1-10页

作者：张莉莉向韡刘超刘刚广西医科大学广西生物医药协同创新中心广西组织器官修复医用生物材料工程技术研究中心广西南宁530021 厦门大学公共卫生学院分子影像暨转化医学研究中心福建厦门361102

分子影像技术创新研究促进了体内免疫系统跟踪技术——免疫成像技术的发展,可实现对免疫细胞和免疫分子定位及其功能进行实时成像及无创可视化监控,协助评价免疫治疗的效果,并已成为免疫治疗中一个重要的新兴检测模块。目前,体内免疫成... 详细信息

分子影像技术创新研究促进了体内免疫系统跟踪技术——免疫成像技术的发展,可实现对免疫细胞和免疫分子定位及其功能进行实时成像及无创可视化监控,协助评价免疫治疗的效果,并已成为免疫治疗中一个重要的新兴检测模块。目前,体内免疫成像技术的研究与应用仍处于初步阶段,本综述概述了近年来SPECT和PET成像方式用于免疫监测的研究进展,为未来免疫影像学新技术的发展和应用提供指导。

关键词：免疫成像免疫治疗放射性标记单光子发射计算机体层摄影正电子发射断层成像

整合素α_(v)β_(3)靶向放射性药物^(99m)Tc-RGD联合抗PD-L1抗体增强肿瘤治疗效果的研究

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协和医学杂志 2023年第4期14卷 766-773页

作者：文雪君周吴昊郭志德张现忠厦门大学公共卫生学院分子影像暨转化医学研究中心分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 中国医学科学院北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院临床医学研究所北京100730

目的探讨诊断类放射性核素^(99m)Tc标记的多肽精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)对肿瘤免疫微环境的调控作用以及联合抗程序性死亡受体配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)抗体增强抗肿瘤治疗的效果。方法采用流式细胞术对肿瘤细胞的PD-L... 详细信息

目的探讨诊断类放射性核素^(99m)Tc标记的多肽精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)对肿瘤免疫微环境的调控作用以及联合抗程序性死亡受体配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)抗体增强抗肿瘤治疗的效果。方法采用流式细胞术对肿瘤细胞的PD-L1表达水平进行检测,采用单光子发射计算机断层显像(single photon emission computed tomography,SPECT)评估^(99m)Tc-RGD在MC38肿瘤鼠中的分布情况,采用^(99m)Tc-RGD联合抗PD-L1抗体对MC38肿瘤鼠模型进行治疗,评价其抗肿瘤治疗效果。结果经^(99m)Tc-RGD诱导后,CT26、MC38、4T1和B16F10肿瘤细胞表面的PD-L1表达水平均显著上调,差异具有显著统计学意义(P均研究结果表明,不同的给药剂量和时间窗可对联合治疗效果产生显著影响,18.5 MBq或37 MBq^(99m)Tc-RGD联合抗PD-L1抗体在间隔4 h时间窗时产生最佳治疗效果。结论^(99m)Tc-RGD可诱导肿瘤细胞表面PD-L1表达水平上调,联合抗PD-L1抗体可增强抗肿瘤治疗效果。

关键词：放射性药物 PD-L1 肿瘤免疫治疗肿瘤模型

放射性药物联合免疫检查点抑制剂协同抗肿瘤研究新进展

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协和医学杂志 2023年第4期14卷 680-690页

作者：曾馨莹文雪君郭志德张现忠厦门大学公共卫生学院分子影像暨转化医学研究中心分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室福建厦门361102 中国医学科学院北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院临床医学研究所北京100730

靶向放射性核素治疗诱导DNA双链断裂,激活cGAS-STING通路、NF-κB/IRF3通路和STAT1/3-IRF1通路,上调程序性死亡受体配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)的表达,促炎细胞因子、CD8^(+)T细胞及CD4^(+)T细胞在肿瘤中浸润增加,为免疫检查点抑制剂治疗提供了有利的免疫原性微环境。联合治疗使得正向调节免疫反应的记忆效应T细胞、M1型巨噬细胞及树突状细胞浸润增加,免疫抑制性的调节性T细胞、M2型巨噬细胞及髓源性抑制细胞下调,部分小鼠肿瘤完全缓解并产生免疫记忆。值得注意的是,放射性诊断药物2-[^(18)F]FDG联合PD-L1抗体治疗也可调控免疫微环境,显著提高疗效。本文主要综述目前典型的放射性药物联合免疫检查点抑制剂协同抗肿瘤治疗策略,并强调联合治疗时间窗以及不同的治疗组合可能改善治疗效果,提出诊断放射性药物联合免疫治疗有望成为一种新的肿瘤治疗范式,或将成为未来研究的重要方向。

关键词： 2-[^(18)F]FDG 靶向放射性核素治疗 PD-L1抗体肿瘤免疫微环境

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核糖核酸酶5在宿主防御中的作用及机制

中国生物化学与分子生物学报 2019年第6期35卷 583-590页

作者：孙德森钱钰玲许正平浙江大学医学院环境医学研究所分子医学研究中心

抗菌肽是机体天然免疫的重要组成部分。核糖核酸酶5 (ribonuclease5,RNASE5;又名angiogenin)属于核糖核酸酶A超家族,是一个分泌型小分子蛋白质,广泛分布于机体需要抵御外界病原微生物的组织中。RNASE5对病毒、细菌以及真菌都存在抑制效... 详细信息

抗菌肽是机体天然免疫的重要组成部分。核糖核酸酶5 (ribonuclease5,RNASE5;又名angiogenin)属于核糖核酸酶A超家族,是一个分泌型小分子蛋白质,广泛分布于机体需要抵御外界病原微生物的组织中。RNASE5对病毒、细菌以及真菌都存在抑制效应,具有广谱抗菌特点,但其表达和活性受到宿主生理状态和外界环境多层次的调控。RNASE5存在多样的抗微生物作用机制,其带正电荷的理化特性破坏微生物细胞壁,而其核糖核酸酶活性则是杀伤真菌所必须的。除了直接作用于微生物外,RNASE5还可作为重要因子调节宿主免疫功能,参与多种病理过程。本文综述了RANSE5的结构、生物活性与功能、作用特点与机制,并讨论了在其研究中存在的问题,以期为今后的研究提供新思路和新方向。

关键词：核糖核酸酶5 抗菌肽抗菌机制宿主防御

RGD4C修饰的铁蛋白纳米笼用于大鼠肝星状细胞的靶向药物输送

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实用医学杂志 2015年第18期31卷 2950-2953页

作者：贺立张君吴春夏旭辉刘刚李丹单鸿中山大学附属第三医院放射科广州市510630 厦门大学分子影像暨转化医学研究中心 361102 广东省分子影像工程技术研究中心广州市510630 中山大学介入放射学研究所广州市510630

目的:制备RGD4C修饰的铁蛋白纳米笼(RGD4C-FRT),并用于大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的靶向药物输送。方法:对RGD4C修饰的人铁蛋白H亚基进行表达和纯化;采用离子通道的方法,将阿霉素(Dox)包裹到RGD4C-FRT空腔,即为RGD4C-FRT-Dox;荧光显微镜检... 详细信息

目的:制备RGD4C修饰的铁蛋白纳米笼(RGD4C-FRT),并用于大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的靶向药物输送。方法:对RGD4C修饰的人铁蛋白H亚基进行表达和纯化;采用离子通道的方法,将阿霉素(Dox)包裹到RGD4C-FRT空腔,即为RGD4C-FRT-Dox;荧光显微镜检测RGD4C-FRT-Dox对HSC-T6的靶向性。结果:透射电镜检测显示,RGD4C-FRT为中空球形、粒径均一、分散性好;RGD4C-FRT和RGD4C-FRTDox的平均粒径分别为12.57 nm和20.13 nm;RGD4C-FRT-Dox的包封率和载药量分别为77.32%和15.88%;HSC-T6对RGD4C-FRT-Dox有明显摄取,并且能够被RGD4C-FRT空载体阻断。结论:RGD4C-FRTDox对HSC-T6有特异靶向性,可进一步在动物水平验证其治疗肝纤维化的有效性。

关键词：肝纤维化肝星状细胞铁蛋白纳米笼整合素αvβ3 靶向药物输送

间充质细胞源性骨肉瘤中关键分子标志物鉴定及药物敏感性分析

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1448-1456页

作者：张昊军李泓毅张辉陈浩然张力中耿杰侯传东于琦贺培凤贾金鹏卢学春山西医科大学基础医学院山西省太原市030600 中国人民解放军总医院第二医学中心血液病科国家老年疾病临床医学研究中心北京市100853 解放军医学院北京市100853 山西医科大学医学科学院山西省太原市030600 山西医科大学管理学院山西省太原市030600 中国人民解放军总医院第四医学中心骨科医学部北京市100853

背景:骨肉瘤发病机制复杂,预后较差,随着医疗技术的发展,其5年生存率有所改善,但仍未取得实质性进展。目的:筛选骨肉瘤中关键分子标志物,分析其与骨肉瘤治疗药物之间的关系,并从分子水平探讨骨肉瘤可能的疾病机制。方法:从基因表达谱数... 详细信息

背景:骨肉瘤发病机制复杂,预后较差,随着医疗技术的发展,其5年生存率有所改善,但仍未取得实质性进展。目的:筛选骨肉瘤中关键分子标志物,分析其与骨肉瘤治疗药物之间的关系,并从分子水平探讨骨肉瘤可能的疾病机制。方法:从基因表达谱数据库中获取GSE99671和GSE28425(miRNA),对GSE99671进行差异表达基因分析和加权基因共表达网络分析(WGCNA)。利用基因本体学(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分别对差异表达基因和与疾病正相关性最高的模块基因进行功能富集分析。将上述模块基因与差异表达基因取交集作为关键基因,构建蛋白质相互作用网络,使用CytoScape软件对关键基因进行相关性分析,筛选枢纽基因(Hub基因)。使用GSE28425数据集对Hub基因进行外部验证,同时对Hub基因进行文本验证。使用CellMiner数据库对Hub基因进行药物敏感性分析,依据关联系数的绝对值|R|>0.3,P研究基本一致;(5)药物敏感性分析发现甲氨蝶呤、异环磷酰胺、帕博西尼的活性与PLOD1、PLOD2、MMP14的mRNA表达呈负相关关系;而唑来膦酸、雷帕霉素的活性与PLOD1、LUM、MMP14、PLOD2、TGFB1的mRNA表达呈正相关关系,提示唑来膦酸和雷帕霉素有望成为骨肉瘤的潜在治疗药物,但仍需进一步基础实验和临床研究加以验证。

关键词：骨肉瘤分子标志物信号通路药物预测 WGCNA 药物敏感性生物信息学