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红毛藻血管紧张素转化酶抑制肽的筛选及其稳定性评价

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食品科学 2024年第2期45卷 188-194页

作者：吴靖娜洪乔茜廖榕榕蔡水淋陈晓婷苏海燕苏筱许莉潘南卓诗晴厦门医学院海洋生物医药资源福建省高校工程研究中心福建厦门361023 厦门医学院厦门市海洋药用天然产物资源重点实验室福建厦门361023 福建省水产研究所福建厦门361013

本实验以红毛藻为原料,利用酶解法及超滤分级制备获得不同分子质量的肽组分,经高效液相色谱法测定体外血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性发现F2组分(800~2000 Da)的ACE抑制率最高;采用液相色谱-串联质谱技术... 详细信息

本实验以红毛藻为原料,利用酶解法及超滤分级制备获得不同分子质量的肽组分,经高效液相色谱法测定体外血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性发现F2组分(800~2000 Da)的ACE抑制率最高;采用液相色谱-串联质谱技术和PEAKS Studio软件的de novo从头测序对F2组分进行氨基酸序列鉴定,并结合分子对接筛选出与ACE稳定结合的6个ACE抑制肽。利用固相合成法制备预测肽并经体外ACE抑制活性验证,发现L1(LVLLFLFGE)的ACE抑制活性最高,半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为14.22μg/mL。分子对接结果表明,L1对ACE的抑制主要归因于其能够与ACE的活性口袋形成氢键相互作用。最后,探讨温度、pH值、金属离子、光照类型和模拟胃肠道酶系消化对L1稳定性的影响,结果表明L1具有较好的热稳定性和离子强度稳定性,pH>2时抑制活性逐步减弱,紫外光处理会影响其抑制活性,体外模拟胃肠液处理后L1的ACE抑制率虽然显著降低,但仍具有较高ACE抑制活性。

关键词：红毛藻 denovo从头测序虚拟筛选血管紧张素转化酶抑制肽稳定性

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海洋真菌来源杂萜类化合物的研究进展

化学与生物工程 2024年第7期41卷 1-7,17页

作者：吴晓惠陈彬彬黄迎王玉琴陈钟情黄晓源唐灵芝洪璇厦门医学院厦门市海洋药用天然产物资源重点实验室福建厦门361023 福建医科大学药学院福建福州350122

海洋真菌生活在高盐、高压、低温、弱光的独特海洋环境中,具有结构独特、代谢多样、活性显著等特点,并产生了一系列功能多样、结构新颖的次级代谢产物,是杂萜类化合物的重要来源。海洋真菌体内复杂的次生代谢途径使获得的杂萜类化合物... 详细信息

海洋真菌生活在高盐、高压、低温、弱光的独特海洋环境中,具有结构独特、代谢多样、活性显著等特点,并产生了一系列功能多样、结构新颖的次级代谢产物,是杂萜类化合物的重要来源。海洋真菌体内复杂的次生代谢途径使获得的杂萜类化合物骨架结构多样,具有抗菌、抗肿瘤、酶活性抑制等丰富的生物活性。介绍了海洋真菌来源杂萜类化合物的研究现状,并对其生物合成途径、发酵与分离方法、生物活性等进行了综述,为海洋真菌来源杂萜类化合物的后续研究提供了一定参考。

关键词：杂萜类化合物海洋真菌生物活性生物合成途径

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仿刺参不同部位ACE抑制活性分析及活性肽制备工艺优化

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食品工业科技 2024年第10期45卷 187-197页

作者：王扬铎苏永昌王晓燕施文正刘智禹上海海洋大学食品学院上海202206 福建水产研究所福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室福建厦门361013

本文对仿刺参具有高降血压活性部位进行筛选并优化其活性肽制备工艺。采用酶解法对仿刺参不同部位(体壁、肠、卵)进行水解,以血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标筛选最适蛋白酶,通过对各酶解物ACE抑制率... 详细信息

本文对仿刺参具有高降血压活性部位进行筛选并优化其活性肽制备工艺。采用酶解法对仿刺参不同部位(体壁、肠、卵)进行水解,以血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标筛选最适蛋白酶,通过对各酶解物ACE抑制率的半数抑制浓度(IC_(50))测定比较筛选出最优抑制活性部位。经单因素实验与响应面试验优化确定活性肽最佳酶解制备条件,对蛋白酶解物进行分子量测定确定其分布范围,经超滤膜分离后对不同组分的ACE抑制活性分析。结果显示,选用碱性蛋白酶为最适水解酶,体壁、肠、卵各蛋白酶解物的ACE抑制率的IC50分别为1.11、4.02、0.65 mg/mL,仿刺参卵具有更好的ACE抑制效果,为最优抑制活性部位。其最佳的酶解制备工艺参数为:酶解时间5 h,加酶量3.5 U/mg,酶解温度65.26℃,底物浓度3.51%,酶解pH9.02,在该条件下仿刺参卵酶解产物的ACE抑制率为80.65%±0.52%,与预测值接近。蛋白酶解产物的分子量集中分布在3000 Da以下,占总含量的98.37%,其中1000~3000 Da占比9.50%,小于1000 Da占比88.87%。超滤膜分离所得低聚肽组分ACE抑制活性(IC_(50)=0.30 mg/mL)显著(P产物高值化利用提供理论依据,可作为分离纯化制备降血压肽的优质资源。

关键词：仿刺参 ACE抑制活性降压活性肽响应面分子量分布超滤膜分离

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VUV/UV/NaClO及UV/NaClO去除百里香酚:降解机制及水质影响因素

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高校化学工程学报 2024年第2期38卷 328-340页

作者：袁雨瑾肖习羽李青松李玉瑛吴俊文戴惠林厦门理工学院水资源环境研究所福建厦门361024 五邑大学生物科技与大健康学院广东江门529020 汕头大学海洋灾害预警与防护广东省重点实验室广东汕头515063

采用VUV/UV/NaClO及UV/NaClO工艺去除百里香酚(Tml),对比考察pH、CO_(3)^(2-)、NO_(3)^(-)和腐殖酸(HA)等因素对Tml去除的影响,鉴定识别Tml的降解产物并推测了降解途径,探究VUV/UV/NaClO工艺中反应溶液的急性毒性变化,通过反应溶液组分... 详细信息

采用VUV/UV/NaClO及UV/NaClO工艺去除百里香酚(Tml),对比考察pH、CO_(3)^(2-)、NO_(3)^(-)和腐殖酸(HA)等因素对Tml去除的影响,鉴定识别Tml的降解产物并推测了降解途径,探究VUV/UV/NaClO工艺中反应溶液的急性毒性变化,通过反应溶液组分毒性鉴定评估结合ECOSAR软件模拟识别了毒性较大的产物。结果表明,UV/NaClO和VUV/UV/NaClO工艺中Tml的去除拟一级反应动力学常数kobs均随着pH的增大先减少后增加,且均在pH为7时达到最小,分别为0.183 6 min-1和0.554 7 min-1;CO_(3)^(2-)的存在有利于Tml的去除,在VUV/UV/NaClO工艺中,低浓度NO_(3)^(-)对Tml的去除有轻微抑制作用,高浓度则反之;而在UV/NaClO工艺中,NO_(3)^(-)的存在有利于Tml的去除;HA对Tml的去除有抑制作用。相同条件下不同水质因素对VUV/UV/NaClO工艺的促进或抑制更为显著,约为UV/NaClO工艺的1.05~3.57倍。VUV/UV/NaClO工艺中Tml主要发生了自由基的取代、加成和氧化分解反应,生成了氯代、醌和醛类中间产物。VUV/UV/NaClO处理后的溶液毒性呈先上升后下降再上升的趋势,生成的丙酸乙烯基酯和戊醛类等小分子有机物导致了反应后期反应溶液急性毒性增加。

关键词： VUV/UV/NaClO UV/NaClO 百里香酚(Tml) 水质自由基

微泡菌QZHA1褐藻胶裂解酶MAAL1的酶学性质研究

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应用海洋学学报 2024年第2期43卷 266-275页

作者：闫康路邵宗泽王万鹏谢珍玉周梅先海南大学海洋生物与水产学院海南海口570000 自然资源部第三海洋研究所、自然资源部海洋生物遗传资源重点实验室福建厦门361005

为探究Microbulbifer ***1褐藻胶裂解(Escherichia coli)酶MAAL1的酶学性质,将褐藻胶裂解酶基因maal1构建至pET-28a表达载体并利用大肠杆菌BL21(DE3)进行异源表达。研究发现:重组酶MAAL1与来源于Microbulbifer ***1菌株的褐藻胶裂解酶(WP_23625014.1)同源性最高,为93.69%,且与PL7家族蛋白聚为一支;重组酶MAAL1最适温度为35℃,最适pH为7.5,在pH为5.5~10.5范围内保存24 h仍能保持60%以上的酶活力;MAAL1具备良好的耐有机溶剂特性,在测试的9种有机溶剂中,除异丙醇外,其他有机溶剂在添加量达到30%(体积分数)后,酶活力依然保持在59%以上;重组酶MAAL1最适条件下酶活力为4.3 U/mg,米氏常数(K_(m))值为1.08 mg/mL,最大反应速率(V_(max))为4.75 mg/(mL·min),催化常数(Kcat)值为4.52 s^(-1);重组酶MAAL1对聚β-D-甘露糖醛酸(polymannuronic acid,PolyM)具有底物特异性,对聚α-L-古罗糖醛酸(polyguluronic acid,PolyG)无降解能力;薄层层析分析显示,MAAL1降解海藻酸钠的主要终产物是单糖、二糖和三糖,降解PolyM的主要终产物是二糖和三糖,降解MG杂合片段(heteropolymeric MG blocks,PolyMG)的主要终产物为单糖和二糖,故MAAL1是一种内切型聚甘露糖醛酸裂解酶。重组酶MAAL1具有良好的pH和有机溶剂耐受性,对PolyM具有底物特异性且不降解PolyG,该特性褐藻胶裂解酶首次在微泡菌属中被发现,该酶可为制备甘露糖醛酸寡糖(mannuronate oligosaccharides,MAOS)提供新的候选用酶。

关键词：海洋生物学微泡菌属褐藻胶裂解酶克隆表达聚甘露糖醛酸耐有机溶剂

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弧菌DS32褐藻胶裂解酶基因vralg1的异源表达和酶学性质研究

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应用海洋学学报 2024年第2期43卷 255-265页

作者：李慧敏邵宗泽路瑶杨江科周梅先武汉轻工大学生命科学与技术学院湖北武汉430023 自然资源部第三海洋研究所、自然资源部海洋生物遗传资源重点实验室福建厦门361005

对从福建省东山湾沉积物样品中筛选到的菌株Vibrio sp. DS32的褐藻胶裂解酶基因vralg1进行克隆和异源表达,并对其酶学性质进行评估。以DS32基因组为模板,克隆褐藻胶裂解酶基因vralg1,构建了pET-vralg1重组表达载体,并在大肠杆菌中实现... 详细信息

对从福建省东山湾沉积物样品中筛选到的菌株Vibrio sp. DS32的褐藻胶裂解酶基因vralg1进行克隆和异源表达,并对其酶学性质进行评估。以DS32基因组为模板,克隆褐藻胶裂解酶基因vralg1,构建了pET-vralg1重组表达载体,并在大肠杆菌中实现了异源表达,对重组酶VRALG1的酶学性质、底物特异性和完全降解产物等进行了测定。结果表明:重组酶VRALG1最适温度为35℃,在5~50℃范围内相对酶活力达到80%以上,最适pH为6.5~7.5,在pH为6.0~9.0范围内保温1 h后相对酶活力在90%以上;重组酶VRALG1最大反应速率为5.919 mmol/(L·min),米氏常数为3.712 mmol/L,最适条件下比活力为5.874 U/mg;K^(+)、Cs^(+)、Na^(+)、咪唑和乙醇对酶活性影响较小,5 mmol/L或50 mg/mL浓度下相对酶活力保持90%以上,EDTA对酶的抑制作用明显,1 mmol/L浓度下可使酶完全失活;重组酶VRALG1对海藻酸钠和聚古罗糖醛酸具有较高的降解活性,TLC分析显示产物主要为单糖、二糖和三糖混合物,结合底物特异性分析,推测重组酶VRALG1是具有明显聚古罗糖醛酸偏好性的内切型双功能褐藻胶裂解酶。本研究成功克隆了弧菌DS32中褐藻胶裂解酶基因并实现了其在大肠杆菌中的异源表达,所得重组酶VRALG1具有优良的海藻酸钠降解活性和明显的聚古罗糖醛酸偏好性,可以用于制备低聚合度的褐藻寡糖。

关键词：海洋生物学褐藻胶裂解酶褐藻寡糖克隆表达酶学性质聚古罗糖醛酸偏好性

镁改性泡沫炭对水中镉(Ⅱ)的吸附性能及去除机理

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无机化学学报 2024年第8期40卷 1537-1548页

作者：蒲小松吴航凯李涛洪李惠娟刘守庆黄元波李雪梅西南林业大学材料与化学工程学院西南地区林业生物质资源高效利用国家林业和草原局重点实验室昆明650224 集美大学海洋装备与机械工程学院福建省能源清洁利用与开发重点实验室厦门361104

以酶解木质素液化产物树脂(LP树脂)为前驱体,借助微波加热和直接混合法,成功制得了镁改性泡沫炭(Mg/CF)吸附材料,通过红外光谱、X射线衍射、X射线光电子能谱等对其结构性能进行了分析表征,并借助静态吸附实验对其水中Cd(Ⅱ)的脱除性能... 详细信息

以酶解木质素液化产物树脂(LP树脂)为前驱体,借助微波加热和直接混合法,成功制得了镁改性泡沫炭(Mg/CF)吸附材料,通过红外光谱、X射线衍射、X射线光电子能谱等对其结构性能进行了分析表征,并借助静态吸附实验对其水中Cd(Ⅱ)的脱除性能进行了考察。结果表明,负载于CF表面的镁以MgO纳米颗粒的形式集中分布于CF的泡孔孔壁上,MgO的负载并未减少CF的比表面积,但可使其微孔孔容增大。该吸附材料对水中Cd(Ⅱ)表现出优越的脱除性能,与单独使用MgO相比,Mg/CF对Cd(Ⅱ)的理论最大吸附容量可达308.51 mg·g^(-1),约为MgO的2.0倍,且平衡吸附时间为720 min,较MgO明显缩短。Mg/CF对Cd(Ⅱ)的去除过程满足准二级动力学方程、Langmuir吸附等温线模型,且去除过程为吸热熵增的自发过程。去除机理研究表明,Mg/CF对Cd(Ⅱ)的去除是以离子交换和沉淀等化学作用为主,并伴有物理吸附的过程。

关键词：泡沫炭氧化镁改性 Cd(Ⅱ) 吸附机理

槲皮素通过激活PTEN抑制PI3K/AKT及JNK信号通路诱导人乳腺癌细胞凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第8期38卷 714-720页

作者：祝珊珊余惟一毕丽伟秦飞李杰曾海泉陆灵松厦门医学院药学系药物检测中心福建厦门361026 厦门医学院厦门市海洋药用天然产物资源重点实验室福建厦门361026 厦门市中药生物工程重点实验室福建厦门361026

目的研究槲皮素对乳腺癌MCF-7细胞增殖活性以及对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PTEN/PI3K/AKT)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法采用CCK-8法检测(0、20、40、60、80、100)μmol/L... 详细信息

目的研究槲皮素对乳腺癌MCF-7细胞增殖活性以及对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PTEN/PI3K/AKT)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法采用CCK-8法检测(0、20、40、60、80、100)μmol/L槲皮素对MCF-7细胞增殖的影响;Hochesst33342染色观察细胞核数量以及核型的变化,流式细胞术检测细胞凋亡;免疫荧光细胞化学染色检测PTEN和磷酸化的JNK(p-JNK)表达,Western blot法检测PTEN、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、p-JNK、磷酸化的AKT(p-AKT)蛋白水平;加入PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理后,再次采用以上方法检测对细胞凋亡和相关蛋白表达的影响。结果随着槲皮素浓度的升高,细胞活性下降,细胞生长受到抑制,且具有浓度依赖性;细胞核浓缩增强、细胞凋亡增加;高浓度槲皮素显著增强PTEN蛋白表达和分布,降低p-PI3K、p-AKT蛋白水平,并抑制p-JNK蛋白的核表达。加入PI3K/AKT信号抑制剂LY294002处理细胞后,LY294002和槲皮素联合作用组细胞凋亡率增加,PTEN蛋白的表达也增强,槲皮素能明显增强LY294002对p-PI3K/AKT/PTEN蛋白的作用。结论槲皮素诱导MCF-7细胞凋亡,可能与激活PTEN的表达,抑制PI3K/AKT和JNK信号通路有关。

关键词：槲皮素乳腺癌 MCF-7细胞第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) AKT

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鱼油绿色制备与营养安全研究进展

中国油脂 2022年

作者：郑圣怡潘南陈晓婷吴靖娜蔡水淋黄文树刘智禹集美大学水产学院福建省水产研究所国家海水鱼类加工技术研发分中心厦门医学院厦门市海洋药用天然产物资源重点实验室海洋生物医药资源福建省高校工程研究中心

鱼油是从鱼类体内提取的油脂，富含ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFA）、维生素A、D和天然色素等营养物质，具有预防心血管疾病、抗炎、抗癌、免疫调节等功效。近年来，鱼油需求量与日俱增，然而传统工艺存在低效、高耗、污染环境等问题...

鱼油是从鱼类体内提取的油脂，富含ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFA）、维生素A、D和天然色素等营养物质，具有预防心血管疾病、抗炎、抗癌、免疫调节等功效。近年来，鱼油需求量与日俱增，然而传统工艺存在低效、高耗、污染环境等问题，且在加工、贮运、销售过程中易于氧化、酸败而品质劣变，导致鱼油营养安全问题日益突出。本文结合国内外研究进展，分别从制备工艺、质量安全和营养功效等方面进行综述，梳理了应用于鱼油生产的水酶法、超临界流体萃取、超声辅助萃取、微波辅助萃取等新型绿色制备工艺，阐述了我国鱼油相关标准现状，比较了中外鱼油标准的质量要素指标、污染物限量和添加剂限量等，探讨了鱼油在预防心血管疾病和炎症方面的营养功效，并针对鱼油应用中存在的问题进行了分析和展望，以期为我国鱼油产业的绿色可持续发展、质量安全、标准优化和营养应用提供参考。

关键词：